银屑病患者细胞因子γ-干扰素、白介素4水平的体外研究

为研究细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)在银屑病发病机制中的作用及其与(PASI银屑病皮损严重指数)和病程的关系,分离银屑病患者和正常人外周血T细胞,经伊屋诺霉素(ionomycin)和佛波酯(phorbolester)刺激后用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测其培养上清中IFN-γ、IL-4水平;用PASI评价银屑病患者病情活动程度。结果:银屑病组IFN-γ水平明显高于正常对照组(P<0.001),IL-4水平组间无差异(P>0.05);IFN-γ含量与PASI成正相关,而与病程无明显关系;IL-4与PASI和病程均无明显关系。表明IFN-γ与银屑病免疫病理变化有密切关系,可作为评价银屑病患者病情活动程度的参考指标。     

311nm中波紫外线调节B16黑素瘤细胞树突生成的研究

目的 探讨311 nm中波紫外线通过Rho家族小GTP酶对B16小鼠黑素瘤细胞树突生成的影响.方法 用相差显微镜和激光共聚焦显微镜分别观察311 nm中波紫外线照射后对B16黑素瘤细胞的树突变化和细胞骨架蛋白F-肌动蛋白的影响;用Pull down方法检测311 nm中波紫外线照射前及照射后不同时间点(15、30、60和120 min)B16黑素瘤细胞GTP-RhoA和GTP-Racl蛋白的表达情况.结果 311 nm中波紫外线100 mJ/cm2照射后24 h,B16黑素瘤细胞呈现胞体增大近似球状,树突明显增多似树枝,与未照光细胞比较树突数量明显增多(P＜0.01);而未照光细胞的树突仅表现为双极或三极,细胞分叉不明显.激光共聚焦显微镜显示,311 nm中波紫外线100 mJ/cm2照射前,B16黑素瘤细胞内张力纤维纹理清晰,照射后30 min和60 min细胞内张力纤维解聚、断裂,纹理欠清晰,在照射后6 h时张力纤维纹理模糊,呈团块状.Pull down结果显示,311 nm中波紫外线100 mJ/cm2照射后15 min和30 min,B16黑素瘤细胞GTP-Racl蛋白的表达逐渐升高,在30 min时表达是照射前的2倍多,随后略有下降,但在照射后60 min和120 min时表达仍高于对照组;而GTP-RhoA蛋白在照射后略有下降,而后逐渐升高,在照射后120 min时升高到照射前的1.6倍.结论 311 nm中波紫外线可通过活化Racl促B16黑素瘤细胞树突生成.     

γ-干扰素诱导银屑病皮损角质形成细胞MAPK活性的研究

目的研究γ-干扰素(IFN-γ)诱导银屑病皮损角质形成细胞的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性,以及MAPK在银屑病发病中的意义。方法在培养的银屑病患者及正常人角质形成细胞中加入IFN-γ、genistein及二甲基亚砜(DMSO)进行刺激,检测MAPK的活性。结果银屑病皮损角质形成细胞中MAPK活性较正常人高,且在IFN-γ的刺激下活性均增加,而加入genistein时两组MAPK活性明显下降,两组接受IFN-γ、genistein刺激后,MAPK活性变化的比较差异有统计学意义(P0.01)。结论 IFN-γ对银屑病角质形成细胞MAPK活性有明显促进作用。     

窄谱中波紫外线对寻常性银屑病患者血清和皮损中IFN-γ,IL-4的影响

目的研究311nm窄谱中波紫外线(NB-UVB)对寻常性银屑病患者血清和皮损中IFN-γ和IL-4的影响。方法40例寻常性银屑病患者随机分为NB-UVB和对照两组,每组20例,NB-UVB组每周光疗3次,共4周,对照组不予光疗。治疗前后分别以银屑病严重程度PASI评分标准评分,以ELISA法测定血清中IFN-γ和IL-4含量,以免疫组化方法和图像分析系统分析IFN-γ和IL-4在银屑病皮损中的表达,结果以积分光密度值(IOD值)表示。结果两组患者治疗后PASI评分均显著下降(P<0.05),且NB-UVB组低于对照组(P<0.05);血清IFN-γ水平均下降(P<0.05),而IL-4水平无明显变化;皮损中IFN-γ表达明显下降(P<0.05),且NB-UVB组低于对照组(P<0.05);IL-4水平增高(P<0.05),且NB-UVB组高于对照组(P<0.05)。结论NB-UVB可以调节寻常性银屑病血清IFN-γ水平和皮损中IFN-γ,IL-4的表达,改善患者体内Th1,Th2失衡状态达到治疗效果。     

