急性冠脉综合征患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的检测及意义

目的 探讨急性冠脉综合征(ACS)患者外周血中CIM CD25 调节性T细胞(Treg)的异常与疾病的关系.方法 28例ACS患者(ACS组)、26例稳定性心绞痛(SAP)患者(SAP组)和30例正常人(对照组)作为入选对象,均采用流式细胞术检测各组外周血中Treg表达百分比,并检测各组Tred的功能状态,EILSA法检测循环及上清液中细胞因子TNF-α和IL-10浓度,常规检测循环CRP及血脂水平.结果 外周血中Treg表达百分比水平及功能ACS组显著低于SAP组(P＜0.05)和对照组(P＜0.05),CRP、TNF-α的水平ACS组显著高于SAP组(P＜0.05)和对照组(P＜0.05),ACS组IL-10的水平显著低于SAP组(P＜0.05)和对照组(P＜0.05).结论 ACS患者外周血中Treg比例减少及功能的降低可能破坏了外周免疫耐受的平衡,参与炎症反应激活致动脉粥样硬化发生发展这一病理过程.     

结核病患者外周血中CD4~+ CD25~+调节性T细胞水平的检测

探讨CD4~+CD25~+调节性T细胞及其转录因子Foxp3在结核病发病机制中的作用。研究对象为肺结核患者22例(病例组)以及健康对照者23例(对照组)。采用FACS检测外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的百分率,采用real-time PCR检测外周血单个核细胞Foxp3mRNA的表达以及CD4~+CD25~+调节性T细胞与CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、IFN-γ和IL-4的相关性。结核病患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞占CD4~+T细胞的百分率,病例组(3.38±1.23)%高于对照组(1.97±0.62)%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。血清单个核细胞Foxp3 mRNA相对表达水平为134.54±6.76,高于对照组(40.98±2.34,P0.05)。CD4~+CD25~+调节性T细胞与CD4~+T细胞、CD8~+T细胞以及与IFN-γ和IL-4的表达呈负相关。结核病CD4~+CD25~+调节性T细胞数量增加、特异性转录因子Foxp3 mRNA表达上升,由此引发的免疫抑制效应可能是结核病发生发展的重要原因之一。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞和肿瘤免疫

近期研究发现一个有独特免疫调节功能的T细胞亚群 :CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞 ,不仅能抑制自身免疫性疾病发生 ,还可能参与肿瘤免疫的调节。这群细胞具有免疫无能和免疫抑制特性 ,通过与细胞直接接触发挥作用 ,而不依赖于其分泌的细胞因子。肿瘤环境中CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞比例增加 ,导致肿瘤免疫失调 ,去除这群细胞可有效诱导肿瘤免疫 ,为肿瘤治疗提供了一种新的方法。     

风湿性心脏病患者的CD4~+CD25~+调节性T细胞及细胞因子的改变及意义

目的:探讨相较于正常人,风湿性心脏病(RHD)患者的血液细胞因子及CD4+CD25+调节性T细胞的改变及意义。方法:分析2012年4月至2013年7月在我院接受住院治疗的RHD患者(观察组)的临床资料,对照组是从我院体检中心选取的健康体检人员,对两组研究对象外周血标本中的转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素6(IL-6)及CD4+CD25+调节性T细胞表达水平进行检测和比较。结果:本研究共纳入受试者76例,其中观察组患者40例,对照组36例。观察组患者的CD4+CD25+T占淋巴细胞比例(t=17.37,P0.01)、CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T比例(t=9.224,P0.01)均显著低于对照组;观察组患者的TGF-β1(t=9.036,P0.01)、IL-10(t=12.11,P0.01)均显著低于对照组,而TNF-α(t=2.331,P=0.013)、IL-6(t=2.239,P0.01)水平则高于对照组,差异均有统计学意义。结论:RHD患者CD4+CD25+调节性T细胞水平明显降低,血液细胞因子如TGF-β1和IL-10也相应地出现下降。     

