急性胰腺炎大鼠TNF-α mRNA、IL-10 mRNA表达和胰腺细胞凋亡的研究

目的 探讨大鼠急性胰腺炎早期胰腺组织中TNF－αmRNA、IL－10mRNA的表达和细胞凋亡的变化规律。方法 以牛磺胆酸钠诱导20只大鼠急性水肿性胰腺炎（AEP）模型,20只急性坏死性胰腺炎（ANP）模型,另取10只正常大鼠作为对照。术后12h各处死10只大鼠,检测血清和胰腺组织中的TNF－α和IL－10水平,分析两者在胰腺组织中的mRNA较录水平,检测胰腺细胞的凋亡率。结果 正常、AEP和ANP组的细胞凋亡率分别为2．98％、17．29％和8．39％。制模后TNF－αm和IL－10增强ANP大鼠TNF－α表达增强。结论 急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的TNF－α和IL－10的表达与其在血清和胰腺中的浓度成正比,胰腺本身可能就是产生细胞因子的主要器官。胰腺细胞凋亡率与疾病的严重程度呈负相关,凋亡是对胰腺损伤的良好反应。     

紫杉醇诱导急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞凋亡机制的研究

目的研究急性胰腺炎时紫杉醇诱导大鼠胰腺腺泡细胞凋亡的机制。方法利用胆胰管内注射脱氧胆酸钠的方法建立急性胰腺炎大鼠模型 ,并向腹腔内注射紫杉醇以诱导胰腺腺泡细胞凋亡。利用免疫组化法研究胰腺腺泡细胞凋亡相关蛋白Bcl 2、Bax、Fas、FasL及 p5 3表达的变化。结果急性胰腺炎时大鼠胰腺腺泡细胞中Bax(2 5 0 6± 94 2 )、Fas(2 79± 15 0 )和 p5 3(180± 5 6 )的表达增加 ,Bcl 2 (79± 4 2 )表达无明显变化 ,而FasL只表达于急性胰腺炎时胰腺间质浸润的炎性细胞中。结论急性胰腺炎时紫杉醇诱导的大鼠胰腺腺泡细胞凋亡与Bax、Fas/FasL系统以及p5 3蛋白有关。     

茵陈承气汤对大鼠急性出血坏死性胰腺炎腺泡细胞凋亡及调控基因的影响

目的 :研究茵陈承气汤对大鼠急性出血坏死性胰腺炎腺泡细胞凋亡及调控基因Bax表达水平的影响。 方法 :胰胆管内注射去氧胆酸钠制备大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型 ,随机分为对照组 ,模型组 ,中药 (茵陈承气汤 )治疗组 ,观察各组大鼠胰腺组织病理学、血清淀粉酶、IL - 6、IL - 8的变化 ,应用TUNEL法分析急性胰腺炎时胰腺腺泡细胞凋亡情况 ,WesternBlotting检测凋亡调控基因 -Bax的表达情况。 结果 :中药组大鼠血清淀粉酶 ,IL - 6、IL - 8水平较模型组低 ,病情明显改善 ,两组差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;模型组凋亡指数为 2 34± 1 15 ,中药组为 11 5 2± 3 41,P <0 0 1;模型组Bax的表达水平为 96 8± 2 76 ,中药组为 1331± 112 ,P <0 0 1。 结论 :茵陈承气汤可能通过上调促凋亡基因Bax的表达水平 ,诱导已受损的腺泡细胞发生凋亡 ,减轻腺泡细胞坏死 ,减少胰酶及炎性介质的释放 ,从而有利于防止急性胰腺炎的病理损害恶化     

