丹参对肝脏保存再灌注时Bcl-2、 Bax表达和肝细胞凋亡的影响

目的探讨丹参对肝脏保存再灌注时Bcl-2、Bax表达和肝细胞凋亡的作用.方法建立离体大鼠肝脏保存再灌注模型,分别采用流式细胞仪和原位末端标记(TUNEL)技术,观察Bcl-2、Bax表达和肝细胞凋亡以及丹参对上述指标的影响.结果丹参组保存16、24、32     

急性胰腺炎大鼠TNF-α mRNA、IL-10 mRNA表达和胰腺细胞凋亡的研究

目的 探讨大鼠急性胰腺炎早期胰腺组织中TNF－αmRNA、IL－10mRNA的表达和细胞凋亡的变化规律。方法 以牛磺胆酸钠诱导20只大鼠急性水肿性胰腺炎（AEP）模型,20只急性坏死性胰腺炎（ANP）模型,另取10只正常大鼠作为对照。术后12h各处死10只大鼠,检测血清和胰腺组织中的TNF－α和IL－10水平,分析两者在胰腺组织中的mRNA较录水平,检测胰腺细胞的凋亡率。结果 正常、AEP和ANP组的细胞凋亡率分别为2．98％、17．29％和8．39％。制模后TNF－αm和IL－10增强ANP大鼠TNF－α表达增强。结论 急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的TNF－α和IL－10的表达与其在血清和胰腺中的浓度成正比,胰腺本身可能就是产生细胞因子的主要器官。胰腺细胞凋亡率与疾病的严重程度呈负相关,凋亡是对胰腺损伤的良好反应。     

IL-10、IL-18在重症急性胰腺炎肺损伤中的作用

目的探讨重症急性胰腺炎（SAP）中IL-10及IL-18的表达及其与SAP肺损伤的关系。方法将48只SD大鼠按随机数字表法均分为对照组和SAP组，动态定量测定肺湿重系数、腹水量、血清淀粉酶、血清IL-10及IL-18的变化和半定量RT—PCR检测肺组织中IL-10 mRNA及IL-18 mRNA的表达，并在光镜下观察胰腺及肺组织病理学改变。结果各时相SAP组肺湿重系数、腹水量、血清淀粉酶、血清IL-10及IL-18水平和肺组织中IL-10 mRNA及IL-18 mRNA的表达与对照组相比均明显增高（P〈0．05，P〈0．01）。SAP组大鼠血清中IL-18水平和肺组织IL-18 mRNA表达水平均与肺湿重系数（r=0．68，P〈0．01；r=0．72，P〈0．01）及肺损伤病理评分（r=0．74，P〈0．01；r=0．79，P〈0．01）呈正相关，而血清中IL-10水平和肺组织IL-10 mRNA表达水平均与肺湿重系数（r=O．62，P〈0．01；r==0．69，P〈0．01）及肺损伤病理评分（r=-0．66，P〈0．01；r=-0．60，P〈0．01）呈负相关。结论IL-18参与了SAP并发肺损伤的病理过程，而IL-10对肺损伤有保护作用。     

白介素-10基因治疗重症急性胰腺炎的实验研究

目的:探讨重组腺病毒质粒介导的人白细胞介素10(IL10)基因对大鼠重症急性胰腺炎的治疗效果。方法:构建IL10的腺病毒质粒,将其注入健康大鼠腹腔内,检测胰、肝、肺组织内IL10的表达和血清淀粉酶的变化。用5%的牛磺胆酸钠诱发大鼠的重症急性胰腺炎;将IL10腺病毒注入胰腺炎大鼠腹腔内,检测大鼠血清淀粉酶及胰、肝、肺组织内IL10的变化;组织切片观察胰腺组织的病理变化。对照组用空载体和PBS溶液注入腹腔。结果:IL10在健康大鼠组织内有高浓度的表达,转染大鼠并不引起炎症反应。用IL10腺病毒基因治疗24h后,胰腺炎大鼠血清淀粉酶明显降低于对照组;胰、肝、肺组织内的IL10浓度明显高于对照组;TNFα的表达明显低于另两组;病理切片显示治疗组胰腺的炎症改变轻微,而对照组却呈现出血坏死性变化。结论:重组腺病毒介导的人IL10基因治疗可以显著地抑制重症急性胰腺炎的病变,降低死亡率。     