天然CD4~+CD25~+调节性T细胞在胸腺中发育的研究进展

天然CD4+CD25+调节性T细胞是CD4+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的重要功能亚群,其主要在胸腺中发育成熟,对维持自身免疫耐受具有重要意义。新近研究显示,胸腺微环境中多种分子和相关信号途径在天然CD4+CD25+调节性T细胞的发育中具有重要作用,这不仅促进了人们对天然CD4+CD25+调节性T细胞的认识,而且对于机体免疫耐受机制的探讨均具有重要意义。本文就其相关研究进展做一综述。     

重症肌无力患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及意义

研究CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞在重症肌无力 (MG )发病中的作用。本文采用三色流式细胞术对 2 9例MG患者和 2 3例健康对照者外周血中CD4 + CD2 5 + T细胞 (CD3+ CD4 + CD2 5 + )的百分率进行测定。结果显示病情未能很好控制的MG患者外周血CD4 + CD2 5 + T细胞比率略低于健康对照组 (分别为 3 79%± 1 4 0 %、 4 5 3%± 0 96 % ,P =0 12 ) ,病情稳定或缓解的MG患者CD4 + CD2 5 + T细胞比率 (8 4 5 %± 1 96 % )显著高于健康对照组 (P =0 0 0 0 1) ;胸腺切除的MG患者CD4 + CD2 5 + T细胞比率 (8 4 4 %± 2 39% )显著高于非胸腺切除的MG患者 (5 88%± 2 89% ,P =0 0 38)和健康对照组 (4 5 3%± 0 96 % ,P =0 0 0 3)。提示MG患者外周血中存在异常比例的CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞 ,可能参与疾病的发生与发展。     

Foxp3和CD4+CD25+调节性T细胞研究进展

调节性T细胞是机体维持自身耐受的重要组成部分,其对免疫反应具有抑制效应,在体外增殖能力低,在免疫病理、移植物耐受、阻止自身免疫反应和维持机体免疫平衡方面都有一定作用.最近发现Foxp3在调控调节性T细胞的一重要亚群CD4+CD25+T细胞的发育上起很重要的作用.本文就CD4+CD25+T细胞特性、Foxp3在其发育和功能发挥中的作用以及其活性调节方面作一综述.     

CD4+CD25+调节性T细胞研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞是调节性T细胞的亚群之一,主要来源于胸腺,具有多种独特的特征,包括可识别自身抗原肽、分泌抑制性细胞因子等.其功能是通过抑制自身反应性T细胞的免疫反应、抑制传统T细胞的活化以及促进一些抑制性细胞因子的分泌等,在维持机体内环境的稳定、肿瘤免疫监测、诱导移植耐受以及自身免疫性疾病的发生中发挥重要作用.     

人早孕期外周及蜕膜CD4~+CD25~+调节性T细胞变化

正常生理妊娠类似于同种异体移植,妊娠的维持有赖于母-胎免疫耐受的形成,妊娠失败也多因母体对胚胎的免疫排斥所致。CD4+CD25+调节性T细胞是一群重要的具有免疫抑制功能的T细胞亚群。研究证实,该类细胞抑制CD4+CD8+T细胞活化及增殖,它在防止自身免疫性疾病的发生、诱导移植耐受等方面发挥重要的作用[1～4],但有关其在人母-胎免疫调节中的作用尚缺乏系统研究。为探讨调节性T细胞在人母-胎免疫调节中的作用,本研究采用流式细胞术分别对正常生育期妇女黄体期外周血、正常人早孕期外周血及蜕膜淋巴细胞CD4+CD25+T细胞进行了分析研究。1材…     

CD4+CD25+调节性T细胞与肿瘤免疫

CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)是维持机体免疫耐受的一种重要因素。它组成性表达IL-2受体α链(CD25),主要的功能是抑制自身反应性T细胞的活化和功能,调节机体对抗原的免疫应答,从而使机体避免发生自身免疫病。近年来研究表明,Treg也可能通过相同的机制削弱机体的抗肿瘤效应。Treg介导的免疫抑制是肿瘤逃逸的原因之一。针对Treg进行肿瘤免疫治疗是一项可行的策略。     

