促凋亡基因 puma 的研究进展

 p53 上调节的细胞凋亡调控因子（p53 up-regulated modulator of apoptosis，PUMA）是 2001 年由 Yu 等^[1]和 Nakano 等^[2] 2 个独立研究小组同时发现的，是 Bcl-2 蛋白家族的促凋亡成员之一，具有强大的促凋亡作用，可被内、外源性 p53 快速诱导活化。PUMA 基因定位于 19q，cDNA 全长 1.9 kb，转录本由 4 个外显子（1a、2、3、4）组成，编码 1 个由 193 个氨基酸组成的蛋白，该蛋白定位于线粒体膜上。Bcl-2 蛋白家族中促凋亡蛋白的共同点是都含有 1 个由 9 个氨基酸（LRRMADDLN）组成的 BH3 保守结构域。其中 PUMA 与 Bik、Bad、Bid、Bim、Hrk/DP5 及线虫 Eg-1 等促凋亡蛋白，都只存在 1 个 BH3（Bcl-2 homology3）结构域，统称为 BH3 仅有蛋白。从秀丽隐杆线虫到小鼠的程序性细胞死亡的遗传学研究显示，BH3 仅有蛋白是程序性细胞死亡的重要启动因子，BH3 仅有蛋白通过其 BH3 结构域与 Bcl-2 蛋白家族中的抑凋亡蛋白表面的沟槽相互作用从而启动凋亡，提示 BH3 结构域对 BH3 仅有蛋白与 Bcl-2 等抑凋亡蛋白结合并启动凋亡起着至关重要的作用^[3]。PUMA 的 BH3 结构域位于其氨基酸序列的第 141 ~ 149 位，缺少此结构域的 puma 突变体也将丧失诱导凋亡的功能^[4]。近年来，PUMA 的诱导凋亡作用与肿瘤的相关性研究成为热点，本文仅就 PUMA 的促凋亡作用在肿瘤研究中的应用进行综述。......     

肿瘤发生的催化分子--肽基脯氨酰顺反异构酶Pin1

Pin1是一独特的肽基脯氨酰顺反异构酶,它专一性催化已磷酸化的丝/苏-脯氨酰顺/反异构,导致功能改变.这种构型转变是新发现的蛋白磷酸化后调节机制,主要关系到细胞增殖和转化.研究表明,Pin1在人类多种肿瘤中过表达,可加强和催化多种致癌信号,被称为肿瘤发生发展的催化分子.     

免疫酶技术在修饰的安卡拉痘苗病毒感染性滴度检测中的应用

 修饰的安卡拉痘苗（modified vaccinia Ankara，MVA）是MVA病毒在原代鸡胚成纤维细胞（CEF）中经过一系列的传代得到^[1]，在人体内可以表达 MVA 病毒蛋白及其携带的外源基因蛋白，但却不形成完整的病毒颗粒，为人体内复制缺陷性病毒^[2]，安全性好，即使在免疫功能缺陷病人和免疫抑制的恒河猴体内也未显示出明显的副作用^[3]。近年来，重组 MVA 病毒广泛地用于预防性疫苗和感染性疾病、癌症治疗的基础与临床研究^[4]，其中以 MVA 病毒作为载体的疫苗是最有希望用于预防人类艾滋病的活载体疫苗之一^[5]。由于 MVA 病毒本身的繁殖特点，其滴度的检测不适合采用常规的蚀斑法进行^[6]；而常规微量细胞病变（cytopathic effect，CPE）法相对耗时，对细胞培养要求高，往往受到主观因素的影响，因而不稳定且精确度降低^[7]，给检测工作带来不便。上世纪 90 年代初 Usuba 等^[8]建立了免疫酶技术测定流感病毒感染性滴度的方法，较常规方法省时、结果准确﹑重复性好。我们就免疫酶技术在 MVA 病毒感染性滴度检测中的适用性进行了探讨，旨在建立一种准确、快速的 MVA 病毒感染性滴度检测方法。......     

