Pathological and biochemical alterations of astrocytes in ovariectomized rats injected with D-galactose:A potential contribution to Alzheimer's disease processes

Astrocytes are implicated in the pathological changes of Alzheimer's disease. Our previous studies have demonstratedthat estrogen deprivation and oxidative stress act synergistically to accelerate0 the progress of Alzheimer's disease. Long-term D-galac-tose injection combined with ovariectomy may serve as a rodent model for Alzheimer's disease. To address the potential contributionof astroglia to the Alzheimer's disease pathogenesis, we investigated pathological and biochemical alterations of astrocytes under thisanimal model. Ovadectomized rats injected with D-galactose for 2 weeks showed extensive localization of glial fibrillary acidic proteinimmunoreactive astrocytes and slightly elevated glutathione levels in the hippocampus without significant impairments in the watermaze test and deficits of the cholinergic analyses, compared to the saline-injected rats. Ovariectomized rats injected with D-galactosefor 6 weeks, however, exhibited degeneration of astrocytes and decreased glutathione levels in the hippocampus, accompanied withsevere dysfunction of behavioral test and deficiency of cholinergic terminals. Electron microscopy further confirmed the pathologicalchanges of astrocytes, especially in the aggregated area of synapse and brain microvessels. Consistent with degeneration of perivascu-lar astrocytic endfeet, analysis of the horseradish peroxidase demonstrated an impairment of the blood-brain barrier permeability.These findings indicate that biochemical and pathological alterations of astrocytes may partially contribute to exacerbating neuronaldeficits in the course of Alzheimer's disease. Restoring neuroprotective potential of astrocytes may be a useful therapeutic target forAlzheimer's disease and other neurodegenerative diseases.     

Pathological and biochemical alterations of astrocytes in ovariectomized rats injected with D-galactose:A potential contribution to Alzheimer's disease processes

Astrocytes are implicated in the pathological changes of Alzheimer's disease. Our previous studies have demonstrated that estrogen deprivation and oxidative stress act synergistically to accelerate the progress of Alzheimer's disease. Long-term D-galactose injection combined with ovariectomy may serve as a rodent model for Alzheimer's disease. To address the potential contribution of astroglia to the Alzheimer's disease pathogenesis, we investigated pathological and biochemical alterations of astrocytes under this animal model. Ovadectomized rats injected with D-galactose for 2 weeks showed extensive localization of glial fibrillary acidic protein immunoreactive astrocytes and slightly elevated glutathione levels in the hippocampus without significant impairments in the water maze test and deficits of the cholinergic analyses, compared to the saline-injected rats. Ovariectomized rats injected with D-galactose for 6 weeks, however, exhibited degeneration of astrocytes and decreased glutathione levels in the hippocampus, accompanied with severe dysfunction of behavioral test and deficiency of cholinergic terminals. Electron microscopy further confirmed the pathological changes of astrocytes, especially in the aggregated area of synapse and brain microvessels. Consistent with degeneration of perivascular astrocytic endfeet, analysis of the horseradish peroxidase demonstrated an impairment of the blood-brain barrier permeability. These findings indicate that biochemical and pathological alterations of astrocytes may partially contribute to exacerbating neuronal deficits in the course of Alzheimer's disease. Restoring neuroprotective potential of astrocytes may be a useful therapeutic target for Alzheimer's disease and other neurodegenerative diseases.     

细胞周期相关因子P15在痴呆鼠脑不同部位表达及针刺的影响

目的 了解细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(P15)在老年性痴呆(AD)模型快速老化模型小白鼠(SAMP8)不同脑区中的表达规律及针刺对其表达的影响.方法 15只10月龄快速老化模型小白鼠,随机分为正常组、模型组、针灸组,每组5只.用免疫组化法和病理图像分析技术测定P15在SAMP8皮层、海马、纹状体、嗅球等脑区中的阳性细胞数.结果 P15在正常组和SAMP8组中4个脑区的表达趋势一致,在嗅球区的表达明显高于其他3个脑区;P15在SAMP8的海马区表达增高、在嗅球及纹状体区表达低于正常组,差异有统计学意义.针刺能够下调SAMP8皮质、海马区的表达,且有统计学意义.结论 海马区细胞凋亡、嗅球和纹状体区细胞增殖可能是AD重要的病理改变,针刺可减少皮质、海马区的神经细胞凋亡,为针刺治疗AD的分子机制提供了新的内容.     

