锌对胰岛素抵抗靶细胞活力和葡萄糖消耗量影响

目的探讨锌对胰岛素抵抗靶细胞活力和葡萄糖消耗量的影响。方法建成Hep G2细胞、3T3-L1细胞和L6成肌细胞胰岛素抵抗模型后,用10-7mol/L胰岛素和不同浓度锌(0、20、50、100、200、400μmol/L)孵育细胞,通过MTT法和葡萄糖氧化酶法测定基础状态和胰岛素刺激状态下3种胰岛素抵抗细胞葡萄糖的消耗量。结果不同剂量的锌孵育3种细胞3 h后,200、400μmol/L的锌可明显抑制各组细胞的活力(P<0.05);50~100μmol/L的锌干预3 h能在不同程度上提高Hep G2、3T3-L1正常细胞和胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗量,但其作用效果明显低于胰岛素;其中100μmol/L的锌与胰岛素共同作用的效果分别优于胰岛素或锌单独作用的效果(P<0.05);对于L6肌细胞,20、50和100μmol/L锌均能明显提高基础状态下正常细胞和胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗量(P<0.05);仅有20μmol/L锌和胰岛素共同作用的效果优于胰岛素或锌单独作用的效果(P<0.05)。结论不同浓度的锌可以在一定程度上提高3种胰岛素抵抗的靶细胞葡萄糖摄取量,且不同的细胞具有不同的适宜作用剂量。     

肿瘤坏死因子-α诱导大鼠L6细胞胰岛素抵抗模型的建立

目的采用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)体外诱导培养法建立大鼠骨骼肌细胞胰岛素抵抗(IR)模型,为研究IR的发生机制及筛选改善IR的药物和功能食品提供一种简便可靠的IR细胞模型。方法以大鼠肌细胞系L6细胞为研究对象,在含10ng/ml小鼠TNF-α培养液中培养24h,同时设立空白对照组和胰岛素对照组。之后各组细胞分别加入100nmol/L胰岛素。采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)法检测培养液中残存葡萄糖含量,[3H]标记的脱氧葡萄糖转运检测细胞内葡萄糖的摄取量评价模型建立的效果。结果在无胰岛素刺激下,TNFα诱导组培养液中残存葡萄糖含量和细胞内的葡萄糖摄取量,与空白对照组比较没有差异(P0.05);在胰岛素刺激下,TNFα诱导组培养液中残存葡萄糖含量和细胞内的葡萄糖摄取量,与胰岛素对照组比较差异具有显著性(P0.05)。结论用含10ng/ml TNFα的培养液培养24h的L6细胞产生胰岛素抵抗,作为IR肌细胞模型可广泛用于胰岛素抵抗的机制研究和筛选辅助降血糖的药物或功能食品的功能评价。     

C-反应蛋白与肥胖大鼠胰岛素抵抗相关性

目的探讨饮食诱导肥胖大鼠血清C-反应蛋白(CRP)与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法30只雄性Wistar大鼠随机分成对照组和高脂组,分别喂基础饲料和高脂饲料12周,测定12周末空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、血清CRP、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,以胰岛素敏感指数(ISI)判定机体胰岛素抵抗(IR)状态。结果12周末,高脂组大鼠血清CRP、TNF-αI、L-6水平分别为(2.933±1.039)mg/L,(2.029±0.152)μg/L,(130.32±23.28)ng/L,均高于对照组(P<0.05),而且TNF-αI、L-6分别与CRP呈正相关(P<0.05),CRP与ISI呈负相关(P<0.05)。结论CRP可能涉及肥胖及肥胖相关的IR。     

