脑缺血再灌流家兔血液中循环内皮细胞变化及针刺对其的影响

利用缺血再灌流家兔模型研究变化规律，并探讨了脂质过氧化物与循环内皮细胞之间的关系，以期了解缺血再灌流损伤血管内皮细胞的受损情况及发生机理。实验共用家兔３３只，缺血组９只，其循环内皮细胞比假手术组增多（Ｐ＜０．０５）。再灌流组９只，其循环内皮细胞显著增多（与假手术组、缺血组比较，Ｐ均＜０．００１），结果显示了再灌流血管内皮细胞损伤程度较缺血组明显，同时可看到脂质过氧化物变化与循环内皮细胞数量变化有一致性。实验同时观察到针刺对再灌流出现的上述异常改变大多有明显的改善作用     

电针对大鼠海马CA1区微循环血流量的影响

目的 研究电针对大鼠海马CA1区微循环血流量的影响。方法 采用激光多普勒微循环血流分析仪，实时监测大鼠双侧海马CA1区微循环血流量，研究电针人中、内关以及曲池、足三里对大鼠海马微循环的影响，并与电针地机、空白组对照。结果 电针人中、内关可使大鼠双侧海马CA1区微循环血流量升高，与同组同侧电针前相比差异具有显著性（P〈0．05）；电针曲池、足三里可使大鼠双侧海马CA1区微循环血流量降低，与同组同侧电针前相比差异具有显著性（P〈0．05）。结论 电针人中、内关可促进大鼠海马CA1区微循环血流量；电针曲池、足三里可降低大鼠海马CA1区微循环血流量。     

Lubeluzole对大鼠脑缺血再灌流时神经元的保护作用

目的 为了观察lubeluzole对大鼠脑缺血再灌流时神经元的保护作用。方法 本实验采用阻塞SD大鼠大脑中动脉2h，再灌流1、3、6、12、24、48h制成局灶性脑缺血动物模型，用免疫组化方法观察给药前后神经生长因子、脑源性神经营养因子在神经元的表达特点。结果 神经生长因子、脑源性神经营养因子在脑组织的分布相似。正常组和假手术组的皮质、丘脑等处的神经元为阴性；缺血模型组的缺血区皮质、丘脑的神经元为阴性或弱阳性，阳性神经元主要位于非大脑中动脉供血区和缺血周边区；治疗组缺血区的皮质、丘脑等处的神经元为弱阳性至中等阳性，缺血周边区为强阳性。结论 在缺血后6h内使用lubeluzole能降低神经元受损伤的程度，促进神经元的生长。     

大鼠脑缺血再灌流后室旁核大细胞的形态学变化

目的观察脑缺血再灌流后室旁核大细胞的形态学变化。方法建立大鼠脑缺血再灌流动物模型。HE染色,普通光镜观察;超薄切片,醋酸双氧铀和柠檬酸铅双重染色,JEM鄄1200透射电镜观察。结果脑缺血再灌流后,随着时间的延长,室旁核呈动态变化:细胞固缩越来越明显,神经毡不断增加,神经胶质细胞不断增多,无炎性细胞。大细胞的核染色质和核膜变化明显;细胞器变化的先后顺序是从滑面内质网扩张和线粒体嵴不清或消失开始的,细胞质空泡化次之,后出现部分细胞器的解体。结论缺血再灌流损伤后,大鼠室旁核出现明显的形态学改变,室旁核大细胞出现超微结构的动态变化。     

大鼠脑缺血再灌流后室旁核大细胞的超微结构变化

目的　观察脑缺血再灌流后室旁核的大细胞的超微结构变化。方法　复制大鼠全脑缺血再灌 动物模型,超薄切片,醋酸双氧铀和柠檬酸铅双重染色,JEM 1200透射电镜观察。结果　与正常大鼠比较, 鼠全脑缺血再灌注后室旁核大细胞的核染色质和核膜变化明显,细胞器变化的先后顺序是滑面内质网扩张 线粒体嵴不清或消失,细胞质空泡化,后出现部分细胞器的解体。结论　脑缺血再灌流引起室旁核大分泌 经元出现超微结构的动态变化。     

