红细胞作载体的超氧化物歧化酶用于脑缺血－再灌注研究

研究用红细胞（ＲＢＣ）作为超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）载体的可行性，将包载ＳＯＤ的ＲＢＣ（ＲＢＣ－ＳＯＤ）用于家兔脑缺血－再灌注（Ｉ－Ｒ）模型研究。采用５１Ｃｒ标记测量ＲＢＣ的循环半寿期（　），兔自身ＲＢＣ的，ＲＢＣ－ＳＯＤ的ＲＢＣ－ＳＯＤ对脑Ｉ－Ｒ期间脂质过氧化物（ＬＰＯ）的升高有一定程度的抑制作用。对照组再灌１０ｍｉｎ时，血浆一氧化氮（ＮＯ）浓度达最高；对照组和游离ＳＯＤ组从缺血１０ｍｉｎ到再灌２７０ｍｉｎ，ＮＯ浓度逐渐回落；但ＲＢＣ－ＳＯＤ组在２７０ｍｉｎ的再灌期间，ＮＯ始终处于持续较高浓度状态。提示完整的ＲＢＣ－ＳＯＤ载体能够清除脑Ｉ－Ｒ时产生的超氧阴离子自由基（　）。     

吸入一氧化氮对兔肺缺血再灌注损伤的影响

目的探讨吸入一氧化氮（ＮＯ）对兔肺再灌注损伤的影响，并研究肺缺血再灌注损伤的机制。方法４０只健康新西兰大白兔随机分成４组，每组１０只，Ⅰ组未缺血；Ⅱ组未缺血＋吸入ＮＯ；Ⅲ组缺血再灌注；Ⅳ组缺血再灌注＋吸入ＮＯ。兔麻醉后，气管切开，插入气管导管，连结呼吸机并行机械通气。通过阻断左肺门使左肺缺血６０ｍｉｎ后，随即阻断右肺门，造成左肺单侧再灌注２４０ｍｉｎ的肺热缺血再灌注模型。Ⅱ、Ⅳ组在阻断右肺门前５ｍｉｎ吸入ＮＯ５０ｐｐｍ。再灌注２４０ｍｉｎ连续动态观察动脉氧分压（ＰａＯ２）、动脉二氧化碳分压（ＰａＣＯ２）、肺泡动脉氧分压差（Ａ－ａＤＯ２）、肺内动静脉分流（Ｑｓ／Ｑｔ）、肺动脉压（ＰＡ）、肺血管阻力（ＰＶＲ）、ＮＯ－２／ＮＯ－３、内皮素（ＥＴ）、高铁血红蛋白、外周白细胞数、中性粒细胞的ＣＤ１８表达。测定肺湿／干重比例、肺组织丙二醛，观察肺组织病理形态的变化。采用免疫组化检测再灌注肺一氧化氮合酶（ＮＯＳ）表达变化。结果（１）吸入ＮＯ不影响正常兔肺气体交换和血流动力学及ＣＤ１８在血液中性粒细胞的表达。正常肺组织未见诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）表达，内皮型一氧化氮合酶（ｅＮＯＳ）在内皮细胞上正常表达。（２）再灌注开     

DDPH对脑缺血的保护作用及其机制的研究

采用家兔急性脑缺血及缺血再灌注模型,观察了ＤＤＰＨ对缺血及缺血复灌时脑组织内Ｃａ＾２＋,Ｎａ＾＋,Ｋ＾＋等离子及ＮＯＳ（一氧化氮合酶）与ＭＤＡ（丙二醛）含量的影响,０实验发现ＤＤＰＨ８ｍｇ／ｋｇ于缺血前静脉注射,可明显降低ＮＯＳ的活性,减少ＭＤＡ的含量,并可减少由缺血所致脑组织内Ｃａ＾２＋,Ｎａ＾＋等离子的含量。结果提示,ＤＤＰＨ对动物脑缺血具有一定的保护作用。     