急性胰腺炎大鼠TNF-α和IL-10mRNA的表达及其意义

目的:探讨急性胰腺炎大鼠胰腺组织中TNF-αmRNA和IL-10 mRNA的表达及其对疾病发展和转归的意义。方法:以牛磺胆酸钠制备大鼠急性水肿性胰腺炎(AEP)模型20只和急性坏死性胰腺炎(ANP)模型20只,另取10只正常大鼠作为对照。造模12h后各处死10只大鼠,检测血清和胰腺组织TNF-α和IL-10水平及其胰腺组织中的mRNA转录水平,并观察胰腺组织的病理变化。结果:正常组、AEP组和ANP组的血清TNF-α水平分别为126pg/ml、186pg/ml和337pg/ml,组织TNF-α水平分别为118pg/ml、210pg/ml和443pg/ml。正常大鼠血清和胰腺组织中无法检测到IL－10,而AEP和ANP组血清IL－10水平为660pg/ml和124pg/ml,组织IL－10水平为669pg/ml和202pg/ml。AEP大鼠组织中IL-10mRNA表达增强,ANP大鼠TNF-α mRNA表达增强。结论:AP大鼠胰腺组织中TNF-α和IL-10 mRNA的表达与其在血清和胰腺组织中的浓度成正比,而急性胰腺炎时胰腺本身可能就是产生细胞因子的主要器官。     

中药三七总苷对急性坏死性胰腺炎大鼠肠道细菌易位的影响

目的 探讨中药三七总苷对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠的治疗作用及肠道细菌易位的影响。方法 逆行胆胰管注射5％牛磺胆酸钠溶液制成ANP模型。90只大鼠随机分为假手术组、ANP组和治疗组，每组各30只。每组10只观察1周生存率；另每组各20只观察术后不同时相血清淀粉酶及胰腺、肝、脾、肺和肠系膜淋巴结细菌培养情况及病理组织学变化。结果 治疗组的存活率明显高于ANP组．术后12h及24h血清淀粉酶明显低于ANP组，治疗组胰腺、肝、脾、肺及肠系膜淋巴结细菌培养阳性率亦低于ANP组．治疗组病理损害明显轻于ANP组。结论 中药三七总苷可保护肠黏膜屏障从而减少肠道细菌易位。     

甘氨酸对急性坏死性胰腺炎大鼠早期外周血中性粒细胞CD11b/CD18表达的影响

目的探讨急性坏死性胰腺炎早期外周血中性粒细胞（PMN）膜上CD11b／CD18及血中IL-6、LPS的动态变化及甘氨酸对急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠的保护作用。方法采用5％牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射建立大鼠ANP肝损害模型，90只大鼠，随机分成三组。30只大鼠作为对照组，甘氨酸腹腔注射治疗30只，急性坏死性胰腺炎组30只，于不同时间取血作流式细胞仪分析，测定血IL-6、LPS含量变化。结果建立ANP模型后6、12、24h，外周血中性粒细胞（PMN）膜上CD11b／CD18及血中IL-6、LPS明显升高。甘氨酸治疗后，PMN CD11b／CD18表达及IL-6、LPS水平降低。结论CD11b／CD18表达和IL-6、LPS参与急性坏死性胰腺炎的病理机制。急性坏死性胰腺炎外周血中性粒细胞（PMN）膜上CD11b／CD18的变化可能与炎性介质的变化密切相关。甘氨酸可降低CD11b／CD18表达和IL-6、LPS的水平。     

清胰汤对大鼠急性坏死性胰腺炎时胰腺腺泡细胞凋亡的影响

目的：研究清胰汤对大鼠急性坏死性胰腺炎时胰腺腺泡细胞凋亡的影响。方法：选用健康雄性SD大鼠30只，随机分为假手术组、模型组和清胰汤治疗组，每组10只。采用TUNEL技术检测胰腺腺泡细胞的凋亡；RT-PCR检测胰腺组织Bax和Caspase一8mRNA的表达；免疫组化分析胰腺组织Bax和Gaspase-8蛋白表达。结果：与模型组比较，清胰汤组大鼠胰腺腺泡细胞凋亡显著增多（P＜0.01），BaxmRNA及蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）；血清淀粉酶及TNF-α、IL-6水平显著降低（P＜0.05），胰腺组织病理损害明显减轻。结论：清胰汤可能通过上调Bax基因的表达促进胰腺腺泡细胞凋亡，减轻胰腺组织病理损害。     

