静脉注射小剂量rhTNF—α对烫伤大鼠T淋巴细胞功能的影响

将ＳＤ大鼠９０只随机分体内和体外实验组，体外实验又分为假伤，烫伤和ｒｈＴＮＦ－α治疗组，观察重组人肿瘤坏死因子－α（ｒｈＴＮＦ－α）对烫伤大鼠Ｔ淋功能的影响。结果表明，小剂量静脉注射ｒｈＴＮＦ－α可以改善烫伤大鼠脾脏Ｔ淋巴细胞亚群的分布，并使Ｔｈ／Ｔｓ比值高（Ｐ＜０．０５），Ｗ３／２５（Ｔｈ）数量增加，ＯＸ－８（Ｔｓ）数量减少；体外实验表明，ｒｈＴＮＦ－α可以改善Ｔ淋巴细胞对ＣｏｎＡ的反应能力，增     

静脉注射小剂量rhTNF-α对烫伤大鼠T淋巴细胞功能的影响

将 SD 大鼠90只随机分为体内和体外实验组,体外实验组又分为假伤、烫伤和 rhTNF-α治疗组,观察重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)对烫伤大鼠 T 淋巴细胞功能的影响。结果表明,小剂量静脉注射 rhTNF-α可以改善烫伤大鼠脾脏 T 淋巴细胞亚群的分布,并使 Th/Ts 比值升高(P<0.05)、W3/25(Th)数量增加,OX-8(Ts)数量减少;体外实验表明,rhTNF-α可以改善 T 淋巴细胞对 ConA 的反应能力,增强烫伤大鼠脾脏 T 淋巴细胞分泌 IL-2的能力,使伤后72、120和168h 的 IL-2分别较烫伤组增加108%、149%和183%(P<0.05)。rhTNF-α作用呈剂量依赖关系,小剂量(rhTNF-α≤10ng/2.5×10~6细胞)对 T 淋巴细胞体外增殖起促进作用,超过此剂量则呈抑制作用。结果提示 rhTNF-α的抗感染作用与其增强机体免疫功能有关,适当剂量的 rhTNF-α不但可以改善 T 淋巴细胞亚群的分布,而且还可增强 T 淋巴细胞免疫活性。     

严重烫伤小鼠脾脏T淋巴细胞功能受抑的胞内信号转导机制研究

目的探讨严重烧伤后小鼠脾脏T淋巴细胞功能受抑的胞内信号转导分子机制,并分析导致该改变的信号流"瓶颈".方法检测伤后早期(2～168 h)T细胞胞浆蛋白酪氨酸激酶(PTK)、蛋白激酶C(PKC)、肌醇磷脂特异性磷脂酶C(PI-PLC)的活性改变和胞浆游离钙浓度变化,观察伤后T淋巴细胞增殖转化功能及白细胞介素(IL)-2、IL-10分泌活性,分析各信号转导分子活性改变在导致伤后T细胞功能受抑中的作用.结果胞浆PI-PLC活性伤后12 h明显受抑(13.89±0.12)μmol·mg-1·min-1,对照组(16.52±0.48)μmol·mg-1·min一,差异有显著性(P＜0.05),伤后168 h恢复(15.26±0.12)μmol·mg-1·min-1;胞浆Ca2+伤后12 h明显降低(P＜0.05),显著降低持续到伤后168 h;胞浆PTK活性升高,但仅伤后12 h升高显著(34.32±4.22)pmol·mg-1·min-1(P＜0.05);PKC活性呈现先升高(2～12 h)后降低(24～168 h)的双向改变.结论PI-PLC活性受抑,胞浆游离Ca2+降低是伤后T细胞功能受抑的重要原因,胞浆PTK、PKC活性升高可能是对伤后T细胞胞外活化信号内流衰减的补偿.     

