线粒体ATP敏感钾通道开放剂对大鼠肺缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 探讨线粒体ATP敏感钾通道开放剂二氮嗪(DE)对肺缺血-再灌注损伤(I/R)的保护作用.方法 建立大鼠肺I/R模型,随机设立假手术(sham)组、I/R组、DE组、线粒体ATP敏感钾通道阻断剂5-羟基葵酸(5-HD)组,每组10只,观察各组肺组织病理形态学变化,测定肺湿/干质量比,检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与sham组比较,I/R组肺组织出现明显损伤性病理形态学变化,肺湿/干质量比明显增加(P<0.05),肺组织MPO活性显著增高、MDA含量显著增加和SOD活性显著降低(P<0.05).与I/R组比较,DE组肺组织损伤明显减轻,肺湿/干质量比降低(P<0.05),肺组织MPO活性降低、MDA含量减少、SOD活性增高(P< 0.05).5-HD组各观察指标与I/R组差异无统计学意义(P>0.05).结论 线粒体ATP敏感钾通道开放剂DE可通过抑制中性粒细胞聚集、减少自由基产生、增强抗氧化能力对大鼠肺缺血-再灌注损伤产生明显保护作用,该保护作用可被线粒体ATP敏感钾通道阻断剂5-HD所拮抗.     

吡格列酮对重症急性胰腺炎大鼠核因子-κB活化的影响及意义

目的观察吡格列酮对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织核因子-κB（NF—κB）活化的影响并探讨其意义。方法54只SD大鼠随机分成重症急性胰腺炎（SAP）组、假手术组和干预组。采用改良的Aho法制作SAP模型，采用免疫组织化学方法，动态观察3组大鼠胰腺组织中NF-κB的表达，同时观察胰腺组织病理变化。结果病理观察显示，SAP组大鼠胰腺组织有明显坏死、出血及炎症细胞聚集，而吡格列酮干预组炎症反应明显减轻。从SAP后3h起，胰腺组织中NF-κB p65即持续上调，12h与3h比较差异有统计学意义（P〈0．01），呈时间依赖性；正常对照组无明显表迭（P〈0．01）；尽管干预组NF-κB也有表达，但表达弱于SAP组。结论信号转录因子NF-κB参与了大鼠SAP的炎症反应，吡格列酮对NF-κB的表达有抑制作用。     

运动预处理对脑缺血再灌注大鼠线粒体ATP敏感性钾通道蛋白及细胞凋亡的影响北大核心CSCD

目的探讨运动预处理对脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损的影响及可能机制。方法健康Sprague-Dawley大鼠36只随机分为假手术组、模型组和运动预处理组,每组12只。后两组采用改良线栓法制备脑缺血120 min再灌注模型。再灌注2 h、12 h、24 h后,采用Longa评分法评定;再灌注24 h后,采用Western blotting检测线粒体ATP敏感性钾(mitoK_(ATP))通道蛋白内向整流性钾离子通道6.2(Kir6.2)和磺脲类受体1(SUR1)的表达,TUNEL染色检测神经细胞凋亡。结果脑缺血再灌注24 h后,与模型组比较,运动预处理组Longa评分降低(P<0.05),Kir6.2、SUR1蛋白水平下降(P<0.05),细胞凋亡减少(P<0.05)。结论运动预处理可能通过调节mitoK_(ATP)通道蛋白表达,降低细胞凋亡,从而改善脑缺血再灌注后神经功能。     

