躯体和内脏感觉传入在脊神经节的汇聚及其神经肽研究

躯体和内脏感觉传入在脊神经节的汇聚及其神经肽研究黄正晖，刘才栋，彭裕文，沈馨亚（上海医科大学解剖学教研室，上海２０００３２）牵涉痛（Ｒｅｆｅｒｒｅｄｐａｉｎ）是许多疾病的一种常见症状。早在１８９３年Ｈｅａｄ［１］就曾较系统地研究了内脏器官疾患时在体表...     

大鼠脊神经节细胞周围突的分支及其向躯体与内脏的分支投射

本文用大鼠做两组实验。一组用CB-HRP注入其膀胱壁内,TMB法成色,追踪其脊神经节内的标记细胞。发现有的节细胞的周围突在节内出现分支,分二支或多支。另一组实验用荧光素双标记法,分别注射核黄和真蓝于大鼠的坐骨神经干和膀胱壁内,追踪其脊神经节内的标记细胞。结果在L_4—L_6节发现双标细胞,以L_5节最多见,双标细胞出现的比例,均占坐骨神经标记细胞总数的3％左右。结果表明少量脊神经节细胞的周围突有向躯体与内脏的分支投射。     

脊神经背根节躯体—内脏感觉汇聚神经元的定性研究——荧光素和免疫组化结合法三重标记研究

脊神经背根节中具有分支投射的感觉神经元的化学性质,至今无人报道。本实验应用荧光素双重标记结合免疫细胞化学技术,研究脊神经背根节感觉神经元周围突的分支投射及其可能释放的化学物质。将快蓝(FB)注入大白鼠腹腔神经节。2天后,将核黄(NY)注入左侧第9～11胁间神经皮支内,经存活12小时后灌注固定,取左侧胸_(9～11)脊神经背根节,恒冷箱切片(厚20μm)。在配有EF-D型落     

躯体和内脏SP能初级传入神经元的定位研究

本文在后根节和脊髓两个水平对躯体(胫神经)和内脏(膀胱)初级传入系统进行同时定性、定位的研究。对后根节选用两种较敏感的双标技术(HRP结合PAP,Biotin-WGA结合免疫荧光)。结果表明,在后根节中被标记的胫神经和膀胱的初级传入神经元均有一部分同时显示SP样阳性反应。另外在分别切断盆内脏神经和胫神经的两组动物模型上进行脊髓的SP样免疫反应,通过两侧对比,观察到术侧灰质在相当于被切断神经的传入经路及终末区出现SP样反应的“脱落”现象,从而反证出躯体和内脏初级传入纤维中的SP能成分在中枢内的定位分布。本文首次提供了内脏初级传入在中枢内定位与定性相结合的研究结果。     

大鼠周围突向躯体和内脏分支投射的脊神经节细胞内一氧化氮和降 …

目的;寻找电刺激肋间神经调节胃功能活动的化学神经基础,材料和方法：用荧光素双标记结合还原型尼克酰胺腺苷二核酸磷酸－黄递酶（ｎｉｃｏｔｉｎ ａｍｉｄｅ ａｄｅｎｉｎｅ ｄｉｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｄｉａｐｈｏｒａｓｅ,ＮＡＤＰＨ－ｄ）组化方法和降钙素基因相关肽（ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ ｇｅｎｅ－ｒｅｌａｔｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅ,ＣＧＲＰ）免疫组化方法,观察了大鼠周围突向助间神经和胃分支     

感觉神经元的轴突分叉及其在躯体内脏相关中的作用(英文)

80年代以来已在脊髓背角鉴定出10种以上新的感觉投射神经元。所有这些神经元均以其分支的轴突或侧支轴突为特征。这些神经元的分支轴突分别向两个以上的不同核团，包括体感核和内脏感觉核投射。其中有些神经元从其所投射的中枢靶核接受躯体与内脏的传入输入，同时通过分叉初级传入从外周接受躯体与内脏的传入输入。有些外周感觉输入可首先在脊神经节神经元上会聚并被加工处理。这些发现看来是对感觉神经元单投射与单支配的传统观念的挑战并参与躯体内脏相关和有关的临床障碍。     

孤束核内儿茶酚胺能神经元汇聚内脏传入与口面部躯体伤害性信息并向臂旁核投射

为了研究内脏初级传入与口面部深层组织躯体伤害性信息是否汇聚于孤束核(NTS)中向臂旁核(PBN)投射的儿茶酚胺(CA)能神经元。本实验将SD大鼠随机分为两组。第一组动物以生物素化的葡聚糖胺(BDA)注入颈部迷走神经主干跨节追踪,四甲基罗达明(TMR)注入臂旁外侧核(LPB)逆行追踪,福尔马林刺激咬肌并行FOS的免疫荧光组织化学染色;第二组动物以BDA注入颈部迷走神经主干跨节追踪,福尔马林刺激咬肌并行FOS和酪氨酸羟化酶(TH)染色。在激光扫描共聚焦显微镜下对两组大鼠NTS内的标记细胞和纤维进行了观察。两组实验中,主要在NTS的内侧、中间内侧和连合亚核内观察到重叠分布的TMR、FOS或TH、FOS单标神经元。其中部分TMR逆行标记的或TH阳性神经元呈FOS阳性并与BDA跨节标记的纤维和终末形成紧密接触。提示大鼠NTS内的CA能神经元可能汇聚了内脏初级传入和口面部深层组织的躯体伤害性刺激信息并向LPB投射。     