烫伤大鼠脾脏高迁移率族蛋白B1表达对调节性T淋巴细胞免疫功能的影响

目的 探讨严重烫伤大鼠延迟复苏后脾脏高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达对调节性T淋巴细胞(Treg)表型及其介导T淋巴细胞免疫功能的影响.方法 将104只Wistar大鼠按随机对照表法分为正常对照组8只、假烫组32只、烫伤组32只、丙酮酸乙酯(EP)治疗组32只.后2组大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤,伤后6 h腹腔注射林格液或EP液延迟抗休克,伤后12 h起每隔12 h给予4 mL林格液或EP液至伤后48 h;假烫组除于37℃模拟烫伤外其余处理同烫伤组.于伤后1、3、5、7 d处死各致伤组大鼠,另处死正常对照组大鼠,免疫磁珠法分离大鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg,ELISA法检测脾脏HMGBI含量及T淋巴细胞上清液中IL-2水平,采用流式细胞仪检测Treg表面分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)表达,同时检测T淋巴细胞增殖活性(数据以吸光度值表示).对数据进行多组间方差分析和2组独立样本间的t检验.结果 (1)烫伤组大鼠脾脏HMGBI含量伤后1～7 d显著高于假烫组,其中第1天达峰值[(46.7±8.3)ng/mg蛋白];EP治疗组大鼠脾脏HMGBI含量伤后1～7 d明显低于烫伤组.(2)与假烫组比较,烫伤组大鼠伤后1～5 d CTLA-4表达明显增强(t值分别为10.459、12.051、4.029,P<0.05或P<0.01);EP治疗组伤后1～7 d CTLA-4表达较烫伤组显著降低(t值分别为2.796、9.913、9.581、10.022,P<0.05或P<0.01).(3)与假烫组比较,烫伤组大鼠伤后1～7 d脾脏T淋巴细胞增殖活性明显受抑,其中伤后1 d达低谷(0.167±0.059);IL-2水平伤后1～7 d显著下降,其中伤后5 d达低谷(44±24)pg/mL.与烫伤组比较,EP治疗组伤后各时相点脾脏T淋巴细胞增殖受抑状态明显缓解,且IL-2水平明显上升.结论 严重烫伤后HMGB1产生可诱导Treg向成熟发展,从而介导T淋巴细胞增殖反应低下,免疫功能抑制.EP通过抑制HMGB1的合成与释放,改善烫伤延迟复苏大鼠的细胞免疫功能紊乱.     

大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能的改变及临床意义

目的 了解大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能的变化，探讨其与脓毒症的关系。方法 选择59例烧伤面积≥30％TBSA的患者，分为脓毒症组43例和非脓毒症组16例。采集两组患者伤后1、3、5、7、14、21、28d的外周静脉血，检测T淋巴细胞增殖能力和白细胞介素2（IL-2）的分泌水平，并行相关性分析；通过流式细胞仪检测CD3^＋／CD4^＋ T淋巴细胞的百分率及其凋亡率，并行相关性分析。结果 与非脓毒症组比较，脓毒症组患者伤后l、14、2l、28dT淋巴细胞增殖能力和IL-2的分泌水平均显著下降（P〈0．05或P〈0.01），两指标呈显著正相关（r=0．82，P〈0．01）。伤后1、5、14、21、28d，脓毒症组患者CD3^＋／CD4^＋T淋巴细胞百分率明显低于非脓毒症组，而其凋亡率呈相反趋势（P〈0.05或P〈0．01），两指标呈显著负相关（r=-0.66，P〈0．05）。结论 大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能持续处于抑制状态，T淋巴细胞凋亡参与了脓毒症细胞免疫紊乱的病理生理过程。     