吡格列酮对大鼠肾脏缺血/再灌注损伤的保护作用及机制

目的:观察过氧化脂质体增殖激活受体γ(PPARγ)激动剂盐酸吡格列酮在大鼠肾脏缺血/再灌注(1/R)损伤中的作用及机制.方法:将大鼠随机分为缺血组(1组)、缺血再灌注组(I/R组)、盐酸吡格列酮预处理组(P组)、设假手术组为对照(SHAM组).P组于术前7 d给予盐酸吡格列酮10 mg/(kg·d)灌胃,经缺血及再灌注损伤后取肾,用生化指标反映肾功能障碍,肾脏组织学评分反映肾脏损伤,免疫组化的方法检测PPARγ、CD68的表达.结果:与I/R组相比,P组肾脏生化及组织学评分均明显减轻(P<0.01),PPARγ表达没有明显量的改变,但出现新的表达部位,CD68在缺血再灌注损伤发展中表达增多,盐酸吡格列酮可减少其表达.结论:PPARγ激动剂盐酸吡格列酮可减轻大鼠肾脏缺血/再灌注损伤,其保护机制与抑制单核巨噬细胞浸润有关.     

吡格列酮对2型糖尿病患者胰岛素敏感性的影响

目的：观察吡格列酮对2型糖尿病患者c反应蛋白（CRP）和胰岛素敏感性的影响。方法：103例2型糖尿病患者分为A、B2组，均给予常规降糖药物治疗，A组每天增加30mg的吡格列酮片口服。2组均观察24周，治疗前后检查CRP、血糖（FBG）、胰岛素（FINS）、血脂和肝功能，测量血压、身高和体重。结果：①与治疗前比较，A组CRP、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、血生化、胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）均明显降低（P〈0．05），高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）轻度升高（P〈0．05），B组各项指标均无明显变化。②CRP与HOMAIR、BMI、FBG、TC、TG、LDL-C、收缩压和舒张压呈正相关，与HDL-C呈负相关。结论：2型糖尿病患者存在低度炎症状态，吡格列酮在改善HOMA-IR及其相关代谢指标的同时，可降低CRP。     

ATP敏感性钾通道对淋巴管功能的调节作用

淋巴系统由密集的淋巴管网构成,是循环系统的重要组成部分;淋巴管舒缩功能是淋巴循环的动力学基础,与淋巴管的泵功能以及神经、体液因子等多种因素有关,它们之间共同促进、互相协调,在体液平衡、脂类转运、免疫调节、新陈代谢以及机体稳态等多个方面发挥重要作用.1983年Noma[1]利用膜片钳技术在心室肌中发现了ATP敏感性钾通道(KATP),证明其参与了心肌细胞的兴奋-收缩耦联.后来Yokoshiki等[2]又发现,KATP也存在于骨骼肌细胞、血管平滑肌细胞以及其他细胞.     

吡格列酮对缺血-再灌注损伤大鼠皮质神经元的保护作用

目的 探讨过氧化物酶增值物激活受体-γ(PPAR-γ)及其激活剂噻唑烷二酮类药物-吡格列酮(pioglitazone)对缺血.再灌注损伤大鼠皮质神经元肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素(IL-1β)表达的影响.方法 采用原代培养的皮质神经元,通过去除培养液中的糖和氧,模拟缺血缺氧,恢复糖氧供给模拟再灌注.再灌注时分别加用普通培养或含吡格列酮20 μmol/L培养基分别再培养6 h后,以上各组及正常细胞组均采用RT-PCR检测PPAR-γ mRNA表达,MTT法检测细胞活性,同时免疫蛋白印记法检测TNF-α,IL-β蛋白表达.统计学采用单因素方差分析进行统计处理.结果 与正常细胞对照组相比,缺血-再灌注组细胞存活率显著下降,且PPAR-γ mRNA表达明显增强,同时TNF-α及IL-β蛋白表达及分泌均显著上调,而应用pioglitazone治疗进一步增加了大鼠脑组织PPAR-γ的表达,并有效抑制TNF-α及IL-1β的上调表达及分泌,以上差异均具有统计学意义(P相似文献   

