丹参醇提物在大鼠体内的药动学研究

目的建立大鼠血浆中丹参酮ⅡA和隐丹参酮的HPLC-UV检测法,并研究丹参脂溶性成分在大鼠体内的药动学。方法以吉非罗齐为内标,血浆样品经简单的甲醇沉淀蛋白后,上清液直接进样测定。大鼠尾iv丹参醇提取物(以丹参酮ⅡA计为5 m g/只),测定各时点丹参酮ⅡA和隐丹参酮的血药浓度,绘制药-时曲线,采用3p87计算药动学参数。结果大鼠尾iv丹参醇提取物后,丹参酮ⅡA的主要药动学参数分别为:t1/2α为(0.088±0.024)h,t1/2β为(2.1±0.7)h;VC为(0.8±0.6)L;CL为(2.0±1.1)L/h-1;AUC0-4和AUC0-∞分别为(2.2±0.9)m g.h/L和(3.4±1.7)m g.h/L。结论丹参醇提取物iv给药后,丹参酮ⅡA的药-时曲线符合二室模型,血浆中丹参酮ⅡA迅速下降,表观分布容积大;隐丹参酮在血浆中消除快,药动学参数不易获得。     

基于壳聚糖的丹参酮IIA固体分散体的研究

目的 将壳聚糖（CS）应用于丹参酮II_A（Tan II_A）固体分散体的制备,考察并比较以不同相对分子质量（M_W）的CS为载体的Tan II_A固体分散体的溶出度。方法 以CS为载体,采用溶剂法制备Tan II_A固体分散体,对不同M_W的CS以及药物与载体的不同比例所制备固体分散体的溶出行为进行比较研究,并进行物相分析。结果 Tan II_A-CS（M_W 3 000～5 000）按1∶9比例制备的固体分散体的体外溶出效果最好,60 min时药物的体外累积溶出率达到90%以上;经差示扫描量热（DSC）和扫描电镜（SEM）分析,固体分散体中药物以非晶形形式存在于载体中。结论 以CS为载体制备的Tan II_A固体分散体能显著改善Tan II_A的溶出;CS作为Tan II_A一种新型的固体分散体载体,具有实际应用价值。     

不同提取工艺的丹参提取物在大鼠体内的药动学研究

目的 研究不同提取方法所得丹参提取物中丹参酮Ⅱ_A与丹酚酸B在大鼠体内的药动学。方法 大鼠禁食12 h后,分别将加热回流法、集成法、醇酸回流法和梯度渗漉法所得丹参提取物ig给予大鼠,对不同时刻血浆中的目标成分进行定量测定,绘制出各提取方法下的药时曲线并计算药动学参数。结果 对于丹参酮Ⅱ_A而言,加热回流法、集成法、梯度渗漉法和醇酸回流法所得提取物大鼠体内的C_max分别为（0.25±0.03）、（0.35±0.06）、（0.32±0.04）、（0.24±0.02）mg/L;AUC为（101.97±12.95）、（130.46±18.83）、（128.67±16.63）、（100.11±13.76）mg?min/L。对于丹酚酸B而言,以上四种方法所得提取物在大鼠体内的C_max分别为（7.17±0.97）、（11.98±1.75）、（10.24±1.05）、（12.16±2.08）mg/L;AUC为（697.31±80.32）、（833.41±96.53）、（719.39±102.41）、（906.96±125.87）mg?min/L。结论 对定量测定和药动学参数进行统计分析,可知集成法所提取的丹参脂溶性成分和水溶性成分含量均比较高,并在体内有较好的吸收,说明该法所得的提取物中丹参酮Ⅱ_A和丹酚酸B的质量分数较高,提取效果可能较好。     

泛昔洛韦缓释微丸体内测定方法的建立及药动学研究

目的：建立泛昔洛韦（FCV）缓释微丸体内血药浓度的测定方法并进行体内药动学研究。方法：以甲醇和0.02mol/L磷酸二氢钾（9∶91）为流动相,选择6条家犬口服泛昔洛韦缓释微丸375mg后,利用高效液相色谱法（HPLC）测定6条家犬的血药浓度并对其进行药动学的研究。结果：本法的线性范围为0.1-10μg/ml,r=0.9943,日内及日间RSD均小于10%。FCV缓释微丸在体内的代谢产物喷昔洛韦（PCV）的tmax为（4.80±0.84）h,Cmax为（2.61±1.37）mg/L,AUC0→∞为（25.59±7.58）mg/h/L,MRT为（9.85±2.47）h。结论：本方法简便快速,无干扰,重现性好,可用于泛昔洛韦在体内的药动学研究,并且通过本实验的体内测定方法得到了家犬体内的药动学参数。     