PGE2对大鼠急性坏死性胰腺炎肾损伤的保护作用

目的：探讨前列腺素E2（PGE2）免疫干预对大鼠急性坏死性胰腺炎血清IL-10、TNF-α、IL-1β水平及其对肾组织超微结构的影响。方法：SD大鼠91只随机分4组；假手术组（n=7），ANP组，PGE2前、后干预组（每组n=28)，后三组随机分1h、3h、6h、12h时段组（n=7）。大鼠ANP模型用5%牛磺胆酸钠诱导，PGE2前干预组在ANP模型制作前2h肌肉注射150μg/kg PGE2，PGE2后干预组在ANP模型完成时即刻肌肉注射150μg/kg PGE2。分别采用ELISA检测各组各时段大鼠血清IL-10、TNF-α、IL-1β含量并在电镜下观察ANP组，PGE2前，后干预组6h、12h时段肾组织细胞超微结构改变。结果：PGE2前或的干预组分别在模型制作后1h和3～12h时段IL-10含量增加，而相应时段的TNF-α、IL-1β含量显著下降。PGE2前干预6h和12h时段，肾组织见凋亡 小体；PGE2后干预组6h和12h时段均未见肾小管上皮细胞坏死现象，炎症明显减轻，肾组织细胞结构明显改善。结论：PGE2前或后干预可以上调IL-10，下调TNF-α、IL-1β，减轻急性坏死性胰腺炎肾组织的炎症反应，改善肾组织的损害。     

急性胰腺炎大鼠TNF-α和IL-10mRNA的表达及其意义

目的:探讨急性胰腺炎大鼠胰腺组织中TNF-αmRNA和IL-10 mRNA的表达及其对疾病发展和转归的意义。方法:以牛磺胆酸钠制备大鼠急性水肿性胰腺炎(AEP)模型20只和急性坏死性胰腺炎(ANP)模型20只,另取10只正常大鼠作为对照。造模12h后各处死10只大鼠,检测血清和胰腺组织TNF-α和IL-10水平及其胰腺组织中的mRNA转录水平,并观察胰腺组织的病理变化。结果:正常组、AEP组和ANP组的血清TNF-α水平分别为126pg/ml、186pg/ml和337pg/ml,组织TNF-α水平分别为118pg/ml、210pg/ml和443pg/ml。正常大鼠血清和胰腺组织中无法检测到IL－10,而AEP和ANP组血清IL－10水平为660pg/ml和124pg/ml,组织IL－10水平为669pg/ml和202pg/ml。AEP大鼠组织中IL-10mRNA表达增强,ANP大鼠TNF-α mRNA表达增强。结论:AP大鼠胰腺组织中TNF-α和IL-10 mRNA的表达与其在血清和胰腺组织中的浓度成正比,而急性胰腺炎时胰腺本身可能就是产生细胞因子的主要器官。     

高渗盐水对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织TNF-α、IL-10mRNA表达的影响

目的研究高渗盐水对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织TNF-α、IL-10mRNA表达的影响。方法Wistar大鼠48只，随机分为4组（每组12只）：正常对照组；SAP模型组；等渗盐水治疗组（NS）；高渗盐水治疗组（HTS）。制模后，等渗盐水和高渗盐水组于0、12、24、36h经右颈外静脉进行干预治疗，分别按2ml／kg给予0．9％和7．5％的NS、HTS，并于24、48h分两批处死大鼠，采用RT-PCR法检测胰腺组织TNF-α、IL-10mRNA转录水平，同时行胰腺组织学评分。结果SAP时胰腺组织TNF-α mRNA表达显著升高、IL-10mRNA表达略升高，高渗盐水干预可明显降低TNF-α mRNA表达而提高IL-10mRNA表达，同时使胰腺组织学评分得到改善。结论SAP时使用高渗盐水处理，可以改善促炎-抗炎细胞因子之间的平衡。     