吡格列酮对糖尿病大鼠血液生化指标影响的研究

目的 本文旨在探讨吡格列酮（Piog）对糖尿病大鼠血脂、高敏C反应蛋白（hs-CRP）及生存率的影响。 方法 一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备Ⅰ型糖尿病模型,大鼠分成3组：Ⅰ组 对照组 Ⅱ组 糖尿病组 Ⅲ组 糖尿病Piog治疗组。Ⅰ组、Ⅱ组大鼠给予生理盐水灌胃,Ⅲ组大鼠给予吡格列酮灌胃。喂养14周,观察生存率,麻醉后处死取血测定血液生化指标。结果 Piog对胰岛素绝对缺乏的Ⅰ型糖尿病大鼠血糖无明显影响;与糖尿病未治疗组相比,Piog干预可显著降低LDL-C,hs-CRP;升高HDL-C,改善糖尿病大鼠生存率。结论 Piog可改善糖尿病大鼠血脂代谢、炎症标志物表达,可能是其产生有利的心血管系统效应的原因之一。     

ATP敏感性钾通道的活性改变对胶质瘤细胞增殖的影响

目的:探讨KATP通道的功能改变与胶质瘤细胞增殖的关系.方法:鉴定KATP通道在胶质瘤细胞上的表达,并比较对照组、KATP通道激动剂、KATP通道阻断剂影响胶质瘤细胞的增殖情况.结果:证实KATP通道在胶质瘤细胞中呈高丰度表达,KATP通道的激动剂二氮嗪(100 μmol/L)显著促进细胞增殖.KATP通道的阻断剂甲糖宁(100 μmol/L)显著性抑制细胞增殖.两者对细胞增殖的影响均呈浓度依赖方式.结论:KATP通道的确参与胶质瘤细胞增殖过程的调节,为胶质瘤的治疗提供新的靶标.     

吡格列酮对大鼠骨髓内皮祖细胞迁移功能的影响及其机制探讨

目的观察选择性过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂吡格列酮（Pioglitazone,PIO）对大鼠骨髓EPCs（Endothelial progenitor cells,EPCs）迁移的影响及并对其机制进行初步探讨。方法使用密度梯度离心法及差速贴壁法联合的方法培养大鼠骨髓EPCs,并使用双荧光染色的方法进行鉴定。将大鼠骨髓EPCs置于含不同质量浓度PIO的培养基中培养,检测EPCs的迁移情况。将培养7天的EPCs分5组,分别加入一定浓度的PIO;PPARγ拮抗剂GW9662;PIO及及PI3K/Akt通道阻滞剂Wortmannin;PIO及ERK通道阻滞剂PD98059;并设立空白对照组,检测EPCs的迁移情况。结果在PIO为50μmol/L时,可最大程度促进EPCs的迁移。这种作用在PI3K/Akt通道阻滞剂Wortmannin及PPAR-γ拮抗剂GW9662存在时作用消失,而在ERK通道阻滞剂PD98059作用下仍存在。结论 PIO可促进大鼠骨髓EPCs的迁移,这种作用可能是通过PI3K/Akt信号通路介导。     

p38MAPK和JNK在大鼠肾缺血-再灌注损伤模型中的表达及意义

目的 观察p38MAPK、JNK在肾缺血-再灌注损伤大鼠肾组织中的表达和活化,从而探讨p38MAPK、JNK信号转导通路与肾缺血-再灌注损伤的关系.方法 用缺血1 h再灌注1 h 制备缺血-再灌注模型,20只健康雄性SD大鼠[体质量(200±20)g]随机分为假手术组(n=10)、缺血-再灌注损伤组(n=10).检测肾组织丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性及血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)浓度.观察肾组织光镜、电镜下的形态学变化,用RT-PCR技术检测两组肾组织p38MAPK、JNK mRNA的表达情况,Western印迹法观察p38MAPK、JNK的活化情况.结果 缺血-再灌注损伤后,大鼠肾功能和肾小管上皮细胞明显受损,BUN、Cr、MDA浓度均高于假手术组(P<0.01),SOD活性低于假手术组(P<0.01),p38MAPK、JNK磷酸化蛋白在假手术组呈少量散在表达或不表达,缺血-再灌注损伤后磷酸化p38MAPK、JNK呈阳性表达(P<0.01).p38MAPK、JNK mRNA在缺血-再灌注损伤组的表达较假手术组显著增高(P<0.01).结论 肾缺血-再灌注可增加p38MAPK、JNK的磷酸化水平及p38MAPK、JNK mRNA的转录水平,p38MAPK、JNK可能在肾缺血-再灌注损伤中起到至关重要的作用.     

