高效液相色谱法对牙周袋内四环素药物浓度的测定

应用高效液相色谱检测牙周袋内置入四环素缓释药膜的牙周炎患者龈沟液，以外标法测定置入药膜后２，４，５，７ｄ牙周袋内四环素药物浓度。结果入药膜后７ｄ牙周袋内药物浓度维持在２０μｇ／ｍｌ左右，提示该药膜缓释作用好，再次置药膜复诊时间可在初镒用药后的１０－１４ｄ进行。以高效液相色谱法对缓释药物２的监测可直接、间接反映药膜在体内的缓释效应，具有简便、快速的优点。     

两性霉素B脂质体胶联羊膜药膜的体内外缓释研究

目的研究两性霉素B脂质体(amphotericin B liposome,AmBL)胶联羊膜药膜的体内外缓释性能。方法将两性霉素B脂质体与纤维蛋白胶混合,再与羊膜胶联,制备成两性霉素B脂质体胶联羊膜药膜,光镜及扫描电镜观察形态学。将药膜置于生理盐水中,连续10d置换浸出液,高效液相色谱法测定药物浓度。兔右眼眼表行药膜移植,考察房水中药物浓度变化,左眼滴入自制的两性霉素B脂质体眼液作为对照。结果药物-纤维蛋白胶与羊膜基底面贴合紧密,药物附着在胶原纤维网状孔隙内。浸出液中前3d药物浓度分别为59.9、34.1、27.9μg/ml,以后逐渐减少,第10天为0.78μg/ml。兔眼表药膜移植后,前2d房水中药物浓度较高,分别为113.1、61.2ng/ml,以后逐渐降低;对照组房水中药物浓度维持在较低水平,平均值为26.1ng/ml。结论两性霉素B脂质体胶联羊膜药膜是一种较好的药物缓释系统。     

头孢呋辛缓释药膜植入兔眼前房的药效学评价

目的评估植入兔眼前房的可生物降解头孢呋辛缓释药膜的抗感染效用。方法头孢呋辛缓释药膜由头孢呋辛酯(CAE)、高分子聚合物PLGA和聚乙烯吡咯烷酮按一定比例通过溶剂蒸发法制成。50只兔随机分为实验组(n=35):右眼前房植入CAE缓释药膜,对照组(n=15):右眼结膜下注射头孢呋辛125 mg,分别检测对照组注射头孢呋辛后0.5、1、2、6、24 h房水中的药物浓度以及实验组植入CAE药膜后第1、2、3、5、7、14、28天房水和血浆中的药物浓度。实验组植入药膜前后行眼压检测,植入后裂隙灯定期观察前房炎症反应,取角膜组织作扫描电镜和光镜组织学检查,以观察CAE缓释药膜的毒性作用。结果对照组注射头孢呋辛后0.5 h时房水中浓度最高为47 736.18 ng/mL,24 h后浓度极低为10.92 ng/mL;实验组于植入后1周内房水原药浓度>500 ng/mL,第28天时浓度较低为(59.20±39.05)ng/mL,血浆中药物浓度一直处于极低水平(<10 ng/mL)。实验组眼压测量、裂隙灯检查、扫描电镜及组织学检查均无明显异常发现。结论可生物降解头孢呋辛缓释药膜植入兔眼前房后,至少在1周内维持眼内有效药物浓度,而血浆中的药物浓度则极低。兔眼对植入的缓释药膜耐受良好,无明显毒副反应。     

头孢呋辛缓释药膜植入兔眼前房的药效学评价

目的 评估植入兔眼前房的可生物降解头孢呋辛缓释药膜的抗感染效用.方法 头孢呋辛缓释药膜由头孢呋辛酯(CAE)、高分子聚合物PLGA和聚乙烯吡咯烷酮按一定比例通过溶剂蒸发法制成.50只兔随机分为实验组(n=35):右眼前房植入CAE缓释药膜,对照组(n=15):右眼结膜下注射头孢呋辛125 mg,分别检测对照组注射头孢呋辛后0.5、1、2、6、24 h房水中的药物浓度以及实验组植入CAE药膜后第1、2、3、5、7、14、28天房水和血浆中的药物浓度.实验组植入药膜前后行眼压检测,植入后裂隙灯定期观察前房炎症反应,取角膜组织作扫描电镜和光镜组织学检查,以观察CAE缓释药膜的毒性作用.结果 对照组注射头孢呋辛后0.5 h时房水中浓度最高为47 736.18 ng/mL,24 h后浓度极低为10.92 ng/mL;实验组于植入后1周内房水原药浓度>500 ng/mL,第28天时浓度较低为(59.20±39.05) ng/mL,血浆中药物浓度一直处于极低水平(<10 ng/mL).实验组眼压测量、裂隙灯检查、扫描电镜及组织学检查均无明显异常发现.结论 可生物降解头孢呋辛缓释药膜植入兔眼前房后,至少在1周内维持眼内有效药物浓度,而血浆中的药物浓度则极低.兔眼对植入的缓释药膜耐受良好,无明显毒副反应.     

