肺癌组织中FHIT和TPX2基因的表达及临床意义的研究

目的探讨FHIT和TPX2基因在肺癌中的表达与临床病理因素的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）法,检测FHIT和TPX2基因在肺癌组织和癌旁正常肺组织中的表达。结果FHIT基因的表达水平在肺癌组织中的水平比正常肺组织低,差异有统计学意义（P〈0．05）,失表达率达74．2％。TPX2基因的表达水平在肺癌组织中的水平比正常肺组织高,差异有统计学意义（P〈0．05）,高表达率达64．5％。FHIT的表达异常与吸烟存在相关（P〈0．05）,TPX2的表达异常与临床病理因素均无关,两者之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论FHIT基因的失表达和TPX2基因的过表达在肺癌的发生发展中起重要作用,吸烟可能导致FHIT基因表达下降诱发肺癌。     

FHIT基因和p21基因异常表达与外阴癌和外阴尖锐湿疣的关系

目的探讨FHIT基因和p21基因的异常表达与外阴癌、外阴尖锐湿疣及正常外阴组织的关系。方法选取病理科存档的石蜡标本,其中外阴鳞癌38例,外阴尖锐湿疣52例,正常外阴组织16例。采用免疫组化(SP)法检测外阴癌、尖锐湿疣和正常组织组中FHIT基因和p21基因的表达情况。结果 FHIT基因在外阴癌、外阴尖锐湿疣、正常外阴组织中的阳性表达率比较,差异有统计学意义(P0.05)。p21基因表达阳性表达率正常外阴组织为68.75%),外阴癌为68.42%,外阴尖锐湿疣为19.23%;p21基因在外阴尖锐湿疣中的阳性表达率低于外阴癌与正常外阴组织,差异有统计学意义(P0.05);正常外阴组织与外阴癌中p21基因阳性表达率比较,差异未见统计学意义(P0.05)。结论 FHIT基因和p21基因的异常表达与外阴鳞癌、外阴尖锐湿疣的发生发展有相关性,外阴尖锐湿疣可能为外阴癌的癌前病变。FHIT基因与p21基因的异常表达未见明显相关性。     

胃癌中FHIT基因外显子5、8纯合性缺失及其蛋白表达的研究

目的:探讨FHIT基因外显子5、8纯合性缺失与蛋白表达的关系及其在胃癌发病机制中的作用.方法:应用PCR及免疫组化SP法检测30例胃癌组织、18例正常胃组织中FHIT基因外显子5、8的纯合性缺失和FHIT蛋白的表达.结果:FHIT蛋白阴性表达率及外显子5、8纯合性缺失率在胃癌组织中均高于正常胃组织(P＜0.05).FHIT蛋白表达与胃癌的分化程度有关(P＜0.05):胃癌组织中FHIT基因外显子5、8纯合性缺失与FHIT蛋白阴性表达有显著相关性(r=0.59,P＜0.05).结论:胃癌组织中FHIT基因外显子5、8纯合性缺失可能是引起FHIT蛋白表达降低并进而导致胃癌发生的重要机制.     

宣威肺癌中脆性组氨酸三联体的表达及其与PTEN和Ki-67表达的关系

目的:探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)的表达在宣威肺癌发生、发展中的作用及其与PTEN和Ki-67蛋白表达的关系.方法:利用组织芯片,运用免疫组化SP法检测FHIT、PTEN和Ki-67三种蛋白在40例宣威肺癌和40例癌旁组织中的表达.结果:宣威肺癌组织中FHIT蛋白的失表达率为65%(26/40),显著高于癌旁组织中的失表达率0(0/40)(P＜0.01);FHIT的表达与肿瘤细胞的分化程度、组织学类型及性别相关(P＜0.05),但与患者的年龄、肿瘤大小、临床分期、有无淋巴结转移无关(P＞0.05);宣威肺癌组织中FHIT表达与FFEN表达无相关关系,而与Ki-67表达呈显著负相关.结论:宣威肺癌中FHIT失表达,PTEN低表达,FHIT和Ki-67在宣威肺癌的发生和发展中有协同作用,三者可作为反映宣威肺癌生物学行为的指标.FHIT可能成为宣威肺癌早期诊断的更有效分子标记物.     