氧化应激对大鼠髓核细胞凋亡的影响

背景:细胞凋亡在椎间盘退变过程中发挥重要作用,而导致细胞凋亡的因素很多,氧化应激是导致细胞凋亡的一个重要因素.目的:从细胞内信号转导水平验证过氧化氢对大鼠髓饮细胞氧化应激损伤的影响.设计、时间及地点:单一样本观察.试验于2008 03/10在山东省创伤骨科研究所完成.材料:p38MAPK特异性阻断刺(SB203580)、JNK特异性阻断剂(SP600125)购自碧云天生物技术有限公司:大鼠椎间盘来自2只新生24 h SD大鼠.方法:原代培养大鼠髓核细胞,将生长良好的髓核细胞制成细胞悬液,随即分为4组:H202组:用0,50.100,200,400,800μmol/L H2O2刺激:对照组:不加刺激的细胞:SB203580+H2O2组:给予特异性p38MAPK阻断剂SB203580预孵育细胞,再给予H2O2刺激:SP600125+H2O2组:给予特异性JNK阻断剂SP600125预孵育细胞,再给予H2O2刺激.上述处理后检测相关指标.主要观察指标:以免疫组织化学检测P-p38和P-JNK的表达情况及表达位置:Western印迹法检测SAPKJJNK、p38MAPK及其磷酸化组分的表达.结果:H2O2能够激活髓核细胞内p38和JNK的活性:SB203580能够有效地抑制p38MAPK的活性,而SP600125则能够有效的抑制JNK的活性;免疫荧光显示P-p38MAPK和P-JNK在细胞质和细胞核均有表达中,而对照组未发现.结论:大鼠髓核细胞受氧化应激后可通过p38MAPK和JNK通路导致细胞凋亡.     

细胞骨架及KATP通道在乳鼠窦房结细胞模拟缺血预适应中的相互作用

目的：观察细胞骨架及线粒体KATP通道在原代培养乳鼠窦房结细胞模拟缺血预适应中的作用及相互影响，方法：实验于2004-12在解放军第三军医大学中心实验室完成。取培养2d的窦房结细胞，随机分为对照组、模拟缺血再灌注组、模拟缺血预适应组、微丝聚合剂＋缺血再灌注组、线粒体KATP通道开放剂＋缺血再灌注组、微丝解聚剂＋缺血预适应组、线粒体KKATP通道阻断剂＋缺血预适应组以及线粒体KATP，通道开放剂＋缺血再灌注＋微丝解聚剂组。以fura2／am荧光探针标记细胞内钙离子，通过荧光分光光度计检测钙离子浓度：以FITC-phalloidin标记F-actin，通过激光共聚焦显微镜检测其形态结构的改变。结果：①微丝聚合剂及线粒体KATP通道开放剂预处理均能显著减轻缺血再灌注引起的钙离子超载。维持微丝形态结构的相对完整性，模拟缺血预适应效应。②微丝解聚剂及线粒体KATP通道阻断剂预处理可阻断缺血预适应效应，使窦房结细胞内钙离子浓度增高，微丝断裂、解体。③微丝解聚剂还可取消线粒体KATP通道开放剂的保护效应。结论：模拟缺血预适应及线粒体KATP通道开放剂能显著改善模拟缺血再灌注导致的微丝解体；而维持微丝结构的相对完整性，也在模拟缺血预适应以及线粒体KATP通道开放剂的保护作用中起重要作用。     

