紫杉醇产生菌美丽镰刀霉K1781的诱变育种

采用紫外线与亚硝酸对美丽镰刀霉(Fusarium mairei)K178的孢子进行复合诱变,于含40μg/ml制霉菌素的平板上进行筛选,获得31株突变株,其中5株的紫杉醇摇瓶发酵产量高于出发菌株,突变株UH23的紫杉醇产量为259.8μg/L,进一步优化其发酵工艺条件,紫杉醇产量达286.4pg/L,较出发菌株提高了29.9%.     

纳他霉素高产菌株的链霉素抗性选育及其发酵工艺的优化

用紫外线对纳他霉素(Natamycin)产生菌褐黄孢链霉菌(Streptomyces gilvosporeus)ATCC13326菌株孢子进行诱变处理后，利用链霉素抗性突变选育得122株链霉素抗性突变株。其中纳他霉素产量高于出发菌株的有13株。突变株SG-56的生产能力达到出发菌株的146％，研究了其发酵性能，优化了培养基组成和发酵工艺条件，纳他霉素产量为2．81g／L，较出发菌株产量提高了170％。     

N+注入诱变筛选阿拉伯糖利用缺陷型肌苷高产菌株

以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HSD06为出发菌株发酵制备肌苷，注入不同剂量的N^＋离子束选育不能利用阿拉伯糖的突变株。结果表明低剂量和较低的致死率利于正突变株的筛选。当照射剂量为2×10^14ions／cm^2时，获得肌苷高产菌株B67，肌苷的摇瓶发酵产量为15．12g／L，比出发菌株提高了18．6％。     

用庆大霉素抗性筛选法选育西罗莫司高产菌株

用紫外线对吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）NP03进行诱变，再采用庆大霉索抗性筛选法进行处理，剂量分别为0、0．01、0．03、0．05和0．08μg／ml，共获得113株抗性突变株，其中西罗莫司产量高于出发菌株的有51株，突变株NP03-74#的生产能力达到出发菌株的134％，且遗传特性稳定。     

麦考酚酸高产菌株的选育

以短密青霉MA-4为出发菌株，应用紫外和亚硝基胍诱变，结合麦考酚酸与三氟乙酸抗性筛选，获得高产、稳定的突变株MA—H8。经过发酵培养基优化，突变株发酵水平为4500μg／ml。     

链霉素抗性筛选法在选育博来霉素A2组分高产菌株中的应用

应用链霉素抗性筛选法提高博来霉素产生菌Streptomycin verticillus SIPI 7011产博来霉素A2组分的产量，将经紫外线诱变处理过的博来霉素产生菌孢子涂布在含有链霉素最小抑制浓度（180μg／ml）的培养基平板上，获得了151株链霉素抗性突变株。其中博来霉素A2产量高于出发菌株的有19株，产量阳性效率达到12．6％，并获得一株产抗生素能力为出发菌株约1．25倍的突变株。     

复合诱变法选育普那霉素高产菌株

以始旋链霉菌(Streptomyces pristinaespiralis)ZP2为出发菌株,经紫外线(UV)、亚硝基胍(NTG)复合诱变,并结合普那霉素抗性突变株的理化筛选,选育到一株高产突变菌株UN2056,其普那霉素产量达到1490 mg/L,比出发菌株提高了45.7%.传代试验表明该高产突变菌株的高产性能遗传特性稳定.高产突变株UN2056在5 L发酵罐中进行发酵试验,其平均发酵产量达到1645 mg/L,比出发菌株提高了60.8%.     

高产克拉维酸的耐甘油突变株选育及生理特性研究

以带小棒链霉菌XC-1—35为出发菌株，经紫外线照射60s，并结合甘油耐受性菌株的理性筛选，选育得到较佳诱变株XC-5—48，效价达1970μg／ml。该菌株经斜面连续传代4次，效价稳定在1800μg／ml以上。对该菌株的生理特性研究表明，其具有活力较强的音油特异诱导的甘油转运系统（GTS）。以XC-5—48菌株为试验菌株，当培养基中甘油初始浓度为1．5X，并且在发酵60h时补加1．0％的甘油，摇瓶发酵的效价可达2668μg／ml，较出发菌株（318μg／ml）提高了7．4倍。该工艺应用于15L发酵罐共十个批次的发酵试验，96h时克拉维酸的平均效价达2103μg／ml。     