FHIT、Survivin基因在食管癌组织中的表达及相关性研究

目的研究FHIT和Survivin基因在食管癌组织中的表达及其与临床病理指标的关系,并探讨其在食管癌发生、发展中的作用。方法采用逆转录多聚酶链反应技术检测FHIT和Survivin基因在癌组织及相应癌旁组织和正常食管组织中的表达情况并分析它们与食管癌临床病理指标的关系。结果癌组织、癌旁组织及正常对照组中FHIT缺失率分别为82．0％、22．0％、16．7％;Survivin阳性率分别为72．O％、2．O％和0％。随着临床分期越晚,FHIT缺失率、Survivin阳性率呈增高趋势;并且在高分化、中分化和低分化鳞癌中FHIT缺失率、Survivin阳性率也呈逐渐增高趋势。在有淋巴结转移与无淋巴结转移的癌组织中FHIT缺失率、Survivin阳性率的差别有显著意义。结论Survivin和FHIT在食管癌中的表达与食管癌的发生、发展有关,两种基因的表达呈负相关。FHIT和Survivin的表达与食管癌患者的年龄,性别无相关性。     

非小细胞肺癌组织中Napsin-A表达与EGFR基因的相关性研究

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中Napsin-A表达与表皮生长因子受体(EGFR)基因的关系。方法采用免疫组织化学法检测89例肺腺鳞癌组织中Napsin-A的表达情况,并用ARMS试剂盒检测上述组织中EGFR基因的表达情况,分析Napsin-A的表达与EGFR基因的关系。结果在NSCLC组织中,腺癌和鳞癌的Napsin-A阳性率分别为96.2%和5.6%,两者比较差异有统计学意义。肺腺癌组织中,EGFR基因突变率为54.7%,而Napsin-A表达阳性者的突变率高达100.0%;肺鳞癌组织中,EGFR基因突变率为5.6%,而Napsin-A表达阳性者的突变率为50.0%,两者比较,差异有统计学意义。结论Napsin-A在肺腺癌组织中高表达,且在腺鳞癌中表达阳性者EGFR基因突变率较高,Napsin-A表达阳性者可建议行EGFR基因检测。     

FHIT蛋白及mRNA在食管癌组织中的表达及意义

目的研究食管癌组织中FHIT蛋白及mRNA的表达变化并探讨其在食管癌发生、发展中的作用。方法采用SP免疫组化检测法和RT-PCR技术检测FHIT蛋白及mRNA在癌组织及相应癌旁组织和正常食管组织中的表达情况。结果 FHIT蛋白在癌组织中缺失表达66%,弱表达32%;与癌旁组织中FHIT蛋白缺失表达18%差异显著（P〈0.001）。FHIT mRNA在癌组织、癌旁组织及正常对照组中的缺失率分别为82%、22%、16.7%。随着临床分期越晚,FHIT蛋白和mRNA缺失率呈增高趋势;并且在高分化、中分化和低分化鳞癌中呈逐渐增高趋势。在有淋巴结转移与无淋巴结转移的癌组织中FHIT缺失率的差别有显著意义。结论 FHIT基因与食管癌的发生、发展过程密切相关,其表达减弱或缺失可能增加了食管癌的易感性。FHIT基因的检测在食管癌的早期诊断、治疗以及预后判断等方面具有重要意义。     

肺鳞癌及腺癌中NGAL表达的免疫组化研究

目的：探讨中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）在肺鳞癌及腺癌组织及远癌组织中的表达及与临床病理因素的关系。方法应用免疫组织化学方法检测 NGAL在35例肺鳞癌、30例肺腺癌组织及相应42例癌旁肺组织中的表达,分析其与病变类型的关系及其在癌组织的表达率与临床病理特征的联系。结果 NGAL在肺腺癌组织中的阳性表达率明显高于肺鳞癌组织;而二类癌组织中的阳性表达率又明显高于相应的癌旁组织,淋巴结转移组高于无淋巴结转移组。阳性表达与患者年龄、性别、吸烟情况、病理类型、分化程度无关（P＆gt;0.05）。结论 NGAL在肺鳞癌及腺癌肿瘤组织内的高表达,且与肿瘤类型有关,有可能成为预测肺鳞癌及腺癌发生发展的肿瘤标志物。     

