慢性肝炎和肝癌病人血清中乙型肝炎病毒DNA的检测

为了了解慢性肝炎和肝癌病人患者体内乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制与ＨＢＶ血清标志之间的关系，用酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ）、聚合酶链反应（ＰＣＲ）及斑点杂交方法对６１例慢性肝炎和４７例肝癌患者的ＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、相关ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）、表面抗体（抗－ＨＢｓ）、核心抗体（抗－ＨＢｃ）、相关ｅ抗体（抗－ＨＢｅ）进行了检测。结果表明：ＨＢＶＤＮＡ在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、／抗－ＨＢｃ阳性的慢性肝炎和肝癌患者血清中的检出率分别为９０．５０％和５０．００％；在ＨＢｓＡｇ／抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性者的检出率分别为４５．４０％和７．１４％；在ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性／抗－ＨＢｅ阴性者中的检出率分别为６０．００％和４０．００％；ＨＢｓＡｇ阴性、／抗－ＨＢｃ阳性或／抗－ＨＢｅ阳性或／抗－ＨＢｓ阳性者中的检出率分别为２０．００％和２２．２２％；在血清学指标全阴性时，慢性肝炎和肝癌患者血清中ＨＢＶＤＮＡ的检出率均为０。实验提示：无论是肝炎或肝癌，在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ同时阳性时，ＨＢＶ复制最为活跃；在单独ＨＢｓＡｇ阳性时，ＨＢＶ有一定程度的复制；ＨＢＶ复制在肝癌细胞中受到一定程度的抑制。     

肝硬变内HBV DNA及其五种抗原的表达及意义

取２２５例人肝硬变活检组织石蜡切片，检测了ＨＢＶＤＮＡ及其５种抗原。分别用免疫组化ＡＢＣ法检测ＨＢｘＡｇ、ｐｒｅ－Ｓ＿１和ｐｒｅ－Ｓ＿２抗原；用ＰＡＰ法检测ＨＢｓＡｇ和ＨＢｃＡｇ；用原位杂交方法检测ＨＢＶＤＮＡ；用免疫组化、原位杂交双标记方法检测ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｘＡｇ或ＨＢｃＡｇ。结果显示，阳性检出率ＨＢｓＡｇ为７０．０％（１２８／１８３例），ｐｒｅ－Ｓ＿１抗原为６４．４％（８５／１３２例）、ｐｒｅ－Ｓ＿２抗原为６１．４％（８１／１３２例），ＨＢｘＡｇ为７５．３％（１１３／１５０例），ＨＢｃＡｇ为２２．４％（３９／１７４例），ＨＢＶＤＮＡ为６２．４％（５８／９３例）。双标阳性检出率ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ为３７．３％（１９／５１例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｘ－Ａｇ为８６．３％（４４／５１例），ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｃＡｇ为３９．２％（２０／５１例）。ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢＶ５种抗原阳性病例中８０％以上均伴有肝细胞不典型增生。这一结果表明，在我国肝硬变的发生发展与ＨＢＶ慢性感染有密切的关系。     

文摘

文摘０４４在ＨＢｓＡｇ阳性患者中，ＨＢｅＡｇ／抗－Ｈｂｅ　ＡＬＴ水平及ＨＢＶ　ＤＮＡ的ＰＣＲ结果的相互关系［英］／ＬｉｕｎｇｇｒｅｎＫＫ…ＪＭｅｄＶｉｒｏｌ．－１９９３，３９．－１９７用高敏感的多聚酶链反应（ＰＣＲ）对瑞典ＨＢｓＡｇ阳性患者的血清样品...     

应用聚合酶链反应技术检测肝组织中的HBV－DNA

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对４２例肝活切组织石蜡切片中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ进行检测，并与乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）的免疫组织化学及血清学检测进行比较，ＨＢＶ－ＰＣＲ阳性率为７３．８％，高于组织及血清ＨＢｓＡｇ阳性率（分别为５９．５％和５０．０％）。３例病理形态呈肝炎改变，而血清ＨＢｓＡｇ（─）的肝组织中有２例检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，提示ＰＣＲ的高度敏感性和准确性。８３．３％的门脉性肝硬变和８７．５％的肝细胞癌组织中ＨＢＶ－ＰＣＲ呈阳性，进一步证实了上述两病与ＨＢＶ的关系密切。我们还发现肝细胞淤胆患者ＨＢＶ感染率较高，ＨＢＶ－ＤＮＡ及组织ＨＢｓＡｇ阳性比例各为６／９和４／８。     