静脉滴注乳酸环丙沙星的人体药物动力学

６名健康志愿者静脉滴注乳酸环丙沙星２００ｍｇ／ｈ，以反相高效液相法测定其血，尿中药物浓度，井据此计算有关药动学参数．静脉滴注结束时即刻血浓度为３．８４±０．３５μｇ／ｍｌＴ１／１β为３２８ｈ，Ｖｄ为１．５４Ｌ／ｋｇ，ＡＵＣ为１０．１２ｍｇｈ／Ｌ。静滴环丙沙星２００ｍｇ后２４ｈ内，尿中药物排出量占给药量的７８．９４％，说明该药主要由肾肚清除。     

肾移植患者环孢素A的血药浓度监测

采用高效液相色谱法对６８例肾移植患进行了１９６次环孢素Ａ血药浓度测定。结果表明：肾移植术后３个月内病人ＣｓＡ血药浓度谷值为（３９５±２４５）μｇ／Ｌ口服ＣｓＡ每ｄ７－９ｍｇ／ｋｇｇ），随时间变化，ＣｓＡ剂量逐渐减小。肾移植１２个月后ＣｓＡ血药浓度谷值下降到（２２５±５２）μｇ／Ｌ。患之间存在显的个体差异。     

玻璃体内注射先锋霉素Ⅵ对视网膜酶组织化学影响

①目的探讨先锋霉素Ⅵ玻璃体腔内注射的安全剂量。②方法以不同浓度的先锋霉素Ⅵ（１００，２００，２５０，３００，４００μｇ）行兔眼玻璃体腔内注射，用酶组织化学染色法测定注射后不同时间（１，３，７ｄ）视网膜琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性的变化，并观察对视网膜组织结构及超微结构的影响。③结果随用药剂量增大，视网膜内ＳＤＨ与ＬＤＨ活性均逐渐降低；各剂量组视网膜内ＳＤＨ与ＬＤＨ活性分别于术后３ｄ和１ｄ降至最低，然后开始恢复，至手术７ｄ后１００和２００μｇ组恢复至正常，其余剂量组仍低于正常。组织学检查显示１００和２００μｇ剂量组视网膜出现水肿，其余剂量组均出现细胞变性坏死、杆锥体脱失等改变。④结论先锋霉素Ⅵ玻璃体腔内注射的安全剂量为２００μｇ．     

甲硝唑缓释药膜治疗牙周炎40例临床观察

[目的]观察甲硝唑缓释药膜治疗牙周炎的临床疗效。[方法]随机抽取门诊成人牙周炎患者40例,共100个患牙,分成两组。治疗组牙周袋内放置甲硝唑缓释药膜,对照组放置20g/L碘甘油。48h后复诊1次,共3次,分别在治疗前,治疗后及停药后1周统计观察指标。[结果]通过统计分析两组的牙龈指数(GI)、牙周袋深度(PD)、牙龈出血指数(SBI)存在显著差异,P<0·01。[结论]甲硝唑缓释药膜对成人牙周病患者疗效显著,而且副作用小,使用方便。     

治疗牙周病的新药

牙周病是否必须手术?基于细菌对牙周病的重要性,作者提出了一种对抗牙周袋中菌斑的新方法。本法系使用一种含有防腐剂或抗菌素的泡沫塑料的小药条,暂时置入牙龈袋内。在使用的药物中最引人注目的是洗必太、四环素和灭滴灵。初步研究表明,这些防腐剂或抗菌素可在数天内释出。临床使用这些药物后,牙周袋内的细菌经检验后表明,通常与牙周病有关的细菌大为减少。炎症的临床体征也减轻,甚至很深的牙周袋经治疗后其深度     