锌对L6细胞葡萄糖消耗量和蛋白激酶B/糖原合酶激酶3β表达的影响（英文）

目的以L6细胞为研究对象,观察锌对正常L6细胞及棕榈酸诱导的胰岛素抵抗L6细胞葡萄糖消耗量及胰岛素信号通路关键分子蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKT)/糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase,GSK3β)表达的影响。方法培养L6成肌细胞,分化后用0.4 mmol/L棕榈酸作用24h造胰岛素抵抗细胞模型,用100 nmol/L胰岛素和不同浓度的锌(0,10,20,50,100μmol/L)作用3h,葡萄糖氧化酶法测定基础状态和胰岛素刺激状态下细胞对葡萄糖的摄取量;用100 nmol/L胰岛素和不同浓度的锌(0,10,20,50μmol/L)作用15 min,Western blot法检测磷酸化AKT及磷酸化GSK3β表达水平。结果 10⁵0μmo/L的锌能明显提高正常L6细胞葡萄糖的消耗量和AKT/GSK3β的磷酸化表达,锌与胰岛素共刺激能显著激活AKT/GSK3β;而对于胰岛素抵抗L6细胞,1050μmo/L的锌能明显提高正常L6细胞葡萄糖的消耗量和AKT/GSK3β的磷酸化表达,锌与胰岛素共刺激能显著激活AKT/GSK3β;而对于胰岛素抵抗L6细胞,10⁵0μmo/L锌单独作用可明显提高其葡萄糖消耗量和GSK3β的磷酸化,1050μmo/L锌单独作用可明显提高其葡萄糖消耗量和GSK3β的磷酸化,10⁵0μmo/L锌与胰岛素共刺激能激活AKT的磷酸化表达。结论1050μmo/L锌与胰岛素共刺激能激活AKT的磷酸化表达。结论10⁵0μmol/L的锌可提高L6细胞的葡萄糖消耗量,这种作用可能与其增强AKT和GSK3β磷酸化水平有关。     

人肝细胞系L02胰岛素抵抗细胞模型的建立及鉴定

[目的]采用高浓度胰岛素体外诱导培养法建立人肝细胞IR模型,为研究IR的发生发展机制及筛选改善IR的药物提供一种简便可靠的IR细胞模型。[方法]以人肝细胞系L02为研究对象,在含5×10-7 mol/L人胰岛素的培养液培养16 h,未用高浓度胰岛素培养者为对照组。之后两组分别加入0、1、10、50、100、200 ng/ml人胰岛素。采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法(GOD-POD)法检测培养液中残存葡萄糖含量。[结果]在各浓度的胰岛素刺激下,高胰岛素诱导组培养液中残存葡萄糖含量均显著高于对照细胞(P﹤0.01)。[结论]用含5×10-7 mol/L胰岛素的培养液培养16 h的L02细胞产生胰岛素抵抗,作为IR肝细胞模型可广泛用于胰岛素抵抗的研究。     