肾缺血再灌流对活体大鼠肾内髓微循环的影响

对于大鼠进行肾缺血再灌注对肾乳头微循环影响的活体观察。结果显示:肾动脉阻断后,肾乳头直血管出现短暂性缺血苍白,继而节律性运动加强,进行性扩张,血液钟摆样倒流,肾乳头呈明显充血现象。再灌流后,部分直血管不能复流,呈持续淤滞状态;复流直血管痉挛性收缩,致乳头血流量明显减少。组织学检查见肾髓质血管内大量RBC聚集,肾浅皮层循环状态良好。提示:肾乳头缺血时的充血反应是对缺血性损害的保护性机制,也是导致缺血后再灌流时髓质血流淤滞的原因之一;前列腺素在这一机制中可能起重要作用。     

LPS对大鼠海马CA2～3区nNOS和FOS蛋白表达的影响

目的 探讨NO和c-fos在SD大鼠海马CA2～3区免疫调节中的作用。方法 腹腔注射LPS600μg／kg建立免疫激发模型，对照组注射等量的生理盐水，用免疫组化方法和图像分析技术，观察两组大鼠海马CA2～3区nNOS和FOS蛋白的表达，检测OD值并进行统计学分析。结果 nNOS和FOS蛋白在大鼠海马各区均有散在分布，LPS刺激组海马CA2～3区nNOS和c-fos免疫阳性产物的OD值较对照组高，差异具有统计学意义。结论海马CA2～3区可能通过NO和(或)c-fos途径参与调节LPS诱导的免疫反应过程。     

大鼠脑缺血再灌流时神经元损伤与星形胶质细胞的反应

为探讨星形胶质细胞在缺血性神经元损伤中的作用及其与神经元损伤的关系 ,本实验阻塞大鼠大脑中动脉 2 h,再灌流0 .5～ 48h建立短暂局灶性脑缺血模型 ,进行 H-E染色 ;通过胶质原纤维酸性蛋白和细胞核增殖抗原免疫组化单重或双重反应 ,TU NEL和胶质原纤维酸性蛋白免疫组化双重反应观察了神经元和星形胶质细胞的反应。结果表明 :再灌流 2 4h缺血区面积最大 ,再灌流 6h开始出现神经元不可逆变性 ,2 4h梗塞成熟 ;星形胶质细胞表现为反应性、营养不良性和退形变三种不同的形态特点。再灌流 48h时星形胶质细胞数量开始增多。 48h之内星形胶质细胞无增生 ,且有少量星形胶质细胞凋亡。这些结果提示脑缺血时星形胶质细胞反应与神经元损伤密切相关 ,反应性星形胶质细胞是其积极应答神经元损伤的结果 ,在维持神经元存活中起作用。     

缺血再灌注对大鼠海马血管紧张素Ⅱ受体样蛋白1表达的影响

目的:探讨缺血再灌注(I/R)对大鼠海马血管紧张素Ⅱ受体样蛋白1(APJ)表达的影响.方法:利用完全随机数字法将大鼠分为假手术组(sham)和缺血再灌注组(I/R),每组30只,每组又分为15、30和60 d等三个时间点(n=10).建立大鼠I/R损伤模型,造模7 d后采用Morris水迷宫定位航行试验检测I/R大鼠学...     

钙离子对沙土鼠脑缺血再灌流后海马区胶质纤维酸性蛋白的作用

目的探讨钙离子对沙土鼠脑缺血再灌流后海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)合成的影响。方法钳夹沙土鼠的双侧颈总动脉制造脑缺血模型 ,体外孵育海马组织脑片 ,应用免疫荧光法染色 ,观察GFAP浓度的变化及分布。结果脑缺血再灌流后钙离子增加海马区GFAP的合成 ,GFAP阳性细胞主要分布在放射层及分子层。结论钙离子与GFAP的合成有关     

右美托咪定对大鼠脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞的影响

目的: 通过观察右美托咪定(DEX)对大鼠脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞的影响,探讨DEX对抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法: 采用大脑中动脉栓塞法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,将SD大鼠随机分为假手术组、单纯脑缺血再灌注组、DEX预处理1组(缺血前30 min腹腔给予DEX 20 μg/kg)及DEX预处理2组(缺血前30 min腹腔给予DEX 40 μg/kg)。缺血再灌注24 h后,观察大鼠神经功能缺失评分,通过HE染色了解脑梗塞后脑组织的病理学变化,采用免疫组化和蛋白免疫印迹方法观察缺血后脑组织星形胶质细胞的变化。结果: DEX预处理能显著改善大鼠神经功能缺失评分,减小大鼠梗死面积,减少缺血区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性星形胶质细胞和肿瘤坏死因子α(TNF-α)阳性星形胶质细胞,降低GFAP表达水平。结论: DEX对缺血再灌注损伤的脑组织具有保护作用,其作用机制可能与抑制星形胶质细胞激活有关。     

