口腔扁平苔藓外周血Th1/Th2型细胞因子表达水平的价值研究

探讨口腔扁平苔藓外周血Th1/Th2型细胞因子表达水平的价值。从收治的充血糜烂型口腔扁平苔藓患者中抽取22例作为A组,光滑型口腔扁平苔藓22例作为B组,并选取22例健康人群作为对照组。对比不同组别IL-4mRNA与IFN-gamma mRNA的表达水平、IL-4与IFN-gamma的表达水平、IFN-gamma/IL-4 mRNA与蛋白表达量比值。A、B组IL-4mRNA表达水平明显比对照组高(P0.05),IFN-mRNA表达水平明显比对照组低(P0.05);口腔扁平苔藓患者IL-4表达水平明显比对照组高(P0.05),IFN-gamma表达水平明显比对照组低(P0.05)。口腔扁平苔藓患者IFN-gamma/IL-4 mRNA与蛋白表达量比值及IFN-gamma/IL-4蛋白表达量明显比对照组低(P0.05)。Th1/Th2与口腔扁平苔藓发病机制有关,可作治疗参考。     

白细胞介素-13和白细胞介素-17在口腔扁平苔藓 患者血清中的表达及临床意义

目的探讨白细胞介素(IL)-13和IL-17在口腔扁平苔藓(OLP)患者血清中的表达及临床意义。方法选取该院健康者28例(对照组)和OLP患者(OLP组)32例,分析OLP患者外周血淋巴细胞亚群CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD19~+、自然杀伤细胞(NK,CD16+CD56+)的表达情况,免疫散射比浊法检测体液相关免疫指标免疫球蛋白(Ig)G、IgA、IgM、C3、C4的表达情况。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测血清中IL-13和IL-17水平,分析IL-13和IL-17的表达与OLP患者免疫功能情况及临床指征的相关性。结果 OLP组患者免疫水平与对照组作比较,OLP组患者C4值低于对照组,IgM高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);两组患者体液免疫水平检测,OLP患者CD19+水平高于对照组;CD3~+、CD4~+、CD8~+低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);OLP患者IL-13和IL-17的表达水平高于对照组,差异比较有统计学意义(P0.05);OLP患者血清中IL-13和IL-17的表达水平呈正相关(r=0.824,P0.05);OLP患者IL-12和IL-27的表达水平与IgG呈正相关(r1=0.643,P10.05;r2=0.747,P20.05),与CD16+CD56+呈负相关(r1=-0.705,P10.05;r2=-0.782,P20.05)。结论 OLP患者机体细胞免疫功能下,伴有一定程度的体液免疫功能的紊乱。IL-13和IL-17高表达可能协同促进了OLP的炎症发生发展,在OLP的发病机制中起到了一定作用。     

口腔扁平苔藓患者唾液TNF—α检测意义

目的探讨唾液TNF—α浓度与口腔扁平苔藓（OLP）的关系。方法使用ELISA法检测20例口腔扁平苔藓OLP患者治疗前后和20例健康体检者唾液TNF—α的浓度。结果OLP患者TNF—α的浓度明显高于正常对照组（P〈0．01）,在治疗后与正常人唾液水平相当（P〉0．05）。结论OLP患者TNF-α浓度明显升高,其浓度与OLP发病机制和疗效有关。     

类风湿关节炎患者外周血TH17与Treg细胞的变化

目的 探讨外周血辅助性T细胞17（TH17）与调节性T细胞（Treg）在类风湿关节炎（RA）发生、发展中的变化。 方法 选取RA患者活动组25例、稳定组20例及健康人对照组25例,采用流式细胞术及定量PCR的方法,分别从蛋白质水平与mRNA水平检测其外周血CD4+T细胞IL-17及FoxP3的表达。 结果 活动组RA患者外周血CD4+T细胞IL-17蛋白质及mRNA表达水平显著高于稳定组（P<0.01）,稳定组又显著高于健康人对照组（P<0.01）。活动组RA患者外周血CD4+T细胞FoxP3蛋白质及mRNA表达水平显著低于稳定组及健康人对照组（P<0.01）,但稳定组FoxP3表达与健康人对照组差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 RA患者外周血中存在TH17/Treg细胞失衡,且这种变化与疾病的进程相关。     