Wnt/β-catenin 信号通路在肿瘤干细胞中作用研究进展

 Wnt 信号通路是调控细胞生长、运动和分化的关键途径，在胚胎和器官发育以及维持干细胞的自我更新方面起重要作用。近年来的研究表明^[1]，Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的不恰当激活，参与了肿瘤的发生及其侵袭转移的过程，而且还与肿瘤干细胞（tumor stem cells，TSC）的关系密切，该通路可能通过作用于TSC而引起肿瘤产生耐受及复发，作用机制与其作用于干细胞的机制类似，从而为肿瘤的治疗提供了新的突破口。本文就 Wnt 通路中最为常见的 Wnt/β-catenin 信号通路在干细胞、肿瘤和 TSC 中作用的研究现状做一简要概述。......     

威麦宁对小鼠Lewis肺癌细胞周期的影响(英)

目的：探讨威麦宁对小鼠Lewis肺癌的抑制作用，并检测其对细胞周期的影响。 方法:采用流式细胞术分析、免疫组化法检测药物对模型鼠肿瘤细胞周期及对cyclin D1表达的影响。 结果:威麦宁浓度在100 mg·kg^-1·d^-1、150 mg·kg^-1·d^-1、200 mg·kg^-1·d^-1、250 mg·kg^-1·d^-1时，对小鼠Lewis肺癌的抑制率分别为19.14%、33.59%、40.63%、51.56%, 药物对肿瘤的抑制作用具有剂量依赖性；该药物可将肿瘤细胞阻滞在G₀-G₁期，并降低肿瘤细胞cyclin D1的表达（P<0.01）。 结论:威麦宁对小鼠Lewis肺癌抑制作用的机制之一可能是通过降低肿瘤细胞cyclin D1的表达，将肿瘤细胞阻止于G₀-G₁期，使细胞不能进入S期进行DNA复制，从而抑制肿瘤的生长。     

C-Jun 氨基端激酶与胰岛素抵抗

 C-Jun 氨基端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK），又称应激活化蛋白激酶（stress-activated protein kinase，SAPK），是在哺乳动物体内发现的第 3 类促分裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）的家族成员之一^[1]。JNK 广泛参与胚胎发育、细胞分化和凋亡、免疫反应以及胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）等多种生理病理过程。JNK 蛋白可由 Jnk1、Jnk2、Jnk3 等 3 个基因编码，其中 Jnk1 基因和 Jnk2 基因在全身各组织中广泛表达，Jnk3 基因则选择性地在脑、心脏、睾丸组织中表达。Jnk 基因通过选择性剪接可表达 10 种不同形式的 JNK 蛋白，这些蛋白按其相对分子质量的不同可分为 46 000 亚型和 54 000 亚型^[2]。哺乳动物的单基因敲除实验表明，Jnk1 基因和 Jnk2 基因在多数情况下能够进行功能互补，同时又具有各自特定的生理功能，其中 Jnk1 基因在 IR 及胰腺 β 细胞功能衰竭的发生发展过程中发挥着重要的调节作用^[3]。进一步的研究还表明选择性地抑制 JNK 的活化将可能为糖尿病的治疗提供一个新途径^[4]。结合近年来相关文献，本文就 JNK 与 IR 关系的研究进展进行简要综述。。。。。。     

生长因子微囊化缓释制剂研究进展

 生长因子是由多种细胞分泌的通过细胞间信号传递影响细胞活动的一类多功能调节肽，具有调节细胞分裂、增殖、迁移及其基因表达等重要功能^[1]。生长因子主要通过与相应的受体结合发挥作用，在正常的生理状态下即可发挥显著的生物学效应，具有微量高效的特点。研究表明，不同生长因子联合应用可产生协同或拮抗效应，如联用血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）可明显促进血管新生^[2]，而联用转化生长因子 β1（TGF-β1）和 TNF- β1 时，TGF-β1 对细胞有丝分裂的促进作用明显降低^[3]。但生长因子还存在稳定性差、半衰期短等不足，限制了其临床应用。为此，国内外众多学者将生长因子微囊化制备成缓释制剂，提高了生长因子的稳定性，并且降低了其在体内的降解速度。例如，VEGF、神经生长因子（NGF）、胰岛素样生长因子（IGF）等生长因子微囊化缓释制剂，都取得了较好的缓释效果^[4-6]。生长因子微囊化缓释制剂的剂型主要有微球、纳米粒和由复合材料构建的缓释体系等。本文就生长因子微囊化缓释制剂的制备方法做一综述。 1 生长因子缓释微球 生长因子缓释微球是指将生长因子溶解或分散在高分子材料基质中形成的粒径为 1 ~ 250 mm 的骨架型微小球状实体，其制备方法主要有复乳液中干燥法、乳化交联法、乳化冷凝法等。......     