高葡萄糖钳夹技术评价肥胖和2型糖尿病者胰岛β细胞功能及胰岛素敏感性

[目的]通过高葡萄糖钳夹技术精确评价正常、肥胖和2型糖尿病者胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗差异,探讨肥胖和2型糖尿病发病机制. [方法]选择正常者10人(正常对照组)、肥胖和2型糖尿病者备15人(肥胖组和糖尿病组),应用高葡萄糖钳夹技术进行研究,观测钳夹过程中胰岛素分泌情况,评价胰岛β细胞功能状态,计算胰岛素敏感指数,了解胰岛素抵抗情况. [结果]①3组均4～8min达到目标高糖平台并维持钳夹结束,平均葡萄糖输注速度正常对照组和肥胖组均高于2型糖尿病组(F=1128.17,v=2,P=0.0000),正常对照组和肥胖组比较无统计学差异(t=1.990,P=0.059);②3组胰岛素双相分泌曲线形态相似,肥胖组曲线微高于正常组;糖尿病组胰岛素1相和2相分泌曲线均显著低于正常组,各项指标差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);③正常组和肥胖组平均葡萄糖代谢率无统计学差异,但显著高于糖尿病组(P<0.01或P<0.05);④正常、肥胖和2型糖尿病胰岛素敏感指数分别是(15.56±2.47)、 (14.26±2.36)和(10.34±3.68)mg·kg-1min-1/mU/L(F=13.71 v=2,P=0.000). [结论]①高葡萄糖钳夹成功建立,评价了不同人群的胰岛β细胞功能和机体胰岛素抵抗的差异;②代偿性胰岛素分泌增多与肥胖相关;③2型糖尿病者胰岛β细胞受损,普遍存在胰岛素分泌缺陷和(或)胰岛素抵抗. 1或P<0.05);③正常组和肥胖组平均葡萄糖代谢率无统计学差异,但显著高于糖尿病组(P<0.01或P<0.05);④正常、肥胖和2型糖尿病胰岛素敏感指数分别是(15.56±2.47)、 (14.26±2.36)和(10.34±3.68)mg·kg-1min-1/mU/L(F=13.71 v=2,P=0. 00). [结论]①高葡萄糖钳夹成功建立,评价了不同人群的胰岛β细胞功能和机体胰岛素抵抗的差异;②代偿性胰岛素分泌增多与肥胖相关;③2型糖尿病者胰岛β细胞受损,普遍存在胰岛素分泌缺陷和(或)胰岛素抵抗. 1或P<0.05);③正常组和肥胖组平均葡萄糖代谢率无统计学差异,但显著高于糖尿病组(P<0.01或P<0.05);④正常、肥胖和2型糖尿病胰岛素敏感指数分别是(15.56±2.47)、 (14.26±2.36)和(10.34±3.68)mg·kg-1min-1/mU/L(F=13.71 v=2,P=0. 00)     

明日叶查尔酮对胰岛素抵抗细胞PI3K-Akt-GLUT4信号通路的影响

目的研究明日叶查尔酮(Angelica keiskei chalcones,AC)对胰岛素抵抗L6细胞磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶-葡萄糖转运体4(PI3K-Akt-GLUT4)信号通路的影响。方法采用高浓度胰岛素诱导的胰岛素抵抗L6细胞,分别加入5、10、20μmol/L终浓度的明日叶查尔酮共同培养24 h,葡萄糖氧化酶法测定细胞上清液中葡萄糖含量,逆转录聚合酶链式反应方法检测细胞PI3K和Akt的mRNA表达水平,蛋白印迹法检测GLUT4和Akt的蛋白表达水平。结果胰岛素抵抗组细胞培养液的葡萄糖含量显著高于空白对照组(P0.05),而PI3K mRNA、Akt mRNA和GLUT4、Akt蛋白表达水平则降低(P0.05);中、高剂量AC组细胞培养液葡萄糖含量均低于胰岛素抵抗组(P0.05),而PI3K mRNA、Akt mRNA和GLUT4、Akt蛋白表达水平则升高(P0.05)。结论明日叶查尔酮可上调L6细胞胰岛素抵抗模型PI3K-AktGLUT4信号通路的表达水平,增强其对葡萄糖的摄取利用,改善胰岛素抵抗。     