加味四君子汤对烫伤大鼠T细胞亚群和免疫球蛋白的影响

Ｔ淋巴细胞既是介导细胞免疫功能的效应细胞 ,又是Ｂ淋巴细胞生成抗体的辅助细胞。严重烧伤可致机体免疫功能紊乱 ,Ｔ淋巴细胞介导的细胞免疫功能受抑现象尤为突出 ,且这一变化同伤后感染的发生密切相关。因此 ,本实验通过对烫伤大鼠早期口服中药四君子汤加味 ,观察对烧伤后外周血Ｔ淋巴细胞亚群和免疫球蛋白的影响。材　料　与　方　法1.动物模型及分组 :Ｗｉｓｔａｒ大鼠 5 0只 ,体重 2 0 0～ 2 2 0 ｇ ,雌雄不限 ,随机分为烫伤中药治疗组 (2 2只 )、烫伤对照组(2 2只 )和正常对照组 (6只 )。大鼠用质量浓度为 10 ｇ/Ｌ的戊巴比妥钠腹腔注…     

精氨酸对烫伤小鼠脾淋巴细胞功能的影响

我们以８周龄、体重２０克左右的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠为实验对象，观察正常小鼠及烫伤小鼠脾淋巴细胞经各种不同浓度精氨酸的培养液体外培养后，对ＣｏｎＡ反应性的变化，同时观察经不同含量精氨酸的饮食饲养后，烫伤小鼠脾淋巴细胞功能的变化。结果表明：小鼠脾淋巴细胞经各种不同浓度精氨酸体外培养后，对ＣｏｎＡ的反应性在一定的范围内随精氨酸浓度的递增而增加；烫伤小鼠通过不同含量精氨酸的摄入，其脾淋巴细胞对ＣｏｎＡ的反应性呈现不同的变化，其中以摄入占总卡量２％精氨酸组的淋转功能最佳。实验提示：小鼠脾淋巴细胞的功能在一定浓度范围内对精氨酸存在剂量依赖关系，淋巴细胞最佳功能的表达需要一个最合适的精氨酸浓度，烫伤后脾淋巴细胞需要更高的精氨酸浓度才能表达其最佳功能。     

精氨酸对烫伤小鼠脾淋巴细胞功能的影响

我们以8周龄、体重20克左右的 BALB/C 小鼠为实验对象,观察正常小鼠及烫伤小鼠脾淋巴细胞经各种不同浓度精氨酸的培养液体外培养后,对 ConA 反应性的变化,同时观察经不同含量精氨酸的饮食饲养后,烫伤小鼠脾淋巴细胞功能的变化。结果表明;小鼠脾淋巴细胞经各种不同浓度精氨酸体外培养后,对 ConA 的反应性在一定的范围内随精氨酸浓度的递增而增加;烫伤小鼠通过不同含量精氨酸的摄入,其脾淋巴细胞对 ConA 的反应性呈现不同的变化,其中以摄入占总卡量2%精氨酸组的淋转功能最佳。实验提示:小鼠脾淋巴细胞的功能在一定浓度范围内对精氨酸存在剂量依赖关系,淋巴细胞最佳功能的表达需要一个最合适的精氨酸浓度.烫伤后脾淋巴细胞需要更高的精氨酸浓度才能表达其最佳功能。     

