川芎嗪对P2X3受体介导的大鼠伤害性兴奋传入的作用

通过动物痛行为反应(缩足反射)确定局部和鞘内应用川芎嗪(TMP)对ATP等P2X受体激动剂所致大鼠足底急性伤害性行为反应的影响。P2X3受体拮抗剂TNP-ATP(0．3μmol／L)明显抑制P2X受体激动剂ATP(1μmol／L)或α，β-meATP(0．6μmol／L)引起的大鼠足底急性伤害性反应。大鼠足底局部应用TMP(0．1-10mmol／L)剂量依赖性地对ATP(1μmol／L)或α，β-meATP(0．6μmol／L)引起的伤害性反应具有抑制作用。鞘内应用TMP(50mmol／L)对ATP(1μmol／L)或α，β-meATP(0．6μmol／L)引起的伤害性反应具有抑制作用。结果表明，TMP可通过阻断P2X3受体介导的伤害性兴奋传入抑制P2X受体激动剂引起的大鼠足底急性伤害性反应。     

P2受体与疼痛的实验研究

嘌呤与嘧啶受体(受体)分为P1和P2受体两大类。P1受体又称为腺苷受体；P2受体是ATP，UTP及其类似物激活的受体，其亚型分为P2X(离子通道型受体)和P2Y(G-蛋白偶联型受体)。P2受体通过与其内源性配体核苷酸结合，参与机体组织器官多种功能的调节，在疼痛病理状态(如神经病理性痛、急性疼痛、炎性痛及内脏痛等)，P2受体发挥着重要的介导作用。P2X3受体在感觉神经元中高度表达，通过P2X3受体基因敲除方法，P2X3受体反义寡核苷酸技术和一种新的选择性P2X3受体拮抗剂A-317491的应用，表明P2X3受体在痛觉中发挥重要作用；异聚体P2X2／3受体也涉及疼痛。P2Y受体的某些亚型在感觉神经元中高度表达及其介导的作用，也表明P2Y受体与痛觉有关。P2Y1和P2Y2受体能够引起类似于伤害性反应的细胞兴奋性，P2Y6受体可能是抗损伤。P2受体各亚型的激动剂和拮抗剂有可能为痛觉等病理状态发现新的治疗药物。     

蛋白激酶A和蛋白激酶C对大鼠背根神经节神经元P2X3受体介导的内向电流的调节作用

目的 探讨蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶C(PKC)对分离培养的背根神经节(DRG)神经元ATP受体P2X3功能的调节作用.方法 分离培养大鼠DRG神经元,给予外源性ATP诱导出瞬时型内向电流,通过全细胞膜片钳记录的方法观察P2X3和P2X2/3受体特异性阻断剂TNP-ATP对这一电流的影响,在此基础上观察PKA和PKC激动剂对ATP诱导的瞬时型内向电流的调节作用.结果 在分离培养的DRG神经元上,ATP诱导的瞬时型电流可以被TNP-ATP抑制,其抑制效应呈剂量依赖性,半数有效剂量(IC50)为(21.7±7.6)nmol/L.PKA激动剂forskolin(1 μmol/L)和PKC激动剂PMA(1 μmol/L)均可以快速、可逆地抑制ATP诱导的瞬时型电流.结论 在大鼠分离培养的DRG神经元,PKA和PKC可能通过磷酸化调节抑制P2X3受体的功能,从而抑制ATP诱导的瞬时型内向电流,提示蛋白激酶对P2X3受体的调节作用可能参与痛觉的形成.     

外周P2X3受体在不同炎性痛模型中的作用比较

P2X3亚单位是嘌呤受体P2X家族成员之一,高度选择性的表达于伤害感受器上,参与炎性痛病理过程。目前炎性痛的动物模型主要包括福尔马林炎性痛模型、弗氏佐剂炎性痛模型、角叉菜胶炎性痛模型、蜜蜂毒炎性痛模型等。不同的炎性痛模型具有不同的病理特征,福尔马林模型的主要特点是双时相的自发痛,由于炎症持续时间的不同,角叉菜胶模型一般用于亚急性的炎症模型,而弗氏佐剂模型和蜜蜂毒模型,以及松节油模型则用于慢性炎性痛模型研究,P2X3受体在其中的表达和功能可能有所不同,本文就外周P2X3受体在不同炎性痛模型中的作用做一综述。     

