胃癌病人血清中免疫抑制因子的测定

用鼠脾细胞抗羊红细胞的空斑形成试验(PEC)测定带瘤动物血清中所存在的高活性免疫抑制因子。此法测定了肺癌病人血清中的免疫抑制因子已见报道。由于此免疫抑制与肿瘤的组织分型关系不大,因此设想此测定法也可用于其他肿瘤病例。 作者等探索了胃癌病人血清中免疫抑制因子的PEC测定法。用血清对C57BL/6J小鼠作五天抑制后测定其对羊红细胞的溶血空斑反应并与对照组作显著性检验。51例未经化疗的手术前胃癌患者的测定结果,阳性抑制率为70.58％(36/51),其中Ⅰ期     

分泌抗体细胞空斑检测方法的改进

作者用一种特制的毛细微玻片代替载玻片,来进行形成空斑细胞(PFC)的检侧。这种微玻片的规格为0.22mm×4mm×10mm,其容量为88μl。使用时只需将微玻片的一端放入微孔板中配好的反应混合液内,由于毛吸作用,微玻片即可被充满。用石蜡封口,放37℃孵育1—2小时后,即可用低倍光镜或自动电子计数器计数结果。通过小鼠脾细胞PFC检侧实验表明,此方法重复性很好,与Gunningham玻片法比较,PFC/10~6脾细胞;SRBC免疫小鼠后不同时间脾细胞PFC     

抗杜氏利什曼原虫犬分离株单克隆抗体的研制及用于病犬血清循环抗原的检测

本文报道用杜氏利什曼原虫大分离株前鞭毛体膜抗原免疫BALB/c小鼠的脾细胞与Sp2/0瘤细胞融合,得到多株分泌抗体较高且稳定的细胞株。进一步筛选出McAb C11-G10-A4可用于检测病犬血清循环抗原。用McAb-AST检测采自甘肃省黑热病流行区的30份犬血清,阳性率30％。与骨髓涂片查病原体的总符合率为86.7％,阳性符合率达100％。69份非流行区对照大血清检测结果,仅1份出现阳性反应,可见本试验的敏感性较高,特异性较强(98.55％)。     

胃癌患者血清在正常淋巴细胞中诱导的抑制活性

近年来癌症患者体内的免疫调控机制,特别是患者血清的免疫抑制引起了人们越来越大的兴趣。动物实验已经证明血清中存在着一些抑制因子。作者用胃癌患者的血清成功地在正常淋巴细胞中诱导出免疫抑制细胞的作用。取不同期胃癌病人的血清与正常淋巴细胞共同温育后,这种淋巴细胞就具有免疫抑制活性,     

中药免疫调节剂对小鼠细胞免疫功能的影响

目的探讨中药免疫调节剂对正常小鼠及环磷酰胺(Cy)所致免疫抑制小鼠细胞免疫功能的影响。方法以Cy诱导建立免疫抑制小鼠模型,给正常小鼠和免疫抑制小鼠饮服中药及生理盐水,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖反应情况。结果试验各组小鼠脾细胞在48h培养时间内淋巴细胞转化率与各组含药血清加入到正常小鼠脾细胞反应体系中,在相同培养时间内的淋巴细胞转化率呈高度正相关。表现为在机体正常条件下,两个中药组与正常组之间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于Cy组(P<0.05);在免疫抑制条件下,两个中药组明显高于正常对照组和Cy组(P<0.05),且中药免疫调节剂组优于玉屏风组(P<0.05);另外,50mL/L浓度的含药血清优于100mL/L浓度的含药血清(P<0.05)。结论该中药免疫调节剂能显著促进免疫抑制小鼠淋巴细胞的转化,而对正常小鼠作用不明显。     

红花多糖的免疫活性作用

用SRBC免疫的C57BL小鼠脾脏作试验,观察到红花多糖制剂有增强免疫应答作用。动物用SRBC致敏后,连续4天分别以三种不同剂量(15、45、135毫克/公斤体重)的红花多糖制剂作腹腔注射,第5天取各鼠脾细胞做溶血空斑试验。结果表明:红花多糖均有刺激PFC的作用,其促进作用随剂量增加而明显增加,在剂量增加至135毫克/公斤时,PFC值比对照组高58％。用安配常数统计法     

抗葡萄球菌肠毒素B-McAb特性的实验研究

本文对自制两种抗葡萄球菌肠毒素B(SEB)单克隆抗体(McAb)3D6和B4的中和及逆转作用进行了鉴定,发现这两种McAb不仅对SEB刺激的小鼠脾细胞增殖有不同程度的中和作用(抑制率分别为26.1％和67.5％),而且对SEB抑制溶血空斑形成(PFC)有一定的逆转作用(逆转率分别为33.1％和59.3％)。所获结果与文献报道用抗Lyt-McAb进行排空试验分析的结果相似,提示两种抗SEB-McAb识别的SEB分子上的表位与SEB所致促分裂原活性及其抑制B细胞抗体产生功能可能有一定的关系。     