内源性一氧化氮与缺血/再灌性室性心律失常的关系

为探讨内源性一氧化氮（ＮＯ）在缺血／再灌性室性心律失常发生中的作用，观察缺血／再灌注损伤早期的室性心律失常（ＶＡ），血中ＮＯ及心肌一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）活性。结果：①缺血／再灌组（Ｉ／Ｒ组）动物缺血及再灌注期各种心律失常均高于对照组（Ｐ＜０．０１），而血中ＮＯ含量皆低于对照组（Ｐ＜０．０５）。ＶＡ等级与ＮＯ含量呈负相关（ｒ＝０．７４５１４，Ｐ＜０．０５）。提示：血中ＮＯ量的减少与缺血／再灌注性ＶＡ增加有密切关系。②Ｉ／Ｒ组与对照组心肌中ＮＯＳ活性无显著差异。提示血中ＮＯ减少，可能不是生成减少而是消耗增多所致。     

心肌再灌注损伤中一氧化氮合酶及其基因异常表达的研究

目的用鼠的离体工作心脏研究心肌再灌注损伤中一氧化氮（ＮＯ）、ＮＯ合酶（ＮＯＳ）同功酶及其ｍＲＮＡ表达的变化。方法逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）定量检测心肌组织ＮＯＳ同功酶ｍＲＮＡ表达,测定心肌组织中的丙二醛（ＭＤＡ）、ＮＯＳ及冠脉流出液的ＮＯ、肌酸磷酸激酶（ＣＰＫ）的量,同时检测心脏缺血再灌注前后的心功能变化。并分别于冷停跳液中加用地塞米松（Ｄｅｘ）和缓激肽（ＢＫ）,观察其对心肌再灌注损伤的影响。结果心肌缺血再灌注后,结构型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）的ｍＲＮＡ表达下调,诱导型ＮＯＳ（ｉＮＯＳ）的ｍＲＮＡ表达上调;ｃＮＯＳ活性下降,ｉＮＯＳ活性升高,ＮＯ量减少。使用Ｄｅｘ后,与缺血再灌注的对照组相比,ｉＮＯＳ的ｍＲＮＡ表达下调,ｉＮＯＳ活力下降,ＮＯ分泌减少,并且心功能恢复好转,ＭＤＡ、ＣＰＫ下降;使用ＢＫ后,ＮＯＳ的ｍＲＮＡ表达无变化,ｃＮＯＳ活力升高,ＮＯ分泌增多,心功能恢复有好转,ＭＤＡ、ＣＰＫ亦下降。结论ＮＯＳ同功酶表达的变化可能是心肌再灌注损伤的重要机制之一,激活ｃＮＯＳ或下调ｉＮＯＳ的ｍＲＮＡ表达具有心肌保护作用     

大鼠心脏缺血再灌的心肌间质损害及SOD抗损伤作用的实验研究

用在体大鼠心脏缺血再灌模型研究了心肌间质缺血再灌损伤和ＳＯＤ抗缺血再灌损伤的作用。实验分３组：Ａ组（缺血再灌组）、Ｂ组（ＳＯＤ组）和Ｃ组（假手术组）。电镜下见Ａ组胶原纤维明显减少，毛细血管基底膜缺损，内皮细胞吞饮小泡减少，间隙增宽；Ｂ组胶原纤维减少和毛细血管损伤不明显。超微结构立体计量显示，Ａ组胶原纤维线密度降低（Ｐ＜００５）。羟脯氨酸测定发现，Ａ组羟脯氨酸减少（Ｐ＜００５）。结果表明：心肌缺血再灌可致间质损伤，ＳＯＤ可减轻间质缺血再灌损伤。     

