HPLC法测定稳心颗粒中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Rd与党参炔苷的含量

[目的] 建立高效液相法（HPLC）同时测定稳心颗粒中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、Rb₁、Rd与党参炔苷的含量。[方法] 采用Agilent1260 DAD高效液相色谱仪,Amethyst C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,4μm）,乙腈-水为流动相,检测波长为210 nm,流速1 mL/min。[结果] 三七皂苷R₁对照品在8~247 mg/L线性关系良好,平均回收率为102.69%,RSD=2.74%（n=6）;人参皂苷Rg₁对照品在14~422 mg/L线性关系良好,平均回收率为98.72%,RSD=1.85%（n=6）;党参炔苷对照品在1.5~42 mg/L线性关系良好,平均回收率为97.69%,RSD=1.94%（n=6）;人参皂苷Rb₁对照品在2.65~847 mg/L线性关系良好,回收率为102.11%,RSD=1.96%（n=6）;人参皂苷Rd对照品在8~255 mg/L线性关系良好,平均回收率为99.66%,RSD=2.49%（n=6）。[结论] 本实验中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、Rb₁、Rd和党参炔苷的含量测定方法稳定可靠,可作为稳心颗粒中三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、Rb₁、Rd与党参炔苷含量测定方法。     

西洋参不同器官中皂苷量与鲨烯合成酶和鲨烯环氧酶基因表达的相关性

目的 探讨西洋参不同组织器官中总皂苷和单体皂苷量的差异及其与人参皂苷合成途径中鲨烯合成酶（SQS）和鲨烯环氧酶（SQE）基因表达量之间的关系。方法 以4年生西洋参的14个组织器官为材料,索氏回流法提取总皂苷,采用HPLC法测定6种单体皂苷（人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rc、Rb₂和Rd）的量,用香草醛-硫酸比色法测定总皂苷量。通过实时荧光定量PCR分析SQS和SQE基因在西洋参14个组织器官中的表达量。结果 总皂苷和单体皂苷量在西洋参不同组织器官中差异非常显著（P＜0.01）。除人参皂苷Rb₂外,各单体皂苷及总皂苷之间均呈非常显著的正相关关系（P＜0.01）。SQS和SQE基因在14个组织器官中的表达量具有非常显著的差异（P＜0.01）并与人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁、Rd和总皂苷量之间有显著的正相关关系（P＜0.05）。结论 西洋参不同组织器官中皂苷的量存在差异,SQS和SQE基因在人参皂苷合成途径中起着极其重要的作用。     

人参皂苷对人参幼苗生长发育的影响

目的 考察人参总皂苷（total ginsenosides,TGS）和人参皂苷Rg₁、Rb₁、Re的生态活性。方法 从四年生的人参根中提取TGS并进一步分离出3种单体皂苷,考察了不同质量浓度（25、50、100 mg/L）的TGS和人参皂苷Re、Rg₁、Rb₁对人参幼苗生长发育的影响。结果 TGS和人参皂苷Rb₁处理对人参的幼苗和幼根的生长发育表现出明显的高质量浓度抑制而低质量浓度促进作用,而人参皂苷Rg₁和Re却对人参幼苗的各项生长指标总体表现为微弱的促进作用,4种化合物的抑制效应依次为人参皂苷Rb₁＞TGS＞人参皂苷Rg₁＞人参皂苷Re,其中TGS和人参皂苷Rb₁处理组人参生长的变化趋势相近。人参幼苗叶绿素的合成随着各皂苷质量浓度的升高而降低,但高质量浓度处理的叶绿素量仍然都高于对照。透射电镜观察到人参幼根细胞在100 mg/L TGS和人参皂苷Rb₁处理后,发生了质壁分离和细胞器降解,液泡膜也逐渐分解,核膜变得模糊不清。人参根尖在高质量浓度的人参皂苷处理后因细胞功能受损而不能完成正常的生理活动。结论 TGS和3种单体皂苷对人参幼苗生长发育的作用效应不同,TGS和人参皂苷Rb₁有较明显的化感活性。     