17-β雌二醇对大鼠肝切除肝缺血再灌注损伤肝细胞凋亡和Bcl-2、Bax表达的影响

目的 观察17-β雌二醇预处理对肝切除肝缺血再灌注损伤肝脏组织细胞凋亡及Bcl2、Bax表达的影响,并探讨其肝保护的机制.方法 建立大鼠肝切除肝缺血再灌注损伤模型,75只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)和17-β雌二醇预处理组(E2+ IR组).检测各组大鼠再灌注后lh、3h、6h、12 h、24 h肝功能变化.光镜下观察肝组织病理学改变.TUNEL法观察再灌注后12 h大鼠肝细胞凋亡情况、流式细胞学方法测定再灌注后12h肝细胞凋亡率.Western blot法检测再灌注后12 h Bcl-2和Bax的表达情况.结果 与Sham组相比,在IR组各时间点均可见ALT和AST增高,且在再灌注后的12h达到了最高值;病理学检查可见肝细胞肿胀,肝窦变窄,嗜中性粒细胞浸润和片状坏死等变化;在再灌注后12h,凋亡细胞增多及细胞凋亡率明显升高;肝脏组织Bcl 2表达减少,Bax的表达增加.17-β雌二醇预处理组在灌注后各时间点ALT和AST值明显下降,肝脏病理损伤改善;在再灌注后12h,凋亡细胞减少及细胞凋亡率明显降低,肝脏组织Bcl-2表达增加,Bax的表达减少.结论 17-β雌二醇对大鼠肝缺血再灌注损伤有明显的保护作用,其可能通过促进Bcl-2表达及抑制Bax表达,从而抑制肝细胞凋亡.     

胰炎合剂对大鼠急性坏死性胰腺炎细胞凋亡水平的影响

目的：探讨中药胰炎合剂对大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）的治疗作用机制及凋亡基因Bax、bcl-2在ANP发病中的作用。方法：健康Wistar大鼠胆胰管内逆行注射5％牛磺胆酸钠制成ANP模型，用生理盐水、单味大黄、善宁及胰炎合剂进行干预治疗，每组大鼠30只，测定血淀粉酶、观察胰腺组织病理形态学变化并检测胰腺细胞凋亡率及Bax、bcl-2基因的表达量。结果：各组血淀粉酶明显上升，但胰炎合剂组及善宁组血淀粉酶下降较快，单味大黄组下降较慢，生理盐水组下降最慢（P〈0．05或P〈0．01）。病理形态学显示胰炎合剂组及善宁组较单味大黄及生理盐水组病变明显减轻。胰炎合剂组及善宁组细胞凋亡率及凋亡基因表达量明显高于其他两组（P〈0．05或P〈0．01）。胰腺腺细胞凋亡率变化与Bax、bcl-2基因表达量有成正比表现趋势。结论：胰炎合剂、善宁及大黄对大鼠ANP有一定的治疗作用。     

大鼠急性胰腺炎细胞凋亡异常及Fas/FasL系统表达的研究

我们用大鼠制作急性水肿性胰腺炎(AEP)和急性坏死性胰腺炎(ANP)模型,检测胰腺炎时细胞凋亡异常以及凋亡通路Fas、FasL蛋白表达情况,进一步探讨细胞凋亡在急性胰腺炎发生发展中的作用和地位。一、材料和方法1.实验动物及方法:健康雄性SD大鼠3 0只,随机分为3组:AEP组、ANP组和对照组,每组10只。模型制作:大鼠常规喂养,手术前禁食不禁饮12h。1%硫喷妥钠溶液4ml/kg体重腹腔内注射麻醉,无菌操作下切开大鼠腹部,显露十二指肠及胰胆管。用钝5号注射器针头穿过十二指肠对系膜缘经乳头逆行插入胰胆管,用血管夹分别夹闭近肝门处胆总管及针头插…     