吸入一氧化氮改善兔缺血再灌注肺气体交换的意义

目的评价吸入一氧化氮（ＮＯ）对再灌注兔肺气体交换改善的效果。方法４０只健康新西兰大白兔随机分成４组,每组１０只。Ⅰ组未缺血组;Ⅱ组未缺血＋吸入ＮＯ组;Ⅲ组缺血再灌注组;Ⅳ组缺血再灌注＋吸入ＮＯ组。Ⅱ、Ⅳ组吸入ＮＯ５０×１０－６,再灌注２４０ｍｉｎ连续动态观察ＰａＯ２、ＰａＣＯ２、Ａ－ａＤＯ２、Ｑｓ／Ｑｔ、高铁血红蛋白。结果（１）吸入ＮＯ不影响正常兔肺气体交换功能;（２）再灌注时吸入ＮＯ后ＰａＯ２上升,ＰａＣＯ２、Ａ－ａＤＯ２、Ｑｓ／Ｑｔ下降。（３）吸入ＮＯ对高铁血红蛋白的升高无明显影响。结论吸入ＮＯ能明显改善再灌注肺早期气体交换功能。     

大鼠小肠缺血／再灌注休克中一氧化氮,内皮素检测及意义

目的：观察一氧化氮（ＮＯ）对大鼠小肠缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）的作用及内皮素的改变。方法：复制内脏血管阻塞（ＳＡＯ）性休克模型,用左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）及硝基精氨酸甲脂（Ｌ－ＮＡＭＥ）处理动物模型后分别测定血浆中ＥＴｓ、ＭＤＡ、组织蛋白酶Ｄ（ＣＤ）、ＮＯ－２／ＮＯ－３含量。结果：Ｌ－Ａｒｇ减缓了大鼠Ｉ／Ｒ血压下降（Ｐ＜０．０１）,降低了血浆ＭＰＯ、ＬＤＨ、ＣＤ、ＭＤＡ的含量（Ｐ＜０．０１）及肠组织中伊文思蓝（ＥＢ）的含量（Ｐ＜０．０５）;Ｌ－ＮＡＭＥ与Ｌ－Ａｒｇ相反。ＭＰＯ与ＥＢ正相关（Ｐ＜０．０１）,ＮＯ－２／ＮＯ－３与ＥＴｓ负相关（Ｐ＜０．０５）。结论：ＮＯ对小肠Ｉ／Ｒ损伤有保护作用,ＥＴｓ参与ＳＡＯ休克过程。     

缺血预适应对未成熟大鼠心肌线粒体及能量代谢的影响

目的研究内源性心肌保护机制一缺血预适应（Ｉｓｃｈｅｍｉｃ－ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ,ＩＰＣ）对未成熟心肌线粒体及能量代谢的 影响,并探讨其作用机制。方法采用改良Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ－Ｎｅｅｌｙ离体鼠心灌流装置,建立未成年大鼠（４周龄）离体心脏顺 行灌注左心作功模型。３６只大鼠随机等分为缺血对照组（ＮＣ）、Ｓｔ．ＴｈｏｍａｓⅡ晶体停搏液组（ＳＴ）、预缺血加停搏液组 （ＰＩ）。比较再灌注后各组心功能（ＬＷＳＰ,ＬＶＥＤＰ,±ｄｐ／ｄｔｍａｘ,ＣＯ）的恢复率;测定缺血前、再灌注后线粒体游离钙（Ｃａ２＋）、 丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及心肌ＡＴＰ含量;观察再灌注后心肌及线粒体超微结构的变化。结果 ＩＰ组心 功能指标的恢复率明显好于ＳＴ组和ＮＣ组（Ｐ＜０．０５）;再灌注后ＳＴ组、ＮＣ组心肌线粒体Ｃａ２＋、ＭＤＡ含量明显增高, ＳＯＤ含量明显减少（Ｐ＜０．０５）,而 ＩＰ组则无明显变化;ＩＰ组、ＳＴ组 ＡＴＰ含量无显著差别,均明显高于 ＮＣ组;ＳＴ组、ＮＣ 组心肌及线粒体超微结构破坏明显,ＩＰ组则仅有轻微改变。结论Ｓｔ．ＴｈｏｍａｓⅡ晶体停搏液能减轻未成熟心肌能量损耗, 但对心肌线粒体的保护作用较小,影响了     