P16及FHIT基因异常表达在非小细胞肺癌发病机制中的研究

目的探讨P16及FHIT基因异常表达在非小细胞肺癌(NSCLC)的发病机制。方法选取肺癌切除术NSCLC患者65例,收集NSCLC肿瘤组织标本、正常肺组织标本。采用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA,采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-硝酸银染色法检测基因杂合性缺失,采用限制性内切酶法检测DNA甲基化,采用免疫组化法检测蛋白表达。结果NSCLC组织P16及FHIT基因杂合性缺失发生率为58.46%和70.77%,甲基化发生率为49.23%和66.15%,蛋白表达缺失率为67.69%和72.31%;正常肺组织未见P16及FHIT基因杂合性缺失、甲基化、蛋白表达缺失,差异有统计学意义(P0.05)。P16基因杂合性缺失及甲基化与P16蛋白表达缺失具有关联; FHIT基因杂合性缺失及甲基化与FHIT蛋白表达缺失具有关联(P0.05)。临床分期是P16蛋白表达缺失的独立影响因素;性别、吸烟史是FHIT蛋白表达缺失的独立影响因素(P0.05)。结论 P16及FHIT基因异常表达在NSCLC的发生发展中起重要作用,发病机制可能与P16及FHIT基因的杂合性缺失和甲基化导致的P16及FHIT蛋白表达缺失有关。     

肺癌中FHIT基因缺失和p53蛋白表达的研究

目的：探讨肺癌组织中FHIT（fragile histidine triadgene）基因缺失和p53蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法：采用逆转录-巢式聚合酶链反应方法及免疫组织化学ABC法分别检测42例肺癌组织中FHIT基因缺失和p53蛋白表达。结果；肺癌组织中FHIT基因缺失和p53蛋白表达阳性率分别为66．7％（28／42）和76．2％（32／42）．FHIT基因缺失肺癌的p53蛋白阳性率明显高于FHIT基因正常表达的肺癌（P〈0．01）。FHIT基因缺失与肺癌的淋巴结转移有关，p53蛋白表达与临床分期、淋巴结转移密切相关。结论：FHIT基因缺失和p53蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关，二者相互促进．呈明显正相关。     

FHIT和TSLC1基因在宫颈组织中的表达及其与HPV感染的关系

目的检测宫颈组织脆性组氨酸三联体(FHIT)基因与肺癌肿瘤抑制因子1(TSLC1)基因表达,研究他们与宫颈癌发生及人类乳头瘤病毒(HPV)感染之间的关系。方法采用实时荧光聚合酶链反应(PCR)检测正常宫颈组织20例、低度鳞状上皮内病变(LSIL)20例、高度鳞状上皮内病变(HSIL)45例及宫颈癌患者标本33例FHIT基因及TSLC1基因表达,同时检测这些标本中高危型HPV感染情况。结果正常宫颈组织、LSIL、HSIL和宫颈癌组织中HPV的感染率、FHIT基因表达率及TSLC1基因表达率分别为0%、30%、71%和100%,100%、80%、36%和18%以及100%、75%、33%和24%。3项指标在不同宫颈组织之间差异有统计学意义(P<0.01)。所有FHIT基因与TSLC1基因表达缺失的患者均存在高危型HPV感染。受试者工作特征(ROC)曲线分析表明检测FHIT与TSLC1基因表达缺失对宫颈癌及HSIL具有诊断价值。结论 FHIT基因与TSLC1基因在HPV感染之后、宫颈癌发生过程的早期阶段就可能发生表达缺失。对高危型HPV感染者进行FHIT与TSLC1基因表达检测,有可能成为宫颈癌早期诊断的重要参考依据。     

肺鳞状细胞癌中人乳头瘤病毒感染的研究

目的通过观察肺鳞状细胞癌及癌旁肺组织中人乳头瘤病毒（humanpapillomavirus，HPV）的感染、分布、存在状态及与临床病理资料间的关系，探讨HPV感染在肺鳞状细胞癌发病中的作用。方法用共有引物PCR检测120例肺鳞状细胞癌及癌旁肺组织中HPV的感染率，用多重PCR对阳性标本的HPV6/11．16．18分型，用原位杂交方法观察HPV在肺鳞癌组织中的分布及存在状态。结果肺鳞癌组织HPV感染率（35％）显著高于癌旁肺组织（67％）（P＜0．01），HPV在肺鳞癌组织中可能以游离和整合两种状态存在并可在肺鳞癌组织中表达，早期（Ⅰ期）肺鳞癌HPV感染率（44.3％）显著高于进展期（Ⅱ～Ⅲ期）肺鳞癌（25．4％）（P＜0．05），重度吸烟组HPV感染率（44．7％）显著高于非吸烟组（18．2％）（P＜0．01）。结论HPV感染在肺鳞癌的发病中可能起一定作用，肺鳞癌组织中HPV感染与吸烟有关。     