CD4+CD25+Treg在急性淋巴细胞白血病患者外周血中的表达及其体外实验研究

目的初步探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatory T cells,CD4 CD25 Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 Treg。方法①采用流式细胞术分别检测ALL初诊组、化疗完全缓解或部分缓解组及正常对照组外周血中CD4 CD25 T细胞所占比例,然后通过荧光定量RT-PCR检测各组外周血中转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并逐层分析比较。②采集正常人外周血单个核细胞后,对照组用正常人血清,实验组用患者血清并分别设浓度梯度进行培养,72h后采用流式细胞术、荧光定量RT-PCR分别检测CD4 CD25 T细胞和Foxp3mRNA表达。结果ALL化疗缓解组CD4 CD25 T细胞及Foxp3mRNA表达水平均明显高于ALL初诊组和正常对照组(P<0.05),后两者之间CD4 CD25 T细胞水平无统计学差异(P>0.05),但ALL初诊组Foxp3mRNA含量较正常对照组明显升高(P<0.01),差异具有统计学意义;并且血清培养对照组CD4 CD25 T细胞水平及Foxp3mRNA含量均明显低于实验组(P<0.05),且其表达并不随血清浓度的增加而升高。结论CD4 CD25 Foxp3 Treg在ALL初诊组及化疗缓解组患者外周血中比例明显升高,且初步表明患者血清中的可溶性物质可诱导外周血CD4 CD25 T细胞转化为CD4 CD25 Treg,提示CD4 CD25 Treg可能是ALL免疫抑制的一个重要原因。     

CD4+CD25+免疫调节性T细胞对CD4+T细胞介导的移植物抗宿主病预防作用的研究

目的研究CD4+CD25+免疫调节性T(Treg)细胞在小鼠骨髓移植后,对移植物抗宿主病的预防作用及其作用机制.方法用C3H(H-2k)小鼠骨髓作为供体,提取C3H(H-2k)小鼠CD4+T及CD4+CD25+T细胞,C3H×B6(H-2k/b)F1小鼠为骨髓移植的受者.在受者接受致死量全身放射后,输注供者去除T细胞的骨髓(ATBM),使其造血功能重建(ATBM组).于不同的实验组给予CD4+(CD4组)T细胞,CD4+CD25+T(CD25组)或二者同时输注(CD4/CD25组).观察各组小鼠移植物抗宿主病(GVHD)的发生率.结果所有10只ATBM组小鼠至骨髓移植后60天仍全部存活,无GVHD发生;所有10只CD4组小鼠在骨髓移植10天内全部死于GVHD(P＜0.01);所有5只CD25组小鼠于骨髓移植后60天仍全部存活,无明显GVHD发生(P＞0.05);同样,所有6只CD4/CD25组小鼠至骨髓移植后仍全部存活,无明显GVHD发生(P＞0.05).结论在同种异基因小鼠的骨髓移植模型中,CD4+CD25+T不诱导GVHD的发生,并有预防CD4+T细胞介导的GVHD发生的作用.     

人CD4~+CD25~+调节性T细胞体外扩增研究

目的:建立有效的体外培养扩增人CD4+CD25+Treg细胞的体系,为临床输注供者来源的CD4+CD25+细胞抑制急性移植物抗宿主病(Auctegraft versus host disease,aGVHD)提供实验基础。方法:用免疫磁珠分选法从健康人外周血淋巴细胞中得到CD4+T细胞、CD4+CD25-T细胞和CD4+CD25+Treg细胞。分别进行长期培养、扩增;流式分析其表型及FOXP3表达,MTT法检测体外扩增的CD4+CD25+Treg对自体和异体的CD4+T细胞增殖的抑制作用。结果:经过3周培养,三组细胞均有明显的扩增。磁珠分选后的CD4+CD25+Treg细胞的扩增倍数为(20±8)倍,细胞纯度由89.28%±2.43%下降到76.36%±2.38%。CD4+CD25-T细胞组扩增迅速,倍数为(110±21)倍,并且CD4+CD25+Treg细胞的比例由培养前0.55%±0.27%增加到53.73%±3.81%。CD4+T细胞组扩增倍数为(89±8)倍,并且CD4+CD25+Treg细胞的比例由10.63%±3.87%增加到70.93%±1.71%。体外抑制实验显示体外扩增的CD4+CD25+T细胞对自体和异体的CD4+T细胞增殖均有明显的抑制作用,并且随着效靶比浓度的降低而降低。而且其各浓度梯度的抑制作用在自体和异体之间无明显的差异。结论:我们在体外成功扩增了CD4+CD25+Treg细胞,并且具有免疫抑制功能,其中CD4+T细胞组扩增倍数大,细胞数量多,细胞纯度有很大提高,方法简便,有望应用于临床试验。     