针对包装信号起始区的硫代反义核苷酸抗HBV的研究

目的筛选高效特异的抗ＨＢＶ反义核酸药物。方法针对ＨＢＶ包装信号ε起始区设计并合成硫代反义寡聚核苷酸（ｓ－ａｓＯＤＮ）片段，通过ＥＬＩＳＡ检测法、ＭＴＴ法、电子显微镜等观察，研究此ｓ－ａｓＯＤＮ对ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ表达，以及对细胞毒性，细胞形态的影响。结果针对ε起始区的ｓ－ａｓＯＤＮ显著抑制ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ的表达，其中，对ＨＢｅＡｇ和ＨＢｃＡｇ的抑制率分别为３８．１％和５８．７％高于Ｓ基因起始区（３２．１％和３７．２％，Ｐ＜０．０１），对ＨＢｓＡｇ抑制率为８２％，低于Ｓ基因起始区（９３．４１％），在实验浓度下ｓ－ａｓＯＤＮ对细胞无毒性，对细胞形态无影响。结论ＨＢＶ包装信号区是反义核酸抗ＨＢＶ复制研究的重要的靶序列选择区域。     

乙型肝炎病毒表面抗原定量检测临床意义的探讨

为探讨乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）定量检测作为反映乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）复制情况的临床意义,本文对２００例ＨＢｓＡｇ阳性标本分别做ＨＢｓＡｇ定量检测和ＨＮＢ－ＤＮＡ检测,血清学标志物检测,并对１０例患者地行随访检测以上项目。根据测得的ＨＢｓＡｇ含量将２００例标本分为五组,计算出各组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率,发现随ＨＢｓＡｇ含量增高,ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率也显著增高（Ｐ〈０．０１）。根据ＨＢＶｅ系统不同模式分组显示,随ＨＢＶ感染好转,ＨＢｓＡｇ含量也随之降低（Ｐ〈０．０５）。对６例ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴患者ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴前后的ＨＢｓＡｇ含量比较,发现随ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴,ＨＢｓＡｇ量也显著降低（Ｐ〈０．０１）。综合以上结果,可以说明血清中ＨＢｓＡｇ含量,可以间接反映体内ＨＢＶ的情况,ＨＢｓＡｇ定量检测可作为间接反     

反义寡脱氧核苷酸在鸭体内抑制鸭乙型肝炎病毒复制与 …

目的 研究反义核酸的抗病毒作用。方法 设计合成了针对鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）前Ｓ（ＰｒｅＳ）基因区第９５１－９６８位核苷酸的硫代反义寡脱氧核苷酸（ＡＳ－ＯＤＮ），以２０μｇ／ｇ体重／日剂量对３只腹腔感染ＤＨＢＶ５．２毒株后，血清ＤＨＢｓＡｇ及ＤＨＢＶ ＤＮＡ阳性鸭连续静脉注射１０天，同时以等体积生理盐水注射另３只感染鸭作为对照。结果 对照鸭注射生理盐水后，血清ＤＨＢｓＡｇ及ＤＨＢＶ ＤＮＡ阳性未     

用ELISA微板法检测乙型肝炎病毒核心抗原

以双抗体包被的抗体夹心法，用微板ＥＬＩＳＡ检测血清乙型肝炎病毒核心抗原（ＨＢＣＡｇ），确定双包被工作浓度ＭＣ－抗－ＨＢｃ（效价１０００）为０．０４μｌ／孔，ＭＣ－抗－ＨＢｓ（１ｍｇ／ｍｌ）为３～４μｌ／孔；最佳裂解剂及其工作浓度为７％ＮＰ－４０巯基乙醇溶液。分别用不同的酶标记抗体检测，均证明双包被具有特异性。加入抗－ＨＢｃ进行阻断试验，其阻断率为７９．３％。对８４４例ＨＢｓＡｇ阴性的血清及１１４例ＨＢＶ－ＤＮＡ探针阴性血清用本法进行ＨＢｃＡｇ检测，均为阴性。在临床应用上，本法的阳性率明显高于试管法的，与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针的阳性符合率为９１．４％，并且特异性与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针的一致。     

乙型肝炎疫苗免疫持久性及预防效果的队列定人研究

报告了新生儿乙型肝炎疫苗免疫后１－９年乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳转率的定人随访结果。母亲ＨＢｓＡｇ阳性和阴性免疫后的ＨＢｓＡｇ阴性者，基ＨＢｓＡｇ的年阳转率分别为０．３６％和０．０３６％，前者是后者的１０倍。母亲ＨＢｓＡｇ阳性儿中１４例ＨＢｓＡｇ阳转，其中１０／１４（７１％）发生在免疫后２－３岁；１２／１４（８６％）变成慢性ＨＢｓＡｇ携带者。母亲ＨＢｓＡｇ阴性儿共发现３例ＨＢｓＡｇ阳转，     