曲尼司特缓释胶囊剂及其药物动力学研究

研制了曲尼司特缓释胶囊剂，建立了高效液相色谱测定血药浓度的方法。以市售胶囊剂为对照品，研究了自制缓释胶囊剂在６名健康志愿受试者体内药物动力学。结果表明曲尼司特缓释胶囊剂和市售胶囊剂在人体内的药动学参数分别为Ｃｍａｘ：２９．１μｇ／ｍｌ，Ｔｍａｘ：５．５ｈ，ＭＲＴ：１４．３５２ｈ，ＡＵＣ：４６２．３１５ｈ·μｇ／ｍｌ和Ｃｍａｘ：３４．２μｇ／ｍｌ，Ｔｍａｘ：３．５ｈ，ＭＲＴ：１０．２３６ｈ，ＡＵＭＣ     

正畸保持期龈沟液骨保护素/核因子kappa B受体活化因子配体水平对牙槽骨改建状态的意义

目的:探讨正畸保持期牙周龈沟液中骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子kappa B受体活化因子配体水平(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)的变化及相应牙周组织OPG和RANKL表达的变化,为预测保持期牙周骨组织状态是否稳定提供依据。方法:选择6周龄雄性Wista大鼠15只,按时间点(T1:基线,T2:加力14 d,T3:停止加力14 d)分为3组,每组5只。在每个时间点先采集龈沟液样本,应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测OPG和sRANKL(soluble receptor activator of nuclear factor kappaB ligand)浓度,然后处死大鼠,采用免疫组织化学检测牙周组织中OPG和RANKL表达。结果:龈沟液中sRANKL浓度在T2期明显上升(P<0.05),T3期则显著下降(P<0.05),与T1期几乎相当。龈沟液中OPG浓度在3个时间点的变化差异均无统计学意义(P>0.05);龈沟液中sRANKL/OPG的比值和牙周组织RANKL/OPG的比值变化近似,均在T2期明显增大(P<0.05和P<0.01),在T3期显著减小(P<0.05)。结论:在正畸加力至保持期,龈沟液中sRANKL/OPG的比值可以在一定程度上反映牙周组织中骨改建的状态。     

慢性牙周炎患者龈沟液中血管内皮生长因子含量的测定及意义

目的检测慢性牙周炎患者在牙周基础治疗前后龈沟液（CGF）中血管内皮生长因子（VEGF）的含量,研究VEGF在牙周炎的病情进展及治疗监测过程中的意义。方法采用滤纸条法采集健康者以及慢性牙周炎患者的龈沟液,用酶联免疫法检测治疗前及治疗中VEGF的含量。结果慢性牙周炎患者的龈沟液中VEGF的含量高于健康组（P〈0.01）。治疗的第4,8,12周VEGF含量低于治疗前（P〈0.01）。龈沟液中VEGF的含量与牙周探诊深度（PD）有相关。结论 VEGF可以作为在牙周炎的病情进展及治疗监测过程中的指标之一。     

地塞米松羧甲基魔芋胶小丸的大鼠体内释药探讨

目的研究地塞米松羧甲基魔芋胶小丸体内释药情况,评价其结肠定位释药特性。方法以地塞米松羧甲基纤维素钠混悬液为对照,将地塞米松羧甲基魔芋胶小丸大鼠灌胃给药(以地塞米松量计,给药剂量为10mg/kg),采用HPLC法测定大鼠体内血药浓度经时变化和粪便排泄物中药物量经时变化,计算制剂在结肠内容物的相对靶向释药指数。结果与对照组相比,小丸组血药浓度存在1h时滞,Tmax由4h延至8h,Cmax由(6.46±0.92)mg/L明显降低为(1.33±0.36)mg/L,P<0.01;AUC0→24由(70.72±9.62)mg.L-1.h-1明显降低为(15.82±4.01)mg.L-1.h-1,P<0.01;粪便中排泄药物量由(29.20±5.77)μg明显提高为(198.2±38.07)μg,P<0.01;小丸组在大鼠结肠内容物的药物相对靶向释药指数为30.34。结论地塞米松羧甲基魔芋胶小丸具有结肠定位释药特性。     