Over-expression of c-fos mRNA in the hippocampal neurons in Alzheimer's disease.

OBJECTIVE: To analyze the relationship between the proto-oncogene c-fos change and neuronal degeneration in the hippocampus of the patients with Alzheimer's disease. METHODS: The post mortem human hippocampal tissues were divided into three groups, namely, the aged, the young and Alzheimer's disease (AD) groups. Each group consisted of 10 patients. The diagnosis of AD was made by clinical manifestation and argentatine (Bodían) staining. Patients of both the young and the aged groups had no neurological disorders. The proto-oncogene c-fos mRNA was investigated in the hippocampal neurons using the method of in situ hybridization. RESULTS: The optical density of stained area and the integral within proto-oncogene c-fos mRNA revealed a significant increase in the hippocampal neurons in cases of Alzheimer's disease as compared with the controls. CONCLUSIONS: The over-expression of the proto-oncogene c-fos might play a role in the pathological process of Alzheimer's disease. These changes might result from a suffering stage of the hippocampal neurons or from a compensatory mechanism in the surviving neurons which are not yet affected-by the pathological process.     

不同神经功能评分标准在小鼠EAE模型评价中的比较

目的：比较不同的神经功能损伤评分标准对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）运动功能障碍评估的效能。方法：应用MOG35—55多肽加完全福氏佐剂乳化后免疫20只C57BL／6小鼠,复制EAE小鼠模型,并使用3种不同的评分标准（Kono’s 5分法、Hooper’s 7分法、Weaver’s 15分法）观察和评估实验动物的发病情况,对实验小鼠在发病初期、高峰期的神经功能障碍进行定量的功能损伤评价。结果：3种评分标准比较,在发病初期,15分法和7分法评估神经损伤症状的敏感性相当,比5分法高;高峰期,以症状评分与病理评分的相关性程度来比较3种评分法的效度,15分法效度最高,7分法次之。结论：Weaver’s15分法评价EAE模型神经功能损伤症状,具有明显的优势,推荐作为今后EAE研究的首选评分法．     

阿尔茨海默病外周血早期生物标志物的研究进展

阿尔茨海默病发病隐匿,在痴呆症状出现前数十年,体内已产生一系列病理变化,一旦进入痴呆期,目前尚无理想的药物和疗法可缓解病情。其与衰老呈正相关,年龄越大,患病风险越高。筛选合适的生物标志物进行早期诊断、早预防、早发现、早治疗,对预防和延缓阿尔茨海默病的发展有着重要意义。外周血生物标志物易采集、易检测、可重复,是最理想的生物标志物来源。本文根据阿尔茨海默病经典的β淀粉样蛋白（Aβ）和Tau蛋白机制,梳理了部分外周血中潜在的生物标志物。     

痴呆模型大鼠中脑腹侧被盖区多巴胺能神经元的形态学改变

目的观察铝中毒痴呆模型大鼠中脑腹侧被盖区(VTA)多巴胺(DA)神经元的形态学变化,探讨中枢多巴胺递质在学习、记忆中的作用.方法以慢性铝中毒方式建立痴呆模型,以酪氨酸羟化酶(TH)为DA神经元的阳性标记物,采取免疫细胞化学ABC法观察中脑VTA TH免疫反应阳性神经元的形态学改变,利用图像分析系统测算VTA TH免疫反应阳性神经元的数目,分析试验结果.结果痴呆模型组中脑VTA TH免疫反应阳性神经元数量明显下降(P＜0.01),部分神经元出现突起消失、胞体肿胀或碎裂等表现.结论中脑VTA DA神经元与认知功能关系密切,其病变可能同老年性痴呆有关.     

增龄脑中毛细血管形态及与神经元密度相关改变

目的观察增龄脑中毛细血管形态变化及神经元和毛细血管密度的相对改变,探讨血管因素在脑老化中的作用.方法以28例正常增龄病例及6例阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)患者尸检脑标本为研究对象.应用荆豆凝集素(ulex europaeus agglutinin,UEA)免疫组织化学及甲苯胺蓝等染色观察正常增龄病例额叶、枕叶、壳核、海马及AD患者海马的神经元、毛细血管形态改变,应用图像分析技术测算各部位神经元与毛细血管密度比值,并分析其与年龄之间的相关性.结果老年及AD患者脑内毛细血管可见诸多病理形态改变.正常增龄病例额叶、枕叶、壳核神经元和毛细血管数目及面积之比与年龄呈正相关.结论脑老化中毛细血管可出现病理形态改变且数目相对减少,故血管因素可能是脑老化发生机制中的重要因素之一.     