大黄丹参对实验性重症急性胰腺炎大鼠肝胰组织TNF-a mRNA和IL-10 mRNA表达的影响

目的:观察中药大黄丹参治疗重症急性胰腺炎大鼠肝胰组织TNF-α mRNA和IL-10 mRNA表达的影响 .方法:SD大鼠30只,随机平均分成假手术组、重症急性胰腺炎对照组及大黄丹参治疗组.造模后6 h后用荧光PCR方法测定各组大鼠肝脏及胰腺组织TNF-α mRNA和IL-10 mRNA.结果:肝脏组织中,重症急性胰腺炎组大鼠TNF-α mRNA和IL-10 mRNA的表达均较假手术组有明显升高(P<0.05);中药治疗后TNF-α mRNA的表达下降(P<0.05),IL-10 mRNA的表达升高(P<0.05).胰腺组织中,重症急性胰腺炎组TNF-α mRNA和IL-10 mRNA表达同样升高(P<0.05),中药治疗后TNF-α mRNA的表达降低(P<0.05),但IL-10 mRNA表达与急性胰腺炎组比较无统计学差异.结论:SAP大鼠在肝脏和胰腺组织中,TNF-α mRNA和IL-10 mRNA均有明显升高,两者呈同一化的进程.大黄丹参治疗能够使肝胰组织的TNF-α mRNA表达下降,使肝IL-10 mRNA升高,显示了中药的调节作用.     

内脏血管灌注对急性出血坏死性胰腺炎大鼠血清白细胞介素 …

目的 探讨两种血管灌注方法对急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）大鼠门静脉及肝静脉血清白细胞介素６（ＩＬ－６）含量的影响和其与胰腺病理损害之间的关系。方法 经内脏血管（腹主动脉及门静脉）和周围血管（股动脉及股静脉）灌注低剂量多巴胺、低分子右旋糖酐及氧自由消除剂二甲亚砜，采用ＥＬＩＳＡ检测门静脉及肝静脉血清ＩＬ－６含量，同时观察胰腺病理变化。结果 内脏血管灌注可明显降低门静脉及肝静脉血清ＩＬ－６含量（Ｐ     

乌司他丁、地塞米松对急性坏死性胰腺炎大鼠TNF-α、IL-10和GR的影响

目的 探讨急性坏死性胰腺炎大鼠(acute necrotizing pancreatitis,ANP)TNF-α、IL-10和糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的变化规律及乌司他丁(ULI)、地塞米松(DEX)干预对上述指标的影响.方法 80只SD雄性大鼠随机分为5组:①假手术组(S组,n=16);②急性胰腺炎组(A组,n=16);③ULI组(U组,n=16);④DEX组(D组,n=16);⑤ULI DEX组(UD组,n=16).除S组外,其余各组均通过逆行胰胆管注射5%牛磺胆酸钠制作ANP模型.分别在模型制作成功后8 h和12 h,观察大鼠胰腺病理改变判断ANP严重程度;酶法检测血清淀粉酶(amylase,AMY)水平,ELISA检测血清TNF-α、IL-10蛋白水平以及RT-PCR检测全血有核细胞GR的mRNA表达.结果 ①A组大鼠表现为典型ANP病理改变,包括间质水肿、炎细胞浸润、出血和胰腺坏死.ULI和DEX单用或两药联用均可减轻ANP的炎症反应,两者联合应用可能存在协同效应.②A组血清TNF-α、IL-10显著高于S组(P<0.01),ULI和DEX无论是单独应用还是联合应用均可使TNF-α下降以及IL-10上升.③在术后8 h和12 h,U组、D组GR mRNA表达显著低于S组(分别为P<0.05和P<0.01);术后12 hUD组GR mRNA组显著高于A组(P<0.05).结论 TNF-α、IL-10以及GR的改变与ANP的炎症反应存在相关性,而ULI和DEX可能通过影响这些因素达到缓解ANP的作用;两药联合应用可能存在协同作用.     