人参皂苷Rb1对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖及凋亡的影响

目的 研究人参皂苷Rb₁对小鼠T淋巴细胞体外活化及增殖的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。方法 分离制备小鼠淋巴结细胞悬液;以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测在刀豆蛋白A（ConA）的刺激下,人参皂苷Rb₁对早期活化标志CD3/CD69和调节T淋巴细胞标志CD4/CD25表达的影响;用羧基荧光素乙酰乙酸（CFDA-SE）染色结合流式细胞术和MTT法检测在ConA的刺激下,人参皂苷Rb₁对T淋巴细胞增殖的影响;DIOC/PI双染技术检测在H₂O₂作用下,人参皂苷Rb₁对淋巴细胞凋亡进程的影响。结果 终浓度为5、10、20 μmol/L的人参皂苷Rb₁对ConA刺激的调节T淋巴细胞CD4^＋/CD25^＋的表达具有促进作用,而CD3^＋/CD69^＋的表达明显下调（P＜0.01）;对ConA刺激的T淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用（P＜0.05）,且呈剂量依赖性;人参皂苷Rb₁显著抑制H₂O₂诱导的淋巴细胞的凋亡进程（P＜0.05）。结论 人参皂苷Rb₁对小鼠淋巴细胞的体外活化及增殖均具有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。     

人参超声逆流提取工艺研究

目的 优化人参超声逆流提取工艺。方法 以人参皂苷Rb₁、Rg₁和Re的总提取率为考察指标,采用正交试验设计对人参超声逆流提取工艺参数进行考察。结果 人参超声逆流提取工艺最佳条件是药材粉碎过30目筛,用70%乙醇,溶媒逆流体积流量与进料质量流量之比为8。结论 优选的提取工艺科学合理,适于大规模生产。     

高效液相色谱法测定血塞通胶囊中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd及三七皂苷R1的含量

[目的] 建立血塞通胶囊中5种皂苷的含量测定方法。[方法] 采用高效液相色谱法对制剂中的人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rd和三七皂苷R₁进行定量测定。[结果] 人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁、Rd和三七皂苷R₁的线性范围均符合要求,5种皂苷样品回收率均合格,RSD在3.00%以内。[结论] 所建立的方法简便、快捷,重复性好,可用于该制剂的质量控制。     

RP-HPLC测定活血止痛片中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1含量

[目的]建立活血止痛片中三七皂苷R₁和人参皂苷Rg₁的含量测定方法。[方法]采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。[结果]三七皂苷R₁的线性范围为0.207~1.036μg,人参皂苷Rg₁的线性范围为0.829~4.148μg,样品平均回收率分别为96.1%,97.3%,RSD分别为2.02%,2.34%。[结论]本方法可准确测定活血止痛片中三七皂苷R₁和人参皂苷Rg₁的含量。     

三七总皂苷的大孔吸附树脂纯化工艺和质量分析研究

目的 建立三七总皂苷的大孔吸附树脂纯化工艺方法,并对总皂苷进行质量分析。方法 以三七总皂苷中4种主要皂苷类成分的转移率为评价指标,优选大孔吸附树脂纯化工艺条件;采用RP-HPLC法测定总皂苷中4种主要皂苷类成分的量,并建立HPLC指纹图谱;色谱条件：Kromasil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,乙腈-水线性梯度洗脱,体积流量1 mL/min,柱温30 ℃,检测波长203 nm。结果 三七总皂苷得率约10%,其中含三七皂苷R₁,人参皂苷Rg₁、Re和Rb₁的总量大于69%。HPLC指纹图谱中共确定14个特征峰,主要色谱峰分离良好。以峰1为参照峰（S）,计算14个特征峰的相对保留时间和相对峰面积,各色谱峰精密度、稳定性和测定重复性RSD均小于1.64%。结论 本工艺皂苷类成分转移率高,工艺简便,提取物得率高、纯度好;HPLC定量测定和指纹图谱测定方法准确,重现性良好,可用于准确评价总皂苷提取物的质量。     

LC-ESI-MSn法鉴定心悦胶囊中西洋参皂苷类成分

目的 建立LC-MS法确定心悦胶囊的主要组成成分。方法 采用LC-ESI-MS负离子检测模式对心悦胶囊中的皂苷类成分进行分析,通过与胶囊辅料提取物比较,筛选胶囊的主要成分,对其进行多级质谱裂解分析。以对照品及文献数据为对照,通过对各成分的MS²谱图和MS³谱图的解析对各成分进行指认。结果 从心悦胶囊中发现包括原人参二醇型、原人参三醇型和奥寇梯木醇型皂苷在内的18种人参皂苷类成分,采用对照品对其中的人参皂苷Re(ginsenoside Re,G-Re)、Rg₁(G-Rg₁)、拟人参皂苷F₁₁(pseudoginsenoside F₁₁,P-F₁₁)、人参皂苷Rg₂(G-Rg₂)、人参皂苷Rc(G-Rc)、Rb₂(G-Rb₂)、Rb₃(G-Rb₃)、Rd(G-Rd)、F₂(G-F₂)、20(S)-人参皂苷Rg₃［20(S)-G-Rg₃］等10个成分进行了结构确证。结论 所建立的LC-MSⁿ法可同时对奥寇悌隆型人参皂苷、原人参二醇型和原人参三醇型人参皂苷进行分析,方法灵敏、快速、简单,适用于心悦胶囊和西洋参皂苷类成分的分析和结构鉴定。     