FHIT、WWOX和MDR1基因在鼻咽癌中的表达

目的探讨FHIT、WWOX基因组在鼻咽癌患者中的表达、失活机制及MDR1基因在鼻咽癌中的表达。方法采用荧光相对定量RT-PCR法检测89例鼻咽癌患者(试验组)和61例慢性鼻黏膜炎患者(对照组)鼻咽部组织WWOX、FHIT和MDR1基因mRNA表达水平,甲基化特异性(MSP)方法及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析FHIT和WWOX基因mRNA表达下调原因。结果 (1)实验组鼻咽组织中FHIT、WWOX和MDR1基因的mRNA表达量与对照组间的差异有统计学意义(P0.05);按临床分期和分化程度分层后,试验组中病情较严重者较病情轻者,分化程度低的较分化程度高者间的FHIT和WWOX基因表达量差异有统计学意义(P0.05),且FHIT和WWOX基因表达量与临床分期、分化程度呈负相关(r=-0.731,P=0.000;r=-0.816,P=0.000;r=-0.626,P=0.000;r=-0.536,P=0.001);试验组低分化者MDR1基因mRNA与高分化者间差异有统计学意义(P=0.021),且组织学类型与MDR1基因mRNA相对表达量呈负相关(r=-0.697,P=0.000);试验组的FHIT与WWOX基因的mRNA相对表达量呈正相关(r=0.540,P=0.000)。(2)试验组的FHIT和WWOX基因启动子甲基化程度明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);且FHIT和WWOX的mRNA与该基因启动子甲基化程度呈正相关(r=-0.689,P=0.000;r=-0.594,P=0.000)。(3)试验组中有39例(43.8%)在FHIT基因中至少有1个位点存在杂合性缺失(LOH),在WWOX基因中42例(47.2%)至少一个位点存在LOH,明显高于对照组的3例和2例(4.9%,3.3%),差异有统计学意义(P0.05)。且FHIT和WWOX基因mRNA与该基因基因杂合性缺失呈负相关(r=-0.239,P=0.049;r=-0.364,P=0.013)。结论启动子甲基化是鼻咽癌患者WWOX和FHIT基因表达下调的主要原因,可能也是鼻咽癌的发生、发展的主要原因。MDR1基因过度表达与鼻咽癌的分化程度密切相关。     

肺癌组织CXCR2和CREB的表达及意义

目的探讨CXC趋化因子受体2（CXCR2）和cAMP反应原件结合蛋白（CREB）在肺鳞癌和腺癌组织中的表达及其与肺癌发生、发展的关系。方法采用免疫组化Elivision法,检测肺癌组织49例（鳞癌22例,腺癌27例）、癌旁正常组织20例中CXCR2和CREB的表达,并分析其与临床病理因素的关系。结果 CXCR2和CREB在肺癌组织中的阳性表达率分别为69.4%（34/49）和57.1%（28/49）,均显著高于癌旁正常组织,差异有显著性（χ2=14.778、10.998,P〈0.05）。CXCR2和CREB表达水平均与肺癌TNM分期和分化程度相关（χ2=4.102-12.042,P〈0.05）;CREB在吸烟者中的表达明显高于非吸烟者（χ2=8.057,P〈0.05）,在鳞癌组织的表达明显高于腺癌（χ2=13.920,P〈0.05）。肺癌组织中CXCR2和CREB的表达呈正相关（r=0.319,P〈0.05）。结论CXCR2和CREB可能参与了肺癌的发生和发展,为肺癌的靶向治疗提供了新的靶位点。     

肺鳞癌组织中208个肺癌相关基因的表达

目的 病理学上诊断同样为肺鳞癌的患者,其治疗疗效和愈后往往存在一定差异,本研究利用本实验室制作的 208个肺癌相关基因芯片,探讨了 7例肺鳞癌组织中基因表达的异质性,试图为患者的治疗和预后提供分子依据. 方法 提取 7例男性肺鳞癌患者(年龄在 55～ 65岁之间)癌组织的总 RNA并用 LD- PCR标记成探针,然后与含有 208个肺癌相关基因的 cDNA Microarray杂交,芯片用 ImaGene软件分析和处理数据. 结果 7例肺鳞癌组织之间 208个肺癌相关基因表达的相似性在 60.65% ～ 82.69%之间. 结论 本研究首次对肺鳞癌患者不同个体之间基因的表达进行研究并发现存在一定的差异,提示应注意癌症患者的个体化诊断和治疗.     