一氧化氮对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛时脑血流 …

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）对大鼠实验性蛛网膜十腔出血（ＳＡＨ）后脑血管痉挛（ＣＶＳ）时脑血流（ＣＢＦ）的作用。方法：将２４只大鼠随机分成４组（ｎ＝６）：Ａ组假手术＋盐水;Ｂ组假手术＋ＮＯＣ１２;Ｃ组ＳＡＨ＋盐水;Ｄ组ＳＡＨ＋ＮＯＣ１２。模型制成４８ｈ,通过Ｌａｓｅｒ－Ｄｏｐｐｌｅｒ血流仪观察ＮＯＣ１２（ＮＯ供体）持续静脉注射１ｈ内ＣＢＦ的变化。结果：Ａ组ＣＢＦ无变化,Ｂ、Ｄ组ＣＢＦ明显增加,且Ｂ级     

大鼠肝缺血预处理过程中诱导型一氧化氮合酶的转录及表达

目的 :研究大鼠肝脏缺血预处理 (IP)过程中肝脏诱导型一氧化氮合酶 (NOS2 )转录及表达的改变 ,以探讨大鼠肝脏IP过程中NO合成通路的作用及意义。方法 :131只SD大鼠随机分为缺血再灌注 (I/R)组 (5 2只 )、IP组 (4 1只 )及假手术 (S)组 (38只 ) ,术后 2h ,2 4h及 1周时检测血浆NO浓度及肝组织NOS2的转录及表达。结果 :①血浆NO浓度 :IP组在术后 2h ,2 4h ,1周时均升高 ,均显著高于S组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 1) ,于 2h及2 4h时均显著高于I/R组 (均P <0 .0 1) ;I/R组在 2h时显著低于S组 (P <0 .0 5 ) ,2 4h与S组无统计学差异 (P >0 .0 5 ) ,1周时显著高于S组 (P <0 .0 5 )。②肝脏NOS2的转录 :IP组在 2h及 2 4h时较I/R组显著增强 (均P <0 .0 5 ) ,1周后差异无显著性 (P >0 .0 5 )。③肝脏NOS2的表达 :在 2h及 2 4h时IP组均显著高于I/R组及S组 (均P<0 .0 5 ) ,I/R组与S组之间差异不显著 (P >0 .0 5 ) ;1周时 ,IP组及I/R组呈弱阳性表达 ,两组间差异不显著 (P >0 .0 5 ) ;S组NOS2显色呈阴性。结论 :大鼠肝脏IP过程中NOS2的转录及表达增强 ,其高转录与表达时相的提前可能与IP的早期保护效应有关。     

NO-cGMP通路在早期心肌缺血预适应中的作用

目的 研究心肌缺血预适应时一氧化氮-环磷酸鸟苷(NO-cGMP)通路的变化,并探讨引起变化的原因及意义.方法 选择SD大鼠,随机分成假手术组(CON组,n=6),预适应组(IP组,n=12),缺血再灌注组(I/R组,n=12)和预适应程序组(PC组,n=36).以手术套管法造成左冠状动脉主干缺血再灌注,损伤后取心脏组织检测NO、一氧化氮合成酶(NOS)和cGMP水平.结果 IP组NO、NOS和cGMP较I/R组明显增高(P＜0.05);PC组中,NO及cGMP含量随缺血及再灌注呈周期性波动.结论 NO-cGMP通路参与预适应的保护作用,并可能是预适应作用的激发者和中介者.     