枸杞多糖防治大鼠酒精性肝病的形态学观察

目的：建立一个简单易行的酒精性肝病动物模型，并观察枸杞多糖（LBP）对它的保护作用。方法：采用酒精饮料（酒精浓度从5％递增至40％，终浓度为40％，共计29周）复制酒精性肝病模型，25周时剩余的大鼠随机分为模型组、两个剂量的LBP防治组（250mg/kg和1000mg/kg）。在光镜和电镜下观察形态学改变。结果：模型组所有大鼠均出现了程度不等的肝脂肪变性、酒精性肝炎。电镜下，部分肝细胞可见线粒体肿胀或空泡变，肝血窦内可见异常增生的胶原纤维。与模型组相比，LBP组肝形态学明显改善。大剂量（1000mg/kg）效果更忧。结论：LBP对大鼠酒精性肝病模型能改善线粒体的形态、减轻肝细胞的脂肪变性和炎症坏死程度。     

Aβ_(25～35)诱导大鼠AD模型及HSP_(70)的表达

目的 :探讨 β 淀粉样蛋白 (β amyloid ,Aβ2 5～ 3 5毒性作用能否诱导大鼠AD模型 ,以及热休克蛋白 70(heatshockproteins ,HSP70 )在海马神经元损伤中的表达。方法 :将 4 8只大鼠 ,随机分为 3组 (每组 16只 ) :AD模型组、溶媒体组、假手术组 ,前两组在双侧海马分别注射 2 μ1(10 μg2 )Aβ2 5～ 3 5、2 μl生理盐水 ,假手术组不注射任何溶液 ;于手术后 1、7、14及 2 1d采用免疫组织化学、积分光密度分析等手段对各组大鼠脑HSP70 的表达进行研究。结果 :AD模型组手术 7d后大鼠记忆明显减退 (P <0 .0 5 ) ,且HSP70 在海马神经元内表达ld时最高 ,7d锐减 ,14d和2 1d则逐渐减少。结论 :Aβ2 5～ 3 5可诱导大鼠AD模型 ,并对热休克蛋白 70在海马神经元损伤中的表达产生显著影响 ,HSP70 的表达是阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)大鼠脑内神经元存活的重要标志。     

遗忘型轻度认知功能障碍患者的内嗅皮层形态学与功能变化的研究

目的：探讨遗忘型轻度认知功能障碍（aMCI）患者内嗅皮层的形态学改变和相关功能变化的关系。方法：16例遗忘型轻度认知功能障碍患者入选。认知功能通过长谷川痴呆量表修订版（HDS-R）评价。通过基于体素的阿尔茨海默病特异性局部分析系统（VSRAD）的Z评分来评价内嗅皮层的萎缩程度。同时利用单光子发射计算机断层显像（SPECT）的FineSRT技术定量分析各个相关脑区局部脑血流（rCBF）的绝对值。结果：VSRAD的Z评分与年龄呈正相关,与双侧海马、杏仁核、丘脑、右侧海马旁回rCBF的绝对值均显著负相关（均P〈0.05）。此外,Z评分与左侧海马旁回、双侧扣带回中、后部rCBF的绝对值也存在一定程度的负相关趋势。结论：在aMCI患者中,内嗅皮层萎缩与海马相关结构、丘脑、扣带回rCBF变化存在明显的功能联系。这种联系可能与解剖和生理学的网络有关。     