干细胞标志物Nanog基因检测在肺癌诊断中的临床意义

目的 观察干细胞标志物Nanog基因在肺癌组织与癌旁组织中的表达情况,明确其在肺癌诊断中的作用.方法 选择2011年1月至2013年7月在我院诊治且临床被诊断为肺癌的患者作为研究对象,分为肺腺癌（A组）和肺鳞癌（B组）.取患者癌组织与癌旁组织,以实时定量RT-PCR反应检测两组患者干细胞标志物Nanog基因的表达水平,并比较不同分化程度下各组织中Nanog基因的表达量.结果 肺腺癌与肺鳞癌患者各年龄段的发病率大致相等,两组患者在性别、疾病分期及有无淋巴结转移方面无显著差异（P＞0.05）;与I期、II期相比,Ⅲ期、Ⅳ期癌组织中Nanog基因的表达明显升高,且癌组织中Nanog基因的整体表达明显高于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）.与中分化及高分化型的癌组织相比,未分化、低分化癌组织中Nanog基因的表达明显升高,差异显著（P＜0.05）.结论 肺腺癌与肺鳞癌患者癌组织中Nanog基因的表达明显增强,以Ⅲ期、Ⅳ期肺癌中表达最高,细胞的分化程度越低,其癌组织中Nanog基因的表达越强.     

纤支镜活检和痰液标本FHIT基因检测对肺癌诊断的意义

目的：明确检测肺癌手术标本、纤支镜活栓和痰液标本FHIT基因转录本缺失在肺癌诊断中的意义。方法：应用RT-PCR法检测41例肺癌手术标本癌组织和9例良性肺疾病肺组织手术标本以及80例肺癌和30例良性肺疾病纤支镜活检标本及全部的160例患者痰液标本FHIT基因转录本缺失，并与病理组织学、刷检细胞学和痰液细胞学检查结果比较。结果：肺癌组织FHIT基因转录本缺失的阳性率[70．7％（29／41）]高于癌旁正常组织（5／41）和良性肺疾病组织（0／9）（P〈0．005）；纤支镜活检标本FHIT基因转录本缺失阳性率[70．0％（56／80）]高于良性肺疾病（2／30）（P〈0．005）；痰液FHIT基因转录本缺失联合痰液细胞学检查诊断肺癌的敏感性（73．6％）高于单独痰液细胞学（47．1％）或痰液中FHIT基因转录本缺失（52．1％）（均P〈0．005）。与单独痰液细胞学相比。两者联合检测使诊断肺癌的敏感性由原来的47．1％提高至73．6％（P〈0．005）．阴性预测值由原来的37．9％提高至54．9％（P〉0．05），特异性不变。结论：在肺癌组织中检测FHIT基因转录本缺失可能成为肺癌诊断的分子标志物之一。痰液中FHIT基因转录本缺失检测为肺癌无创诊断提供了一个新的辅助指标。[著者文摘]     

结核杆菌L-型感染与肺癌组织类型的关系

目的调查肺癌组织中结核分枝杆菌L-型的感染状况,以分析结核分枝杆菌L-型感染相关肺癌的临床病理学特征。方法采用原位分子杂交技术检测结核分枝杆菌L-型MPB64基因片段的存在及定位。同时,用IK抗酸染色法检测标本中的结核分枝杆菌L-型。结果原位分子杂交检测石蜡包埋73例肺癌组织中MPB64基因片段在肺鳞癌、肺腺癌、细支气管肺泡癌、小细胞未分化癌中的阳性率分别为85.0%、73.5%、81.8%和87.5%,差异无统计学意义(P>0.05)。IK抗酸染色检测结核分枝杆菌L-型在肺鳞癌、肺腺癌、细支气管肺泡癌、小细胞未分化癌中的阳性率分别为70.0%、64.7%、63.6%和75.0%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论结核分枝杆菌L-型感染在肺癌的形成过程中可能起到一定的作用,但是与癌组织的病理学类型无关。