粘附分子基因表达在大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用

目的　研究急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠肺组织细胞间粘附分子 1(ICAM 1)mRNA的表达情况及其与肺损伤的关系。方法　将 33只Wistar大鼠随机分为正常对照组和胰腺炎不同时间点 (1、4、12和 2 4h)各组 ,用逆行胰胆管注射方法制备ANP模型。采用逆转录聚合酶链反应法检测ANP大鼠肺组织中ICAM 1mRNA表达 ,同时观察肺组织髓过氧化物酶 (MPO)及病理改变。结果造模ANP 1h后大鼠肺组织中ICAM 1mRNA(0 82± 0 0 3)比正常对照组 (0 41± 0 0 4)的表达水平高 (P <0 0 5 ) ,并持续升高至 12h及 2 4h(分别为 1 17± 0 0 5及 1 11± 0 0 4) ,同时伴有肺组织病理损害 ,其严重程度与ICAM 1mRNA表达、MPO及肺MPO与ICAM 1mRNA表达均呈正相关 ,相关系数分别为0 85、0 85及 0 96 (P <0 0 5 )。结论　ANP大鼠早期肺组织中ICAM 1mRNA呈过度表达 ,肺损伤严重程度与ICAM 1mRNA表达的高低有关。肺组织中ICAM 1过度表达及中性粒细胞浸润是ANP肺损害发生的原因之一。     

急性坏死性胰腺炎肺组织炎性介质mRNA表达与肺损伤的关系

目的 探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺组织白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及细胞间黏附分子(ICAM-1)等炎性介质mRNA表达与肺损伤的关系.方法 33只Wistar大鼠随机分为正常对照和胰腺炎不同时间点(1、4、12和24 h)各组,应用3.5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备ANP模型.采用RT-PCR法检测ANP肺组织IL-6、TNF-α及ICAM-1 mRNA表达,同时观察血淀粉酶及脂肪酶、胰腺和肺组织湿/干重比率及病理改变.结果 造模ANP 1 h后肺组织IL-6、TNF-α及ICAM-1 mRNA水平(1.25±0.16、0.33±0.09及082±0.03)较正常对照组(0.07±0.02、0.06±0.02及0.41±0.04)表达增高(P<0.05),并持续升高至12及24 h(分别为1.674±0.14、0.99±0.11、1.17士0.05及1.87±0.05、0.96士0.06、1.11士0.04),同时伴有肺组织病理损害,其严重程度与肺TNF-α及ICAM-1 mRNA表达、肺组织湿/干重比率与TNF-α、IL-6、ICAM-1 mRNA表达的相关系数分别为0.93及0.70(P<0.05).结论 大鼠ANP早期肺组织IL-6、TNF-α及ICAM-1mRNA即过度表达,肺IL-6、TNF-α及ICAM-1mRNA过度表达是ANP肺损害发生的原因之一,肺损伤严重程度与IL-6、TNF-α及ICAM-1mRNA表达的高低有关.     