Kyoto Breast Cancer Consensus Conference

Background To date, there have been no reports on altered nitric oxide （NO） content in ischemia/reperfusion with regard to in vivo preconditioning procedures. These studies are important for understanding the mechanisms of NO during early myocardial ischemic preconditioning. The aim of the present study was to investigate the mechanisms of NO during early myocardial ischemic preconditioning by measuring levels of NO and cyclic guanosine monophosphate （cGMP）, as well as activity of nitric oxide synthase （NOS） in ischemia/reperfusion with respect to preconditioning in rats.
Methods Sixty-six female Sprague-Dawley rats were randomly divided into four groups： ischemic preconditioning group （IP）, ischemia/reperfusion group （I/R）, control group （CON）, and preconditioning procedure group （PC）. In the PC group, rats were further divided into PC1-, PC1＋, PC2-, PC2＋, PC3-, and PC3＋ subgroups. Rats underwent left coronary artery occlusion and reperfusion, and subsequently, NOS activity and levels were assessed with spectrophotometric analysis. cGMP contents were measured with radioimmunoassay.
Results The level of NO and cGMP, as well as the activity of NOS, were significantly higher in the IP group compared to the I/R and CON groups （P 〈0.05）. During preconditioning prior to prolonged ischemia, NO and cGMP levels varied markedly with ischemia and reperfusion. The levels of NO repeatedly increased when the heart was exposed to three episodes of 5-minute ischemia, and were almost completely reversed during each reperfusion period. NO and cGMP levels were significantly different between the 5-minute period of ischemia and the same period of reperfusion during preconditioning.
Conclusions NO plays an important role during early phase myocardial ischemic preconditioning in rats. NO and cGMP could be triggers and mediators of early phase myocardial ischemic preconditioning. Altered NOS activity following ischemic stress could be the primary inducer of higher NO levels detected. NO     

陈旧性坐骨神经损伤对大鼠腓肠肌组织一氧化氮、一氧化氮合酶和细胞凋亡的影响

目的:探讨陈旧性坐骨神经损伤对大鼠腓肠肌组织一氧化氮(NO)的含量、一氧化氮合酶(NOS)活性和肌细胞凋亡的影响。方法:切断大鼠右侧坐骨神经10mm的缺损。于术后1、3、6个月分别用硝酸还原法测定大鼠腓肠肌NO的含量;用化学比色法测定NOS的活性;原位缺口末端标记(TUNEL)法检测肌细胞凋亡指数(AI)的变化;透射电镜观察肌细胞超微结构的变化。结果:与正常组相比,1个月大鼠腓肠肌组织NO含量、NOS活性有所增加,AI变化不明显。3、6个月NO量显著上升、NOS活性显著增加、肌细胞AI增加(P均<0.01),超微结构显示细胞凋亡现象明显增多,且随神经损伤时间的延长而增加。结论:陈旧性坐骨神经损伤能导致肌细胞凋亡增加,其原因可能与NO的增多有关。     

黄蜀葵花总黄酮预处理对大鼠脑缺血再灌注性损伤的保护作用

目的探讨黄蜀葵花总黄酮（TFA）对大鼠脑缺血再灌注损伤的预适应样保护作用。方法采用间断静脉推注TFA模拟预适应的实验方法，观察大鼠大脑中动脉栓塞再灌致脑梗死面积、血清中乳酸脱氢酶（LDH）和一氧化氮合酶（NOS）活性以及血清中前列腺素E2（PGE2）、一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）含量等指标的变化。结果TFA（160、80、40、20mg／kg）预处理明显减少脑梗塞面积并可明显降低血清中LDH活性、MDA和PGE2含量，同时明显增加血清中NOS活性和NO含量。结论黄蜀葵花总黄酮预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤具有缺血预适应样的保护作用。     