丹参酮IIA、隐丹参酮和丹参酮I组合物在斑马鱼体内的代谢研究

目的 研究丹参酮II_A、隐丹参酮和丹参酮I组合物（组合物）在斑马鱼体内的代谢,探讨斑马鱼用于中药多组分代谢研究的可行性及合理性。方法 将斑马鱼暴露于组合物1% DMSO纯净水溶液中,采用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱（HPLC-MS）检测,根据准分子离子峰获得代谢物相对分子质量信息,通过与文献数据或对照品比较,鉴定组合物暴露于斑马鱼24 h后的药液及鱼体中的代谢产物。结果 组合物经斑马鱼作用后,产生丹参酮II_A和隐丹参酮的羟基化和脱氢产物,未发现丹参酮I的代谢产物。结论 斑马鱼对组合物的代谢与大鼠或鼠肝微粒体的代谢机制高度一致,提示斑马鱼对该组合物的代谢具合理性,且具有化合物用量少、成本低、简单、高效等优点,为斑马鱼用于更复杂的中药体系代谢研究提供依据。     

乳腺丸中阿魏酸在兔体内的药动学研究

目的研究乳腺丸中阿魏酸在兔体内的药动学特性。方法采用高效液相色谱法测定阿魏酸的血药浓度。以香豆素为内标,甲醇-醋酸-水(38.0∶0.5∶61.5)为流动相,ODS Hypers il C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,检测波长为320 nm。结果阿魏酸在12.5~1 600.0μg/L呈线性,血浆最低检测质量浓度为6.25μg/L,低、中、高3种质量浓度平均回收率分别为96.17%、99.80%、100.23%,日内及日间RSD均<6%,5只兔单次ig乳腺丸后药-时曲线符合一室模型,药动学参数分别为AUC0-4(855.29±100.78)μg/(L.h),AUC0-∞(1 051.99±125.96)μg/(L.h),Cm ax=(952.71±119.04)μg/(L.h),tm ax=(0.5±0.00)h,t1/2=(1.61±0.21)h,Ke=(0.46±0.05)/h。结论本方法准确、重现性好,适用于乳腺丸中阿魏酸血药浓度测定及药动学研究。     

LC-MS／MS法测定大鼠血浆中3种丹参酮浓度及药动学研究

目的：建立LC-MS／MS法测定大鼠血浆中丹参酮I、隐丹参酮及丹参酮IIA的浓度,并对大鼠口服丹参酮提取物后的3种丹参酮成分进行药代动学研究。方法：血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以甲醇（含O．1％甲酸）一水（含0．1％甲酸）为流动相,梯度洗脱,采用AgilentZorbaxSB-C18（2．11T11TI×150lrllrt,5斗m）色谱柱分离,质谱以电喷雾离子源,选择反应监测（SRM）方式进行正离子检测。用于定量分析的离子反应分别为m／z277．1→249．1（丹参酮I）,m／z297．1→251．2（隐丹参酮）,m／z295．1→277．1（丹参酮IIA）和m／z360．9→233．0（内标,非诺贝特）。结果：丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮IIA的线性范围为2-100ng·mL-1,日内、日间精密度（RSD）均小于12．0％,高、中、低3种浓度平均方法回收率均大于89．4％。结论：本方法灵敏、简便,可用于丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮IIA的药代动力学研究。     

丹参提取物中丹酚酸B在大鼠体内的药动学参数研究

目的 考察丹参提取物中丹酚酸B在大鼠体内的药动学行为.方法 按1 kg体质量大鼠给予丹参提取物1.5g的剂量口服给药,HPLC-MS法测定不同时间点的血药浓度,并以DAS3.0软件计算其药动学参数.结果 大鼠体内丹酚酸B的t1/2为(39.91±1.25) min,Cmax为(25.15±3.52) μ.g·mL-...     