Short-term changes of parvalbumin and calbindin immunoreactivity in the rat hippocampus following cerebral ischemia

The calcium-binding proteins, parvalbumin (PV) and calbindin (CaBP), were used as immunocytochemical markers for two different interneuron populations in the rat hippocampus shortly after transient cerebral ischemia. Besides in interneurons, CaBP immunoreactivity (-i) is located in hippocampal CA1 pyramidal cells and dentate granule cells. Shortly after ischemia, the PV-i and CaBP-i were unchanged but, around the 4th postischemic day, PV-i disappeared from somata and fibers located in CA1, CA3c, and the dentate hilus. Terminal PV-i was unchanged. Within days, the PV-i gradually reappeared, first in somata and then in fibers. The transient loss of PV-i was, on a time scale, closely accompanied by a permanent loss of CaBP-i in CA1 pyramidal cells. CaBP-i in interneurons was unchanged. In order to examine the effect of an increased intracellular calcium concentration on the PV-i and CaBP-i, the calcium ionophore A23187 was stereotaxically injected into CA1. In rats killed 30 min later and processed for PV-i and CaBP-i, both PV-i and CaBP-i had disappeared around the A23187 injection sites. Based on this observation and the changes observed after ischemia, it is suggested that the hippocampal PV-i interneurons suffer from a delayed and reversible calcium accumulation in the days after ischemia. Concomitantly, there could be a decreased synthesis or increased destruction of PV after ischemia.     

电针足三里穴对肠缺血再灌注损伤大鼠小肠黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1的调节作用

目的探讨电针足三里穴对肠缺血再灌注损伤大鼠小肠黏膜上皮紧密连接蛋白闭锁小带蛋白(ZO)-1的调节作用。 方法按随机数字表法将30只SD大鼠分为模型组、电针足三里穴组、电针非经非穴组,每组10只。每组大鼠均于麻醉后沿腹正中线切口,分离肠系膜上动脉,用无损伤血管夹夹闭其起始部位,30 min后松夹恢复血流60 min,造成小肠缺血/再灌注损伤。电针足三里穴组于大鼠缺血后即刻行电针双侧足三里穴30 min,强度为2～3 mA,频率2～100 Hz;电针非经非穴组采用相同频率和强度于缺血后即刻刺激大鼠非经非穴(足三里穴外侧旁开0.5 cm)30 min;模型组不做任何治疗。于缺血再灌注损伤60 min时,以腹主动脉放血法处死各组大鼠,留取每只大鼠的血液和10 cm远端回肠组织。将留取的大鼠血液经10 000×g,4 ℃离心10 min后取上清得到血浆20 μL,全自动生化分析仪检测大鼠血浆脏器功能指标,包括谷丙转氨酶(GPT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、尿素氮、肌酐;免疫荧光染色及蛋白质印迹法检测各组大鼠小肠黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1分布情况与表达水平。数据比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。 结果缺血再灌注损伤60 min时,模型组大鼠GPT、CK-MB、尿素氮和肌酐水平分别为(88.1±11.6) μ/L、(482.3±69.7) μ/L、(11.6±3.7) mmol/L、(52.3±13.2) μmol/L,电针足三里穴组大鼠分别为(37.3±6.4) μ/L、(213.7±44.3) μ/L、(5.2±1.4) mmol/L、(30.1±5.7) μmol/L,电针非经非穴组大鼠分别为(85.7±13.4) μ/L、(460.2±72.3) μ/L、(10.8±4.2) mmol/L、(53.4±12.1) μmol/L,3组大鼠各指标比较,差异均有统计学意义(F＝69.4063、55.3611、10.9582、14.6817,P<0.05)。与模型组比较,电针足三里穴组大鼠血浆中GPT、CK-MB、尿素氮和肌酐水平与均降低,2组比较差异均有统计学意义(t＝12.126、10.285、5.116、4.883, P<0.05),而电针非经非穴组大鼠血浆中GPT、CK-MB、尿素氮和肌酐水平与模型组相近,差异均无统计学意义(P>0.05);电针足三里穴组大鼠血浆中GPT、CK-MB、尿素氮和肌酐水平均低于电针非经非穴组,比较差异均有统计学意义(t＝－10.307、－9.193、－4.000、－5.509, P<0.05)。免疫荧光染色结果显示,缺血再灌注损伤60 min时,模型组大鼠小肠黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1分布异常,连续性破坏,表达减少;电针足三里穴组大鼠小肠黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1分布密度较大、完整、连续;电针非经非穴组大鼠小肠黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1断裂,部分缺失,肠黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1荧光较弱、连续性消失。蛋白质印迹法检测结果可得,缺血再灌注损伤60 min时,电针足三里穴组大鼠小肠黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1蛋白表达(1.67±0.43)显著高于模型组(0.86±0.31)和电针非经非穴组(0.89±0.29),比较差异均有统计学意义(t＝4.517、3.965,P<0.05);电针非经非穴组大鼠小肠黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1蛋白表达与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。 结论电针足三里穴可有效调节肠黏膜上皮紧密连接蛋白ZO-1的正常分布与表达,能有效保护肠缺血再灌注损伤后肠黏膜屏障功能,减轻肠缺血再灌注后脏器功能损害。     