细胞骨架及KATP通道在乳鼠窦房结细胞模拟缺血预适应中的相互作用

目的观察细胞骨架及线粒体KATP通道在原代培养乳鼠窦房结细胞模拟缺血预适应中的作用及相互影响.方法实验于2004-12在解放军第三军医大学中心实验室完成.取培养2 d的窦房结细胞,随机分为对照组、模拟缺血再灌注组、模拟缺血预适应组、微丝聚合剂+缺血再灌注组、线粒体KATP通道开放剂+缺血再灌注组、微丝解聚剂+缺血预适应组、线粒体KATP通道阻断剂+缺血预适应组以及线粒体KATP通道开放剂+缺血再灌注+微丝解聚剂组.以fura2/am荧光探针标记细胞内钙离子,通过荧光分光光度计检测钙离子浓度;以FITC-phalloidin标记F-actin,通过激光共聚焦显微镜检测其形态结构的改变.结果①微丝聚合剂及线粒体KATP通道开放剂预处理均能显著减轻缺血再灌注引起的钙离子超载,维持微丝形态结构的相对完整性,模拟缺血预适应效应.②微丝解聚剂及线粒体KATv通道阻断剂预处理可阻断缺血预适应效应,使窦房结细胞内钙离子浓度增高,微丝断裂、解体.③微丝解聚剂还可取消线粒体KATP通道开放剂的保护效应.结论模拟缺血预适应及线粒体KATP通道开放剂能显著改善模拟缺血再灌注导致的微丝解体;而维持微丝结构的相对完整性,也在模拟缺血预适应以及线粒体KATP通道开放剂的保护作用中起重要作用.     

优降糖对KATP通道介导缺血预适应心肌再灌注损伤的影响

目的 :探讨优降糖在完整大鼠心脏模型中 ,对 ATP敏感钾通道 (KATP)介导心肌缺血预适应作用的影响。方法 :将 4 4只大鼠随机分为 4组 :心肌缺血预适应组 (IPC组 )、优降糖组 (GL I组 )、优降糖 IPC组 (G P组 )和对照组 (C组 )。心肌缺血预适应由 3次 10分钟缺血和 10分钟再灌注组成。所有大鼠均接受 30分钟缺血和 6 0分钟再灌注。梗死范围由饱和曲利本蓝和红四氮唑蓝染色判定 ,并以坏死区占缺血区的百分比表示。 导联记录心脏室性心律失常。结果 :IPC能显著缩小缺血再灌注后的心肌梗死范围 ,且这种作用能被 KATP通道阻滞剂优降糖完全取消。 IPC可减少缺血再灌注所致的室性心律失常的发生 ,但这种保护作用不能被优降糖所阻断。结论 :优降糖对 KATP介导 IPC的心肌保护作用有影响。     

p38 MAPK抑制剂对脓毒症大鼠肝损伤的保护作用

目的探讨脓毒症肝损害的原因及p38 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂的保护作用.方法采用盲肠结扎并穿刺 (CLP)来制作脓毒症模型.在不同时相点观察大鼠肝功能[谷丙转氨酶(ALT)]、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)浓度.结果 CLP术后血清TNF-α、IL-1β进行性升高,ALT也显著升高.血清ALT、TNF-α、IL-1β呈显著正相关.应用p38MAPK抑制剂SB203580后,血清TNF-α、IL-1浓度显著降低,同时血ALT减低.结论 TNF-α、IL-1的大量释放是脓毒症肝损害的原因之一,通过调控p38MAPK信号通路可对脓毒症鼠肝损害起保护作用.     