芪苈强心胶囊中酚酸类成分在大鼠体内药动学研究

[目的]建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）的方法,考察大鼠灌胃给药后,芪苈强心胶囊中酚酸类成分（丹酚酸A、丹酚酸B、丹参素、紫草酸、迷迭香酸、原儿茶酸）的药动学特征。[方法]采用Agilent ZOBRAX XDB-C₁₈色谱柱（4.6 mm×50 mm,3.5 μm）,柱温40℃,流动相[0.1% 甲酸水溶液（A）]-[含0.1% 甲酸的乙腈溶液（B）]梯度洗脱,流速0.45 mL/min,进样量 10 μL;采用电喷雾离子源（ESI）,多反应监测（MRM）负离子模式下测定血药浓度。[结果]方法学结果符合要求。大鼠灌胃芪苈强心胶囊后,血浆中6种酚酸类活性成分的达峰时间（T_max）在10~40 min内,半衰期（t_1/2）在3.34~8.38 h间;血药达峰浓度（C_max）和血药浓度-时间曲线下面积（AUC_0-∞）从大到小排序依次为丹酚酸B > 丹参素 > 紫草酸 > 迷迭香酸 > 原儿茶酸 > 丹酚酸A。[结论]该检测方法专属性强,重复性好,可用于芪苈强心胶囊中酚酸类成分的药动学研究。     

复方丹参缓释胶囊在犬体内的药动学研究

目的 考察复方丹参缓释胶囊在犬体内的药效动力学。方法 采用多元定时释药技术制备复方丹参缓释胶囊,以血小板聚集抑制率为评价指标,以市售复方丹参片为参比制剂,对自制复方丹参缓释胶囊进行犬体内药效动力学研究。结果 犬单剂量口服给药后,复方丹参缓释胶囊的效应峰值(E_max)为18.62％,效应达峰时间(t_max)为8 h,效应半衰期(t_1/2)为2.40 h,平均效应滞留时间（MRT）为8.11 h;而市售复方丹参片的E_max为44.34％,t_max为3.5 h,t_1/2为1.54 h,MRT为4.57 h。结论 与复方丹参片相比,复方丹参缓释胶囊的药效更加温和而持久,达到了预期的缓释效果。     

海藻、芫花反甘草的研究进展

中药配伍中相反指两种药物合用产生或增强毒性或使疗效降低,而“十八反”是重要的配伍禁忌,也是现代药性理论争议最多的问题,且至今尚未形成较统一的判断标准和结论。主要介绍了“十八反”中有关海藻、芫花反甘草的毒性和机制研究,探讨了影响“十八反”的因素,并在此基础上提出根据不同药物的特点确定其特定部位的安全药理实验内容的观点。     

一测多评法测定丹参中4种丹参酮类成分

目的 建立测定丹参中4种丹参酮类成分的一测多评法。方法 采用HPLC法,以丹参酮II_A为对照品,外标法测定其在丹参中的量,同时测定丹参酮II_A与丹参酮I、隐丹参酮、二氢丹参酮的相对校正因子,用获得的相对校正因子计算后3种成分的量,实现一测多评;用外标法测定丹参中丹参酮I、隐丹参酮和二氢丹参酮的量,比较其与采用相对校正因子计算值之间的差异。结果 各相对校正因子重现性良好;各成分采用相对校正因子计算的量值与外标法测定值之间无显著差异。结论 一测多评法在丹参中4种丹参酮类成分的测定中具有适用性和可行性。     

硅胶柱色谱结合高速逆流色谱法分离纯化丹参中丹参酮

目的 建立硅胶柱色谱结合高速逆流色谱（HSCCC）法分离纯化丹参中丹参酮的方法。方法 丹参粗提物经硅胶柱色谱分离,得到组分F1、F2,分别采用石油醚-醋酸乙酯-甲醇-水（4∶3∶4∶2）、（8∶5∶8∶3）的溶剂系统进行HSCCC分离,下相为流动相,体积流量2.0 mL/min,转速850 r/min,检测波长254 nm,所得产物采用ESI-MS、NMR进行结构鉴定。结果 80 mg组分F1分离得到丹参酮I（14 mg）、二氢丹参酮I（22 mg）、丹参酮II_A（26 mg）;80 mg组分F2分离得到二氢丹参酮（11 mg）、三叶鼠尾酮B（15 mg）、隐丹参酮（30 mg）;6个化合物进行HPLC分析,质量分数均大于96%。结论 硅胶柱色谱结合HSCCC是一种有效的分离制备丹参酮的方法。     