Genistein attenuates oxidative stress and neuronal damage following transient global cerebral ischemia in rat hippocampus

Oxidative stress is believed to contribute to neuronal damage induced by cerebral ischemia/reperfusion (I/R) injury. The present study was undertaken to evaluate the possible antioxidant neuroprotective effect of genistein against neuronal death in hippocampal CA1 neurons following transient global cerebral ischemia in the rat. Transient global cerebral ischemia was induced in male Sprague-Dawley rats by four-vessel-occlusion for 10min. At various times of reperfusion, the histopathological changes and the levels of mitochondria-generated reactive oxygen species (ROS), malondialdehyde (MDA), cytosolic cytochrome c and caspase-3 activity in hippocampus were measured. We found extensive neuronal death in the CA1 region at day 5 after I/R. The ischemic changes were preceded by increases in ROS generation and MDA concentration and followed by increased cytosolic cytochrome c, and subsequently caspase-3 activation and apoptosis. Treatment with genistein (15mg/kg, i.p.) significantly attenuated ischemia-induced neuronal death. Genistein administration also decreased ROS generation, MDA concentration and the apoptotic indices. These results suggest that genistein protects neurons from transient global cerebral I/R injury in rat hippocampus by attenuating oxidative stress, lipid peroxidation and the signaling cascade leading to apoptotic cell death.     

异丙酚诱导大鼠中枢FOS核蛋白表达的研究

目的　通过检测异丙酚静脉全麻诱导大鼠中枢FOS核蛋白的表达 ,明确静脉全身麻醉的中枢作用位点。方法　 2 1只Wistar大鼠随机分成 3组 :对照组 (C组 )腹腔注入生理盐水 2ml,异丙酚组 (P组 )腹腔注入异丙酚 10 0mg kg ,异丙酚作用后断尾刺激组 (S组 )。 1h后应用FOS蛋白免疫组织化学法 (ABC法 ) ,检测FOS免疫反应 (FOS IR ,immunityreactionofFOS)阳性神经元在大脑的分布。结果　C组可见部分散在FOS IR阳性神经元分布 ,P组FOS IR阳性神经元数比C组明显增多 (P <0 .0 1) ,并呈核特异性分布 ,S组在杏仁基底外侧核、丘脑室旁核、外侧缰核及海马回嗅觉小岛等核团发现FOS IR阳性神经元较P组分布增多 (P <0 .0 1)。结论　异丙酚在大鼠中枢神经系统有与其静脉麻醉作用相关的神经核团。     

脑缺血后大鼠前脑NOS神经元与FOS蛋白表达的研究

目的 :观察大鼠全脑缺血再灌注后前脑NOS阳性神经元分布和FOS蛋白表达时程变化 ,探讨其相互间的变化关系及其在脑缺血损伤机制中的可能作用。方法 :采用四血管闭塞模型、运用NADPHd组化反应、FOS免疫组化反应及两者的双重反应技术 ,对全脑缺血 30min再灌注 2h、4h、8h、1 2h、2 4h、4 8h进行研究。结果 :缺血组前脑NOS阳性神经元数目和染色强度增加 ,FOS蛋白表达随再灌注时程而变化 ,并可见有约 1 0～ 1 5 %NOS/FOS双染细胞。结论 :全脑缺血再灌注损伤过程中 ,前脑NOS阳性神经元的分布与FOS蛋白表达密切相关。     

FOS蛋白在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响

目的 探讨FOS蛋白在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞生长的影响.方法 用免疫组化染色法检测FOS蛋白在各级别胶质瘤组织中的表达水平.应用RNA干扰技术降低FOS表达后,应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法和流式细胞技术检测胶质瘤细胞的增殖和周期的改变;应用Transwell实验检测胶质瘤细胞侵袭能力的改变;采用Western印迹法检测FOS下游功能蛋白的变化.结果 胶质瘤组织中FOS的表达随着级别的增高而增高;抑制FOS的表达后,U87和U251细胞生长受抑制,细胞生长阻滞在G1期且细胞侵袭能力下降,下游的功能蛋白CyclinD1和MMP9表达水平降低.结论 FOS在胶质瘤中高表达;抑制其表达可以下调功能蛋白CyclinD1和MMP9的表达,进而调控细胞的生长和侵袭能力.     