胸腺瘤合并重症肌无力患者外周血Th17／Treg变化及其与IL-6相关性

目的：研究单纯胸腺瘤和胸腺瘤合并重症肌无力（MG）患者外周血CD4＋T细胞中Th17细胞、Treg细胞变化及其与IL-6的相关性。方法：采用流式细胞术检测胸腺瘤合并MG（MG组）、单纯胸腺瘤（NMG组）和健康对照组患者外周血CD4＋T细胞中Th17细胞、Treg细胞比例,ELISA法检测IL-6。结果：MG组及NMG组Th17细胞比例高于对照组（P＜0．01）;MG组与对照组、NMG组比较,Treg细胞比例降低、IL-6水平增高（P＜0．01）。 MG组IL-6水平与Th17细胞比例呈正相关性（r＝0．792,P＜0．001）,与Treg细胞比例呈负相关性（r＝－0．559,P＝0．005）。结论：单纯胸腺瘤及胸腺瘤合并MG患者Th17细胞增多,胸腺瘤合并MG患者Treg细胞减少,IL-6在维持两者间平衡起着重要作用,Th17／Treg失衡可能导致免疫调节功能紊乱。     

特应性皮炎患者外周血中Th22、Treg细胞及其细胞因子表达的研究

目的检测特应性皮炎(AD)患者外周血中辅助性T细胞22(Th22)和调节性T细胞(Treg)及其细胞因子IL-22和TGF-β的表达,探讨其与AD发病之间的关系及临床意义。方法选择52例AD患者,按照欧洲特应性皮炎评分标准(SCORAD)进行评分分组;使用流式细胞仪检测52例AD患者和和20例健康人Th22和Treg细胞的数量;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IL-22和TGF-β的表达。结果与对照组比较,AD患者外周血中Th22细胞的比例及血清中IL-22的水平显著增高(P0.0001),Treg细胞的比例及血清中TGF-β的水平显著降低(P0.0001);与中度AD患者比较,重度AD患者外周血Th22细胞的比例及血清中IL-22的水平显著增高(P0.0001),Treg细胞的比例及血清中TGF-β的水平显著降低(P0.0001)。结论 AD患者外周血中Th22细胞及其相关细胞因子表达水平显著升高,而Treg细胞及其相关细胞因子的表达降低,提示Th22和Treg可能在AD的发病机制中发挥重要作用。     

口腔扁平苔藓患者唾液白介素17的检测

目的:检测口腔扁平苔藓患者(oral lichen planus,OLP)治疗前后唾液中白介素17(IL-17)的水平,研究唾液IL-17与OLP发病以及病情变化的关系.方法:分别收集OLP患者治疗前后和健康对照组的唾液样本,用ELISA方法检测唾液中IL-17的表达水平.结果:OLP患者治疗前后及健康对照组的唾液样本中均未检出IL-17.结论:唾液中IL-17浓度较低,需进一步完善唾液保存方法和提高检测技术的灵敏度来检测唾液中IL-17 表达水平.     

儿童肺炎支原体感染者．Thl7／Treg的变化分析与临床意义

目的探讨外周血辅助性T细胞17型（helperTcelltype17,Thl7）和CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（RegulatoryTcells,Treg）在肺炎支原体感染儿童体内的变化及临床意义。方法肺炎支原体（mycoplasmapneumoniae,MP）感染组32例．分为普通肺炎组18例、肺炎合并肺外症状组14例;健康对照组26名。常规分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测各组外周血Thl7细胞、Treg的表达频率;ELISA方法检测血清细胞因子IL-6、IL-17水平。结果1．MP感染组外周血Thl7细胞频率高于正常对照组（P〈0．01）,肺外症状组血Thl7细胞频率水平高于普通肺炎组（P〈O．01）;MP感染组外周血Treg细胞表达频率低于正常对照组（P〈0．01）,肺外症状组血Treg细胞频率低于普通肺炎组（P〈0．01）。2．MP感染组血清IL．6、IL．17水平高于正常对照组（P〈0．01）;肺外症状组血清IL-6、IL-17水平高于普通肺炎组（P〈0．01）。结论在儿童MP感染者体内存在Treg与Thl7细胞频率明显改变,并伴有炎症性细胞因子水平升高．提示Treg与Thl7细胞的频率异常在儿童MP感染的发病机制中起着重要的作用。     