环孢素A结合蛋白的生物学功能

环抱素A结合蛋白（cyclophilins，CyP）是一类在生物界广泛存在、高度保守的蛋白质。它有肽基脯氨酰顺/反异构酶（peptidylprolylcis/transisomerase,PPIase）活性、核酸酶活性、分子伴侣功能以及多种细胞因子特性。这些特征决定了CyP对细胞生命活动的维持有重要作用。     

急性白血病患者bcrp、mdr-1、mrp-1和lrp耐药基因表达的临床意义

目的：定量检测急性白血病(AL) 患者乳腺癌耐药相关蛋白基因（bcrp）、多药耐药基因（mdr-1）、多药耐药相关蛋白基因（mrp-1）及肺耐药相关蛋白基因（lrp）表达及其与临床的关系。方法：应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应RT-PCR （real time fluorescent quantitative RT-PCR，FQ RT-PCR）检测105例AL 患者bcrp、mdr-1、mrp-1、lrp等基因的拷贝数,分析其与临床预后的关系。结果： AL组bcrp基因拷贝数（2.8×10³)±(8.4×10³）明显高于正常对照组（7.6×10²)±(2.3×10³）,P<0.05；mdr-1基因拷贝数（1.3×10⁵)±(2.2×10⁵）及lrp基因拷贝数（8.3×10⁵)±(1.0×10⁶）显著高于正常对照组（P<0.01）。复发组AL患者的mdr-1拷贝数（3.7×10⁴)±(1.1×10⁵）明显高于初治组患者（1.1×10⁴)±(3.6×10⁴）,P<0.05。在AL耐药组mdr-1拷贝数（2.1×10⁴)±(9.1×10⁴）明显高于敏感组（1.0×10⁴)±(3.8×10⁴）,P<0.05）。经直线相关分析显示mdr-1和mrp-1，mdr-1和lrp，mrp-1和lrp之间呈显著正相关，经等级相关分析显示mdr-1和lrp的表达与耐药性密切相关。结论：急性白血病多药耐药的出现与bcrp、mdr-1、mrp-1、lrp中一项或几项过度表达有关，mdr-1较其它基因更具有预测临床预后的意义。     

IL-1β、TNF-α和IFN-γ引起的大鼠胰岛细胞凋亡及牛磺酸的影响

目的： 观察白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和γ-干扰素（IFN-γ）引起胰岛细胞凋亡、胰岛素分泌、Bcl-xL和Bax蛋白表达变化及其牛磺酸的影响。方法： 应用体外单层培养Wistar大鼠胰岛细胞，分别检测IL-1β、TNF-α和 IFN-γ对胰岛细胞凋亡细胞百分率、DNA片段、培养液中NO^-₂/ NO^-₃含量及NOS活性、胰岛素分泌、Bcl-xL和Bax表达的影响，并进一步观察牛磺酸的作用。结果： IL-1β、TNF-α和 IFN-γ联合可诱导胰岛细胞凋亡率明显增加，DNA明显片段化，同时NO^-₂/ NO^-₃含量和NOS活性亦明显升高，胰岛素分泌明显降低, Bcl-xL表达下降和Bax表达增强（P<0.01）；牛磺酸能阻断上述细胞因子的作用（P<0.01），并有一定的剂量依赖性。结论：牛磺酸能够改善IL-1β、TNF-α和 IFN-γ诱导的胰岛细胞凋亡，其机制可能与抑制NOS活性从而减少NO的生成以及下调Bax/Bcl-xL比例有关。