大鼠周围突向躯体和内脏分支投射的脊神经节细胞内一氧化氮和降钙素基因相关肽共存

目的 :寻找电刺激肋间神经调节胃功能活动的化学神经基础。材料和方法 :用荧光素双标记结合还原型尼克酰胺腺苷二核苷酸磷酸 -黄递酶 ( nicotin amide adenine dinucleotide phosphate- diaphorase,NADPH- d)组化方法和降钙素基因相关肽 ( calcitonin gene- related peptide,CGRP)免疫组化方法 ,观察了大鼠周围突向肋间神经和胃分支投射的脊神经节细胞是否含一氧化氮 ( nitric oxide,NO)或 NO和 CGRP。结果 :分别有 2 1.6%和 11.8%的周围突向肋间神经和胃分支投射的脊神经节细胞呈 NADPH- d阳性和 NADPH- d/ CGRP阳性 ,4 7.9%的胃初级传入脊神经节细胞呈 NADPH- d/ CGRP阳性。结论 :大鼠周围突向躯体和内脏分支投射脊神经节细胞内含 NO或 NO和CGRP共存 ,NO和 CGRP还共存于内脏初级传入脊神经节细胞。     

婴儿脊神经前根中神经元的观察

本文报道在10具婴儿尸体的117条脊神经前根中,见到神经细胞1446个。其中大多数前根中含有一定数量的神经细胞。神经细胞弥散地分布于前根各处,以邻近脊神经节的前根远侧端较多,且多数以单个形式出现,也有2～3个成群排列的,偶尔还见有小神经节状的细胞集团。前根细胞的大小、形态、尼氏物质的分布,具有完整的卫星细胞包被等特点,皆类似于脊神经节细胞。两者可能属于同一范畴。就前根细胞出现的可能和意义及其来源进行了讨论。     

大鼠下丘脑弓状核神经元的神经支配

用ＨＲＰ逆行追踪和免疫细胞化学与电镜结合法研究了下丘脑弓状核神经元的神经支配。结果表明，室旁核向弓状核投射的神经元中，有一部分为催产素免疫反应阳性，一部分为后叶加压素免疫反应阳性，视上核也有部分ＯＴ免疫反应阳性神经元发出纤维投射至弓状核。将零乱毒素Ｂ亚单位结合ＨＲＰ注入第三脑室后，可见弓状核内有逆行标记细胞，电镜观察发现弓状核内的脑啡肽免疫反应阳性的树突接受ＨＲＰ反应阳性的触液神经元的轴突形成突触     

大鼠脊神经节神经元对其中枢突与外周突刺激的反应

本文应用细胞内记录技术在大鼠腰骶段脊神经节（DRG）记录到68个单位，其中对刺激坐骨神经和背根，盆神经和背根，坐骨神经、盆神经和背报以及时侧背报发生反应的单位分别为33、11、16和8个；同侧坐骨神经、盆神经和背根刺激诱发反应的传导速度分别平均为36．80±17．86m／s（x±s，下同）；36．76±17．66m／s和32．11±16．39m／s．刺激一侧背根，在对侧脊神经节记录到短、长和短长潜伏期兼有的单位分别为3、2和3个．结果提示：大鼠脊神经节神经元具有分叉的外周突和中枢突；两侧脊种经节神经元之间存在交互支配．     

识别脊神经感觉神经元单克隆抗体的制备

将脊神经感觉神经元特有的蛋白组份作为抗原,注入BABL/c小鼠腹腔中。采集经免疫的小鼠脾细胞,以聚乙二醇(PEG)为促融剂,使之与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合。应用HAT选择性培养液培养杂交瘤细胞。三周后,以ABC法检测,筛选出仅对感觉神经元起反应的Ⅱ6H杂交瘤细胞株,三次有限稀释,克隆化后,体外培养达一年之久,仍能稳定地分泌抗体。该抗体属IgG_1亚类,特异性地识别感觉神经元特有的蛋白组份。应用该单抗,可鉴别周围神经干中的感觉与运动纤维,亦可研究感觉神经的发育以及结构与功能的关系。     

躯体与内脏传入向鼠脊髓后连合核区的投射

用８只Ｗｉｓｔａｒ大白鼠，采用跨神经溃变技术，辣根过氧化物酶和牙凝集素结合辣根过氧化物酶标记法，研究了膀胱和坐骨神经初级传入纤维向脊髓Ｌ６－Ｓ２节段后连合要我的投射。在同一只鼠切断右侧坐骨神经后向膀胱注入ＨＲＰ或ＨＲＰ和ＷＧＡ－ＨＲＰ溶液。     