局灶性脑缺血再灌注后大鼠血浆和海马皮质醇含量变化

目的:探讨脑缺血再灌注后糖皮质激素与海马神经元损伤的关系,以及糖皮质激素对卒中后痴呆发病的影响。方法:采取大脑中动脉阻塞模型,通过放射免疫方法测定脑缺血再灌注后模型大鼠再灌注2h、6h、12h和24h不同时点的血浆和海马皮质醇含量变化。结果:模型组在再灌注4个时点糖皮质激素含量都有增高,同假手术组、正常组相比有显著差异(P<0.05)。血浆、海马中皮质醇含量都以再灌注6h最高。HE染色海马神经元损伤随再灌注时点的延长,呈进行性加重。结论:脑缺血再灌注后24h内存在血浆、海马皮质醇含量的增高,这可能是加重海马神经元损伤,引发卒中后痴呆发生的原因之一。     

大鼠大脑中动脉缺血后海马星形胶质细胞反应的研究

目的:观察大鼠大脑中动脉缺血后皮层损伤侧海马星形胶质细胞反应的变化。方法:采用大鼠大脑中动脉阻塞再灌流模型,应用免疫印迹和免疫组织化学方法测定脑缺血后3 d、7 d以及30 d皮层损伤侧海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达,观察星形胶质细胞增殖的变化。结果: GFAP免疫组化结果显示,脑缺血后7d皮层损伤侧海马CA1、CA2区星形胶质细胞数量较假手术组增加且胞体增大;脑缺血后30 d皮层损伤侧海马CA1、CA2区呈胶质疤痕样改变。同时,免疫印迹法显示脑缺血后7 d皮层损伤侧海马GFAP表达增强;脑缺血后30 d皮层损伤侧海马GFAP表达增高更加明显。此外,免疫印迹法显示脑缺血后3 d皮层损伤侧海马PCNA蛋白表达水平升高;脑缺血后7 d PCNA蛋白表达水平达到峰值;脑缺血后30 d,PCNA蛋白表达水平降低,但仍高于假手术组。结论: 大鼠大脑中动脉缺血后可引起其皮层损伤侧海马星形胶质细胞过度反应和增殖。     

脑缺血再灌注模型大鼠接受跑台运动锻炼海马反义导向分子A的表达

背景：脑卒中后,运动锻炼对其神经功能的康复具有极其重要的作用,但关于卒中后大鼠运动量的研究鲜有报道。而海马与认知功能密切相关,但大鼠缺血再灌注后海马内反义导向分子A的表达的研究,国内外未见报道。 目的：探索运动锻炼对脑缺血再灌注后大鼠缺血侧海马内反义导向分子A表达的影响。 方法：将120只SD大鼠随机等分为正常组、假手术组、模型7,14,28 d组,模型7,14,28 d组大鼠采用线栓法制作大鼠右侧脑缺血再灌注模型。各组大鼠各等分为`4个亚组：非运动亚组、低、中、高运动量亚组。低运动量组进行5 m/min,5 min;7 m/min,5 min;9 m/min,20 min跑台训练;中运动量组进行8 m/min,5 min;10 m/min,5 min;13 m/min,20 min跑台训练;高运动量组进行8 m/min,5 min;11 m/min,5 min;20 m/min,20 min跑台训练。 结果与结论：非运动时,模型7 d组大鼠缺血侧海马反义导向分子A mRNA和蛋白表达水平最高,且反义导向分子A相对表达水平随时间延长而逐渐降低。与非运动相比,模型14,28 d组大鼠中运动量时缺血侧海马反义导向分子A mRNA和蛋白表达水平明显下降(P < 0.05),而高运动量海马反义导向分子A mRNA和蛋白表达水平表达增加。提示中运动量锻炼可以降低脑缺血再灌注大鼠患侧海马反义导向分子A的表达。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：