旺拉提取物对胆碱能损伤大鼠脑胆碱酯酶的影响

【目的】研究藏药旺拉提取物对胆碱能损伤大鼠脑胆碱酯酶活性和表达的影响。【方法】采用基底前脑注射鹅蒿蕈氨酸的方法建立胆碱能损伤大鼠模型。实验动物分为假手术组、模型组、CE 5 mg/kg组,连续灌胃给药28 d。取大鼠脑额叶皮层、基底前脑区,观察大鼠脑病理改变,化学法测定胆碱酯酶和乙酰胆碱酯酶活性,免疫组化染色法检测乙酰胆碱酯酶表达。【结果】与假手术组相比,模型组大鼠脑额叶皮层、基底前脑神经元细胞发生坏死等病理变化,胆碱酯酶和乙酰胆碱酯酶活性明显下降(P<0.05),乙酰胆碱酯酶表达水平下降[P<0.05,脑额叶皮层乙酰胆碱酯酶的累积光密度为(4.6±0.4)×104,基底前脑乙酰胆碱酯酶的累积光密度为(2.5±0.2)×104]。与模型组大鼠比,CE 5 mg/kg可抑制胆碱能损伤大鼠脑的病理改变,对乙酰胆碱酯酶和胆碱酯酶活性影响不大,但可明显提高乙酰胆碱酯酶的表达水平[P<0.05,脑额叶皮层乙酰胆碱酯酶的累积光密度为(6.2±0.4)×104,基底前脑乙酰胆碱酯酶的累积光密度为(3.2±0.2)×104]。【结论】CE对胆碱能神经系统有一定的保护作用,这可能是CE改善学习记忆能力的途径之一。     

腹部爆炸伤后早期脑病理学改变的实验研究

目的：探讨犬腹部爆炸伤后早期脑病理形态学的变化特点。方法：15只犬按伤后不同时相点分为5组，即伤后即刻、3、6、12、24h组，每组各3只动物。致伤犬腹部后，对其脑组织进行大体及光、电镜观察。结果：15只动物中，12只大脑表面出现1-3个点、片状出血灶。伤后即刻，光、电镜主要以小血管的出血改变及部分神经髓鞘的分层为主，未见明显神经元的损伤。伤后6h则可见神经元及神经胶质细胞水肿的表现。伤后24h可见部分水肿组织溶解变性、神经微丝凝固性改变。结论：腹部爆炸伤比一般枪弹伤造成了更加严重的脑间接损伤，且伤后病理改变进展迅速。     

克山病肝脏损伤的形态学改变及其与休克和心力衰竭时肝脏病变的比较

本文观察了141例急型和亚急型克山病尸检病例肝脏的形态学改变,并与死于休克或心力衰竭的非克山病病例肝脏病变进行了比较。结果发现,三者在病变性质上无明显区别,但克山病组肝脏坏死检出率则高于其它两组,其中与心力衰竭组相比,已经达到显著差异的程度(P<0.05)。认为克山病肝脏坏死性改变是由其病因所造成的原发性肝脏损伤与休克及心力衰竭等缺氧因素共同作用的结果。     

灵草液对阿尔茨海默病模型大鼠脑组织氧化还原力的影响

目的 :观察灵草液对 AD模型大鼠脑组织中氧化还原能力的影响。方法 :将 SD健康雄性大鼠 ,随机分成 7组 , 组为正常对照组 , 组为 AD模型组 , 组为 AD模型 +生理盐水组 , 组为 AD模型 +脑复康 0 .3g/kg治疗组 , 组为 AD模型 +低浓度灵草液治疗组 , 组为 AD模型 +中浓度灵草液治疗组 , 组为 AD模型 +高浓度灵草液治疗组。采用大鼠脑组织立体定位微量注射技术 ,用 IBO损毁大鼠双侧 nb M,建立 AD模型大鼠。手术后灵草液连续灌胃 2 0 d,每天 1次 ,每次 2 ml。灌胃期满后即将大鼠断头处死同时收集血液 ,分离血清 ,并立即在冰盘中开颅取脑做组织匀浆 ,取其上清液测定总抗氧化力 ( T- AOC)含量、超氧化物歧化酶 ( SOD)活性和丙二醛 ( MDA)含量。结果 :用 IBO损毁大鼠双侧 nb M,建立的 AD模型大鼠脑组织 T- AOC含量、SOD活性明显下降 ,MDA含量显著增加。灵草液能显著地提高 AD模型大鼠脑组织 T- AOC、SOD活性 ,减少 MDA含量 ,与模型组比较有显著性差异 ( P<0 .0 1 ,P<0 .0 5 )。结论 :灵草液能提高 AD模型大鼠的抗氧化能力 ,其抗氧化作用与 AD模型大鼠脑组织 T- AOC、SOD和 MDA的含量显著改变有关。     