甲基强的松龙对重症急性胰腺炎大鼠脑组织神经细胞凋亡的影响

目的 探讨甲基强的松龙对重症急性胰腺炎大鼠脑组织神经细胞凋亡的影响.方法 将36只SD大鼠分为3组,假手术组、重症急性胰腺炎组、甲基强的松龙组,每组12只.逆行胰胆管注射5%牛磺脱氧胆酸钠建立重症急性胰腺炎模型.观察各组血清淀粉酶、IL-6、TNF-α水平、腹水量和胰腺组织的病理学改变.RT-PCR法分析脑组织Bcl-2、Bax mRNA的表达水平,TUNEL法检测神经细胞凋亡.结果 重症急性胰腺炎组血清IL-6、TNF-α升高,腩组织Bcl-2 mRNA表达减少,Bax mRNA表达上调,Bcl-2/Bax比值降低,脑组织神经细胞凋亡增加;甲基强的松龙组血清IL-6、TNF-α表达明显下降,脑组织Bcl-2 mRNA表达变化不明显,但Bax mRNA表达下调明显,Bcl-2/Bax比值升高,脑组织神经细胞凋亡显著减少.结论 重症急性胰腺炎时脑组织神经细胞凋亡可能是胰性脑病的发病机制之一;甲基强的松龙可抑制细胞因子的释放,促进脑组织Bcl-2和Bax基因表达的平衡,降低脑组织神经细胞凋亡指数,使脑组织损伤得以改善.     

70%门静脉分支高位结扎大鼠肝组织细胞凋亡及相关基因Bax和Bcl-2 mRNA的表达

目的 观察70%门静脉分支高位结扎后大鼠肝组织细胞凋亡及相关基因Bax,Bcl-2的表达,以探讨肝细胞凋亡的发生机制.方法 Wistar大鼠60只,随机分成假手术对照组(n=30)和门静脉结扎组(n=30).观察术后第12小时和第1,2,3,7,14天的肝脏大体结构和血浆转氨酶的变化.用细胞凋亡原位末端标记技术(TUNEL)对结扎侧肝细胞凋亡进行定量分析,光学显微镜下观察未结扎侧肝细胞的增殖情况,采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测肝脏组织中Bax和Bcl-2 mRNA的表达.结果 70%门静脉分支高位结扎后,结扎侧肝叶以细胞凋亡的方式呈进行性萎缩变小,对侧则以有丝分裂的方式成比例地代偿性增生.全肝的总质量维持恒定,肝脏功能基本保持正常.结扎侧肝组织中以Bax mRNA的升高为主,而未结扎侧肝组织中以Bcl-2 mRNA的升高为主.结论 近70%门静脉分支高位结扎后,结扎侧肝脏由于Bax mRNA表达升高引起肝细胞大量凋亡,未结扎侧由于Bcl-2 mRNA表达升高引起肝细胞增殖,在维持全肝的质量和功能中具有重要意义.     

中药腹腔灌洗对急性出血坏死性胰腺炎大鼠血和腹水中细胞因子水平的影响及其对胰腺的保护作用

目的 探讨白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子a (TNF-a）在急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）发病中的作用,观察各种腹腔灌洗液对AHNP的治疗效果。方法 将160只大鼠随机分成：假手术组、对照组、抗生素灌洗组和中药灌洗组。采用5%牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射建立大鼠AHNP模型,并于模型制成后24h、48h、72h取血液、腹水、胰腺组织,测定血液、腹水中IL-6、IL-8、TNF-a水平,作胰腺病理检查。结果 对照组大鼠血液、腹水中IL-6、IL-8、TNF-a水平较假手术组明显增高,并随病情加重而升高,胰腺组织学改变进行性加重。经腹腔灌洗治疗后各组上述指标水平有所降低,胰腺病理损害减轻,以中药腹腔灌洗组改善最为明显。结论 IL-6、IL-8、TNF-a参与AHNP发病机理,检测上述指标有助于对AHNP病情轻重程度的评估。中药腹腔灌洗能够更好地降低血液、腹水中IL-6、IL-8、TNF-a水平,减轻胰腺组织的损害。中药腹腔灌洗治疗AHNP方法简单、安全、有效。     