染料木黄酮对油酸诱导脂肪变HepG2细胞PPARα表达和糖脂水平的影响

目的研究染料木黄酮(genistein,Gen)对油酸(oleic acid,OA)诱导脂肪变HepG2细胞的过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferators-activated receptorα,PPARα)蛋白表达和糖、脂代谢水平的影响。方法将HepG2细胞在含有0⁵0?mol/L的Gen,0.5mmol/L的OA的培养基内,且设置对照组,培养24h后收集细胞,分别采用蛋白质印迹法(Western blotting)、酶法、选择性沉淀法测定PPARα、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量;收集培养基上清液,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定葡萄糖消耗量。结果浓度为1050?mol/L的Gen,0.5mmol/L的OA的培养基内,且设置对照组,培养24h后收集细胞,分别采用蛋白质印迹法(Western blotting)、酶法、选择性沉淀法测定PPARα、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量;收集培养基上清液,采用葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定葡萄糖消耗量。结果浓度为10⁵0?mol/L的Gen可以减轻HepG2细胞脂肪变的程度,总体上呈现剂量效应关系。Gen各组与模型组比较,高浓度的Gen(50?mol/L)可有效提高OA诱导脂肪变HepG2细胞内PPARα和HDL-C含量,降低TC和葡萄糖消耗量,但低浓度的Gen(1050?mol/L的Gen可以减轻HepG2细胞脂肪变的程度,总体上呈现剂量效应关系。Gen各组与模型组比较,高浓度的Gen(50?mol/L)可有效提高OA诱导脂肪变HepG2细胞内PPARα和HDL-C含量,降低TC和葡萄糖消耗量,但低浓度的Gen(10³0?mol/L)对细胞内TC和HDL-C作用不明显。结论高浓度Gen能改善OA诱导的脂肪变HepG2细胞内的糖脂代谢情况,并可能与PPARα表达有关。[营养学报,2014,36(1):49-52]     

褪黑素改善高糖高脂饲养大鼠胰岛素敏感性

目的:观察褪黑素对高糖高脂饲养大鼠胰岛素敏感性的影响。方法:将18只雄性SD大鼠(150~200g)随机分为正常组(CD组)与高糖高脂组(HFSD组),分别饲以正常饲料与高糖高脂饲料(53%基础饲料含蔗糖37%和猪油10%)喂养6个月后,给药治疗2个月;治疗期间,给褪黑素组(Mel组)每天腹腔注射药物褪黑素(Melatonin,Mel,4 mg/kg),对照组腹腔注射生理盐水。测定空腹血糖、胰岛素、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)水平,做口服葡萄糖耐量实验(OGTT)和胰岛素敏感性实验。结果:高糖高脂饮食可诱导SD大鼠产生胰岛素抵抗,引起SD大鼠空腹血糖、血清胰岛素、TG、FFA水平升高;胰岛素敏感性、HDL—C水平下降。褪黑素治疗后,胰岛素敏感性增强,改善了胰岛素抵抗。结论:Mel能降低高糖高脂饲养SD大鼠糖脂状况,提高胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗。     

游离脂肪酸引起肝细胞胰岛素抵抗及缺陷位点研究

目的研究游离脂肪酸诱导人肝细胞(HepG2)引起胰岛素抵抗及信号转导缺陷位点。方法用含0.25mmol/L的软脂酸(PA)或100nmol/L胰岛素的DMEM培养基培养HepG2细胞24h后,用100nmol/L胰岛素刺激不同时间后,分别测定培养液的葡萄糖浓度,细胞内的糖原含量,磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性以及磷酸化的蛋白激酶B(P鄄Ser473PKB)的蛋白水平。磷酯酰肌醇3激酶(PI鄄3K)的抑制剂Wortmannin加入培养基,终浓度10-6mol/L。结果与正常对照组相比,PA处理组和高胰岛素组培养液中葡萄糖含量增高(P<0.05);PA处理组胰岛素刺激的PEPCK活性高于正常对照组(P<0.01),P鄄Ser473PKB蛋白水平低于正常对照组(P<0.01)。用Wortmannin处理后,正常对照组中PEPCK活性差别有统计学意义(P<0.01),PA处理组中的PEPCK活性差别无统计学意义(P>0.05);正常对照组和PA处理组中P鄄Ser473PKB差别均有统计学意义(P<0.01)。结论0.25mmol/L的AP培养24h后,细胞产生了胰岛素抵抗并且胰岛素信号转导途径存在障碍,可能蛋白激酶B(PKB)及下游分子缺陷参与了肝胰岛素抵抗的形成。     