不同产地丹参药材质量研究

目的 建立丹参药材多指标成分测定方法,综合评价不同产地来源丹参药材的质量。方法 采用HPLC法测定,Diamonsil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈（A）-0.05%磷酸水（B）为流动相,梯度洗脱（0～8 min、10%～25%A;8～20 min、25%A;20～25 min、25%～40%A;25～35 min、40%～100%A;35～40 min、100%～10%A;40～45 min、10%A）,体积流量1.0 mL/min,检测波长280 nm,柱温30 ℃。结果 丹参素、迷迭香酸、丹酚酸B及丹参酮II_A分别在0.037 12～0.556 8 mg/mL（r＝0.997 1）、0.022 04～1.102 mg/mL（r＝0.999 2）、0.277～8.31 mg/mL（r＝0.999 9）、0.016 08～0.804 mg/mL（r＝0.999 7）线性关系良好,平均回收率分别为101.3%（RSD＝1.72%）、102.4%（RSD＝1.05%）、102.9%（RSD＝1.67%）、97.9%（RSD＝1.42%）。结论 不同产地丹参药材各指标成分量差别较大;所建立的多指标成分测定方法准确、可靠、重复性好,可有效评价不同产地丹参药材的质量。     

杭白菊、当归、丹参提取液抑制黄褐斑形成及机制研究

目的 观察杭白菊、当归、丹参提取液对im黄体酮及紫外（UV）照射导致的黄褐斑小鼠模型的抗氧化与抗黄褐斑形成作用。方法 将小鼠随机分成对照组、模型组、维生素C组、杭白菊组、当归组、丹参组共6组。采用im黄体酮及辅助UV照射方法建立黄褐斑小鼠模型。测定各组肝脏及皮肤组织中的谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、酪氨酸酶（TYR）活性与总抗氧化能力（T-AOC）,以及丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、肝脏脂褐质水平,并测定血液流变学指标,进行皮肤病理学检查。结果 杭白菊、当归、丹参提取液显著增强黄褐斑小鼠肝脏和皮肤中GSH-Px、SOD活性,降低MDA水平,抑制TYR增加,使黑素细胞（MC）生成减少,抑制黑色素合成,从而减轻皮肤色素沉着。结论 杭白菊、当归、丹参提取液有一定的防治黄褐斑的功效,其作用与提高机体抗氧化能力,抑制TYR活性,减少黑色素的合成以及改善机体的血液流变学有关。     

虎杖多指标成分测定及质量控制方法研究

目的 采用HPLC-DAD和HPLC-TOF/MS对虎杖中二苯乙烯类、蒽醌类和黄酮类等化合物进行快速分析,将多指标成分的测定和明晰化指纹图谱共同应用于中药质量控制的研究模式中。方法 采用Agilent SB-C_l8柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,分别采用HPLC-DAD和HPLC-TOF/MS两种分析方法对虎杖中化学成分进行分离测定。结果 共从虎杖鉴别出中2个二苯乙烯类、10个蒽醌类和10个黄酮类成分,HPLC-DAD法可以同时测定虎杖药材中的虎杖苷、白藜芦醇和大黄素、大黄素甲醚。结论 采用HPLC-DAD和HPLC-TOF/MS对虎杖中二苯乙烯类、蒽醌类和黄酮类成分进行快速分析测定,有效地控制虎杖的质量。     