瑞芬太尼对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨瑞芬太尼对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 成年健康雄性SD大鼠30只,体重260～300 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):肝硬化组(C组)、肝硬化+肝缺血再灌注组(I/R组)和瑞芬太尼组(R组).C组、I/R组和R组采用四因素综合法制备大鼠肝硬化模型,I/R组和R组在肝硬化模型制备成功后1周制备大鼠70％肝脏缺血再灌注模型,R组于缺血前10 min开始静脉输注瑞芬太尼1μg·kg-1·min-至再灌注结束.于再灌注4h时取静脉血样和肝组织,测定血清ALT和AST活性、肝细胞Bcl-2和Bax表达及肝细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数,光镜下观察肝组织病理学结果.结果 与C组比较,I/R组血清ALT和AST的活性升高,肝细胞Bcl-2表达下调,Bax表达上调,细胞凋亡指数升高(P＜0.05);与I/R组比较,R组血清ALT和AST的活性降低,肝细胞Bcl-2表达上调,Bax表达下调,细胞凋亡指数降低(P＜0.05).R组肝组织病理学损伤轻于I/R组.结论 瑞芬太尼可减轻肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤,其机制与平衡肝细胞Bcl-2与Bax表达而抑制肝细胞凋亡有关.     

急性出血坏死性胰腺炎大鼠胰腺组织结构改变与内毒素血症的关系及纳屈酮的治疗作用

为探讨大鼠急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）胰腺组织结构改变与内毒素血症的关系及纳屈酮的治疗作用，用５％牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制成ＡＨＮＰ模型。取Ｗｉｓｔａｒ大鼠１１０只随机分为假手术组（ｎ＝２０）、ＡＨＮＰ组（ｎ＝４５）、纳屈酮治疗组（ｎ＝４５），分别于术后６、１２、２４小时称取胰腺重量，观察ＡＨＮＰ大鼠胰腺组织结构改变，同时测定其血浆淀粉酶和内毒素水平，并与假手术组比较。结果：与假手术组比较，ＡＨＮＰ组血浆淀粉酶、内毒素及胰腺系数升高，在光镜及电镜下可见胰腺损害随时间延长而加重。纳屈酮治疗组与ＡＨＮＰ组相比，其血浆淀粉酶、内毒素及胰腺系数下降，而且胰腺损害减轻。本实验结果提示：ＡＨＮＰ引发内毒素血症，纳屈酮可通过改善胰腺缺血性损害而降低血浆内毒素，延长大鼠生存时间及降低病死率     

胰腺炎相关性腹水诱导的大鼠胰腺病理学改变

目的观察胰腺炎相关性腹水(pancreatitis associated ascetic fluid,PAAF)腹腔注射后引起的胰腺病理学改变。方法SD大鼠26只,随机分为急性出血坏死性胰腺炎组(acute hemorrhagic necrotic pancreatitis,AHNP)(AHNP组,n=10),生理盐水(normal saline,NS)组(NS组,n=8)以及PAAF组(n=8)。制备急性出血坏死性胰腺炎腹水后,腹腔注射到健康大鼠体内,7h后活杀,取胰腺进行光镜以及电镜观察。结果PAAF组胰腺病理改变表现为腺泡细胞完整,腺叶间隔略增宽。结论PAAF腹腔注射后引起的胰腺病理改变轻微。     

