变应性鼻炎患者血清维生素D与Treg/Th17细胞的相关性研究

目的　通过检测变应性鼻炎（AR）患者血清中维生素D（vitamin D,VD）及外周血调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）、Th17细胞的表达水平,研究Treg细胞、Th17细胞及VD在AR发病机制中的作用,探讨VD与Treg/Th17细胞间的相互关系以及治疗AR的价值。方法  选取38例AR确诊患者为AR组,健康体检者38例为对照组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测受试者外周血25（OH）D3的含量;电化学发光免疫分析法检测血清总VD含量;流式细胞术（FCM）检测外周血CD4+IL-17+Th17细胞、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞百分率。结果　AR组血清总VD及25（OH）D3的表达水平显著低于对照组（t =-7.791、-2.439,P 均<0.05）;AR组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率明显低于对照组（t =-17.011,P <0.05）;AR组CD4+IL-17+Th17细胞占CD4+T细胞的百分率明显高于对照组（t =8.986,P <0.05）;AR组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达水平与血清25（OH）D3含量呈正相关（r =0.713,P <0.05）;AR组外周血CD4+IL-17+Th17细胞含量与血清25（OH）D3含量呈负相关（r =-0.658,P <0.05）。结论　AR患者中VD含量显著低于对照组,提示血清VD的缺乏有可能影响AR发病;而VD缺乏可能与Treg/Th17细胞失衡存在一定的相关性。     

CD4+CD25+调节性T细胞在变应性鼻炎患者外周血淋巴细胞中的含量研究

目的:研究CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)在变应性鼻炎外周血淋巴细胞中的比例,并探讨其临床意义.方法:采用流式细胞术分别检测20例季节性变应性鼻炎患者发作期外周血CD4+CD25+Treg在淋巴细胞中的比例,并与8例健康对照者进行比较.结果:变应性鼻炎患者外周血CD4+CD25+Treg和CD4+CD25highTreg所占比例与对照组比较差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:变应性鼻炎患者外周血CD4+CD25+Treg在外周血中的比例明显减少,可能与该病的发病机制有关.     

白细胞介素-12和干扰素-γ表达与变应性鼻炎的相关性

目的 探讨变应性鼻炎患者白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)和干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)的表达及两者与变应性鼻炎的相关性.方法 通过原位杂交染色法和酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA),检测30例变应性鼻炎患者和22例对照鼻黏膜组织中IL-12和IFN-γ的表达.结果在变应性鼻炎组和对照组,外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell,PBMC)IL-12 mRNA杂交阳性率分别为0.13±0.03和0.77±0.15(t=11.1,P<0.05);血清IL-12的含量为(13.7±2.4)pg/L和(52.9±8.4)pg/L (t=6.2,P<0.05);血清IFN-γ的含量为(11.2±2.1)pg/L和(51.8±6.4)pg/L(t=7.9,P<0.05).结论变应性鼻炎的病理过程与IL-12和IFN-γ的表达下调有关.Th细胞分化偏移,Th2功能亢进是导致变应性鼻炎的重要原因.     

变应性鼻炎小鼠外周调节性T细胞的表达特征

目的运用流式细胞仪检测小鼠变应性鼻炎模型的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）和脾脏单个核细胞中Foxp3^＋、CD4^＋、CD25^＋的表达情况,比较与正常对照组间是否存在差异。方法选取8周龄成熟雌性BALB/c小鼠30只,随机分为实验组和对照组各15只。卵清蛋白致敏建立BALB/c小鼠变应性鼻炎模型。21天实验结束取鼻腔HE染色观察形态学特点及差异;分别取脾脏和外周血分离获得单个核细胞,流式细胞仪检测其Foxp3^＋、CD4^＋、CD25^＋的表达情况。结果卵清蛋白造模成功,实验组小鼠均出现喷嚏、搔鼻、鼻周红肿等症状;镜下可见鼻黏膜下较多嗜酸性粒细胞、浆细胞及肥大细胞浸润。实验组PBMC中CD4^＋CD25^＋T细胞和Foxp3^＋CD4^＋CD25^＋T细胞明显低于对照组,均具有极显著性差异（P〈0.01）。小鼠脾脏单个核细胞中CD4^＋CD25^＋T细胞和Foxp3^＋CD4^＋CD25^＋T细胞均略低于对照组,但统计学显示无显著性差异（P〉0.05）。结论调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）在变应性鼻炎中作用机制尚未完全明晰,本实验从分子水平分析变应性鼻炎中CD4^＋细胞的表达特征,旨在为Treg的深入研究提供又一实验依据。     