心肌缺血预适应对心肌的梗死面积及梗死后左室功能的影响

目的：探讨心肌缺血预适应对梗死心肌的保护作用。方法：对２５例急性心肌梗死（ＡＭＩ）患者按发病前２４ｈ内有无心绞痛分为有缺血预适应组（ＩＰ,１２例）及无缺血预适应组（ＮＩＰ,１３例）,并对各组患者的左室舒张功能和心肌梗死面积进行统计分析。结果：ＩＰ的心肌酶ＣＫ,ＣＫ－ＭＢ峰值、心电图估测的梗死面积及左室舒张功能指标二尖瓣血流Ａ／Ｅ比值均低于ＮＩＰ组,而左室收缩功能指标左室短轴缩短率（ＦＳ）无明显变化     

早期一氧化氮抑制对大鼠睾丸生精功能迟发性损伤的防护作用

目的 研究早期局部一氧化氮(NO)抑制在大鼠单侧睾丸扭转后对侧睾丸生精功能迟发性损伤中的防护作用.方法 将56只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、安慰剂组、N-一甲基-L-精氨酸(L-NMMA)组和环孢素组,每组14只.建立左侧睾丸扭转模型,并做相应的药物处理.各组大鼠分别于术后1、8周时各处死7只,即刻采集未扭转侧睾丸标本,测定睾丸组织中丙二醛水平和NO/一氧化氮合酶(NOS)含量,同时组织病理学观察以及MHC肽-四聚体复合物流式细胞仪分析.结果 术后1周时L-NMMA组丙二醛值为(181±22)nmol/g、NO含量为(112±18)μmol/g、NOS含量为(9.3±1.6)U/mg、MHC肽-四聚体复合物比例为0.36±0.09,与安慰剂组比[分别为(276±31)nmol/g、(195±22)μmol/g、(13.5±2.2)U/mg、0.58±0.10],差异均有统计学意义(均P＜0.05);L-NMMA组对侧睾丸组织早期和晚期病理损伤较安慰剂组轻.结论 抑制早期局部NO的产生,对早期对侧睾丸生精功能有一定的防护作用.     

一氧化氮参与缺血预处理的心肌保护

目的：研究 Ｎ Ｏ 在缺血预处理（ Ｉ Ｐ） 心肌保护中的作用。方法：观察一氧化氮合酶抑制剂 Ｎ硝基 Ｌ精氨酸甲基酯（ Ｌ Ｎ Ａ Ｍ Ｅ） 对大鼠心肌缺血预处理时心脏血流动力学、心肌组织 Ｎ Ｏ 含量、脂质过氧化物和氧自由基的影响。结果：短暂的预处理缺血使心肌组织 Ｎ Ｏ 含量升高,同时心脏舒缩功能改善,丙二醛（ Ｍ Ｄ Ａ） 下降,超氧化物歧化酶（ Ｓ Ｏ Ｄ） 上升。在缺血预处理前应用 Ｌ Ｎ Ａ Ｍ Ｅ 完全抑制 Ｎ Ｏ 的产生,缺血预处理的心肌保护作用消失。结论：缺血预处理末大鼠心肌组织 Ｎ Ｏ 含量增加,此短暂增加的 Ｎ Ｏ 参与了缺血预处理的心肌保护。     

解耦联蛋白-2与诱导型一氧化氮合酶在大鼠缺血预适应保护机制中的作用

目的:探讨解耦联蛋白-2(UCP-2)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在大鼠心肌缺血预适应(IPC)保护机制中的作用。方法:采取结扎左冠状动脉的方法复制大鼠心肌缺血-再灌注(I/R)模型。IPC组行3次缺血5 min、再灌注10 min的预处理,分别于预处理0、6、12、24和48 h后进行30 min缺血及120 min再灌注;对照组剖胸后不结扎左冠状动脉,分别采用Western blot及比色法检测心肌中UCP-2蛋白活性及iNOS活性。结果:IPC后各组UCP-2活性均增高(与I/R组比较,P<0.05),其中0 h组UCP-2表达水平最高(与I/R组比较,P<0.01),24 h组和48 h组心肌iNOS活性显著升高(与I/R组比较,P<0.05)。结论:UCP-2和iNOS共同参与了大鼠心肌缺血预适应的心肌保护作用。