紫外线照射对HaCaT细胞IL-12和IFN-γ受体表达的影响

目的：观察紫外线（UV）照射对HaCaT细胞起源的IL-12、IFN-γ的影响，为进一步阐述光敏性皮炎的发病机制提供依据。方法：以UVA和UVB照射人永生化表皮细胞（HaCaT打细胞），应用免疫组化SP法观察UV照射后HaCaT细胞表面IL-12、IFN-γ受体的表达情况，并以阳性细胞百分比半定量IL-12、IFN-γ在HaCaT细胞中的表达；同时应用ELISA方法检测细胞培养液中IL-12、IFN-γ的含量。结果：静息状态下，HaCaT细胞低水平表达IL-12R、IFN-γR，上清液中IL-12、IFN-γ呈低水平表达或检测不出；UV照射HaCaT细胞后12h，细胞表面IL-12R、IFN-γR及上清液中的IL-12、IFN-γ与照射前无明显差异。结论：紫外线照射后角质形成细胞产生细胞因子致T细胞亚群失衡与光敏性皮炎的相关性，有待进一步探讨。     

紫外线照射对HaCaT细胞起源的白介素10和白介素4的影响

我们以往的研究表明,UV照射对HaCaT细胞分泌Th1型细胞因子白介素12(IL-12)和干扰素-γ(IFN-γ)无明显影响.本研究在此基础上,以长波紫外线(UVA)和中波紫外线(UVB)照射人永生化表皮细胞HaCaT细胞,检测UV照射后HaCaT细胞IL-10、IL-4受体的表达情况和细胞培养液中IL-10、IL-4的含量,探讨UV照射对角质形成细胞产生Th2型细胞因子的影响及其与T细胞亚群失衡的相关性.     

白介素18和干扰素γ在生殖器疱疹感染中的意义

目的探讨白介素18(IL-18)和干扰素γ(IFN-γ)在单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染的生殖器疱疹患者发病机制中的意义。方法采用双夹心ELISA方法对43例确诊为HSV-2感染的生殖器疱疹患者外周血单一核细胞(PBMC)及血清IL-18和IFN-γ进行检测,设立健康对照组。结果HSV-2感染的生殖器疱疹患者的血清及PBMC中IL-18水平分别为(424.32±51.60)ng/L和(417.54±47.23)ng/L,均明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01);HSV-2感染者血清IFN-γ水平为(384.84±72.45)ng/L,明显高于对照组,两组差异有显著性(P<0.01);PBMCIFN-γ水平(381.62±70.45)ng/L,亦明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01);HSV-2感染生殖器疱疹患者血清IL-18和IFN-γ呈正相关(r=0.515,P<0.05);rhIL-18可诱导PBMC产生IFN-γ。结论HSV-2感染的生殖器疱疹患者体内IL-18水平升高,并与IFN-γ呈正相关,rhIL-18可刺激HSV-2感染者PBMC产生IFN-γ,IL-18具有明显的抗HSV-2感染作用,其机制可能与诱导IFN-γ产生有关。     

药物实验湿疹离体模型的初步应用

目的利用干扰素-γ(IFN-γ)与抗Fas单克隆抗体(AntiFasmab)诱导角质形成细胞凋亡,模拟湿疹样皮炎的部分发病机制作为离体实验模型,研究中药单体人参皂甙化合物Ⅰ、Ⅱ的可能治疗作用.方法将IFN-γ、AntiFasmab作用于体外培养角质形成细胞colo-16,用流式细胞仪、倒置显微镜、荧光显微镜观察colo-16细胞凋亡情况及单体人参皂甙化合物Ⅰ、Ⅱ对colo-16凋亡的抑制作用.结果①流式细胞仪检测IFN-γ对colo-16细胞Fas抗原的表达有明显的上调作用.②colo-16表面Fas抗原的表达与其凋亡呈正相关.③IFN-γ、AntiFasmab二者联合作用于colo-16可诱导细胞凋亡,镜下可见典型的细胞凋亡形态学特征.④单体人参皂甙化合物Ⅰ、Ⅱ对colo-16的凋亡有部分阻断作用.结论①IFN-γ对角质形成细胞Fas抗原的表达有上调作用.②IFN-γ、AntiFasmab共同作用可诱导角质形成细胞凋亡.③单体人参皂甙化合物Ⅰ、Ⅱ可抑制角质形成细胞凋亡.     