尼莫克汀高产菌株诱变选育研究

目的 为了提高尼莫克汀产量以满足生产需求。方法 本试验以蓝灰链霉菌N20-69为出发菌株,探索了紫外(UV)诱变、常压室温等离子体(ARTP)诱变、亚硝基胍诱变、UV氯化锂复合诱变与ARTP缬氨酸氧肟酸复合诱变育种。结果 筛选到了11株高产突变株,均将出发菌株提高了20%以上,其中突变株NAX-96遗传性稳定,最适种龄为19 h。在500 L发酵罐发酵实验中,突变株NAX-96在生产能力上优势明显,尼莫克汀的产量达到3593μg/mL,比出发菌株N20-69(2477μg/mL)提高了45%。结论 研究结果对实际生产有重要指导作用。     

A40926高产菌株的选育及发酵工艺优化

目的通过菌种选育与发酵工艺优化,提高A40926发酵产量。方法本文采用紫外线和亚硝基胍两种方法诱变,结合抗生素抗性筛选方法,对A40926的产生菌Nonomuraea sp.SIPI-H3020进行诱变选育,并通过工艺优化提高发酵产量。结果筛选得到一株高产突变株Nonomuraea sp.SIPI-H5972,其发酵效价比出发菌株提高了257%。在优化的摇瓶发酵工艺下,突变株SIPI-H5972的发酵效价达到990μg/m L,又提高了153%。通过补料工艺优化,在50L发酵罐中发酵效价为1223μg/m L,比摇瓶发酵提高了23.5%。结论紫外线和亚硝基胍诱变并结合抗生素抗性筛选对提高A40926发酵单位效果明显,补料工艺可以显著提高其产量。     

微波诱变及添加氯化镧筛选阿扎霉素B高产菌株

目的 拟通过微波诱变和添加氯化镧对阿扎霉素B产生菌N98-1634进行选育,获得高产菌株.方法 对菌株进行40～240s的微波诱变,采用金黄色葡萄球菌抑菌圈法获得初筛通过株,并进行HPLC复筛获得高产菌株;在高产菌株发酵培养基中加入5～30mg/L的氯化镧考查其对阿扎霉素B合成的影响.结果 通过微波诱变选出l株阿扎霉素B产量达到945.0μg/mL的突变菌株MW-638,较出发菌株N98-1634的752.4μg/mL提高了25.6％,随后经过添加15mg/L氯化镧阿扎霉素B单位最终达到1413.8μg/mL.结论 微波诱变对提高菌株N98-1634阿扎霉素B发酵单位效果明显,诱变菌株添加适量氯化镧可以显著提高其产量.     

链霉素抗性突变-万古霉素高产菌株的选育研究

以东方拟无枝酸菌(Amycolatopsis orientalis)AO-4为出发菌株，经紫外线(15w，253．7nm，距离30cm)诱变处理，筛选链霉素抗性突变株(链霉素浓度1000μg／ml)，从中获得万古霉素高产变株Amycolatopsis orientalis AO-29，其发酵效价较出发菌株提高170%。传代实验表明该变株的高产性能遗传特性较稳定。     

从氯霉素抗性突变株筛选赤霉素高产菌株

应用氯霉素抗性筛选法，将经NTG诱变处理的赤霉素产生菌——水稻恶苗病菌6028菌株(Gibberella fujikuroi 6028)原生质体涂布在含有氯霉素2000μg／ml的致死再生培养基平板上，获得了大量氯霉索抗性突变株．其中赤霉索产量高于出发菌的阳性效率达20％，同时获得了在20和60吨罐上产素能力和发酵总亿比出发菌株分别提高7．58％和9．36％的7106高产菌株，且该菌株经连续5次传代试验，产索能力无明显变化。     

肌苷产生菌LL—111突变株的选育及发酵罐小试研究

以枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis)LSBS-1247为出发菌株，经NTG和紫外诱变处理，获得一株高产突变菌LL111（ade^-,his^-,thi^-,8-AG1,Gua^-)摇瓶发酵产量为28mg/ml，发酵条件优化后可达29.6mg/ml。5L发酵罐产量最高为24.7g/L。菌株性状稳定。     

纳他霉素产生菌基因组重排育种

Streptomyces gilvosporeus SG-1原生质体经紫外线诱变并筛选链霉素抗性菌株，获得纳他霉素高产菌株。在上述高产突变株中选择4株作为亲本进行基因组重排育种，筛选得到了高产重排菌株，其中一株重排菌株S．gilvosporeus GS-74的纳他霉素产量为3574mg／L。为产量最高的亲本菌株的153％，比原始出发菌株SG-1提高1.17倍。     