大鼠“延髓内脏带”向杏仁核投射的儿茶酚胺神经元对内脏伤害性…

本文通过建立ＨＲＰ逆行追踪结合抗ＦＯＳ和抗酷氨酸羟化酶（ＴＨ）的免疫组织化学三重标记技术，在延髓见到以下七种标记细胞：ＦＯＳ，ＨＲＰ，ＴＨ单标细胞，ＦＯＳ／ＨＲＰ，ＦＯＳ／ＴＨ，ＨＲＰ／ＴＨ双标细胞，ＦＯＳ／ＨＲＰ／ＴＨ三标细胞。这些细胞主要分布于延髓中、尾段由孤束核、腹外侧区以及在两者之间的网状结构共同组成的弧形带状区－“延髓内脏带”。本文结果表明大鼠“延髓内脏带”向杏仁核直接投射的儿茶酚胺能神     

人胚胎三叉神经节神经元的躯体定位

目的:应用1,1′-双十八烷-3,3,3′,3′-四甲基吲哚羰花青-高氯酸盐(DiI)追踪技术研究人胚胎发出眼神经、上颌神经及下颌神经的神经元在三叉神经节内的解剖定位.方法:对胎龄20周以上的6个胎儿标本进行灌注固定后,分别于标本的眼、上颌、下颌神经处植入DiI染色晶体.37℃恒温箱放置3个月,等待DiI染色晶体扩散,再根据神经走向切片,荧光显微镜下观察发出3支神经的神经元在三叉神经节内的解剖定位.结果:人胚胎三叉神经节是沿内外方向分布的细胞团.发出眼神经的神经元位于神经节的前内侧,下颌神经的神经元位于神经节的后外侧,上颌神经的神经元位于两者之间.结论:人胚胎发出眼神经、上颌神经及下颌神经的神经元在三叉神经节内以内外局部定位方式排列.     

个体间支配手指运动的微观神经元特征

目的 分析个体支配单个手指伸展运动的微观神经元特征,得出不同个体微观神经元特征的异同性。方法 通过盲源分离算法分解出支配不同个体在单个手指伸展时的微观运动神经元,对所得神经元进行二维空间特征量化,并利用不同个体分解出的神经元特征进行手指分类,通过特征量化和分类结果验证支配不同个体的运动神经元特征的异同性。通过共享运动神经元占比分析研究神经支配不同手指协同运动的微观神经元特性在不同个体间的差异性。结果 不同个体的食指与中指的运动神经元空间分布差异较大,激活面积相似。利用不同人群数据作为训练集和测试集进行手指分类的平均准确率为86.99%,经迁移成分分析校准后显著提高为90.07%。通过不同个体共享神经元占比分析发现,食指与其他3指(中指、无名指、小指)之间的共享神经元占比较少,而无名指与小指之间的占比最高。结论 不同个体控制不同手指的运动神经元整体的空间放电特征较为相似,存在较小的个体性差异。本研究揭示不同个体在进行手指运动时的内在神经机制,为手指运动障碍患者临床神经机制分析以及相关工程应用提供参考。     

坐骨神经损伤后脊神经节神经元凋亡的形态学观察

周围神经损伤后，神经修复困难的原因之一是一定数量的神经元胞体死亡。运用NGF可保护感觉神经元胞体免于死亡，但对于细胞死亡的性质目前尚未肯定，因而对NGF的保护机理也就不清楚。本研究通过对大鼠坐骨神经切断再吻合后，观察其脊神经节感觉神经元的胞体形态变化，认为神经元死亡的主要形式是细胞凋亡(apoptosis)。     

延髓内脏带儿茶酚胺能神经元对LPS免疫刺激的Fos表达

目的　探讨“延髓内脏带 (MVZ)至下丘脑室旁核 (PVN)”的儿茶酚胺能通路在“免疫 脑通讯”中的作用。　方法　应用WGA HRP逆行追踪与抗Fos和抗酪氨酸羟化酶 (TH)抗体双重免疫组织化学相结合的三重标记方法 ,即先将WGA HRP注入大鼠一侧PVN内 ,存活 4 8h后经腹腔注射免疫刺激剂脂多糖 (LPS)诱发免疫反应后 ,观察MVZ中WGA HRP逆标细胞、Fos蛋白和儿茶酚胺能神经元 (以TH为标记物 )的分布及表达状况。　结果　在MVZ内发现 7种阳性神经元 ,即HRP、Fos、TH单标细胞、Fos HRP、Fos TH、HRP TH双标细胞和Fos HRP TH三标细胞。Fos HRP双标记和Fos HRP TH三标记细胞分别占总HRP逆行标记细胞的 12 5 %和 39 6 %。　结论　MVZ对LPS免疫刺激起反应 ,并可能将免疫信息经儿茶酚胺能神经元上传至PVN ;MVZ可能作为“免疫 脑通讯”的一个中继站 ,通过“MVZ→PVN”通路起免疫调节作用。     

内脏传入和躯体传入在延髓孤束核区的相互作用

内脏感觉主要通过内脏大神经、迷走神经和支配腹膜壁层的躯体神经传入。我们以往的工作证明,内脏大神经的传入冲动主要投射到延髓网状巨细胞核及附近区域,同时我们还观察到部分躯体传入冲动也向该区域投