静脉应用川芎嗪对P2X受体激动剂引起足底伤害性反应的影响

Holton发现在刺激外周神经引起逆行性血管扩张时感觉末梢有三磷酸腺苷(ATP)释放,首次提示ATP参与感觉神经的信息传递。“嘌呤能神经”学说创立者英国科学家Burnstock于1996年提出,不同类型细胞释放的ATP作用于感觉神经末梢的嘌呤受体引发疼痛[1]。分子克隆技术显示ATP作用的P2X3受体选择性表达于与伤害性感受有关的小直径背根神经节(DRG)细胞[2];清醒鼠足底注射ATP等P2X受体激动剂引起急性伤害性反应(缩足反应)[3,4];用电离子透入法将ATP注入到健康志愿者的皮肤内引发痛反应[5]。这些实验结果均支持Burnstock提出的假设。嘌呤受…     

ATP、P2X3受体与疼痛

产生痛觉的原因有很多种,从组织损伤到阳光灼伤等,好几种痛觉的机制都涉及到所有细胞的能量库ATP。不论是因膝盖擦伤还是因生长中的肿瘤引致的痛觉,都涉及到化学信使与信号通道之间复杂的相互作用,其机制中的很多问题目前尚不清楚。但Cockagne与Souslova在近期出版的美国《自然》杂志上报道了两项具有里程碑意义的实验研究,即P2X_3受体分子如何影响疼痛。Cockapne与Souslov及其合作者培养出已被敲除与ATP结合的P2X_3受体的鼠。他们对这些鼠的初期研究结果支持ATP参与组织损     

配体门控性离子通道P2X7受体在肿瘤中的意义

ATP等核苷酸类物质作为细胞间通讯的载体可结合细胞膜上的嘌呤受体调节细胞的功能。嘌呤受体根据结构不同分为P2Y和P2X。P2X7受体是P2X家族配体门控离子通道型嘌呤受体的一员,广泛表达于多种组织,生理功能呈多样性,可受多种因素调控。P2X7受体表达及功能异常与多种肿瘤尤其是血液肿瘤相关,进一步阐明P2X7受体在肿瘤发生、发展中的作用机制具有重要的理论意义和潜在的应用前景。     

大鼠坐骨神经损伤后DRG神经元P2X3受体表达的变化

目的 应用免疫组织化学技术,探讨大鼠坐骨神经损伤后不同时间段L4～L5节段DRG神经元P2X3受体表达的变化.方法 实验动物分为对照组、损伤2d组和损伤7d组,分别建立大鼠坐骨神经离断模型,在2d、7d后按照组化方法常规取材、切片、染色,观察坐骨神经损伤后不同时间段DRG神经元P2X3受体表达的变化.结果 对照组、损伤2d组、损伤7d组DRG神经元P2X3受体阳性神经元百分比率分别为31.73%、35.26%、42.93%.坐骨神经损伤2d后DRG神经元P2X3受体表达差异无统计学意义(P＞0.05);而坐骨神经损伤7d后DRG神经元P2X3受体表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 坐骨神经损伤后不同时间段DRG神经元P2X3受体表达发生了不同的变化.     

小剂量氯胺酮对慢性神经痛大鼠的镇痛效应和背根神经节P2X3受体表达的影响

【 目的 观测腹腔注射小剂量氯胺酮对慢性神经痛大鼠镇痛效应和背根神经节P2X3受体表达的影响,以探讨其在神经性疼痛中的作用。方法 大鼠随机分为4组：空白对照组(C组)、假手术组(S组)、腹腔注射生理盐水组(NS组)与氯胺酮组(K组),每组8只。在大鼠右后足检测冷刺激反应、热痛敏阈基础值后,腹腔注射10%水合氯醛400 mg∕kg进行麻醉。NS组和K组构建大鼠右侧坐骨神经慢性结扎损伤模型,S组暴露坐骨神经但不结扎,C组不进行手术。手术后K组每天上午10时腹腔注射10mg·kg-1氯胺酮(用生理盐水稀释至0.5ml),NS组则腹腔注射等量生理盐水,连续2周。14d后测定各组大鼠右后足冷刺激反应、热痛敏阈值。尔后各组取手术侧L4背根神经节,并采用免疫组化法观测P2X3受体的表达。结果 手术后14 d,NS组和K组大鼠右足热痛敏阈值均明显低于C组和S组（P<0.05）,冷刺激反应则显著高于C组和S组（P<0.05）;但K组大鼠右足热痛敏阈值明显高于NS组,而冷刺激反应明显低于NS组(P<0.05);NS组和 K组大鼠背根神经节P2X3受体免疫反应阳性细胞数量多于C组和S组,但K组显著少于NS组比较则明显降低(P<0.05);NS组与S组大鼠背根神经节神经元P2X3受体免疫组化评分高于C组和S组,而K组却低于NS组,(P<0.05)。结论 腹腔注射小剂量氯胺酮可提高慢性神经性疼痛大鼠痛敏阈值及减弱冷刺激反应,其作用机制可能与减少背根神经节神经元P2X3受体表达有关。 【关键词】背根神经节 神经痛 氯胺酮 三磷酸腺苷 P2X3     