长期酒精摄入对大鼠骨骼肌组织IR、IRS-1和PI-3K基因表达的影响

目的研究酒精长期作用下对大鼠骨骼肌胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、磷脂酰肌醇3-激酶p85亚单位(PI-3K)mRNA表达的影响,探讨酒精与胰岛素抵抗的关系及相关分子机制。方法清洁级Wistar大鼠80只(雌雄各半),按体重随机分为对照组和低、中、高剂量组,分别给予蒸馏水以及10%、20%和33%酒精溶液,灌胃剂量为每天10ml/kgbw。第19周末,断头处死大鼠,测定空腹血糖和血胰岛素,计算HOMA胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。提取骨骼肌总RNA,通过RT-PCR测定IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达水平。结果雄性大鼠,与对照组比较高剂量组空腹血糖,低、中剂量组空腹胰岛素水平升高,各酒精剂量组HOMA-IR指数均升高。IRmRNA的表达在中、高剂量组降低,而IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达水平表现为随着酒精剂量的增加先升高后降低,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);与对照组比较,雌性大鼠高剂量组空腹血糖升高、空腹血胰岛素下降,IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA的表达在中、高剂量组降低(P<0.05)。各剂量组HOMA-IR指数与对照组比较差异无显著性。结论长期摄入过量酒精可以造成骨骼肌组织IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达的降低,这可能是酒精降低胰岛素敏感性,引起胰岛素抵抗的分子机制。     

油酸在高甘油三酯血症患者体内转化生成9,10-二羟基硬脂酸

目的比较高甘油三酯血症患者食用油酸(oleic acid,OA)含量不同的茶籽油和调和油前后,血清OA和9,10-二羟基硬脂酸(9,10-dihydroxystearic acid,DHSA)的含量和变化,以探讨OA是否在高甘油三酯血症患者体内转化生成DHSA。方法采用随机双盲对照研究,将50名高甘油三酯血症患者随机分为茶籽油组和调和油组,每组各25例。受试者每日摄入以上实验油25~30g,持续8w。在研究开始时和结束时测定身高、体重、BMI以及血清中OA、DHSA、总甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血糖、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。结果研究结束后茶籽油和调和油组分别获得21和25例有效数据。实验开始时两组性别分布、年龄、BMI、TG、TC、ALT、AST、总能量、三大营养物质摄入水平、各脂肪酸摄入量及活动水平无显著差异。实验结束时,与调和油组相比,茶籽油组油酸和单不饱和脂肪酸摄入量以及血清OA和DHSA水平显著增加,多不饱和脂肪酸摄入量减少,其他各项指标无显著变化。与实验开始时相比,茶籽油组油酸和单不饱和脂肪酸摄入量以及血清中OA和DHSA含量显著增高,体重和BMI显著下降及多不饱和脂肪酸摄入量减少,其他各项指标无显著变化;调和油组除体重和BMI显著下降外,其他各项指标无显著变化。结论油酸在高甘油三酯患者体内可代谢生成DHSA。     

乳清酸诱导的大鼠非酒精性脂肪肝与糖耐量异常和高血压关系的研究

目的研究长期摄食乳清酸诱导的大鼠脂肪肝、糖耐量及血压的变化及三者之间的关系。方法将Wistar大鼠按体重随机分为对照组和乳清酸两组,前者喂标准饲料,后者喂1%乳清酸饲料。14、30、60、90d后测体重、肝、肾周及附睾脂肪重量,肝甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)水平和葡萄糖耐量,并在14、30、45、60、89d测血压变化。结果乳清酸组14、30、60、90 d后测,大鼠体重、体脂肪重量无明显变化,但肝重分别显著增加了46.1%(P<0.001)、35.1%(P<0.001)、40.9%(P<0.001)和42.0%(P<0.05),肝脏TG水平分别升高了383.8%(P<0.05)、301.0%(P<0.05)、538.0%(P<0.01)和1251.5%(P<0.001),肝脏TC水平也有所上升。糖耐量结果为,乳清酸组持续性异常,呈现胰岛素抵抗现象,并伴随发生高血压。结论 1%乳清酸可在短期内建立大鼠非肥胖性非酒精性脂肪肝模型,长期持续,同时伴有糖耐异常现象和高血压。该模型可用于非酒精性脂肪肝与代谢性综合征之间关系的研究。     