紫外线照射下microRNA在皮肤中的应答机制研究进展

紫外线(UV)是环境中普遍存在的致癌物,可分为:短波UVC(200～280 nm),中波UVB(280～320 nm)和长波UVA(320～400nm).皮肤常会暴露在UV中,尤其是UVA和UVB.其对皮肤的不良影响备受关注,如:红斑、老化、免疫抑制和癌症.为了对抗这些不良影响并维持染色体组的完整性,细胞发动一系列保护...     

长波紫外线防晒剂的光防护作用

紫外线是日光中的一部分,波长为180～400 nm,其可分为短波紫外线(UVC,180～290 nm)、中波紫外线(UVB,290～320 nm)和长波紫外线(UVA,320～400 nm),其中UVA又分为UVal(340～400 nm)和UVA2(320～340 nm).     

雷公藤内酯醇对HaCaT细胞IFN-γ信号转导途径的影响

目的 研究雷公藤内酯醇对人角质形成细胞永生化株HaCaT细胞中IFN-γ信号转导途径的影响。方法 不同浓度雷公藤内酯醇（10-10 ～ 10-7 mol/L）预处理HaCaT细胞2 h后,用重组人IFN-γ（rhIFN-γ,500 U/mL）刺激诱导细胞,在不同的时间收集细胞,提取细胞总蛋白,免疫印迹法检测IFN-γ信号途径中IFN-γ受体α（IFN-γRα）、磷酸化Janus激酶2（pJAK2）、细胞因子信号转导抑制因子1（SOCS1）表达情况。结果 10-8 mol/L及10-7 mol/L雷公藤内酯醇可明显抑制HaCaT细胞中IFN-γ诱导的IFN-γRα蛋白表达（P < 0.05,P < 0.05）;10-9 mol/L及10-8 mol/L雷公藤内酯醇可明显抑制IFN-γ诱导的pJAK2蛋白表达（P < 0.05,P < 0.05）。雷公藤内酯醇对IFN-γRα表达及JAK2磷酸化的抑制作用呈剂量依赖性,其半数抑制浓度（IC50值）分别为1.37 × 10-8 mol/L和2.83 × 10-9 mol/L。10-10,10-9,10-8 mol/L的雷公藤内酯醇作用HaCaT细胞2 h后可明显上调IFN-γ诱导的SOCS1蛋白表达（P < 0.05,P < 0.01,P < 0.01）,其半数有效剂量（ED50值）为3.32 × 10-11 mol/L。结论 雷公藤内酯醇可分别通过抑制HaCaT细胞中IFN-γRα表达、JAK2磷酸化以及上调SOCS1表达,从不同时相的3个环节,共同抑制HaCaT细胞中STAT-1磷酸化,从而抑制IFN-γ信号所诱导的多种炎症相关基因转录。这种抑制作用可能是雷公藤治疗银屑病等IFN-γ依赖性炎症性皮肤病有效的重要机制之一。     

角朊细胞凋亡的相关细胞因子

细胞凋亡是机体内的一种生理现象,是细胞分裂、分化的最终结局。在维持体内组织器官更新修复的平衡中起重要作用。各种体内外环境的变化都将影响细胞凋亡过程,如细胞因子具有诱导、促进和调节细胞凋亡过程。近期研究发现表皮角朊细胞凋亡与γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子β(TNF-β)、转移生长因子-β(TGF-β)等细胞因子有关。IFN-γ是由T细胞与自然杀伤细胞作用产生的,是具有多功能的淋巴因子,如抗病毒、调节细胞增殖和分化、调节免疫功能等[1]。IFN-γ与细胞表面高亲合受体结合导致特殊蛋白激酶活化、磷酸化、潜在胞质蛋白激活和γ…     