细胞信号转导调控剂对严重烫伤小鼠T淋巴细胞分泌功能的影响及机制

目的观察不同信号转导调控剂对严重烫伤小鼠脾脏T淋巴细胞分泌白细胞介素(IL)2、IL-10功能的影响,并探讨其机制。方法分离正常小鼠及高压热蒸气烫伤小鼠(烧伤面积18％TBSA,Ⅲ度)伤后12、96 h的脾脏T淋巴细胞。分为正常对照组(不加T淋巴细胞活化相关信号转导分子调控剂)、调控剂组[正常细胞分别加入以下调控剂:膜蛋白激酶C(PKC)抑制剂H-7(50μmol／L,1 ml)、PKC激活剂佛波酯(TPA,30μmol／L,1 ml)、非受体型蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制剂Herbimycin(10μmol／L,1 ml)、丝裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)抑制剂PD098059(25μg／ml,1 ml)和Ca2 导入剂A23187(100 nmol/L,1 ml)]、烫伤组(不加调控剂)、烫伤 调控剂组(加入上述调控剂)。检测各组细胞IL-2、IL-10的分泌水平。结果伤后各组细胞中IL-2、IL-10含量均低于正常对照组(P<0．05或0．01);烫伤12 h H-7组、烫伤96 h H-7组分别低于烫伤12 h组和烫伤96 h组(P<0．01)。TPA能使IL-2、IL-10分泌明显升高,但对IL-2升高效能更显著。加入PD098059的各组IL-2、IL-10值均低于正常对照组(P<0．05或0．01)。Herbimycin能显著降低烫伤12 h Herbi- mycin组及烫伤96 h Herbimycin组IL-2的分泌,对IL-10亦有明显抑制。烫伤12 h A21387组中IL-2、IL-10含量为(2417±39)、(2793±25)pg／ml,烫伤96 h A21387组为(921±50)、(2633±35) pg／ml均明显高于烫伤12 h组[(1542±40)、(2390±15)pg／ml]和烫伤96 h组[(328±19)、(1618±21)pg／ml(P<0．05或0．01)]。结论PKC、Ca2 、MAPKK和PTK在严重烫伤小鼠脾脏T淋巴细胞分泌IL-2、IL-10的功能紊乱中起重要作用,其中PKC和PTK主要作用于IL-2的分泌而MAPKK影响IL-10的分泌。TPA和A21387均能显著提高烫伤后IL-2的分泌,并明显纠正伤后IL-2／IL-10分泌比值的失调。     

过氧化脂质对淋巴细胞功能影响的实验研究

体外观察了过氧化亚油酸（ＬＯＯＨ）对淋巴细胞的影响，并进一步观察烧伤后体内过氧化脂质（ＬＰＯ）水平变化及淋巴细胞功能变化，以探讨烧伤免疫抑制的机制。体外实验采用正常小鼠脾淋巴细胞与ＬＯＯＨ一起培养或温育，测定增殖反应，ＩＬ－２及ＬＰＯ。体内实验采用小鼠１１％－１２％ＴＢＳＡⅢ度烧作模型测定脾淋巴细胞功能以及血浆，肝，脾中ＬＰＯ。结果表明：ＬＯＯＨ可抑制淋巴细胞增殖反应及ＩＬ－２生成，诱发淋巴细胞脂     

精氨酸对烫伤小鼠脾淋巴细胞的影响

我们以８周龄，体重２０克左右的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠为实验对象，观察正常小鼠及烫伤小鼠脾淋巴细胞经各种不同浓度精氨酸的培养液体外培养后，对ＣｏｎＡ反应性的变化，同时观察经不同含量精氨酸的饮食饲养后，烫伤小鼠脾淋巴细胞的变化。结果表明：小鼠脾淋巴细胞经各种不同浓度精氨酸体外培养后，对ＣｏｎＡ的反应性在一定的范围内随精氨酸浓度的递增而增加；烫伤小鼠通过不同含量精氨酸的摄入，其脾淋巴细胞对ＣｏｎＡ的反应性呈现     

体外循环对瓣膜替换病人T淋巴细胞免疫功能的影响

探讨体外循环对心脏瓣膜替换病人外周血Ｔ淋巴细胞免疫功能的影响。作者对９例单瓣膜替换和７例双瓣膜替换病人的Ｔ淋巴细胞亚群、ＩＬ－２诱生能力和ＳｍＩＬ－２Ｒ＋表达水平在术前和术后１、３、７、１４天进行动态检测。结果显示术后早期、ＩＬ－２和ＳｍＩＬ－２Ｒ＋值均较术前明显降低；ＩＬ－２和ＳｍＩＬ－２Ｒ＋的下降，双瓣膜替换者较单瓣膜替换者更明显；均于术后７～１４天恢复。表明体外循环能明显抑制这类手术病人的Ｔ淋巴细胞免疫功能，抑制程度与体外循环时间和输血量有关。故认为围术期应采取保护和增强病人免疫功能的综合措施。     