Chlorogenic acid differentially affects postprandial glucose and glucose-dependent insulinotropic polypeptide response in rats

Regular coffee consumption significantly lowers the risk of type 2 diabetes (T2D). Coffee contains thousands of compounds; however, the specific component(s) responsible for this reduced risk is unknown. Chlorogenic acids (CGA) found in brewed coffee inhibit intestinal glucose uptake in vitro. The objective of this study was to elucidate the mechanisms by which CGA acts to mediate blood glucose response in vivo. Conscious, unrestrained, male Sprague-Dawley rats were chronically catheterized and gavage-fed a standardized meal (59% carbohydrate, 25% fat, 12% protein), administered with or without CGA (120?mg·kg(-1)), in a randomized crossover design separated by a 3-day washout period. Acetaminophen was co-administered to assess the effects of CGA on gastric emptying. The incretins glucagon-like peptide-1 (GLP-1) and glucose-dependent insulinotropic peptide (GIP) were measured. GLP-1 response in the presence of glucose and CGA was further examined, using the human colon cell line NCI-H716. Total area under the curve (AUC) for blood glucose was significantly attenuated in rats fed CGA (p?< 0.05). Despite this, no differences in plasma insulin or nonesterified fatty acids were observed, and gastric emptying was not altered. Plasma GIP response was blunted in rats fed CGA, with a lower peak concentration and AUC up to 180?min postprandially (p?< 0.05). There were no changes in GLP-1 secretion in either the in vivo or in vitro study. In conclusion, CGA treatment resulted in beneficial effects on blood glucose response, with alterations seen in GIP concentrations. Given the widespread consumption and availability of coffee, CGA may be a viable prevention tool for T2D.     