不同分期老年 COPD 患者 Treg 细胞比例及炎性因子水平的研究

目的：观察和分析不同分期老年慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者 Treg 细胞比例及炎性因子水平的变化情况。方法选取老年 COPD 患者100例,将处于急性加重期的患者纳入急性组,将处于稳定期的患者纳入稳定组,两组分别纳入42例和58例,选取健康人50例作为对照组。对三组研究对象外周血中的 CD4＋ Foxp3＋ Treg 细胞的比例、CD4＋ CD25＋ Treg 细胞的比例以及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-8（IL-8）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1（IL-1）的水平进行检测和比较。结果急性组患者的 CD4＋ Foxp3＋ Treg 细胞比例显著高于对照组（P ＜0．05）,对照组研究对象的 CD4＋ Foxp3＋ Treg 细胞比例显著高于稳定组（P ＜0．05）;急性组患者的 TNF-α、IL-8、IL-6、IL-1水平均显著高于稳定组（P ＜0．05）,稳定组患者的上述指标均显著高于对照组（P ＜0．05）。结论老年 COPD 患者在急性加重期表现为 Treg 细胞比例的异常升高和炎性因子水平的大幅度上升,这可能是造成急性加重期 COPD 患者感染和损伤程度加重的原因之一,稳定期老年 COPD 患者仍存在过度炎症反应的现象,但程度相对较低,并出现了 Treg细胞比例下降的机体自我保护现象。     

CITP患者外周血Breg与CD4＋T细胞的相关性及临床意义

本研究检测慢性特发性血小板减少性紫癜（CITP）患者治疗前后外周血Breg亚群与CD4＋ T细胞数量、相关细胞因子的变化及其相关性,探讨它们在CITP发病机制中的作用。选择35例CITP患者,分离外周血单个核细胞（PBMNC）,采用流式细胞术检测糖皮质激素治疗前后外周血Th1、TH17、Th22以及Breg细胞亚群的比例变化;运用ELISA法检测治疗前后PBMNc培养液上清中IFN-γ、IL-17、IL-22以及IL-10水平,与同期选择的健康对照组比较。结果表明,CITP患者治疗前外周血中Th1、Th17、Th22细胞亚群的比例均升高（P〈0．05）,调节性B细胞（Breg）的比例降低,差别均有统计学意义（P〈0．05）,而治疗后与正常对照组比较,差别均无统计学意义（P〉O．05）;CITP患者治疗前PBMNC培养液上清中细胞因子IFN-γ、IL-17、IL-22水平升高,IL-10的水平低于健康对照组,差别均有统计学意义（P〈0．05）,而治疗后与正常对照组比较,差别均无统计学意义（P〉0．05）。患者Breg细胞的比例变化与培养液上清中细胞因子IL-10表达水平呈正相关（r=0．719,P〈0．05）,Breg细胞与Th1、Th17、Th22细胞亚群的变化呈负相关性,IL-10水平与IFN-γ、IL-17、IL-22水平也呈负相关性。结论：调节性B细胞比例及IL-10的水平下调可能参与CITP患者的CD4＋T细胞免疫调节紊乱机制,可为其临床免疫调节治疗提供新的靶点与新思路。     