通过受体介导法将核酶特异导入肝细胞以阻断HBV蛋白表达的初步研究

应用半乳糖末端糖蛋白受体（ＡＳＧＰ－Ｒ）介导的内吞作用，将外源基因导入真核细胞，与脂质体介导的转染和细胞表面转铁蛋白受体（Ｔｆ－Ｒ）介导的内吞作用相比，虽然三种方式均能有效介导外源基因的转移，但ＡＳＧＰ－Ｒ法具有肝细胞特异性，而脂质体法和Ｔｆ－Ｒ法不具此特性。将克隆于真核表达载体的针对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ｍＲＮＡＰｒｅＣ／Ｃ区的核酶质粒ｐＣＭＶ－Ｒｉｐｃ特异性导入肝细胞并发挥作用，通过酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测细胞培养液中的乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ），评价核酶在细胞水平对ＨＢＶ抗原表达的阻断作用。结果表明当核酶质粒ｐＣＭＶ－Ｒｉｐｃ与ＨＢＶ抗原表达质粒ｐＵＣ－２ＨＢＶ共转染ＨｅｐＧ２细胞时，核酶对ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ表达的抑制率分别为５５．２９％和６８．７３％。     

用序列依赖性引物延长试验定量分析野型和HBeAg缺陷HBV

用序列依赖性引物延长试验定量分析野型和ＨＢｅＡｇ缺陷ＨＢＶ［英］／ＢｒｕｎｅｔｔｏＭＲ…／／ＪＭｅｄＶｉｒｏｌ．－１９９４，４３（３）．－３１０～３１５ＨＢｅＡｇ缺陷ＨＢＶ为一种逃避变异型并可检出于严重类型的急性和慢性乙型肝炎。ＨＢｅＡｇ缺陷ＨＢＶ的...     

乙型肝炎患者HBV M和HBV DNA的相关性研究

目的 探讨乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）血清学标志（ＨＢＶ Ｍ）与ＨＢＶ ＤＮＡ检测结果的相关性与临床意义。方法 对４１４例乙型肝炎的ＨＢＶ Ｍ和ＨＢＶ ＤＮＡ检测结果进行比较。ＨＢＶ Ｍ用ＥＬＩＳＡ定量分析法检测,ＨＢＶ ＤＮＡ用斑点杂交法检测。结果 急性、慢性乙型肝炎患者中ＨＢＶ ＤＮＡ的阳性率与乙型肝炎肝硬化患者的ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率比较,差异有显著性;ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组的ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率比较,差异无显著性;ＨＢｓＡｇ和／或ＨＢｅＡｇ的滴度与ＨＢＶ ＤＮＡ阳性率呈正相关关系。结论 ＨＢＶ ＤＮＡ是评价ＨＢＶ活动最理想的标志;抗－ＨＢｅ的出现不能作为ＨＢＶ复制停止的指标;ＨＢｓＡｇ的滴度和ＨＢｅＡｇ的滴度变化可作为临床评价病毒复制程度和     

孕产妇和新生儿血清乙肝免疫标志物与HBV—DNA检测结果的比较…

利用ＨＢＶ－ＤＮＡ出现先于血清其它血清学指标理论依据。采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对乙肝免疫标志物至少一项改变的２００例孕产妇、新生儿血清进行ＰＣＲ扩增，结果有１０８份标本ＨＢＶ ＤＮＡ阳性、总阳性率为５４％。其中ＨＢｅＡｇ阳性率８３．３％（７０／８４），ＨＢｓＡｇ阳性率４８％（２４／５０），ＨＢｅＡｂ阳性率１０．５％（２／１９），ＨＢｓＡｂ９．８％（２／２２），可见ＰＣＲ早期诊断，判断其传染性，     

在抗病毒治疗中，评估HBeAg的量与HBVDNA试验的比较

在抗病毒治疗中，评估ＨＢｅＡｇ的量与ＨＢＶＤＮＡ试验的比较［英］／［ＰｅｒｒｉｌｌｏＲ．．．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．－１９９３，１８．－１３０６］在慢性肝炎的治疗中，ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＢｅＡｇ的消失是血清学检测的最终目的。血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ量已经显示...     