人参皂苷Rb1在林可霉素诱导的菌群失调大鼠体内的药代动力学

肠道菌群介导的脱糖基代谢在人参皂苷Rb₁代谢及药代动力学中起着重要作用,本文对人参皂苷Rb₁在林可霉素诱导的菌群失调大鼠体内的药代动力学及脱糖基代谢特征进行研究。基于UPLC-MS/MS建立同时测定大鼠血浆中人参皂苷Rb₁及其脱糖基代谢物Rd的分析方法,并对线性、专属性、回收率、准确度、精密度进行方法学考察。结果发现,所建立的分析方法符合生物样本中Rb₁和Rd测定的要求。然后采用林可霉素(5 000 mg/kg)造模1周,诱导菌群失调大鼠模型。体外和体内研究结果均显示,在林可霉素诱导的菌群失调大鼠粪便中β-葡萄糖苷酶活性显著降低,进而使人参皂苷Rb₁在肠道菌群中的脱糖基代谢生成Rd的速率显著降低,导致人参皂苷Rb₁及其脱糖基代谢产物Rd吸收入血后药代动力学行为发生改变。     

地榆炭化学成分研究

目的 对地榆炭进行化学成分研究。方法 采用色谱技术进行分离纯化,通过理化常数和波谱分析鉴定化合物结构。结果 从地榆炭共分离得到5个化合物,分别鉴定为3β-羟基-28-去甲乌索-17, 19, 21-三烯（1）、3β-羟基-28-去甲乌索-12, 17-二烯（2）、3β-O-α-L-阿拉伯呋喃糖基-28-去甲乌索-12, 17-二烯（3）、3β-O-α-L-阿拉伯吡喃糖基-28-去甲乌索-12, 17-二烯（4）和坡模酸（5）。结论 化合物1、3和4为首次发现的三萜及其皂苷类新化合物,分别命名为地榆皂苷元Z、地榆皂苷Y₁和地榆皂苷Y₂。     

硬脂酸改性纳米CaCO3对当归喷雾干燥粉体的影响研究

目的 研究硬脂酸改性纳米CaCO₃,制备疏水性纳米CaCO₃并应用于当归喷雾干燥粉体。方法 采用硬脂酸对纳米CaCO₃进行表面改性,通过活化指数（H）、吸油值、接触角和透射电镜（TEM）、傅里叶变换红外光谱（FTIR）对改性前后纳米CaCO₃进行分析和表征。以微粉硅胶和未改性纳米CaCO₃为对照,考察改性纳米CaCO₃对当归喷雾干燥粉体流动性、吸湿性和有效成分阿魏酸溶出行为的影响。结果 FTIR表明硬脂酸吸附在碳酸钙表面;改性后的纳米CaCO₃改善当归喷雾干燥粉体流动性和吸湿性的效果优于微粉硅胶和未改性纳米CaCO₃,且不影响阿魏酸体外溶出度。结论 经硬脂酸改性后的纳米CaCO₃应用于中药喷雾干燥粉体值得进一步研究。     

别隐品碱抗肝纤维化作用

目的 探讨别隐品碱（allocryptopine）对实验性肝纤维化的防治作用。方法 采用CCl₄复合因素诱导大鼠肝纤维化与血吸虫致小鼠肝纤维化模型,观察别隐品碱在造模同时（预防给药）和造模后（治疗给药）给药对脏器指数、肝功能、纤维化血清指标、脂质过氧化指标、肝组织胶原（CoI、CoIII）及羟脯氨酸（Hyp）表达的影响,并进行肝脏病理学检查。结果 对CCl₄所致肝纤维化大鼠模型,各剂量别隐品碱预防给药均能不同程度地降低肝指数及CoI表达（P＜0.05、0.01）,其中高剂量明显降低CoIII表达（P＜0.01）,中剂量明显降低脾指数、丙氨酸氨基转移酶（AST）的量（P＜0.05）;别隐品碱治疗组大鼠的肝指数、天冬氨酸氨基转移酶（ALT）的量、CoIII表达明显降低（P＜0.05、0.01）;预防给药与造模后给药均不同程度地减轻模型大鼠肝纤维化程度。对血吸虫致肝纤维化小鼠模型,别隐品碱预防给药显著降低小鼠ALT的量与Hyp水平（P＜0.05）,高剂量别隐品碱治疗给药能明显降低肝指数,降低血清PCIII、碘透明质酸（HA）、ALT的量（P＜0.05、0.01）,中剂量组肝指数、PCIII、HA的量明显降低（P＜0.05）;治疗给药组大鼠肝脏病变明显减轻。结论 别隐品碱对实验性肝纤维化大鼠有较好的保护肝细胞、改善肝功能、抗肝纤维化作用。     