西维来司钠对重症急性胰腺炎大鼠肝细胞凋亡及B-淋巴细胞/白血病-2/bax表达的影响

目的 观察西维来司钠(Sivelestat)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肝细胞凋亡及B-淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)/bax基因表达的影响,并探讨其机制.方法 健康雄性SD大鼠54只,随机分为C组(对照组)、P组(SAP组)、S组(SAP+ Sivelestat治疗组),每组18只.C组为假手术组,P组大鼠以4％牛黄胆酸钠胆胰管逆行注射制造重症急性胰腺炎模型,S组造模后立即给予Sivelestat [0.2mg/(kg·h)]尾静脉注射治疗.3组大鼠术后3、6、12h分别取6只检测血清中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)含量;取肝组织测定丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量;原位末端标记(TUNEL)法检测造模后大鼠肝细胞凋亡并计算凋亡指数(AI);流式细胞术方法测定肝细胞凋亡率;Western blot法检测造模后12 h bcl-2/bax基因表达.结果 与C组比较,各时点P组大鼠血清NE含量[(5.62±1.70)、(6.83±2.01)、(10.88±3.72) μg/L]、肝细胞凋亡指数(11.4±1.1、15.3±1.1、21.3±1.2)及细胞凋亡率均明显升高;肝组织内MDA含量升高[(9.13±1.32)、(11.62±3.71)、( 13.57±3.29) nmol/mg],SOD含量下降[(154.00±22.38)、(138.05±29.48)、(122.63±28.71) U/mg];肝组织bcl-2表达减少,bax表达增多.与P组比较,各时点S组大鼠血清NE含量[(3.57±2.30)、(4.11±2.16)、(6.66±2.69) μg/L]、肝细胞凋亡指数(8.1±0.7、11.2±0.8、15.1±1.0)及细胞凋亡率均有明显降低;肝组织内MDA含量降低[(5.75±0.86)、(7.95 ±3.01)、(9.77±3.45) nmol/mg]而SOD含量升高[(187.12±37.39)、(179.23±44.59)、( 163.55±25.79) U/mg];肝组织bcl-2表达增多而bax表达下降.结论 西维来司钠可抑制SAP大鼠肝细胞凋亡,具体机制可能与其拮抗NE及氧自由基从而提高bel-2/bax比值有关.     

生长激素对急性坏死性胰腺炎大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡的影响

目的观察生长激素 (GH)对急性坏死性胰腺炎 (ANP)大鼠早期肠粘膜上皮细胞凋亡的调节作用。方法ANP模型大鼠分ANP组和ANP加GH治疗组 ,假手术组 (SO组 )作为对照。分别用DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪分析和dUTP缺口末端标记法研究肠粘膜细胞凋亡 ,免疫组织化学方法检测肠粘膜凋亡相关蛋白FasL及Bax表达。结果ANP大鼠各时点肠粘膜DNA电泳均可见典型的凋亡“梯形”条带 ,而GH治疗组仅于 3h出现“梯形”条带。术后 3h、6h、12h、2 4h肠粘膜脱落细胞凋亡比例分别为 :SO组为 (5 4± 4) %、(2 8± 6 ) %、(39± 5 ) %、(2 9± 11) % ,ANP组为 (5 0± 11) %、(80± 9) %、(4 8± 17) %、(5 0± 10 ) % ,术后 6h较SO组明显增高 (P <0 0 1) ;GH治疗组 ,(4 8± 11) %、(2 7± 15 ) %、(4 2± 7) %、(30± 10 ) % ,与SO组各时点比较差异无显著意义 ,且术后 6h较ANP组降低(P <0 0 1)。术后 3h、6h、12h、2 4h各时点肠粘膜细胞凋亡指数分别为 :SO组为 (6± 2 )、(8± 2 )、(11±1)、(5± 1) ,ANP组为 (18± 4)、(2 0± 3)、(15± 2 )、(14± 2 ) ,较SO组明显增高 (P <0 0 1) ;GH治疗组为(10± 2 )、(10± 2 )、(13± 2 )、(14± 4) ,其中术后 3h、6h较ANP组降低 (P <0 0 1)。FasL及Bax蛋白在假手术组呈弱表达 ,AN     

热休克蛋白70对急性胰腺炎时TNF、IL-8的影响

目的 探讨热休克蛋白70(Hsp70)对急性胰腺炎时TNF、IL-8的影响。方法 温生理盐水(42℃)持续灌洗大鼠腹腔30min,10 h后诱导大鼠急性胰腺炎(AP),术后2、6 h检测血清淀粉酶、TNF、IL-8水平,观察病理改变。结果 与正常AP组相比,42℃生理盐水腹腔持续灌洗预处理能明显降低AP术后2 h时的淀粉酶水平、病理评分和6 h的淀粉酶、病理评分、TNF和IL-8水平(P<0.05)。结论 42℃生理盐水腹腔持续灌洗能诱导大鼠胰腺表达Hsp70,诱导表达的Hsp70能减轻AP时的胰腺局部损伤和全身炎症反应。     