Th细胞及趋化因子受体CCR4、CCR6与类风湿性关节炎的相关性研究

目的探讨Th1、Th2和Th17细胞及CCR4、CCR6在类风湿性关节炎（RA）发病机制中的作用。方法用酶联免疫法（ELISA）检测65例RA患者和50例健康人血清中IFN-γ、IL-10和IL-17的水平,流式细胞仪检测外周血CD4＋T细胞表面CCR4和CCR6的表达。结果与健康组比较,RA活动期患者血清中IFN-γ的水平具有统计学意义（P〈0.05）;IL-17水平与健康人相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;CCR4的水平,RA活动期与健康人相比,差异有统计学意义（P〈0.01）;CCR6的水平,RA活动期和健康人相比,差异具有统计学意义（P〈0.01）。RA血清中IL-17的表达与CCR4的表达无明显相关性（P〉0.05）,但与CCR6的表达水平和CD4＋CCR4＋CCR6＋T细胞的数量呈正相关（P〈0.05）。结论 Th细胞分泌的细胞因子及趋化因子受体CCR4、CCR6与RA的发病存在一定的联系。     

溃疡性结肠炎患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞水平及其临床意义

目的：探讨溃疡性结肠炎（ UC）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（ CD4＋CD25＋Treg）水平及其与疾病活动性关系。方法采用流式细胞仪检测50例不同病期UC患者（ UC组）和50名正常人（对照组）的外周血CD4＋CD25＋Treg水平,全自动ESR分析仪测定ESR。结果活动期UC组外周血CD4＋CD25＋Treg水平均明显低于对照组,且随着其病情程度的加重,其水平逐渐降低（P＜0.05）。 UC组CD4＋CD25＋Treg水平与ESR水平呈负相关（r＝-0.432, P＜0.05）。结论 UC患者外周血CD4＋CD25＋Treg降低水平与其炎症活动程度相关,其水平检测有助于判断病情严重程度。     

婴儿巨细胞病毒性肝炎外周血Treg及IL-l7表达水平与肝损伤的关联性

目的探讨婴儿巨细胞病毒性肝炎（CMV）外周血调节性T细胞（Treg）及白介素17（IL-17）表达水平与肝脏损伤的关联性。方法 43例CMV肝炎患儿根据其肝损伤程度分为轻症组31例、重症组12例,32例健康小儿作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血Treg细胞百分比,ELISA法检测血清IL-17的表达水平,荧光定量PCR（FQ-PCR）法检测尿HCMVDNA载量,并同时测定血清胆红素、丙氨酸转移酶水平,分析它们之间的关联性。结果 43例CMV肝炎组外周血Treg细胞百分比显著低于正常对照组（P〈0.01）,其中重症组外周血Treg细胞百分比也显著低于轻症组（P〈0.01）;而CMV肝炎组血清IL-17表达水平则显著高于正常对照组（P〈0.01）,重症组血清IL-17水平也显著高于轻症组（P〈0.01）;尿HCMV-DNA载量在CMV肝炎各组中差异无统计学意义（P〉0.05）。相关分析显示,外周血Treg细胞百分比与IL-17呈负相关（r=-0.590,P〈0.01）,而血清IL-17水平与血清总胆红素（TBIL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平呈正相关（r分别为：0.749,0.785,P〈0.01）。结论外周血Treg细胞及IL-17表达失衡可能在婴儿巨细胞病毒性肝炎发病机制中发挥重要作用,且与肝损伤严重程度密切相关。     