Correlation between recent thymic emigrants and CD31+ (PECAM-1) CD4+ T cells in normal individuals during aging and in lymphopenic children

CD31(+)CD45RA(+)RO(-) lymphocytes contain high numbers of T cell receptor circle (TREC)-bearing T cells; however, the correlation between CD31(+)CD4(+) lymphocytes and TREC during aging and under lymphopenic conditions has not yet been sufficiently investigated. We analyzed TREC, telomere length and telomerase activity within sorted CD31(+) and CD31(-) CD4(+) lymphocytes in healthy individuals from birth to old age. Sorted CD31(+)CD45RA(+)RO(-) naive CD4(+) lymphocytes contained high TREC numbers, whereas CD31(+)CD45RA(-)RO(+) cells (comprising < or =5% of CD4(+) cells during aging) did not contain TREC. CD31(+) overall CD4(+) cells remained TREC rich despite an age-related tenfold reduction from neonatal (100 : 1000) to old age (10 : 1000). Besides a high TREC content, CD31(+)CD45RA(+)RO(-)CD4(+) cells exhibited significantly longer telomeres and higher telomerase activity than CD31(-)CD45RA(+)RO(-)CD4(+) cells, suggesting that CD31(+)CD45RA(+)RO(-)CD4(+) cells represent a distinct population of naive T cells with particularly low replicative history. To analyze the value of CD31 in lymphopenic conditions, we investigated six children after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). Reemerging overall CD4(+) as well as naive CD45RA(+)RO(-)CD4(+) cells predominantly expressed CD31 and correlated well with the recurrence of TREC 5-12 months after HSCT. Irrespective of limitations in the elderly, CD31 is an appropriate marker to monitor TREC-rich lymphocytes essentially in lymphopenic children after HSCT.     

不同原位肝移植模型大鼠的CD4~+CD25~+调节性T细胞数量变化的研究

目的建立稳定的大鼠原位肝移植模型,并检测大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)比例的变化。方法采用近交系成年雄性BN、LEW大鼠,改良"二袖套"法建立肝移植模型31例。术前随机分为3组:排斥组(LEW→BN,n=9),耐受组(BN→LEW,n=11),同基因组(BN→BN,n=11)。存活的受体分别于术后5 d、10 d、30 d取外周血,分离外周血中的单个核细胞,由流式细胞仪检测CD4+CD25+Treg比例。并于相应时间点每组随机各处死2只,取肝脏标本观察病理学变化。每组选取5例来观察生存期,存活>100 d时各处死2只,取肝脏标本。结果中位生存期:排斥组14 d,耐受组112 d,同基因组129 d。耐受组与同基因组术后未见明显排斥反应。术后7 d,排斥组肝脏病理Banff评分Ⅲ级。肝移植早期,排斥组和自发耐受组的外周血中CD4+CD25+Treg比例均增加,术后10 d耐受组CD4+CD25+Treg比例明显高于同基因组(P<0.01)。术后30 d,耐受组CD4+CD25+Treg比例仍维持在较高水平。结论 BN与LEW大鼠组合可建立稳定可靠的急性排斥模型与自发耐受模型。CD4+CD25+Treg可能参与自发免疫耐受的形成。     