低频电针刺激对慢性痛大鼠背根神经节P2X3受体表达的影响

目的观察低频脉冲电针对慢性痛大鼠模型背根神经节P2X3受体表达的影响。方法使用完全弗氏佐剂复制慢性炎性痛大鼠模型,24h后用电针刺激双侧“夹脊”穴和“足三里”穴,参数为波宽0．6ms,频率2Hz,电流强度为0．5、1和2mA,各10min,共刺激30min。使用实时定量PCR法,观察慢性痛大鼠给予电针治疗后背根神经节P2）（3受体的表达变化。结果低频电针可以减轻痛觉超敏,疗效持续约70min。同时,低频电针也可以使慢性痛大鼠背根神经节增高的P2X3mRNA明显减低。结论低频脉冲电针的镇痛作用可能部分是通过抑制P2X3基因的表达实现的。电针可以通过改变初级传入神经元中基因的表达而对疼痛起到调控作用。     

P2X受体介导的神经病理痛的研究进展

<正>神经病理痛是临床上常见病症,对人身心健康危害较大,其发病机制尚不清楚,目前无有效的治疗手段,加之慢性神经病理痛持续时间长,其研究成为疼痛领域的热点和重点。三磷酸腺苷(ATP)是一种重要的疼痛信号物质,ATP可作用于P2X受体产生效应。应用神经病理痛动物模型,观察到P2X受体在神经病理痛的痛觉形成、传导和调节中有着重要作用,有望成为神经病理痛治疗的新作用位点。     

内脏分布的P2X受体的功能与疾病

P2X受体是细胞外配体门控的阳离子通道,目前普遍认为可分为7个亚型,即P2X1~P2X7,当任何一种亚型的P2X受体与胞外三磷酸腺苷结合时,P2X通道打开,允许阳离子通过,如钠、钾、钙离子等(但以钙离子的通透性为著),继而引起一系列生理或病理现象。P2X受体在体内分布广泛,涉及到呼吸、消化、心血管、泌尿生殖以及骨骼肌肉系统和神经系统。     

P2X4受体与神经退行性疾病的关系

嘌呤碱受体分为P1和P2两大类,其中P2X是非选择性阳离子通道,分为P2X1～P2X7,共7种亚型,其与三磷酸腺苷结合后可触发各种反应。P2X4R是P2受体的一个亚型,主要分布在小胶质细胞。正常状态下,P2X4R对小胶质细胞的激活和存活有重要作用。在正常生理情况下往往都是低水平表达,但在病理状态下P2X4R表达上调,参与机体疼痛以及神经系统疾病的发生、发展,如阿尔茨海默病（Alzheimer′s disease,AD）、帕金森病（Parkinson′s disease,PD）、肌萎缩性侧索硬化（amyotrophic lateral sclerosis,ALS）等。本文主要研究P2X4R在神经退行性疾病发生发展中的作用,以及P2X4R作为神经退行性疾病潜在的治疗靶点,可对上述疾病的治疗提供新途径。     