寻常型银屑病患者外周血Th17／Treg细胞免疫失衡的研究

目的：探讨寻常型银屑病患者外周血Th17细胞与Treg细胞的数量以及相关细胞因子的表达水平,分析Th17/Treg细胞免疫失衡在银屑病发病机制中的作用及与疾病严重程度的相关性,进一步阐述银屑病的发病机制。方法选取92例寻常型银屑病患者作为试验组,同时选60例健康查体者作为正常对照组,采用流式细胞术检测患者及正常人外周血Th17细胞和Treg细胞比例,采用ELISA法检测患者及正常人血清中 IL-17、IL-23、TGF-β的含量,同时以皮损面积和严重程度（PASI）评分评价银屑病病情的严重程度。结果寻常型银屑病患者外周血Th17百分比、IL-17和IL-23水平均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P值均＜0.01）,Th17/Treg比值和IL-17/TGF-β比值也明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）;而银屑病患者外周血Treg百分比及血清中TGF-β水平显著低于正常对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）。进行期Th17/Treg比值高于稳定期,Treg百分比低于稳定期,差异有统计学意义（P＜0.01）。银屑病患者Th17细胞百分比、Th17/Treg比值、IL-17/TGF-β比值、 IL-17和IL-23水平与PASI评分呈显著正相关（P＜0.01）,而Treg细胞百分比、TGF-β水平与PASI评分呈显著负相关（P＜0.01）。Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg比值、IL-17/TGF-β比值、IL-17、IL-23和TGF-β与病程均无相关性（P＞0.05）。结论 Th17/Treg细胞免疫失衡可能在寻常型银屑病的发病机制中发挥重要作用,可望通过调节患者外周血Th17/Treg细胞失衡及相关细胞因子而达到治疗银屑病的目的。     

细胞凋亡及凋亡相关基因的表达对口腔扁平苔藓预后的影响

目的：研究细胞凋亡及凋亡相关基因P53、bcl-2、C-myc的表达对口腔扁平苔藓（OLP）预后的影响。方法：采用TUNEL法及免疫组化法检测45例OLP（糜烂型23例，非糜烂型22例）凋亡细胞情况及P53、bcl-2、C-myc的表达情况并随访至2001年1月。结果：45例OLP均有凋亡细胞发生，凋亡指数（AI）为24．3％，糜烂型（AI＝19．0％）明显低于非糜烂型（AI＝29．4％，P＜0．05）；OLP中P53、bcl-2、C-myc表达阳性率分别为31．1％、35．6％、33．3％（糜烂型为39．1％、52．2％、43．5％，非糜烂型为22．7％、18．2％、22．7％），糜烂型的bcl-2表达阳性率明显高于非糜烂型（P＜0．05）。45例OLP患者中有5例发生恶变，其AI明显低于未恶变者（P＜0．01）。结论：细胞凋亡及凋亡相关基因P53、bcl-2、C-myc参与了OLP的发生发展，凋亡细胞较少且P53、bcl-2过度表达的OLP患者尤其是糜烂型应引起高度重视。     

免疫调节性细胞及其效应分子在CITP免疫功能紊乱中的作用研究

目的探讨调节性T细胞(Treg)、调节性B细胞(Breg)、辅助性T细胞17(Th17)、辅助性T细胞22(Th22)及其相关细胞因子的变化在慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患者免疫功能紊乱中的作用。方法选择CITP患者40例、健康者40例,分离外周血单个核细胞,采用流式细胞术检测Treg、Breg、Th17、Th22细胞数量与比例,采用酶联免疫吸附法检测血浆中白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素(IL-22)水平,计算IL-17/IL-10、IL-22/TGF-β1比值。比较CITP患者、健康者各指标检测结果。结果 CITP患者Th17、Th22细胞及IL-17、IL-22水平高于健康者,Treg、Breg细胞及IL-10、TGF-β1水平低于健康者(P0.05)。CITP患者Th17/Treg、Th22/Breg、IL-17/IL-10、IL-22/TGF-β1比值水平均高于健康者(P0.05)。结论 Th17、Treg、Th22、Breg细胞水平异常及IL-17/IL-10、IL-22/TGF-β1比值变化可能与CITP患者免疫功能紊乱密切相关。     

口腔扁平苔藓患者唾液TNF—α检测意义

目的 探讨唾液TNF-α浓度与口腔扁平苔藓(OLP)的关系.方法 使用EUSA法检测20例口腔扁平苔藓OLJP患者治疗前后和20例健康体检者唾液TNF-α的浓度.结果 OIP患者 TNF-α的浓度明显高于正常对照组(P<0.01),在治疗后与正常人唾液水平相当(P>0.05).结论 OLP患者TNF-α浓度明显升高,其浓度与OLP发病机制和疗效有关.     