通过获得链霉素抗性基因(str)突变株筛选梅岭霉素高产菌株

本文通过链霉素对梅岭霉素（meilingmycin）产生菌南昌链霉菌NS－41－80菌株孢子致死浓度的测定，采用诱变剂EMS四种不同诱变剂量对菌株的孢子进行诱变处理，诱变处理的孢子涂布在含链霉素致死浓度的高氏平板上，获得了大量的链霉素抗性基因（str）突变株。然后从链霉素抗性基因突变株进一步筛选到梅岭霉素高产菌株80－5．11－221，在摇瓶条件下，只产梅岭霉素不产南昌霉素，梅岭霉素活性效价达1500μg/ml，比出发菌株NS－41－80的摇瓶发酵效价855μg/ml提高了77．9％，该菌株连续传代六代进行摇瓶发酵，其F2代和F3代梅岭霉素发酵效价稳定，F4代至F6代随着传代数增加，其梅岭霉素发酵效价急速下降。通过EMS诱变剂量分别与抗药性突变率和链霉素抗性基因突变株产梅岭霉素产量的产势统计分析表明，菌株抗药性突变与产抗生素突变密切相关，产抗生素突变的EMS诱变剂量高于链霉素抗性基因突变诱变剂量。在0．03mol/L的EMS剂量作用下，菌株致死率为99．43％，而抗药性突变率为0．0440％，建立了梅岭霉素产生菌链霉素抗性基因突变筛选方法，为南昌链霉菌高产菌种选育研究作了有益的尝试，并有助于其它链霉菌属的抗生素产生菌育种研究。     

PF1022A产生菌的菌种选育及培养基优化

目的 筛选PF1022A高产菌株，并优化发酵条件，以提高发酵水平。方法 以PF1022A产生菌座坚壳菌(Rosellinia sp.)HS-NF-1412Z(3050 mg/L)为出发菌株，采用紫外诱变育种，再在单因素试验的基础上结合Box-behnken(BB)响应面法优化发酵条件。结果 获得一株产PF1022A的高产稳定菌株HS-NF5-86-5-88，发酵水平较出发菌株提高了19%。采用优化后的发酵培养基：麦芽糊精163.0 g/L，酵母抽提物19.7 g/L，棉籽饼粉25.0 g/L，豆油5.0 g/L时，硫酸镁2.0 g/L，氯化钠2.0 g/L，碳酸钙2.0 g/L，菌株摇瓶发酵产量5978 mg/L。结论 通过菌种诱变选育与配方优化，PF1022A的摇瓶产量较出发菌株提高了96%，具有工业应用价值。     

复合诱变选育星形孢菌素产生菌

目的提高蛋白激酶C抑制剂星形孢菌素产生菌株的发酵效价。方法以海洋来源的链霉菌Strepto-myces fradiae 007、S.arenaeZ4007和S.rubrolavendulae T H W-12为出发菌株,采用紫外线照射和亚硝基胍复合诱变,结合HPLC进行筛选。结果从菌株Streptomyces fradiae 007中得到一株高产突变株,发酵效价由原来的1.02μg.mL-1提高到9.06μg.mL-1,提高了8倍,突变株性状稳定。结论复合诱变是一种简便有效的提高菌株发酵效价的方法。     

产腺苷蛋氨酸酵母菌株的选育

目的筛选产腺苷蛋氨酸(SAM)的酵母菌并进行诱变育种。方法以选择性培养基筛选酵母菌株并用高效液相色谱检测SAM。利用紫外线和γ-射线处理对菌株进行诱变。结果从34份土样中筛选到1株产SAM的酵母菌Q95菌株,经过5轮紫外线诱变和1轮γ-射线诱变,筛选到1株SAM产量显著提高的正突变株Q6-13。摇瓶发酵27 h后,其SAM产量达到1860μg/mL,与Q95相比提高了86.9%。在15 L外循环气升式生物反应器中补料发酵22 h后,Q6-13的SAM产量达到2540μg/mL。结论通过筛选和诱变,得到了1株高产SAM的酵母菌突变株,为SAM的微生物发酵法规模化生产奠定了基础。     

糖肽类抗生素A40926B产生菌的培养基优化及菌种选育

以A40926 B产生菌野野村放线菌SIPI-D-30为出发菌株,通过UV诱变及乙酸钠和甘氨酸抗性平板筛选,获得A40926 B产量提高的突变株SIPI-U-157。经优化,确定摇瓶发酵培养基(g/L)为:葡萄糖5.0、麦芽糊精30.0、可溶性淀粉10.0、玉米淀粉30.0、大豆蛋白胨5.0、肉蛋白胨10.0、酵母浸粉5.0、冷榨黄豆饼粉10.0、棉籽饼粉5.0、L-缬氨酸1.0,发酵培养7 d,突变株的A40926 B发酵单位为893 mg/L。该突变株在5 L发酵罐中培养180 h,A40926 B的产量最高为583 mg/L。