肝癌及癌旁组织HBVDNA原位杂交HBsAg免疫组织化学双标记研究

用原位分子杂交和免疫组化双标记技术，检测４０例肝癌（ＨＣＣ）及癌旁组织中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢｓＡｇ，癌及癌旁中ＨＢＶＤＮＡ阳性率为６５％，ＨＢｓＡｇ阳性率为８２．５％，表明ＨＢＶ感染与ＨＣＣ发生密切相关。二者在ＨＣＣ中表达较癌旁组织中少而弱，可能系ＨＣＣ中ＨＢＶＤＮＡ整合后复制减弱之故。发现的碎点状ＨＢｓＡｇ小包涵体可能为ＨＣＣ中ＨＢｓＡｇ的特有表现形式。小细胞ＬＣＤ中ＨＢ－ｓＡｇ表达显著高于癌旁其他类型病变，支持其更接近癌前病变的观点。     

新生儿乙型肝炎疫苗免疫后首次检测为乙型肝炎病…

报告了新生儿乙型肝炎（乙肝）疫苗免疫后１－９年的ＨＢｓＡｇ阳性者年阴转率的定人随访结果。母亲ＨＢｓＡｇ阳性儿，乙肝疫苗免疫后首次检出的８４例ＨＢｓＡｇ阳性者，动态观察了１－９年，ＨＢｓＡｇ年抗ＨＢｓ，２／１０无抗－ＨＢｓ应答。结论：母婴阻断失败者的ＨＢｓＡｇ阳性儿，其ＨＢｓＡｇ年阴转率很低，和人群观察结果（１．１１％）相似；阴转者８０％能够产生抗－ＨＢｓＡｇ阳性儿，其ＨＢｓＡｇ年阴转率很低，和人群     

老年慢性乙型肝炎患者肝组织内Pre－S2蛋白的表达及意义

用免疫组织化学方法和单克隆抗体检测５７例老年慢性乙肝患者肝组织内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ，并与６３例非老年患者进行比较。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白总阳性率为７５．４％（４３／５７），非老年组为５４．０％（３４／６３），两组差异显著。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性细胞数非常显著地高于非老年组，膜型Ｐｒｅ－Ｓ２阳性率９３．０％（４０／４３），Ｐｒｅ－Ｓ２与ＨＢｓＡｇ符合占９１．２％（５２／５７）。４３例Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性标本中血清ＨＢｅＡｇ阳性５３．５％（２３／４３），ＨＢｅＡｂ阳性４１．９％（１８／４３）。认为老年慢性乙肝肝内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白表达高于非老年的，Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白免疫反应与ＨＢｓＡｇ相似并可能在ＨＢｓＡｇ免疫特性中起作用。     

新生儿乙型肝炎疫苗免疫失败同孕妇血清乙型肝炎…

以ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ阳性孕妇作为研究对象，用病例－对照研究方法，比较婴儿乙型肝炎疫苗免疫失败和婴儿疫苗免疫成功两组孕妇分娩时血清乙型肝炎病毒ＨＢＶ－ＤＮＡ含量进一步用定群方法研究母亲ＨＢＶ－ＤＮＡ含量与其婴儿免疫后ＨＢｓＡｇ持续携带 关系，证实孕妇血清ＨＢＶ－ＤＮＡ高含量是婴儿免疫失败的主要原因。     

血清标本中HBsAg免疫复合物对检测HBsAg的影响

０．５ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ处理１ｈ后解离ＨＢｓＡｇ－抗ＨＢｓ免疫复合物，并变性抗ＨＢｓＡｇ抗体而对ＨＢｓＡｇ免疫反应性无影响，３４例临床抗ＨＢｓ＾＋血清样品经ＨＣｌ处理前后，常规ＥＬＩＳＡ检测ＨＢｓＡｇ比较，结果；酸处理前ＨＢｓＡｇ阳性率为１１．７６％，处理后增加至４１．１８％，实验表明血清样品经酸处理后能明显提高临床乙肝ＨＢｓＡｇ检出率。     

选择性扩增法检测HBV前C终止密码突变：在HBeAg阳性健康携带者中的高频率检出

选择性扩增法检测ＨＢＶ前Ｃ终止密码突变：在ＨＢｅＡｇ阳性健康携带者中的高频率检出［英］／ＮａｋａｈｏｒｉＳ．．．ＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌＨｅｐａｔｏ．－１９９５，（１０）．－４１９～４２５乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区是分泌ｅ抗原不可缺少的，因此，...