广东省东莞市超重及肥胖青少年代谢综合征与糖调节异常的研究

目的 通过研究超重及肥胖对青少年空腹血糖受损(IFG)及糖耐量低减(IGT)影响的特点,了解青少年2型糖尿病(T2DM)发生和发展的过程.方法 2007年5月至11月,以东莞地区3856名11～18岁在校中学生为研究对象.根据志愿的原则,对符合超重及肥胖(b/Ob)的368例男生和326例女生再抽静脉血,检测血脂、空腹血糖(FPG)和餐后2小时血糖(2 h PC)、空腹胰岛素(Fins),然后根据体质指数(BNI)(暂定)标准Ⅱ分成超重组(b)和肥胖组(Ob),以11岁～和15～18岁年龄段对检测数据进行统计分析.结果 (1)同年龄段两组BMI、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、胰岛素抵抗指数(IR)、IFG和IGT的比较:①女生ll岁～b组的BMI值为(22.1±2.4)kg/m2、LDL-C为(2.38±0.65)mmol/L、IR为1.15±0.58,IFG和IGT的检出率分别为3.5%和1.4%;Ob组的BMI值为(24.4±3.9)kg/m2、LDL-C为(2.70±0.73)mmol/L、IR为1.36±0.67、IFG和IGT的检出率分别为14.6%和6.3%,两组相比的t或X2值分别为4.83、2.45、2.10、7.41和7.99(P值均<0.01或<0.05).15～18岁b组的BMI值为(25.8±3.1)kg/m2、LDL-C为(2.35±0.61)mmol/L、IR为1.14±0.64、IFG和IGT的检出率分别为3.1%和4.1%,Ob组的BMI值为(28.0±4.3)kg/m2、LDL-C为(2.69±0.69)mmol/L、IR为1.43±0.84、IFG和IGT的检出率分别为12.8%和15.4%,两组相比的t或X<2>值分别为3.33、2.79、1.87、4.75和5.17(P值均<0.01或<0.05).②男生11岁～b组的BMI值为(22.4±2.3)kg/m2、LDL-C为(2.36±0.67)mmol/L、IR为1.19±0.65、IFG和IGT的检出率分别为3.6%和1.8%,Ob组的BMI值为(24.6±4.2)kg/m2、LDL-C为(2.68±0.71)mmol/L、IR为1.44±0.89、IFG和IGT的检出率分别为13.3%和9.4%,两组相比的t或X2值分别为4.85、2.72、2.19、6.75和6.76(P值均<0.01或<0.05).15～18岁b组的BIM值为(26.4±2.8)kg/m2、LDL-C为(2.35±0.70)mmol/L、IR为(1.24±0.68)kg/m2、IFG和IGT的检出率分别为4.7%和5.6%,Ob组的BMI值为(28.2±4.8)kg/m2、LDL-C为(2.71±0.73)mmol/L、IR为1.50±0.95、IFG和IGT的检出率分别为17.9%和17.9%,两组相比的t或X2值分别为2.80、2.69、1.84、6.68和6.27(P值均<0.01或<0.05).男生11岁～b组FIG为(4.88±0.76)mmol/L,Ob组FPG为(5.09±0.80)mmol/L,两组相比t=1.84,P<0.05.(2)不同年龄段比较:①男生Ob组11岁～的2 h PG为(5.13±1.18)mmol/L,15～18岁的2 h PG为(5.36±1.24)mmol/L,两组相比t=1.78,P<0.05,接近成人的水平.男生11岁～(h/Ob)IGT阳性者有8例,阳性率为3.6%;15～18岁(b/Ob)IGT阳性者有13例,阳性率为8.9%,两年龄段相比X2=6.86,P<0.01.②女生11岁～(b/Oh)IGT阳性者有5例,阳性率为2.6%;15～18岁(b/Oh)IGT阳性者有10例,阳性率为7.4%,两年龄段相比X2=4.02,P<0.05.结论 青少年T2DM的预防,应从预防体重超重开始,同时对有高危因素的青少年人群进行定期筛查,并对有高危因素者及早地进行干预性治疗,防止或减少糖调节异常患者(IFG、IGT)向T2DM的转化.     

α-亚麻酸植物甾醇酯调节自噬改善油酸诱导的HepG2细胞脂肪变性

目的 观察α-亚麻酸植物甾醇酯（PS - ALA）对油酸（OA）诱导的肝细胞脂肪变性的影响，并从调节自噬角度进一步探索其可能的分子机制。方法 将HepG2细胞分为:对照组（Control）、模型组（OA）、ALA组（OA + ALA）、PS组（OA + PS）和PS - ALA组（OA + PS - ALA）。CCK - 8检测细胞活力；尼罗红染色观察肝细胞脂滴积累；GPO - PAP法测定细胞中TG的含量；Western blot检测自噬相关蛋白LC3II和p62蛋白表达水平；免疫荧光检测自噬调控因子p - mTORC1、LC3II和p62表达水平。采用单因素方差分析进行多组实验结果间的比较；采用LSD法和Dunnett T3法进行两两比较。结果 PS - ALA显著降低OA诱导的HepG2细胞脂质沉积和TG水平，且效果优于α- 亚麻酸（ALA）或者植物甾醇（PS）单独干预（F = 35.198, P＜0.001）；PS - ALA显著降低HepG2细胞LC3II和p62的蛋白表达水平，促进细胞自噬（F = 10.614, P = 0.001; F = 20.222 , P＜0.001）；进一步的分子机制研究表明PS - ALA抑制OA引起的mTORC1磷酸化激活（F = 644.164 , P＜0.001），同时伴随LC3II和p62的表达水平降低（F = 393.234, P＜0.001; F = 668.414 , P＜0.001）。结论 PS - ALA显著改善OA诱导的HepG2细胞脂肪变性，其分子机制可能与抑制mTORC1磷酸化促进自噬有关。     