肝素对急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的治疗作用

研究抗凝治疗对急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征动物模型的治疗作用及其机制。方法将48只大耳白兔随机分为四组:对照组(A组)、内毒素组(B组)、内毒素 肝素组(C组)和内毒素 低分子肝素组(D组),每组12只。肺损伤动物模型采用静脉注射脂多糖来制作,用NovaStstProfileM血气分析仪进行血气分析;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α);用Westernblots检测磷酸化p38MAPK水平。结果①给予内毒素各组的动脉血氧分压(PaO2)进行性下降,1h后各时间点B、C、D组的PaO2显著低于A组(P<0.05);在4h和6h时,C组和D组PaO2明显高于B组(P<0.05),但C、D组之间差异均无统计学意义。②给予内毒素各组的血浆TNF-α水平进行性升高,在1h后各时间点B、C、D组的血浆TNF-α水平均显著高于A组(P<0.05);在4h和6h时,C组和D组血浆TNF-α水平明显低于B组(P<0.05),C、D组之间差异无统计学意义。③根据肺损伤的病理改变,A、B、C和D组的肺损伤评分分别为0.1分、(2.4±0.5)分、(1.6±0.5)分和(1.8±0.4)分,C、D组的肺损伤评分明显低于B组P<0.05)。④各实验组动物予以内毒素处理1h后p38MAPK的表达较对照组显著升高(P<0.05),C、D组在4h后p38MAPK表达明显低于B组(P<0.05),但C、D组之间差异无统计学意义。结论对于内毒素诱导的ALI动物模型,肝素和LMWH干预可能对ALI有一定的保护作用,表现在改善低氧血症和减轻炎症反应,减轻炎症反应可能与其抑制p38MAPK的活化有关。     

雷米普利酸预处理对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的:观察雷米普利衍生物雷米普利酸预处理对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用,并分析其作用途径与缓激肽的关系。方法:实验于2004-06/2005-01在南阳医学高等专科学校药理学教研室完成。成年Wistar大鼠60只随机分为4组,空白对照组;生理盐水模型对照组;雷米普利酸组(30μg/kg);B1650+雷米普利酸组(125μg/kg+30μg/kg),各组均为15只。①制备心肌缺血再灌注模型:除空白对照组行冠状动脉左室支下穿线不结扎外,其余各组均结扎30min后,再灌注60min。模型对照组与雷米普利酸组均于结扎前10min分别静脉输入等容量生理盐水和雷米普利酸持续10min;B1650+雷米普利酸组结扎前20min输入B1650,持续时间10min,再输入雷米普利酸持续10min。②心电监测:记录各组大鼠再灌注30min内心律失常出现的时间、持续时间、室性心动过速和室颤的发生率、再灌注后15,60min时ST段的变化。③心肌组织指标检测:观察各组再灌注后心肌一氧化氮合酶、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性、丙二醛和一氧化氮含量的变化。结果:60只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠缺血再灌注心律失常变化:雷米普利酸组在心肌缺血再灌注60min后,其心律失常出现时间明显延长(P<0.01),而持续时间、室性心动过速、室颤的发生率及再灌注15,60minST段的抬高程度均较B1650+雷米普利酸组与模型对照组显著降低(P<0.01)。②缺血再灌注大鼠心肌一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的变化:空白对照组一氧化氮含量为(12.2±2.1)μmol/L,模型对照组及B1650+雷米普利酸组显著下降犤(8.7±1.9),(8.9±1.3)μmol/L,P<0.01犦,雷米普利酸组显著高于模型对照组与B1650+雷米普利酸组犤(13.8±2.5)μmol/L,P<0.01犦;模型对照组再灌后与空白对照组比较总一氧化氮合酶活性下降犤(18.50±5.55),(27.17±4.67)nmol/(min·g),P<0.01犦,雷米普利酸组显著高于模型对照组犤(25.64±5.24)nmol/(min·g),P<0.05犦。③缺血再灌注大鼠丙二醛含量和超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性的变化:雷米普利酸组超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力均显著高于模型组(P<0.01),雷米普利酸组丙二醛含量显著低于模型对照组(P<0.01);而B1650+雷米普利酸组在预先静脉注射B1650后,再给予雷米普利酸,则雷米普利酸抗心肌缺血再灌注所致丙二醛升高的作用被减弱,具有显著性差异(P<0.05)。结论:一氧化氮产生不足是心肌再灌注损伤的主要因素,雷米普利酸通过调节缓激肽活性,维持正常一氧化氮水平对缺血再灌注心肌损伤大鼠可产生药理预适应保护作用,该作用由缓激肽所介导。