单向灌流法研究丹参中丹参素和原儿茶醛大鼠肠吸收特性

目的 研究丹参提取物中丹参素和原儿茶醛的大鼠在体肠吸收动力学特征。方法 采用大鼠在体肠单向灌流装置,并用质量法校正灌流液体积,考察灌流液体积流量、灌流液pH值、胆管结扎、丹参提取物质量浓度、吸收部位以及P-糖蛋白（P-gp）对丹参素和原儿茶醛吸收的影响,以HPLC法分别测定丹参素和原儿茶醛。结果 在灌流体积流量0.2～0.8 mL/min,随着灌流体积流量的增大,丹参素和原儿茶醛的吸收速率常数（K_a）和表观吸收系数（P_app）均呈线性增大;在考察pH值为7.4、6.8、5.5时,供试液的pH值对丹参素和原儿茶醛的吸收有显著影响（P＜0.05）,丹参素和原儿茶醛的K_a和P_app均随pH值的降低而升高,pH 5.5和pH 6.8的吸收无显著差异,而pH 5.5与pH 7.4吸收有显著差异（P＜0.05）;胆管结扎组与不结扎组的丹参素和原儿茶醛的K_a和P_app均无显著差异;在不同吸收部位,丹参素的K_a和P_app分别按照十二指肠、空肠、回肠和结肠的顺序依次下降,原儿茶醛则下降趋势不明显,全肠段都有很好的吸收;在丹参提取物质量浓度0.8、1.5、2.2 mg/mL时小肠中丹参素的K_a和P_app随质量浓度升高而降低,而原儿茶醛吸收参数则无明显变化;含P-gp抑制剂组与不含P-gp抑制剂组相比,丹参素和原儿茶醛的K_a和P_app均无显著差异。结论 灌流体积流量对丹参素和原儿茶醛的吸收有显著影响;随着pH值的降低,丹参素和原儿茶醛的吸收增加;胆管结扎与否对吸收没有显著影响;丹参素和原儿茶醛在整个肠段都有一定吸收,丹参素在肠上端吸收要比下端好;随着丹参提取物质量浓度的增大,原儿茶醛的K_a和P_app无明显变化,故其在肠道的吸收呈一级动力学过程,推测其吸收机制为被动扩散;而丹参素的K_a和P_app有明显减小的趋势,推测其吸收机制除被动扩散外,还可能有主动吸收或易化扩散;丹参素和原儿茶醛均不受P-gp的外排吸收影响。     

不同加工与贮藏方法对商洛产丹参药材品质的影响

目的 考察几种加工和贮藏方法对丹参药材中丹参酮II_A、丹酚酸B和丹参素以及药材表面、断面颜色的影响,以寻找出丹参药材的最适加工和贮藏方法。方法 分别采用晒干、烘干加工处理丹参药材;对加工后的药材分别采用常温贮藏、常温避光贮藏,分别贮藏0、1、2、4、6、9、12、18、24个月,采用HPLC法分别测定其中丹参酮II_A、丹酚酸B和丹参素的量,并观察药材表面、断面颜色。结果 40～80 ℃烘干对丹参药材中丹参酮II_A影响不明显;当温度高于60 ℃,对丹酚酸B造成明显损失;丹参素的量随着干燥温度的升高有所增加;当干燥温度高于70 ℃,对丹参的表面和断面颜色产生影响。采用40～60 ℃烘干所得丹参药材中丹酚酸B的量及丹参的表面和断面色泽优于传统的晒干法。结论 从活性成分量的损失、药材外观色泽变化及节约生产成本等方面综合考虑,丹参药材的加工方法应以40～60 ℃烘干为宜,贮藏方法以常温避光贮藏不超过24个月为宜。     

制川乌与川贝母、浙贝母配伍前后化学成分的变化研究

目的 研究制川乌与川贝母、浙贝母配伍前后其化学成分的整体变化情况,从而分析乌头反贝母的相反机制。方法 使用UPLC-ESI-LTQ-MS对配伍前后的煎煮液进行分析,采用主成分分析（PCA）对数据进行分析并采用多级串联质谱技术对化学标志物进行鉴定。结果 制川乌与川贝母、浙贝母配伍前后成分均有明显差异,其中与川贝母配伍产生5个化学标志物,与浙贝母配伍产生6个化学标志物,重复出现的标志物为次乌头碱和苯甲酰基次乌头原碱。结论 制川乌与两种贝母配伍后的化学标志物差异较大,仅有2个相同,结合前期的急性毒性试验结果,推测制川乌与不同贝母配伍后LD₅₀的变化与其配伍后化学成分的变化相关;从而说明相反不完全是通过其化学成分变化引起的,其相反机制可能还通过其他因素共同引起。