柳叶白前中非C21甾体类化学成分

采用硅胶、凝胶及反相柱色谱等技术,对鹅绒藤属植物柳叶白前Cynanchum stauntonii干燥根茎80%乙醇提取物乙酸乙酯部位的非C₂₁甾体类成分进行分离,得到12个化合物,利用波谱学方法和理化性质鉴定它们的结构为:丁香脂素(1)、(-)-(7R,7′R,7″R,8S,8′S,8″S)-4′,4″-二羟基-3,3′,3″,5-甲氧基-7,9′∶7′,9-环氧-4,8″-O-8,8′-倍半木质素-7″,9″-二醇(2)、8,8′-二羟基松脂素(3)、对羟基苯乙酮(4)、白首乌二苯酮(5)、2,4-二羟基苯乙酮(6)、苯甲酸(7)、对羟基苯酚(8)、6-O-［E］-芥子酰-α-D-吡喃葡萄糖苷(9a)、6-O-［E］-芥子酰-β-D-吡喃葡萄糖苷(9b)、1-O-甲基-α-D-吡喃加拿大麻糖甲苷(10)、β-胡萝卜苷(11)、β-谷甾醇(12)。其中化合物1~ 3,5,7~ 11为首次从该植物中分离得到。     

海藻、芫花反甘草的研究进展

中药配伍中相反指两种药物合用产生或增强毒性或使疗效降低,而“十八反”是重要的配伍禁忌,也是现代药性理论争议最多的问题,且至今尚未形成较统一的判断标准和结论。主要介绍了“十八反”中有关海藻、芫花反甘草的毒性和机制研究,探讨了影响“十八反”的因素,并在此基础上提出根据不同药物的特点确定其特定部位的安全药理实验内容的观点。     

白首乌研究现状

白首乌是传统补益类中药,有补肝肾、强筋骨、益精血、乌须发及延年益寿之功效。近年来,白首乌的抗肿瘤活性日益引起学者的关注,C₂₁甾类成分被认为是其主要活性成分。现就白首乌近年来的研究进展进行综述,为今后合理开发利用其药用资源提供依据。     

白首乌研究现状

白首乌是传统补益类中药,有补肝肾、强筋骨、益精血、乌须发及延年益寿之功效。近年来,白首乌的抗肿瘤活性日益引起学者的关注,C₂₁甾类成分被认为是其主要活性成分。现就白首乌近年来的研究进展进行综述,为今后合理开发利用其药用资源提供依据。     

《黄帝内经》中“开鬼门、洁净府”理论的现代临床应用

“开鬼门、洁净府”理论最早记载于《素问·汤液醪醴论》,通过查阅文献并整理,明确其具体含义指宣肺发汗、通腑排浊与清利小便之法。文章拟对现代医家运用“开鬼门、洁净府”理论指导临床治疗心、肺、肾系疾病、肢节类疾病、皮肤类疾病的应用进行梳理,体现经典理论对于现代临床疾病的指导意义与价值。“开鬼门、洁净府”是中医治疗疾病的经典理论法则,合理应用将取得良好疗效,对中医经典理论传承具有重要意义,值得中医学者进一步研究及探讨。     

HPLC波长切换法测定青阳参中7个C21甾体皂苷的含量

建立HPLC波长切换法,同时测定青阳参中7个C₂₁甾体皂苷的含量。采用Alltima C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为35 ℃,检测波长为259 nm(0~27 min),223 nm(27~72 min)。结果表明,该7个C₂₁甾体皂苷在各自检测范围内线性良好,加样回收率范围在98.5%~103.9%之间。通过对不同产地的7个批次青阳参中7个成分的含量测定,认为该方法简便、准确、快速,可用于青阳参药材的质量控制。