兔曲霉菌性角膜溃疡局部应用两性霉素B脂质体的研究

目的 探讨兔曲霉菌性角膜溃疡局部应用两性霉素B脂质体(Liposomal amphotericin B,LAmB)和两性霉素B(AmB)滴眼液后,角膜及房水中的药物代谢状况。方法 用105只新西兰白兔,随机分为5组,采用角膜“#”形划痕法制作兔实验性曲霉菌性角膜溃疡模型,分别应用0.5% LAmB、0.25% LAmB、0.5% AmB点眼,分别在用药后5 min、15 min、30 min、1 h、2 h、4 h、8 h,共7个时点,抽取兔眼房水并取下角膜,用高效液相色谱检测(high performance liquid chromatography,HPLC)测定角膜及房水中两性霉素B的药物浓度。结果 三组滴眼液在7个时间点角膜中的药物浓度均能超过MIC₉₀;在房水检测中,0.5%AmB滴眼液组房水中的药物浓度超过MIC₉₀时段在用药30 min后至2 h之间,而0.5% LAmB,0.25% LAmB滴眼液组在用药15 min后房水中的药物浓度分别达到(10.57±0.042)μg/mL和(7.55±0.170)μg/mL,8 h后仍能维持在MIC₉₀以上,药物浓度分别为(5.344±0.3673)μg/mL和(4.382±0.3591)μg/mL。结论 LAmB滴眼液具有较好的缓释作用和生物利用度,药物浓度稳定,作用时间长,0.25%LAmB滴眼液是局部治疗曲霉菌性角膜溃疡的合适浓度。     

长春新碱超顺磁性氧化铁纳米粒的制备及体外评价

采用自组装法制备长春新碱超顺磁性氧化铁纳米粒,分别通过邻二氮菲显色法和高效液相色谱法测定制剂中铁浓度和药物浓度,计算包封率;分别用透射电镜、动态光散射法对制得纳米粒的形态、粒径进行了表征;通过振动样品磁强计测定制剂的饱和磁化强度,绘制磁滞回线;以硫酸长春新碱为对照,考察等剂量的长春新碱超顺磁性氧化铁纳米粒对人白血病K562细胞的抑制效果,通过四唑单钠盐法检测细胞活力。结果表明,制得的长春新碱超顺磁性氧化铁纳米粒包封率为(81.2±1.5)%,铁浓度为(104±1.4)μg/mL;磁性纳米粒子呈球形,平均粒径为(83±1.2)nm;饱和磁化强度为53 A.m2/kg,且具有超顺磁性;细胞实验表明长春新碱超顺磁性氧化铁纳米粒比硫酸长春新碱对K562的细胞的抑制作用更明显。结果显示,制得的超顺磁性氧化铁纳米粒性能良好,具有一定的应用前景。     

高效液相色谱法测定草酸钙结石大鼠尿中草酸含量

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠尿液中草酸含量。方法 将SPF级雄性健康Wistar大鼠24只采用随机数字表法分为空白对照组(n=12)和乙二醇组(n=12)。空白对照组给予去离子水喂养,每天以1 ml生理盐水灌胃;乙二醇组给予1%乙二醇自由饮水喂养,每天2%氯化铵2 ml灌胃。造模28 d后收集两组大鼠24 h尿液,采用HPLC法测定尿中草酸含量,并与铬酸钾氧化甲基红催化光度法的结果进行比较。HPLC法采用色谱柱Aglient 5TC-C₁₈(250×4.6 mm,5 μm),以甲醇(0.1 mol/L)、醋酸铵水溶液(15∶85)为流动相,流速为1.2 ml/min,紫外检测波长为314 nm,柱温20 ℃。结果 大鼠尿液中高、低浓度草酸标准曲线分别为y=5909.1x+378730,R²=0.9984和y=7810.5x-16635,R²=0.9967;最低检测浓度为5 μg/ml,大鼠尿液中草酸高浓度线性范围为62.50~2000.00 μg/ml,低浓度线性范围为6.25~100.00 μg/ml。平均回收率为95.1%,日内及日间精密度分别为3.4%~10.8%和3.8%~9.4%。HPLC法和铬酸钾氧化甲基红催化光度法均显示乙二醇组大鼠尿草酸浓度和24 h尿草酸含量显著高于空白对照组[尿草酸浓度:(736.35±254.52)μg/ml比(51.56±36.34)μg/ml,(687.35±234.53)μg/ml比(50.24±42.34)μg/ml;24 h尿草酸含量:(11.23±4.12)mg比(0.87±0.45)mg,(9.89±3.55)mg比(0.77±0.65)mg;P均＜0.01];两种方法检测出的尿草酸浓度和24 h尿草酸含量差异无统计学意义(P均＞0.05)。结论 HPLC法简单快速、回收率高、精密度好,与铬酸钾氧化甲基红催化光度法检测结果一致,适用于大鼠尿中草酸含量的测定。     

