肝细胞内糖原拮抗肝脏缺血—再灌注损伤及相关机制的临床研究

为探讨阻断肝血流施行肝脏手术前,增加矸细胞糖原含量能否减轻肝脏缺血－再灌注损伤及其相关机制。将17例患者分为对照组及实验组（术静滴高浓度葡萄糖）,均采阻断第一肝门行病变肝脏切除术,术中获取肝组织标本测定组织中ATP含量及丙二醛,超氧化物歧化酶的变化情况,并对两组患者术前及术后1、5天的肝功能进行检测,结果发现,于肝脏缺血后及再灌注1h,实验组肝组织ATP含量显著高于对照组,且术后第1、5天,实验组肝功能改善程度也显著优于对照组;外引,氧自由基及其引发的脂质过氧化反应明显参与了肝脏缺血－再灌注损伤过程,但在程度上实验组显著轻于对照组,提示临床上在阻断肝脏血流前,增加肝细胞糖原含量可有效地减轻肝脏缺血－再灌注损伤程度;其间,肝细胞糖原能显著抗原自由基的损伤作用,可能是其内在机制。     

兔肝缺血/再灌注损伤DWI及与肝损伤关系的研究

目的:观察兔部分肝脏缺血/再灌注损伤(I/R)磁共振弥散加权成像(MR-DWI)表面扩散系数(ADC)的演变规律,分析其与肝酶(ALT、ALP)相关性.方法:新西兰大白兔阻断肝左叶血供60min后,恢复血供,按再灌注时间分为6h、12h I/R组及假手术对照组即sham组(每组6只,共计18只),DWl成像b值分别选取20s/mm2、50s/mm2、100s/mm2、300s/mm2和600s/mm2.同时行T2WI、T1 WI扫描、组织病理学和肝生化AST、ALT检查.结果:各I/R组ADC低十sham组,其中在b=20s/mm2、50s/mm2、100s/mm2时,6h组ADC明显低于sham组(P<0.05).在b=300s/mm2、600s/mm2时,6h、12h I/R组ADC与sham组之间均无统计学差异(P>0.05).各I/R血清AIJT、ALP明显高于sham组(P<0.05).b=20s/mm250s/mm2、100s/mm2时,ALT与ADC存在显著负相关(r＝-0.497,P<0.05;r=-0.623,P<0.05;r=-0.671,P<0.01);b=20s/mm2、100s/mm2,AD(:与分别与ALP也存在相关性(r=-0.578,P<0.05;r=-0.489,P<0.05).结论:采用较小b值弥散成像(DWI)能够动态监测肝I/R病理发展过程,ADC值可以作为榆测肝脏损伤的敏感指标.     

大鼠缺血再灌注后小动脉ICAM-1与NOS表达关系的实验研究

目的：观察大鼠缺血再灌注后细胞间黏附分子（ICAM-1）和一氧化氮合酶（NOS）表达及其相互关系。方法：将大鼠分为对照组、缺血45min组和缺血再灌注1、3、6、12、24h组,建立失血性休克模型并给予治疗,用光镜和电镜观察小动脉形态学改变,并用免疫组化法检测ICAM-1、NOS在小动脉内皮和平滑肌细胞表达的阳性细胞数。结果：（1）缺血45min后NOS表达量首先增加,再灌后1h达到高峰,3h表达减弱。与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）;（2）缺血再灌后1h组ICAM-1表达量增加,再灌后3h达到高峰,并持续至24h,与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：ICAM-1介导了小动脉缺血再灌注损伤,NOS对小动脉缺血再灌注损伤具有保护作用,NOS对ICAM-1有抑制作用。     

肝细胞肝癌中凋亡和增殖细胞核抗原的表达及意义

目的探讨细胞凋亡、增殖细胞核抗原(PCNA)与肝细胞肝癌(HCC)发生、发展的关系。方法利用DNA缺口末端标记技术(TUNEL)和免疫组织化学方法,检测33例肝细胞肝癌中自发性细胞凋亡和PCNA的表达。结果TUNEL染色凋亡阳性细胞为胞核呈蓝紫色颗粒,PCNA染色阳性为胞核呈棕黄色颗粒状。肝癌组织的凋亡指数AI(0.40)和PCNA指数PI(26.75)都明显高于癌旁肝组织的AI(0.11)和PI(7.63),并且在包膜受侵犯者及低分化癌组织中AI和PI都明显增高(P＜0.01)。此外,AI与PI呈高度正相关(r＝0.8,P＜0.01)。结论细胞凋亡和PCNA参与HCC的发生和发展,随着HCC分化程度的降低,凋亡指数和PCNA指数显著增加。     

暂时性门体分流对大鼠冷缺血再灌注肝细胞凋亡的保护作用

目的比较门静脉分流和阻断对再灌注后两组大鼠肝细胞凋亡的影响,为临床上选取手术方式减轻移植肝冷缺血再灌注损伤提供参考。方法将动物分为假手术组、分流组和阻断组,制作门颈静脉转流下大鼠冷缺血再灌注模型,观察大鼠的一般情况及术后1h、6h、24h、3d及7d肝脏细胞凋亡的变化。结果分流组与阻断组肝细胞凋亡数于再灌注24h达到高峰,然后逐渐下降,术后相同时间分流组肝细胞凋亡数目明显少于阻断组。结论无肝期门体分流处理可以避免门静脉阻断引起的胃肠、脾脏淤血,减少肝细胞凋亡,在更大程度上保持冷缺血再灌注后肝脏组织结构和功能的完整性。     