试管内诱生抗体的研究——Ⅱ.对实验条件的进一步探讨

本文对体外诱生溶血空斑形成细胞(PFC)的实验条件进行了进一步研究,包括筛选新生小牛血清、挑选绵羊红细胞(SRBC)的供羊;和诱生抗体反应的最适SRBC剂量,以及选择适合于本实验的小鼠品系。结果证明不同批的小牛血清支持PFC反应的能力及不同个体的SRBC诱生PFC反应的能力存在着差异;每毫升脾细胞培养物中加入50微升1％SRBC悬液及用615小鼠作为脾脏细胞的供体较为合适。还对贮存不同时间的SRBC和用SRBC吸收过的小牛血清进行了比较。通过选用合适的条件,能够获得稳定的实验结果和诱生出较高的PFC反应。文内分析和讨论了可能引起实验失败的原因。     

抗口腔鳞癌单克隆抗体ASC_5的制备与特异性分析

用舌鳞癌Tca8113细胞免疫BALB/c小鼠,将免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞P_3U_1进行融合,经筛选和克隆化后,获得分泌抗口腔鳞癌单克隆抗体的杂交瘤ASC_5。经ELISA检测,ASC_8单抗与Tea 8113细胞有反应,与Hela细胞有交叉反应,与肺癌、肝癌、胃癌、K_(562)细     

抗胃印戒细胞癌株KATOⅢ单克隆抗体MGb_1和MGb_2的建立及其免疫组化初步鉴定

本文用胃印戒细胞癌株KatoⅢ免疫BALB/c小鼠,取鼠脾细胞与SP2/0融合,获得两株抗胃印戒细胞癌的单克隆抗体,即MGb_1和MGb_2。ABC免疫酶标组化法证实,89例正常胃粘膜呈阴性反应。20例胃癌阳性率达80％,其中印戒细胞癌达100％,显著高于肺癌、结肠癌、食管癌、眼癌、皮肤癌等。本文讨论了MGb_1和MGb_2用于早期胃印戒细抱癌诊断及鉴别诊断的价值。     

章鱼糖蛋白对小鼠脾细胞的增殖作用

目的:探讨从章鱼干中提取的2种糖蛋白粗品以及经分级纯化的4种糖蛋白对正常小鼠和免疫抑制小鼠脾细胞的增殖作用。方法:MTT比色法测定脾细胞的增殖。结果:所有样品对正常小鼠脾细胞和免疫抑制小鼠脾细胞增殖均有促进作用,对于免疫抑制小鼠脾细胞增殖作用更为显著,与ConA合用部分级分在一定的剂量下有协同作用。结论:章鱼干糖蛋白能促进小鼠脾细胞增殖。     

转染IL-6基因骨髓基质细胞系对骨髓移植后免疫功能重建的促进作用

目的　探讨转染IL 6基因的骨髓基质细胞系对同基因骨髓移植 (BMT)后小鼠免疫功能重建的促进作用。方法　将IL 6cDNA片段连接到pcDNA3真核表达载体上。用脂质体将pcD NA3IL 6转入骨髓基质细胞系QXMSC1,ELISA法测定转染IL 6基因骨髓基质细胞QXMSC1IL 6培养上清中IL 6的含量 ,有限稀释挑选多个细胞克隆 ,选择表达量最高的转基因细胞系QXMSC1IL 6用于动物实验。BABL c小鼠经γ射线致死量照射后 ,输入同基因骨髓细胞 (10 7 只 )同时输入骨髓基质细胞QXMSC1IL 6 (5× 10 5 只 )。在骨髓移植后 30d、6 0d检测BMT小鼠淋巴细胞对LPS ,ConA增殖反应 ,T辅助细胞前体 (helpTlymphocyteprecursor,HTLp) ,杀伤性T细胞前体 (cytotoxicTlymphocyteprecursor,CTLp) ,迟发型超敏反应 (delayed typehypersensitivity ,DTH)及空斑形成细胞数 (plaqueformingcell,PFC) ,反映骨髓移植后小鼠免疫功能。结果　成功构建pcDNA3IL 6重组体。该细胞体外培养 2 4h分泌IL 6的含量为 11.15 (± 2 .4 1) μg 10 6 。QXMSC1IL 6细胞系能明显增强BMT后淋巴细胞对LPS、ConA反应性 ,小鼠对异基因小鼠脾细胞DTH反应增强 ,脾脏中HTLp ,CTLp及PFC数明显增加。转入外源IL 6cDNA基因的骨髓基质细胞系QXMSC1IL 6在体内能明显促进BMT后小鼠T、B淋巴     

花粉对抗体生成的影响

LACA雄性小鼠经腹腔注射花粉浸提液,其抗体生成受到一定的抑制,IgG、PFC抑制率为56.2～63.6％,血清抗体生成量的抑制车为42％,主要由花粉浸提液中MW>1000的组分昕致。LACA雄性小鼠经灌胃给予花粉浸提液,对lgG、PFC及血清抗体生成量均未见有明显影响。     