UVB下调IFN-γ诱导的正常人角质形成细胞表面抗原的表达

目的：研究中波紫外线（UVB）对IFN-γ体外诱导的正常人角质形成细胞(KC)表面抗原表达的影响及可能机制。方法：分离培养原代人KC,用适当浓度的IFN-γ对细胞进行预处理,再用生理剂量的UVB照射细胞。流式细胞术测定照射前后细胞表面CD40、CD54、MHC-II的表达,放射免疫法测定照射前后细胞上清液中α-MSH浓度,ELISA测定上清液中IL-6、IL-8、TNF-α等细胞因子浓度。结果：KC低水平表达CD40、CD54、MHC-II抗原,IFN-γ处理后,细胞活性增强,表面抗原的表达显著增加,再用UVB照射后,细胞活性下降,表面抗原表达明显下调,而上清液中α-MSH的浓度则逐渐上升,照后72 h达最高峰。KC经可溶性CD40配体(sCD40L)处理后,IL-8的释放和CD54的表达加强。结论：UVB能抑制IFN-γ诱导的KC表面抗原的表达,这可能与UVB诱导KC自分泌产生α-MSH等免疫抑制物有关。     

补肾驱白汤联合308nm准分子激光治疗白癜风及对外周血Th17细胞与相关细胞因子的影响

目的观察补肾驱白汤联合308nm准分子激光治疗稳定期白癜风的临床疗效,并分析对患者外周血Th17细胞在CD4~+T细胞中的表达率及其相关细胞因子(IFN-γ,IL-10,IL-17和IL-23)分泌的影响。方法将60例稳定期白癜风患者随机分为2组,每组30例。两组患者均采用308nm准分子激光系统进行每周2次治疗,观察组另加服补肝肾类中药协定方——补肾驱白汤,日煎1剂分早、晚2次内服。治疗12周后,分别评定2组的临床疗效。此外,采用流式细胞术分析患者治疗前后外周血Th17细胞表达率及血浆中IFN-γ,IL-10及IL-17水平变化,采用ELISA分析外周血血浆中IL-23水平变化,并与20例健康体检者的外周血标本进行比较。结果治疗12周后,观察组显效率为86.67%,对照组显效率为63.33%,差异有统计学意义(P0.05)。治疗前,两组患者外周血Th17细胞比例、IFN-γ,IL-17及IL-23水平较健康人群组有显著性增高(P0.05),血浆中IL-10水平与健康人群组比较差异无统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者血浆中IFN-γ水平均有一定下调,与健康人群组比较差异无统计学意义(P0.05);观察组外周血Th17细胞比例、血浆中IL-17和IL-23水平较对照组显著下调。结论补肾驱白汤联合308nm准分子激光治疗白癜风疗效显著,可显著降低患者外周血Th17细胞比例及相关细胞因子水平,恢复机体免疫功能平衡。     

芦荟对银屑病患者外周血单一核细胞产生干扰素-γ的影响

目的探讨芦荟对银屑病患者外周血单一核细胞(PBMCs)产生干扰素-γ(IFN-γ)的影响。方法采用双抗体夹心ELISA法,检测芦荟对银屑病患者PBMCs或Colo-16细胞培养,及对银屑病患者PBMCs和Colo-16细胞混合培养产生的IFN-γ的含量变化。结果芦荟对银屑病患者PBMCs和Colo-16细胞混合培养产生的IFN-γ含量有明显的抑制作用,P<0.01;而对银屑病患者PBMCs或Colo-16细胞培养产生的IFN-γ的含量没有抑制作用。结论芦荟在银屑病患者PBMCs和Colo-16细胞混合培养时,才能抑制IFN-γ的产生。为进一步研究芦荟外用治疗银屑病提供药理作用依据。     

斑秃患者外周血单个核细胞产生Th1/Th2细胞因子研究

目的:研究斑秃患者外周血单个核细胞产生Th1型细胞因子(如IFN-γ)和Th2型细胞因子(如IL-4、IL-10)水平,探讨其在斑秃发病中所起的作用及与病情活动性的关系。方法:采用ELISA双抗体夹心法检测36例斑秃患者(其中活动期19例、非活动期17例)和20例正常对照者外周血单个核细胞产生IFN-γ、IL-4和IL-10水平。结果:活动期斑秃患者外周血单个核细胞产生IFN-γ水平显著高于正常对照和非活动期患者(P<0.05),非活动期患者比正常对照者明显增高(P<0.05);活动期患者产生IL-4水平明显低于正常对照组(P<0.05),也低于非活动期患者,但差异无统计学意义(P>0.05),非活动期患者和正常对照组相比明显降低(P<0.05);活动期患者产生IL-10水平显著低于正常对照组和非活动期患者(P<0.05),非活动期患者与正常对照相比明显降低(P<0.05)。结论:斑秃患者体内可能存在Th1型细胞因子占优势,Th1型细胞因子如IFN-γ在斑秃的免疫发病中起到重要作用,并且与病情活动性有关联。     