X射线诱导转录因子活化与凋亡的关系

目的 通过观察较高剂量照射的鼠胸腺细胞内几种转录因子活性的变化和胸腺细胞凋亡发展时程，探讨转录因子活性的变化在辐射诱导的免疫细胞凋亡中的作用。方法 通过电泳移动变化分析及流式细胞术的方法分别检测了2Gy X射线全身照射后胸腺细胞内转录因子NF－κB、CREB和OCT－1活性以及胸腺细胞凋亡的动态变化。结果 2Gy X射线全身照射后胸腺细胞内NF－κB两种二聚体p50/p50和p50/p65的DNA结合活性的变化存在着明显的区别，主要以p50/p50活性显著升高为特征，CREB OCT－1的活性也明显增强，活性高峰均出现了照射后4－12h，而它们的活性高峰又恰与2Gy照射诱导的胸腺细胞凋亡的高峰相吻合。结论 较高剂量电离辐射主要诱导NF－κB同源二聚体的DNA结合活性增强；3种转录因子NF－κB p50/50、CREB以及OCT－1可能在2Gy照射诱导的胸腺细胞内具有协同促进细胞凋亡的作用。     

Resistance training and glycogen content in ovariectomized rats

The aim of the present study was to investigate the effects of resistance training on glycogen content and muscle cross-sectional area (CSA) in ovariectomized rats. Wistar rats were divided into: sedentary; ovariectomized sedentary; resistance trained; and ovariectomized resistance trained. In the 12-week resistance training, the animals climbed a 1.1 m vertical ladder, 3 days per week, with 4-8 climbs. Cardiac, liver and muscle glycogen content was determined. After the 12-week resistance training period there was a higher hepatic and muscle glycogen content in the resistance training group compared with the other groups (p<0.01). CSA was higher in soleus for the resistance trained, ovariectomized resistance trained and sedentary compared with ovariectomized sedentary (p<0.05). Ovariectomy attenuated the increase in liver and muscle glycogen content, while soleus muscle cross-sectional area increased with resistance training, even in ovariectomized rats. Resistance training could be an important exercise to increase muscle function in situations of reduced estrogen and progesterone.     

肝癌组织中gp78蛋白与KAI1蛋白的相互关系研究

目的探讨gp78蛋白与肝癌组织中的肿瘤转移抑制基因KAI1蛋白可能存在的相互关系。方法收集肝癌组织30例及与其相对应的癌旁组织标本30例。用MHCC-97肝癌细胞接种裸鼠肝脏,产生肝脏原位肿瘤9例及肿瘤转移灶14例,收集肿瘤组织和正常肝脏组织。采用免疫组织化学和蛋白质印迹技术检测相关组织中gp78蛋白及KAI1蛋白的表达。结果蛋白质印迹结果表明,人肝癌组织中gp78蛋白的表达水平(0.350±0.143)明显高于人癌旁组织(0.036±0.003,P=0.016),而KAI1蛋白的表达水平(0.036±0.008)则明显低于人癌旁组织(1.173±0.124,P=0.003)。与癌旁组织相比,30例肝癌组织中24例(80%)gp78水平升高,20例(66.7%)KAI1水平降低;9例裸鼠肝癌组织中8例(88.9%)gp78水平升高,6例(66.7%)KAI1水平降低;14例肝癌转移灶样本中,12例(85.7%)gp78水平升高,13例(92.8%)KAI1水平降低。免疫组织化学结果显示,30例人肝癌组织中,有22例(73.3%)gp78呈强阳性表达(分值≥5分),19例(63.3%)KAI1阳性表达较低(分值...     

热休克预处理对大鼠肝脏缺血再灌注时线粒体的保护作用

目的 研究热休克预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤时线粒体功能的影响。方法 大鼠分为热休克组（HS组）和对照组（C组），HS组大鼠缺血再灌注前48小时先行热休克预处理。随后两组均采用钳夹肝十二指韧带，造成肝脏缺血再灌注损伤，检测缺血前（n=5)、缺血后（n=10)和再灌注后（n=10)肝脏线粒体膜电位（MPM）和呼吸功能的变化。同时比较两组再灌注后三磷酸腺苷（ATP）的恢复情况。结果 缺血30分钟后，C组MPM明显降低，再灌注后仍未恢复。HS组MPM在缺血和再灌注后均保持在较高水平。C组线粒体呼吸控制率（RCR）在缺血30分钟后降至4.89 0.35)，而HS组维持在接近正常的水平。再灌注后，HS组ATP水平的恢复明显早于C组。结论 热休克预处理可防止肝脏缺血时线粒体膜完整性的破坏，并有助于线粒体在再灌注时产生高能磷酸化合物。     

肝胆疾病与色素痣的关系

经B超检查发现并经其它检查确诊的肝胆疾病50例,其中46例在皮肤相应经络线上出现色素痣,占92％;另设50例无肝胆疾病者作为对照组,其中有痣者1例,占2％。结果表明,观察组有痣率明显高于对照组,说明肝胆疾患和痣的发生率成正比。认为探讨这类疾病在经穴上的表现,对肝胆疾病的早期诊断具有一定的参考价值。     

急性间断低氧大鼠脑细胞程序性死亡与自由基消除能力的关系

为探讨高原低氧神经细胞细胞性死亡的机制，利用急性间断低氧动物模型，用ＴＵＮＥＬ法检测了脑细胞的程序性死亡，化学法制定组织中ＧＳＨ／ＧＳＳＧ比值和ＳＯＤ活性。结果表明，随着低氧时间延长，组织中ＧＳＨ／ＧＳＳＧ比值与ＳＯＤ活性下降；而程序性死亡细胞数目增加，相关与回归分析表明，程序性死亡细胞数与ＧＳＨ／ＧＳＳＧ比值和ＳＯＤ活性成负的幂相关，提示，程序性细胞死亡与自由基消除系统可能存在内的联系。