基于PKC通路调控的P2X3受体在疼痛中的研究进展

疼痛作为临床上最常见的症状之一,极大地影响了患者的行为与情绪。本文总结了目前P2X3受体基于PKC通路在疼痛机制中的研究,为疼痛的研究和治疗提供思路。     

神经元P2X7受体在疼痛调制中作用研究进展

疼痛是指组织损伤或潜在组织损伤所引起的不愉快感觉和情感体验。由于疼痛机制未明确,临床上传统镇痛疗法效果不理想,给患者、家人及社会造成沉重的经济与精神负担。研究发现P2X7受体作为非选择性ATP门控阳离子通道,由于其自身结构的特殊性,使得其在痛觉调制镇痛中起着重要的作用。本文通过总结近年来国内外有关神经元P2X7受体特性、神经元P2X7受体在神经元凋亡机制中作用以及神经元P2X7受体在疼痛调制中的作用的相关文献报道进行综述,为进一步开发以P2X7受体为靶点的镇痛药物提供新的思路。     

P2X3受体在逼尿肌不稳定大鼠膀胱组织的表达及其意义

本实验通过建立逼尿肌不稳定(detrusor instability, DI)大鼠模型,检测正常及DI大鼠逼尿肌组织中P2X3受体mRNA及蛋白的表达情况,探讨P2X3受体在大鼠DI发生中的作用.     

P2X3受体在糖尿病神经痛动物模型中的研究进展

糖尿病神经痛(diabetic neuropathic pain, DNP)作为临床上最常见的并发症之一, 极大地影响了患者的生活质量, 目前发病机制尚不明确, 缺少有效的治疗方法。DNP与周围感觉神经兴奋性增强有关, 涉及多种离子通道、受体表达、功能上调, 已有研究表明P2X3受体参与DNP等多种神经病理痛的痛觉形成、传导和调节, 本文将围绕DNP模型的建立及P2X3受体在DNP模型中的作用予以综述。     

大鼠坐骨神经损伤后脊髓P2X3受体变化

目的 研究大鼠坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)后脊髓背角神经元P2X3受体的变化,以探讨P2X3受体在初级中枢中的作用.方法 雄性SD大鼠20只,随机分为正常组、CCI后3、7和14 d组.采用von Frey细丝法检测大鼠机械痛敏压力阈值变化,采用免疫组化技术检测不同时间段大鼠脊髓背角P2X3受体表达的变化.结果 CCI 7和14 d组大鼠术侧足底机械痛阈(PWPT)明显降低;CCI 7和14 d组大鼠术侧腰4～腰5(L4～L5)节段脊髓背角P2X3受体免疫反应阳性显著上升.结论 坐骨神经损伤后L4～L5节段脊髓背角P2X3受体免疫阳性的增加与机械痛敏的增强一致.在神经损伤的病理情况下.P2X3受体可能参与了脊髓中枢疼痛信息的调节.     

大鼠正畸牙移动初期P2X3受体在牙髓及牙周膜中的表达变化

[目的]研究正常大鼠牙髓牙周膜P2X3受体的表达及正畸牙移动初期的变化.[方法]利用免疫组织化学方法检测大鼠第1磨牙牙髓及牙周组织P2X3受体的表达及分布.[结果]P2X3受体表达牙髓多于牙周膜,在牙髓主要分布于成牙本质细胞层,并伸向前期牙本质和牙本质;在牙周膜以牙根中部和根尖部居多,远离牙骨质;在正畸牙移动初期牙髓、牙周膜的表达均增强.[结论]P2X3在牙髓牙周膜均有表达,在正畸牙移动初期表达增强,可能在正畸初期疼痛信息的传递中起着一定作用.     

P2X2、P2X3受体与CGRP和calretinin在大鼠脊神经节内的共存

目的研究ATP受体P2X2、P2X3在大鼠脊神经节感觉神经元的表达、形态特点及与神经肽降钙素基因相关肽(CGRP)、钙结合蛋白calretinin的共存.方法应用激光共聚焦显微镜结合免疫组织化学双标技术.结果免疫组织化学显示脊神经节内可见大量P2X2 、P2X3受体阳性的细胞和神经纤维;P2X2受体亚型阳性细胞多为大、中、小型神经元,P2X3受体亚型阳性细胞为中、小型神经元;免疫组织化学双标显示有41.2±1.9%P2X2受体阳性细胞含有CGRP,而P2X3受体亚型与CGRP共存的细胞很难见到;有8.9±1.1%的P2X2免疫阳性神经元和7.2±1.3%P2X3受体阳性神经元分别含有calretinin.结论这一结果表明大鼠脊神经节内表达的ATP受体P2X2 、P2X3是不同的受体亚型.