硫辛酸对胰岛素抵抗HepG_2内质网应激和超微结构的影响

目的探讨硫辛酸对胰岛素抵抗HepG2细胞内质网应激和超微结构改变的影响及机制。方法用高浓度胰岛素诱导胰岛素抵抗的细胞模型,用硫辛酸进行预处理,观察X盒结合蛋白-1(XBP-1)、氧调节蛋白150(ORP150)和细胞信号抑制因子-3(SOCS-3)mRNA表达的改变和用透射式电镜观察内质网超微结构的改变,流式细胞术检测细胞活性氧含量。结果硫辛酸预处理后XBP-1和ORP150 mRNA表达较对照组显著增强(P<0.05),而较胰岛素显著下降(P<0.05),SOCS-3 mRNA表达较对照组和胰岛素组显著减弱(P<0.05);细胞内质网损伤较胰岛素组明显减轻,硫辛酸预处理后细胞活性氧含量较胰岛素组明显下降(P<0.05)。结论硫辛酸对高浓度胰岛素诱导的HepG2细胞内质网应激有保护作用,其机制可能与其抗氧化作用和引起胰岛素抵抗相关的内质网应激蛋白的表达改变有关。     

长期酒精摄入对雄性大鼠胰岛素敏感性及肝脏IR、IRS-1、IRS-2 mRNA表达的影响

目的从基因表达水平探讨长期酒精摄入影响肝脏胰岛素敏感性的分子机制。方法清洁级Wistar雄性大鼠40只,随机分为对照组和低、中、高剂量酒精组,每天摄入酒精剂量分别为0、0·8、1·6和2·4g/kg bw。给予酒精19周后,测定空腹血糖、血胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。提取肝脏总RNA,通过RT-PCR测定胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物1(IRS-1)、胰岛素受体底物2(IRS-2)的mRNA表达水平。结果与对照组相比,高剂量组血糖升高(P<0·05);各剂量组血胰岛素浓度均升高,低、中剂量组升高有显著性差异(P<0·05);各剂量组HOMA-IR均显著高于对照组(P<0·05)。各剂量组IR mRNA表达均降低;IRS-1及IRS-2mRNA表达在低、中剂量组升高,高剂量组降低。结论长期过量酒精摄入可以引起雄性大鼠胰岛素抵抗,肝脏IR、IRS-1、IRS-2mRNA表达降低是酒精影响胰岛素敏感性的分子机制之一。     

9,10-二羟基硬脂酸对糖尿病小鼠糖代谢的影响

目的研究9,10-二羟基硬脂酸(DHSA)对KKAy糖尿病小鼠糖耐量、胰岛素敏感性的影响。方法将48只雄性KKAy小鼠随机分为4组,每组12只,分别给予含4%DHSA高脂饲料、2%DHSA高脂饲料、4%橄榄油高脂饲料和4%玉米油高脂饲料。饲养5周时进行糖耐量实验、第6周进行胰岛素敏感性实验。体外检测DHSA对CV-1的PPAR-α和PPAR-γ的激活作用。结果在葡萄糖耐量试验中,4%DHSA组KKAy小鼠葡萄糖负荷后0.5h、1h血糖及血糖曲线下面积明显低于其它各组;4%DHSA组在注射胰岛素0.5h、1h后的血糖较低,反映对胰岛素的敏感性高于其它各组(P0.05);4%DHSA组体重明显低于4%玉米油高脂饲料组(P0.05)。DHSA在低浓度(5～20μmol/L)时没有激活CV-1细胞PPAR-γ的作用,而在50～100μmol/L浓度时具有激活PPAR-γ活性的作用,且具有一定的剂量-效应关系,但其活性远低于罗格列酮(ROSI)。DHSA没有激活CV-1细胞PPAR-α的作用。结论 DHSA改善KKAy糖尿病小鼠糖耐量和增加胰岛素敏感性,可能与提高PPAR-γ活性有关。