不同免疫调节剂对烫伤大鼠巨噬细胞功能的影响

目的 探讨不同免疫调节剂对烫伤大鼠腹腔巨噬细胞（Mφ）功能的影响。方法 应用McAb APAAP桥联酶标法、琼脂溶菌板法和MTT比色法等技术，分别测定了各组烫伤大鼠不同时相腹腔Mφ各种功能的变化。结果 ①烫伤后大鼠腹腔Mφ表面Ia抗原表达率降低，抗原提呈能力减弱，对念珠菌的噬菌率下降，溶菌酶活力减低，TNF分泌增高，且伤后第10天比第5天更明显。以上结果与正常组比较，差异有非常显著意义（P＜0．01）。②经不同免疫调节剂治疗后，各组烫伤大鼠腹腔Mφ各种功能明显改善，各项指标与未用药的对照组,差异有非常显著意义（P＜0．01）。结论 烫伤后早期腹腔注射特异性免疫核糖核酸（iRNA)可明显改善伤鼠的免疫功能。     

麻醉对T淋巴细胞亚群的影响

患者围手术期免疫功能的变化是手术创伤和麻醉共同作用的结果,手术创伤在其中发挥极为重要的作用,有资料说明麻醉对机体免疫功能的影响也不容低估。T细胞亚群是机体免疫功能的主要组成部分之一,麻醉可以影响围术期T细胞亚群的变化,现就T淋巴细胞亚群在免疫中的作用及麻醉对其影响进行综述。     

中药对受损淋巴细胞功能的调理作用

作者观察了“三七、虎杖、金银花和人参”四种中药对烧伤受损淋巴细胞功能的调理作用。结果显示，三七、虎杖和金银花能使淋巴细胞伤后低下的接受抗原信息功能提高到正常水平；三七和金银花可使受损淋巴细胞母细胞化反应恢复到正常，虎杖能提高至正常的９０％以上；三七还能使ＩＬ－２产生能力恢复至９０％以上，虎杖和金银花也能显著增强ＩＬ－２的产生。三种中药能使受损淋巴细胞抗体产生能力显著增加，但人参在烧伤早期对受损淋巴细胞功能无明显作用。     

精氨酸对烧伤病人T淋巴细胞功能的影响

我们以烧伤病人摄入占总热卡２％的精氨酸为实验组，以占总热卡２％的１４复合氨基酸液摄入为对照组，动态观察了增加精氨酸摄入对改善烧伤后Ｔ淋巴细胞功能的影响。实验结果表明：烧伤病人摄入占总热卡２％的精氨酸后，其外周血淋巴细胞对ＰＨＡ的反应性，ＣＤ４阳性细胞比例，ＣＤ４／ＣＤ８比例，白细胞介素２（ＩＬ－２）水平以及白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）的表达均较对照组有明显的提高。提示了精氨酸应该成为烧伤病人营…     

过氧化脂质对淋巴细胞功能影响的实验研究

体外观察了过氧化亚油酸（ＬＯＯＨ）对淋巴细胞的影响，并进一步观察烧伤后体内过氧化脂质（ＬＰＯ）水平变化及淋巴细胞功能变化，以探讨烧伤免疫抑制的机制。体外实验采用正常小鼠脾淋巴细胞与ＬＯＯＨ一起培养或温育，测定增殖反应、ＩＬ－２及ＬＰＯ。体内实验采用小鼠１１％～１２％ＴＢＳＡⅢ度烧伤模型测定脾淋巴细胞功能以及血浆、肝、脾中ＬＰＯ。结果表明：ＬＯＯＨ可抑制淋巴细胞增殖反应及ＩＬ－２生成、诱发淋巴细胞脂质过氧化，ＶｉｔＥ可减轻ＬＯＯＨ的这些作用；烧伤后体内ＬＰＯ水平明显升高、脾淋巴细胞增殖反应及ＩＬ－２生成明显降低，ＶｉｔＥ组或ＳＯＤ组的这些变化与正常组相比，无显著性差别。提示：烧伤后体内脂质过氧化亢进以及ＬＰＯ增多可能是烧伤免疫抑制的机制之一。     