CD4+CD25+调节性T细胞的发育与胸腺CD4-CD25+细胞关联性的探讨

目的:探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatoryTcells,CD4 CD25 Tr)的发育及其与胸腺CD4-CD25 细胞的关系。方法:以流式细胞术检测小鼠从出生至发育成熟过程中,胸腺、脾脏、淋巴结和外周血中CD4 CD25 Tr比例变化,以及胸腺CD4-CD25 细胞比例变化;通过磁激活细胞分选(MACS)从小鼠淋巴结纯化CD4 CD25 T和CD4 CD25-T细胞,经CFDA-SE标记,以多种刺激形式诱导增殖。结果:小鼠出生1d到10周的发育过程中,胸腺CD4 CD25 Tr比例一直比较恒定,但在脾脏、淋巴结和外周血,随鼠龄增加而不断升高,从1d龄到1周时升高最迅速,其后的升高速度逐渐减慢,10周龄时达平台期。胸腺中CD4-CD25 细胞在出生1d的小鼠比例非常高,1d龄到1周龄期间迅速下降,10周龄时达平台期。ConA不能诱导CD4 CD25 Tr和CD4 CD25-T细胞增殖,但CD4 CD25 Tr出现一过性细胞增大;佛波醇酯加离子霉素能诱导CD4 CD25 Tr和CD4 CD25-T细胞增殖;包被的抗CD3抗体加可溶性抗CD28抗体能刺激CD4 CD25-T细胞增殖,但CD4 CD25 Tr不增殖,加入高浓度IL-2,CD4 CD25-T细胞增殖更强,CD4 CD25 Tr出现增殖。结论:胸腺CD4-CD25 细胞很有可能是CD4 CD25 Tr的前体。     

天然CD4+CD25+Treg细胞的研究进展

天然CD4+ CD25+ Treg细胞在针对自身抗原和外来抗原的免疫应答中起关键控制作用,其缺乏或功能性的缺陷将导致多重病理性的失调.本文就近年在其产生、作用机制以及与免疫耐受的诱导关系等方面的研究进展进行了综述.     

小鼠脾细胞CD4+CD25+调节性T细胞的表型特征

观察CD4+CD25+T和CD4+CD25-T细胞的表型和细胞因子的表达。自小鼠脾脏制备单个细胞悬液,分离CD4+T细胞、CD4+CD25+和CD4+CD25-T细胞,进行细胞表面标记,激活后进行细胞内细胞因子染色,利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析细胞表面分子、转录因子和细胞因子表达之间的关系。结果:在CD4+T细胞中,约有7.8%的细胞同时表达CD25分子。与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+T细胞CD44的表达略有增加,CD45RB的表达明显下降,CTLA-4和Foxp3明显增加。以同时表达CTLA-4和Foxp3的细胞为主,其次为单独表达Foxp3的细胞。细胞因子的研究结果表明,与CD4+CD25-T细胞相比,CD4+CD25+T细胞IL-2、IFN-γ明显减少,而只产生IL-10的细胞略有增加。CD4+CD25+调节性T细胞无论在表型、转录因子的表达以及细胞因子表达方面均于非调节性T细胞不同。     

脐血CD4~+CD45~+调节性T细胞体外扩增及其抑制复发性流产患者免疫细胞功能研究

目的:建立有效的脐血CD4+CD45+调节性T(Treg)细胞体外培养体系,探讨其对复发性流产患者免疫细胞功能的抑制作用,为开发新的复发性流产免疫治疗方法奠定实验基础。方法:应用免疫磁珠分选法从脐血淋巴细胞中获得Treg细胞,体外进行长期培养、扩增,分别应用MTT法和51Cr释放法检测扩增后的Treg细胞对复发性流产患者效应T细胞和NK细胞功能的抑制作用;ELISA法检测Treg对复发性流产外周血Th1/Th2细胞因子的影响。结果:经过5、15、25天培养,Treg细胞的扩增倍数分别为(6.5±0.6)倍、(18.2±2.5)倍和(52.7±4.8)倍,Treg细胞的纯度分别为(93.2±3.4)%、(88.6±2.9)%和(81.9±3.3)%。培养25天后的脐血Treg细胞对复发性流产的CD4+CD25-效应T细胞和NK细胞杀伤活性具有明显抑制作用,能使外周血中IFNγ-水平下降,IL-10水平升高。结论:培养扩增后Treg细胞能在体外有效抑制复发性流产患者外周血免疫细胞功能,并能使外周Th1型细胞因子水平下降,Th2型细胞因子水平升高。