瑞芬太尼对大鼠肠缺血再灌注时肝细胞凋亡的影响

目的 评价瑞芬太尼对大鼠肠缺血再灌注时肝细胞凋亡的影响.方法 成年Wistar大鼠54只,随机分为3组(n=18):假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(IIR组)和瑞芬太尼组(R组).IIR组及R组采用夹闭肠系膜上动脉1 h后再灌注的方法制备肠缺血再灌注模型,R组于缺血前10min开始静脉输注瑞芬太尼1 μg·kg-1·min-1至再灌注末,S组及IIR组给予等容量生理盐水.分别于再灌注1、3、6 h时处死6只大鼠,取肝组织,检测肝组织Bcl-2与Bax表达水平及肝细胞凋亡情况,计算肝细胞凋亡指数(AI).结果 与S组相比,IIR组和R组Bcl-2与Box表达上调,肝细胞AI升高,IIR组Bcl-2/Bax比值降低,R组Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05);与IIR组相比,R组Bcl-2表达、Bcl-2/Bax比值升高,Box表达下调,肝细胞AI降低(P<0.05).结论 瑞芬太尼可抑制大鼠肠缺血再灌注时肝细胞凋亡,其机制与上调Bcl-2表达及抑制Bax表达上调有关.     

急性出血坏死性胰腺炎肝损伤中TLR2/4mRNA的表达及氯喹的干预效应

目的： 研究急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）肝损伤中Toll-样受体(TLR)2/4mRNA表达的变化及氯喹的干预效应。 方法：采用逆行胰胆管牛磺胆酸钠（TAC）注射造成大鼠AHNP肝损伤动物模型。动物分为假手术组（S组）、胰腺炎组和氯喹（CQ）治疗组。后2组于术后3，6，12 h分批剖杀，S组于术后6 h剖杀。观察血清淀粉酶、ALT和AST及肝组织NO和TNF-α的变化，RT-PCR方法检测各组不同时点肝组织TLR2和TLR4mRNA的表达。 结果：相对于S组，胰腺炎组大鼠3 h肝组织TLR2和TLR4mRNA表达开始增高，术后6～12 h肝组织TLR2和TLR4mRNA表达迅速达到峰值（P<0.05），肝损伤加重，血清淀粉酶升高，肝组织TNF-α浓度升高，NO浓度逐渐降低（P<0.05）；相对胰腺炎组，CQ治疗组TLR2/4mRNA表达降低（P<0.05），肝损伤程度减轻，血清淀粉酶降低，肝组织TNF-α浓度降低，NO浓度显著升高（P<0.05）。 结论：AHNP大鼠肝组织内TLR2和TLR4的基因表达上调；其表达增高可能在AHNP肝损伤的发生、发展中起重要作用。氯喹对大鼠AHNP过程中肝损伤可能有保护作用。     

氢吗啡酮预处理对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的影响

目的观察氢吗啡酮预处理对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的影响,并探讨其作用机制。方法SPF级SD大鼠48只,随机分为假手术组(C组)、缺血-再灌注组(IR组)、氢吗啡酮组(H组)和吗啡组(M组),每组12只。采用前房加压灌注的方法制备视网膜缺血-再灌注损伤模型。于缺血前15 min,H组颈内静脉注射氢吗啡酮0.1mg/kg,M组注射吗啡1mg/kg,C组和IR组注射等容量生理盐水。再灌注24 h后,取大鼠视网膜组织,采用HE染色法观察病理学变化,测定视网膜内层厚度及全层厚度;采用TUNEL法计算细胞凋亡指数(AI);采用免疫组化法检测Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白含量;采用ELISA法检测TNF-α、IL-6浓度;采用硫代巴比妥酸及黄嘌呤氧化酶法分别检测MDA浓度和SOD活性。结果与C组比较,IR组视网膜出现病理学损伤,AI明显升高(P<0.05);Bax、caspase-3蛋白含量明显升高,Bcl-2蛋白含量和Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05);TNF-α、IL-6和MDA浓度明显升高(P<0.05),SOD活性明显减弱(P<0.05)。与IR组比较,H组和M组视网膜组织病理学损伤明显减轻,AI明显降低(P<0.05);Bax、caspase-3蛋白含量明显降低,Bcl-2蛋白含量明显升高,Bcl-2/Bax比值明显升高(P<0.05);TNF-α、IL-6和MDA浓度明显降低,SOD活性明显增强(P<0.05)。结论氢吗啡酮可减轻大鼠视网膜缺血-再灌注损伤,其机制可能与改善视网膜细胞凋亡、炎症反应及氧化应激相关。