过氧化脂质对淋巴细胞功能影响的实验研究

体外观察了过氧化亚油酸(LOOH)对淋巴细胞的影响,并进一步观察烧伤后体内过氧化脂质(LPO)水平变化及淋巴细胞功能变化,以探讨烧伤免疫抑制的机制。体外实验采用正常小鼠脾淋巴细胞与LOOH一起培养或温育,测定增殖反应、IL-2及LPO。体内实验采用小鼠11％～12％TBSA III度烧伤模型测定脾淋巴细胞功能以及血浆、肝、脾中LPO。结果表明:LOOH可抑制淋巴细胞增殖反应及IL-2生成、诱发淋巴细胞脂质过氧化,Vit E可减轻LOOH的这些作用;烧伤后体内LPO水平明显升高、脾淋巴细胞增殖反应及IL-2生成明显降低,Vit E组或SOD组的这些变化与正常组相比,无显著性差别。提示:烧伤后体内脂质过氧化亢进以及LPO增多可能是烧伤免疫抑制的机制之一。     

体外循环对T淋巴细胞细胞免疫功能的影响

目的观察体外循环（CPB）对T淋巴细胞细胞免疫功能的影响，以探讨CPB致机体免疫功能失调的内在机制。方法在我科2006年3～9月收治的500例手术患者中，随机抽取30例在CPB下行二尖瓣置换术的风湿性心瓣膜病患者为CPB组；30例动脉导管未闭在非CPB下行动脉导管结扎术患者为非CPB组。于术前、停机前或手术结束时、术后24h取血分离T淋巴细胞，对T淋巴细胞的数量、凋亡、细胞杀伤能力进行检测。结果停机前CPB组T淋巴细胞计数较术前减少（50．9％±6．8％VS．58．5％±9．1％，P〈0．05）；停机前和术后24hT淋巴细胞凋亡率较术前升高（6．5％±2．2％VS．0．9％±1．1％，5．6％±1．8％VS．0．9％±1．1％；P〈0．01）；停机前和术后24hT淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤能力较术前降低（30．4％±6．0％VS．37．3％±8．6％，29．0％±4．9％VS．37．3％±8．6％；P〈0．05）。停机前CPB组T淋巴细胞对肿瘤细胞杀伤能力明显低于非CPB组（30．4％±6．0％VS．33．6％±5．3％，P〈0．05）。结论CPB可抑制T淋巴细胞的细胞免疫功能，CPB过程中机体处于短暂的免疫抑制状态。     

不同免疫调节剂对烫伤大鼠巨噬细胞功能的影响

目的探讨不同免疫调节剂对烫伤大鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)功能的影响。方法应用 McAb APAAP 桥联酶标法、琼脂溶菌板法和 MTT 比色法等技术,分别测定了各组烫伤大鼠不同时相腹腔 Mφ各种功能的变化。结果①烫伤后大鼠腹腔 Mφ表面 Ia 抗原表达率降低,抗原提呈能力减弱,对念珠菌的噬菌率下降,溶菌酶活力减低,TNF 分泌增高,且伤后第10天比第5天更明显。以上结果与正常组比较,差异有非常显著意义(P<0.01)。②经不同免疫调节剂治疗后,各组烫伤大鼠腹腔 Mφ各种功能明显改善,各项指标与未用药的对照组比较,差异有非常显著意义(P<0.01)。结论烫伤后早期腹腔注射特异性免疫核糖核酸(iRNA)可明显改善伤鼠的免疫功能。