窄波中波紫外线联合凉血消风汤治疗血热型寻常型银屑病的疗效观察

目的 观察NB-UVB（窄波中波紫外线）联合凉血消风汤治疗血热型寻常型银屑病的临床疗效及血清学变化.方法 将100例银屑病患者随机分为治疗组（60例）与对照组（40例）,治疗组给予窄波UVB联合凉血消风汤治疗,对照组给予窄波UVB照射治疗,2组治疗8周后进行疗效判定.结果 治疗组临床疗效明显优于对照组（P＜0.05）;治疗组血清中干扰素γ（IFN-γ）和白细胞介素2（IL-2）的表达水平较对照组明显下降（P＜0.05）.结论 窄波UVB联合凉血消风汤治疗血热型寻常型银屑病收到了良好疗效。     

系统性红斑狼疮患者外周血γ-干扰素和白介素-10阳性细胞的研究

目的：研究活动性系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中，γ-干扰素(IFN-γ)、白介素(IL)-10阳性细胞在SLE病理机制中的意义。方法：采用微量全血标记法结合胞内细胞因子标记技术，以CD4、CD8分子为T细胞表面标记，经三色流式细胞仪检测未经刺激和经刺激培养后的SLE患者外周血T细胞亚群比率。结果：SLE患者外周血的CD4^ 及CD8^ T细胞中IFN-γ^-IL-10 细胞比例均显著升高，IFN-γ^ IL-10^-细胞与IFN-γ^-1IL-10^ 细胞的比值明显降低，且IFN-γ^ IL-10^-双阳性细胞显著增多；SLE外周血的CD4^ 及CD8^ T细胞中IFN-γ^ IL-10^-细胞亚群对离子霉素刺激的反应性明显降低；肾上腺皮质类固醇治疗可以降低SLE外周血CD4^ 及CD8^ T细胞中IFN-γ^-IL-10^ 细胞亚群及CD4^ T细胞中IFN-γ^ IL-10^ 细胞亚群的比例，提高IFN-γ^ IL-10^-／IFN-γ^-IL-10^ 细胞亚群比值。结论：SLE患者体内存在明显的T细胞亚群平衡失调，表现为分泌IL-10的T细胞亚群比例增高和Tr1细胞增多、Th1／Tc1细胞对刺激的反应存在缺陷。皮质类固醇对T细胞亚群数量及比例有一定的影响。     

γ-干扰素对银屑病角质形成细胞蛋白酪氨酸激酶活性的影响

目的 研究γ-干扰素(IFN-γ)对银屑病表皮角质形成细胞蛋白酪氨酸激酶(PTK)的活性的影响,以及PTK(在银屑病发病中的意义.方法 采用无刺激或加入不同浓度IFN-γ刺激后的膜蛋白在催化γ-32P后用闪烁计数仪检测PTK活性.结果 正常表皮组织角质形成细胞膜PTK活性为(1.39±0.46)fmol/mg protein/rain、银屑病皮损为(3.36±1.29)fmol/mg protein/min,两者之间存在显著差异(P<0.01).同时,表皮角质形成细胞膜在不同浓度IFN-γ刺激后,角质形成细胞膜的PTK活性呈剂量依赖性增高,但银屑病组的反应明显高于正常人对照组.结论 银屑病皮损角质形成细胞中PTK活性较正常人为高,且在IFN-γ的刺激下活性均增加,说明IFN-γ对PTK有明显促进作用.     

干扰素联合窄谱中波紫外线治疗皮肤T细胞淋巴瘤16例

目的:观察干扰素(IFN)-α联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗皮肤T细胞淋巴瘤的临床疗效.方法:对16例皮肤T细胞淋巴瘤患者采用重组人IFN-α联合NB-UVB治疗.结果:治疗后16例患者完全缓解率为37.5%,有效率为87.5%,无明显不良反应.结论:IFN-α联合NB-UVB治疗皮肤T细胞淋巴瘤是一种安全有效的方法.