多发性骨髓瘤患者Treg细胞、Th17细胞及相关转录因子mRNA的表达及临床意义

目的:探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血及骨髓中调节性T细胞(Treg细胞)和辅助性T细胞17(Thl7细胞)的比率及其相应特异转录因子Foxp3、RORγt的mRNA表达水平,分析Treg/Thl7平衡的临床意义。方法:将46例MM患者分为初发组(n=20)、平台期组(n=16)、复发/难治组(n=10),以健康体检者(n=20)为正常对照组。用流式细胞术检测研究对象外周血及骨髓中Treg细胞、Th17细胞占CD4~+T细胞的比率及Treg/Th17比值的变化;RT-PCR检测转录因子Foxp3及RORγt mRNA的表达水平;同时分析患者血清IL-6及CRP水平变化。结果:初发组及复发/难治组患者外周血和骨髓Treg细胞比率较正常对照组及平台期组患者升高(P0.05);初发组及复发/难治组患者外周血和骨髓中Th17细胞比率与正常对照组及平台期差异均无统计学意义。初发组及复发/难治组患者外周血和骨髓中Treg/Thl7比值高于平台期组及正常对照组(P0.05)。各组外周血及骨髓中Foxp3和RORγt mRNA的变化趋势与Treg/Thl7一致。MM患者血清中IL-6、CRP水平与外周血及骨髓中Treg/Thl7比值变化一致。结论:MM患者活动期外周血及骨髓中Treg/Thl7平衡向Treg倾斜,Foxp3表达水平升高;血清中IL-6、CRP水平与Treg/Th17比值变化趋势一致,可用于预测MM患者预后。     

颅脑损伤患者外周血miRNA-124与Treg细胞和IL-10表达的关系

目的:研究颅脑损伤后外周血小RNA(miRNA)-124与调节性T细胞(Treg)及白细胞介素-10(IL-10)表达的关系,探讨miRNA-124在颅脑损伤中的作用及其机制。方法:纳入颅脑损伤患者109例,根据GCS评分分为轻度损伤组35例,中度损伤组45例,重度损伤组29例,同时纳入正常体检者20例为对照组。受伤后24 h分别采集各组的外周静脉血,采用流式细胞术检测Treg细胞的表达;实时荧光定量聚合酶联反应检测miRNA-124表达;酶联免疫吸附试验检测IL-10的水平。结果:各组颅脑损伤患者外周血Treg比例、miR-124表达及IL-10水平均显著高于对照组(P<0.05),中、重度颅脑损伤组高于轻度损伤组(P<0.05),重度组高于中度组(P<0.05);重度损伤组患者外周血miR-124和Treg比例呈正相关。结论:颅脑损伤后,miRNA-124可能参与对Treg细胞增殖的调节,调控炎症反应。     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和细胞因子与异基因造血干细胞移植后aGVHD的相关性研究

本研究旨在研究异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）、细胞因子IL-2、TGF—B水平与受者急性移植物抗宿主病（aGVHD）的相关性。采用流式细胞术检测13例allo—HSCT患者术后外周血Treg细胞在CD4^＋T细胞中的百分比;用ELISA法检测其血清IL-2和TGF—B水平。结果表明：13例患者均获造血重建,non—aGVHD4例,Ⅰ-Ⅱ度aGVHD5例,Ⅲ-Ⅳ度aGVHD4例。non-aGVHD组Treg在CD4^＋T细胞中所占的百分比高于aGVHD组,差异有显著性（P〈0．05）;non—aGVHD组血清IL-2水平低于aGVHD组,差异有显著性（P〈0．05）;non—aGVHD纽血清TGF—B水平高于aGVHD组,差异有显著性（P〈0．05）。结论：外周血Treg、IL-2、TGF—β水平与allo—HSCT后aGVHD的发生及严重程度有密切关系,因此可作为早期判断和监测aGVHD的指标。