六君子汤上调小鼠免疫功能的机制

目的:探讨六君子汤(LD)对小鼠的免疫调节作用。方法:用一定剂量的LD给正常小鼠和免疫抑制小鼠灌胃7d,用ELISA法测定血清溶血素的水平;采用中性红吞噬试验检测腹腔巨噬细胞的吞噬功能;应用重氮化反应测定NO的水平;采用MTT比色法测定淋巴细胞增殖反应。结果:中剂量的LD可提高正常小鼠的免疫功能,明显提高免疫抑制小鼠的免疫功能。结论:LD对小鼠的免疫功能具有上调作用。     

结肠癌单克隆抗体MC3、5、7、10的制备及其相应抗原免疫组化定位的研究

本文报道用结肠癌转移淋巴结分离的癌细胞免疫小鼠制得4株单克隆抗体即MC3、5、7、10,杂交瘤细胞已经过150天的连续培养,至今分泌抗体稳定,抗体效价高。能直接用于福尔马林固定石蜡包埋的切片作染色。经免疫组化法对成人的几种癌组织、癌旁组织及胚胎组织中MC相应抗原的定位研究,发现MC相应抗原在癌旁正常组织及胚胎组织表达十分局限,但在结肠癌表达可达100％,而且在染色强度、阳性细胞数等方面均比胃癌、食管癌、肺癌显著,提示MC相应抗原是在结肠癌占优势的一种抗原。     

抗人胃癌单克隆抗体的制备

分别以SGC-7901胃癌细胞以及MKN-28胃癌细胞无血清培养上清免疫Balb/c 小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。此外,尚取荷胃癌裸小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合。经筛选及克隆化后获得六株分泌胃癌单抗的杂交瘤(RWS3,RWS4,RSD5,RSC12,RNE8,RNF11)。     

含中药莪术瓜蒌汤兔血清诱导人肺癌细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨莪术瓜蒌汤含药血清对人肺癌细胞凋亡的诱导作用。方法 :用莪术瓜蒌汤不同剂量的水煎剂、全反式维甲酸乳剂和生理盐水给家兔灌胃 ,制备高、中、低剂量莪术瓜蒌汤含药血清 ,全反式维甲酸血清和对照血清 ,分别作用于PGLH7细胞 ,流式细胞仪观察含药血清与PGLH7凋亡的量效关系。结果 :莪术瓜蒌汤含药血清中剂量、高剂量组随着作用时间的延长 ,凋亡细胞所占的比例明显增加 ,有统计学差异 (P <0 .0 5)。结论 :莪术瓜蒌汤具有一定的抗肺癌作用 ,其机制可能与诱导肺癌细胞凋亡有关。     

胃癌单克隆抗体MGd_1在胃癌免疫组化检查中的应用

本文报道采用MGd_1胃癌单克隆抗体作ABC染色检测胃癌及萎缩性胃炎等。61例胃癌中,54例阳性,阳性率89％,22例萎缩性胃炎,1例阳性,11例胃局部淋巴结转移性胃癌,全部阳性,5例正常胃粘膜全为阴性。结果表用:MGd_1胃癌单克隆抗体对胃癌有很高的特异性,可用于病理诊断。并发现胃癌的分化程度、浸润及转移能力与胃癌细胞内的相应抗原多少密切相关。     

基于PCR的乙型肝炎病毒体外中和试验

目的　建立一种新的基于PCR的乙型肝炎病毒(HBV)体外中和试验,将其用于HBV中和抗体的检测,为新型HBV疫苗的评估提供一种体外模型。方法　待检免疫血清与已知HBV作用后接种HepG2 细胞,吸附、洗涤、培养后提取细胞核酸,PCR检测HBVDNA以判断中和试验结果。结果　免疫血清与10倍最小PCR感染剂量的HBV作用后接种细胞,培养2 4h后检测表明,其中和滴度高,结果稳定。市售疫苗免疫小鼠血清、多数抗HBsELISA阳性人血清和2份含HBVS区的新型候选疫苗的免疫血清中和试验阳性,而正常小鼠血清、戊型肝炎病毒重组蛋白免疫血清和抗 HBs阴性人血清中和试验阴性。结论　基于PCR的HBV体外中和试验简单、快速、经济,具有良好的特异性和敏感性,可以用于新型HBV疫苗免疫效果的评估。     

用重组SAG1抗原检测弓形虫抗体

目的探讨重组SAG1抗原对弓形虫IgG和IgM抗体的检测效果。方法用rSAG1作抗原建立免疫印迹方法（rSAG1-WB）,与玻片虫体过氧化物酶免疫染色试验（TSHE）平行检测不同来源血清。结果15例病原学检查阳性小鼠血清和5例免疫兔血清的IgG抗体均为阳性,30例正常小鼠血清和10例正常兔血清均未出现阳性反应。rSAG1-WB检测可疑弓形虫病患者血清阳性率为60．3％（38／63）,献血员血清阳性率为6％（3／50）,与TSHE检测结果（65．1％和4％）均无统计学差异（P〉0．05）。1例IgM强阳性血清和13例IgM弱阳性血清在Western—blot检测中分别出现相应的强阳性与弱阳性反应,50例献血员血清均未出现IgM阳性反应,结果与TSHE一致。结论rSAG1-WB检测弓形虫IgG和IgM抗体均具有高度的敏感性和特异性．与TSHE的符合率高。