变应性鼻炎患者外周血嗜酸粒细胞-骨髓干细胞通路指标检测在激素治疗评价中的意义

目的 检测健康人及变应性鼻炎(AR)患者治疗前后外周血嗜酸粒细胞(eosinophils,EOS)-骨髓干细胞通路相关指标CD34+、白细胞介素5(IL-5)、EOS,探讨外周血-骨髓通路在变应性鼻炎发病机制中的作用以及糖皮质激素对此通路的影响.方法 实验分2组:①试验组:常年性持续性变应性鼻炎患者44例,男24例,女20例,年龄7～68岁;给予糖皮质激素治疗4周;②健康对照组:健康体检者30例.分别检测试验组治疗前后和对照组外周血EOS计数,血清IL-5水平及CD34+细胞数,并分析各指标间的相关性.结果 试验组治疗前血清IL-5含量、CD34+数分别为(88.25±33.47)ng/L、(9.24±2.15)个/105,显著高于治疗后[(44.34±16.32)ng/L、(6.31±1.83)个/103]及健康对照组[(31.24±8.43)ng/L、(3.47±1.32)个/105].试验组治疗前后血清IL-5水平与其CD34+数呈显著正相关(r值分别为0.64、0.61,P值均＜0.01).患者血清IL-5水平与其EOS数呈显著正相关(r=0.64,P＜0.01).结论 外周血EOS、IL-5及CD34+细胞参与AR发病过程,提示AR患者病变局部组织和骨髓造血之间有相关通路存在.通过检测外周血IL-5及CD34+可评价治疗效果.     

血清IL-4、IFN-γ与持续性变应性鼻炎的相关性

目的探讨T辅助细胞亚群失衡介导的免疫反应在常年性变应性鼻炎中的作用。方法24例常年性变应性鼻炎患者和17例健康志愿者,应用酶联免疫试剂盒检测血清白细胞介素-4(IL-4)、γ-干扰素(IFN-γ)水平并进行比较分析。结果常年性变应性鼻炎组血清IL-4含量[37．8±18．36]pg/L明显高于对照组[1．74±3．35] pg/L；IFN-γ含量[0．72±3．35]pg/L明显低于对照组[43．60±22．87]pg/L,其差异有显著性意义(P＜0．01)。常年性变应性鼻炎组血清IFN-γ/IL-4比值明显下调。结论T辅助细胞亚群比例失衡,Th2功能亢进是常年性变应性鼻炎发病的重要原因。     

流式细胞术检测IFN-γ、IL-4在鼻息肉及变应性鼻炎患者外周血表达的差异

目的检测鼻息肉及变应性鼻炎患者外周血单个核细胞（PBMC）内IL-4，IFN-γ的表达，探讨细胞因子与鼻息肉和变应性鼻炎发病的关系，以及二者发病机制的不同。方法用流式细胞仪测定30例鼻息肉患者、30例变应性鼻炎患者和30例健康人的PBMC，经PMA诱导培养后IFN-γ／和IL-4的水平，与健康对照组比较，进行统计学分析。结果鼻息肉组PBMC中CD3^＋／CD8^-／IFN-γ^＋和CD3^＋／CD8^-／IL-4^＋含量均较健康对照组明显升高，比较有统计学意义（P〈0．05）。变应性鼻炎组PBMC中CD3^＋／CD8^-／IFN—γ^＋含量较健康对照组明显降低，而CD3^＋／CD8^-／IL-4^＋含量则明显升高，比较均有统计学意义（P〈0．05）。结论鼻息肉患者体内分泌IFN-γ、IL-4均增高，分泌多种细胞因子，在鼻息肉的发生发展中起到网络调节作用。而变应性鼻炎患者分泌IL-4增高，分泌IFN-γ却受到抑制，这种细胞因子失平衡可能在变应性鼻炎发病机制中起到重要作用。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂对小鼠变应性鼻炎治疗的作用与机制研究

目的　探讨过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferators-actived receptor,PPAR）γ激动剂对小鼠变应性鼻炎的治疗作用及机制。方法　采用卵清蛋白（OVA）建立变应性鼻炎小鼠模型,观察吡格列酮（PIO）对变应性鼻炎症状的改善;取鼻腔组织行HE染色,采用real time PCR检测脾脏Foxp3、T-bet、GATA-3 mRNA表达;流式细胞仪检测脾脏中CD4+Foxp3+T细胞含量。结果　小鼠变应性鼻炎组（AR组）喷嚏和搔鼻频率明显高于对照组（control组）,经PIO治疗后症状得以改善;AR组小鼠鼻黏膜上皮连续性破坏,黏膜下大量炎症细胞浸润;PIO治疗后炎症细胞浸润明显减少,同时上皮完整性修复良好;PIO组Foxp3 mRNA表达高于AR组（P <0.001）,GATA-3则较AR组明显降低（P <0.001）,而T-bet 无统计学差异;AR组CD4+Foxp3+T细胞含量（4.43%±0.25%）较control组（5.19%±0.39%）降低（P <0.001）,PIO治疗后CD4+Foxp3+T细胞含量（6.35%±0.37%）高于control组及AR组。结论　PPARγ激动剂能够有效缓解小鼠鼻过敏症状,调节Th1/Th2平衡;PPARγ激动剂可能是通过促进Foxp3表达,进而扩增调节性T细胞达到治疗变应性鼻炎的作用。     

变应性鼻炎患者外周血Th1和Th2细胞的流式细胞分析

体内Th1和Th2细胞及其分泌的细胞因子失平衡在变应性鼻炎的发病机制中所起的作用受到学者们的重视。通过检测变应性鼻炎患者外周血单个核细胞（PBMC）经PMA刺激培养后的CD3^＋／CD8^-细胞的IL-4和IFN-γ的水平，进一步探讨Th1／Th2失衡在变应性鼻炎发病中所起的作用。