分娩方式与血清促乳素水平的关系 附124例病例观察

对１２４例以不同方式分娩的产妇进行了产后２４ｈ血清促乳素浓度的放免测定。其中，阴道分娩组（包括产钳术及胎吸术助娩）６２例，促乳素浓度为（４５１．９±２０４．６６）μｇ／Ｌ；剖宫产组６２例，促乳素浓度为（５４７．１±２４８．６４）μｇ／Ｌ，两者间差异显著（Ｐ＜０．０５）。提示产后血清促乳素水平与分娩方式有关。     

高效液相色谱法确定兔人参药物血清制作中的灌药周期研究

目的:采用高效液相色谱分析法测定不同灌药周期兔药物血清中人参的有效成分人参皂苷Rg1血药浓度, 确立中药药物血清制作中的灌药周期。方法:色谱柱为Cosmosil C18柱(4.6 mm×250 mm, 5μm), 人参皂苷Rg1流动相为甲醇:0.1%磷酸(60:40),检测波长203nm。结果:随着灌药时间的延长,血清中的人参皂苷Rg1的血药浓度逐渐增加,在灌胃3 d血药浓度最低,灌胃7 d、14 d、21 d血药浓度均明显高于3 d(P<0.01), 21 d与14 d相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高效液相色谱法简便、准确, 重复性好, 为中药药物血清实验中实验动物的灌药周期提供实验依据, 并能够有效控制四君子汤拆方人参的质量。     

超顺磁性硫酸链霉素PLA-PEG微球的制备和体外特征研究

目的:制备超顺磁性硫酸链霉素(Streptomycin sulfate,SM)PLA-PEG微球(Superparamagnetic streptomycin sulfate PLA-PEG microspheres,spSPM),探索并建立一种准确、方便和有效的硫酸链霉素HPLC检测方法;研究此微球的特征,并对其在振荡磁场作用下的体外药物释放规律进行研究,为今后的动物实验及临床应用提供理论依据.方法:用化学共沉淀法合成超顺磁性壳聚糖Fe3O4纳米粒(Superparamagnetic chitosan Fe3O4 nanospheres,spCFN),再用双乳化(W/O/W)溶剂挥发法制备spSPM,检测其特征参数.将此spSPM在37℃模拟体液中进行体外药物溶出试验,振荡磁场干预,用HPLC检测硫酸链霉素(SM)的释放量.结果:本实验制备的spSPM包封率47.56%±1.39%,载药量25.20%±1.52%,体积平均粒径为2.467μm,体外释放周期超过7 d.结论:本实验制备的spSPM具有隐形微球的各项特征,可应用于进一步的研究中.     

mEGF乙醇脂质体的制备和特性研究

目的制备mEGF乙醇脂质体,并研究mEGF乙醇脂质体囊泡的包封率和物理性质。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定mEGF乙醇脂质体的包封率、精密度、回收率、稳定性,运用扫描电镜、原子力显微镜、透射电镜和激光粒度分析仪观察和分析mEGF乙醇脂质体囊泡的外观、粒径和均一度。结果 mEGF乙醇脂质体的包封率大约为38%,精密度小于5%,30 d内包封率波动在36%～38%之间。运用原子力显微镜和透射电镜观察到粒径分布于40～60 nm的乙醇脂质体囊泡。并且在激光动态光散射仪下测定显示囊泡的粒度分布较为均一,mEGF乙醇脂质体的折光度为4.6,囊泡粒径大约分布在100～500 nm之间。结论成功制备了mEGF乙醇脂质体,建立了测定包封率的色谱方法,该给药系统稳定性较好,乙醇脂质体囊泡粒径分布均匀。