PGE2对大鼠急性胰腺炎肺超微结构与TNF-α、IL-10水平的影响

目的：探讨前列腺素E2（PGE2）免疫干预对急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠肿瘤坏死因子（TNF－α）和白介素－10（IL－10）与肺组织超微结构改变的影响。方法：SD大鼠91只分成4组：手术对照组（n=7）、ANP组、PGE2前干预组和PGE2后干预组(每组n=28），后3组又随机分1h、3h、6h、12h时段，每时段7只。大鼠ANP模型用5％牛磺胆酸钠诱导制作，PGE2前干预组和后干预组分别在ANP模型制作前2h和模型完成时肌肉注射150μg/kg和150μg/kg PGE2。采用ELISA检测各时段大鼠血清的TNF－α与IL－10含量，观察PGE2前干预、后干预对大鼠血清TNF-α与IL－10含量动态变化，同时随机取NAP组和PGE2干预组6h和12h时段肺组织，电镜下观察超微结构改变。结果：PGE2前、后干预组IL－10含量峰值分别在3h和6h时段，比ANP组显升高（P＜0．001），所有时段（1h、3h、6h、12h）TNF－α均比ANP组大鼠显降低（P＜0．001），IL－10上升幅度随PGE2给予的早晚而不同，TNF－α亦随IL－10上升而下降。PGE2免疫干预组与ANP组相比，6h时段的肺组织病变有所减轻，12h时段明显改善。结论：PGE2在上调大鼠血清IL－10、降低TNF－α含量的同时，使肺组织损伤得到改善。     

Toll-样受体2，4mRNA在急性出血坏死性胰腺炎肺损伤中的表达变化

目的研究急性出血坏死性胰腺炎（AHNP）肺损伤中Toll-样受体（TLR）2/4mRNA表达的变化规律.方法建立AHNP肺损伤动物模型.动物分为假手术组（S组）、胰腺炎组（P组）.计算各组肺组织学评分和肺损伤指数以评价肺损伤的程度;RT-PCR方法检测不同时间点肺组织TLR2和TLR4mRNA表达的变化.结果肺组织TLR2和TLR4mRNA在S组仅有低表达,在P组3h表达开始增高,伤后6～12h该两指标表达达到峰值（P＜0.05或P＜0.01）,而S组变化不明显.结论AHNP时,肺组织内该两种基因的表达上调;肺组织内TLR2和TLR4的基因表达增高可能在AHNP肺损伤的发生、发展中起作用.     

内源性一氧化氮对急性胰腺炎大鼠胰腺微血管通透性的影响

目的 探讨内源性一氧化氮（NO）对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺炎大鼠胰腺微血管通透性的影响。方法 以5%牛磺胆酸钠溶液胰胆管注射（1ml/kg）制成大鼠急性坏死性胰腺炎模型,以工具药L-硝基精氧酸（L-NNA）和内源性NO的阻断Evans Blue的漏出代表微血管的通透性,观察内源性NO对胰腺组织损伤程度、胰腺内Evans Blue漏出等的影响。结果 牛磺胆酸钠胆管注射造成大鼠胰腺组织明显坏死和炎性细胞浸润,以及血清淀粉酶浓度升高、胰腺湿/干重比率产加和明显的胰腺组织内Evans Blue积聚。以L-NNA（12.5mg/kg）阻断内源性NO后,胰腺组织坏死和炎性细胞浸润进一步加重,并使血清淀粉酶浓度升高,胰腺湿/干重比率增加,Evans Blue的漏出率也较之单纯胰腺炎组大鼠明显增加。结论 内源性NO具有胰腺保护作用,其保护机制可能与维持胰腺微血管的完整性有关。