脑动脉硬化对视神经血供影响的形态学研究及其临床意义

①目的 探讨视神经动脉起源、数目、分布及相关动脉的病理变化，为视神经因缺血所致视野缺损提供形态学依据。②方法 在体视显微镜扣手术显微镜下对100侧成人脑标本观察视神经动脉来源、数目和分布，对其中年龄50-70岁60侧脑标本的视神经和相关动脉进行病理切片观察。③结果 视神经动脉主要来源于颈内动脉、大脑前动脉争前交通动脉。其中单来源3侧(3％)，双来源68侧(68％)，3来源29侧(29％)。病理切片观察动脉管壁有粥样硬化改变53侧(88．3％)，其中被硬化斑块阻塞眼动脉的3侧(5、7％)。阻塞垂体上动脉的4侧(7．5％)，小动脉管腔狭窄11侧(20．8％)。与小动脉阻塞相对应的视神经切片。可见有神经纤维萎缩、变性等病理改变。硬化的颈内动脉壁压迫视神经可以形成明显的压迹。④结论 50岁以上出现不明原因的周边或中央视野缺损。脑动脉硬化导致视神经供血障碍病因不能除外。     

大鼠骨髓基质细胞诱导分化为神经细胞的实验研究

目的 探讨大鼠骨髓基质细胞（MSCs）体外诱导分化为神经细胞的可行性,为MSCs移植治疗缺血性脑血管病提供实验依据.方法从大鼠骨髓中分离培养骨髓基质细胞,应用bFGF进行预诱导,然后用ATRA和NGF来诱导骨髓基质细胞,观察细胞的形态变化,用免疫组化法检测细胞的NSE和GFAP的表达.结果大鼠MSCs经ATRA和NGF诱导后,细胞的形态发生改变,免疫组化显示部分细胞表达NSE和GFAP.结论骨髓基质细胞可被ATRA和NGF在体外诱导分化为神经细胞和胶质细胞.     

阴道镜在子宫颈病变中的诊断价值

目的:评价影视阴道镜在宫颈病变中的诊断价值。方法:对378例宫颈病变妇女进行宫颈细胞学检查,阴道镜图像观察及病理检查。结果:宫颈细胞学检查378例宫颈病变患者发现异常63例,占16.7%,经阴道镜下病理活检确诊为慢性宫颈炎319例,宫颈上皮内瘤变(CIN)59例,宫颈原位癌1例,宫颈浸润癌4例。分别占88.36%,10.32%,0.26%,1.06%。结论:影视阴道镜能准确取组织活检,可早期发现宫颈病变及宫颈癌,对诊断女性宫颈疾病结果准确、可靠、有重要价值。     

512例乳腺增生病的病理形态及分类

目的:分析乳腺增生病病理形态学特点,并探讨分类的可行性及其与乳腺癌的关系。方法:复习512例乳腺增生病的病理切片,观察并分析各种病变出现的频率。结果:该病以轻度一般性增生为主,出现率约81.7%;多种病变组合,以2-3种病变者居多占74.3%,多者达到6种,平均2.7种。乳腺增生病发病年龄以纤维腺瘤变病人最年轻(20-30岁),一般性增生病变年龄高峰在25-40岁之间,而非典型增生病患者则多在40-60岁之间。结论:将乳腺增生病分为单纯性及非典型增生两大类是可行的,其形态学特征易于掌握,非典型增生与乳腺癌的发生密切相关,值得注意。     

小剂量齐拉西酮联合盐酸多奈哌齐治疗老年痴呆的疗效及对患者糖脂代谢的影响

目的 观察小剂量齐拉西酮联合盐酸多奈哌齐治疗老年痴呆的疗效以及对患者糖、脂代谢的影响。 方法 将杭州市富阳区第三人民医院2016年1月—2018年1月收治的老年痴呆患者100例采用随机数字表法分为2组，每组50例。低剂量组患者给予20 mg齐拉西酮与10 mg盐酸多奈哌齐治疗；高剂量组给予40 mg齐拉西酮与10 mg盐酸多奈哌齐治疗。比较2组治疗后阿尔茨海默病行为病理评定量表总分(BEHAVE-AD)、护理苦恼程度、韦氏成人智力测试与临床记忆量表评分(WAIS)、血糖及血脂的变化。 结果 治疗后，2组BEHAVE-AD、护理苦恼程度均优于治疗前，但低剂量更显著(均P<0.05)。2组患者治疗后WAIS中各因子评分比较，低剂量组评分要明显优于高剂量组，差异有统计学意义(均P<0.05)；2组患者治疗后临床记忆量表比较，除人像特点联系学习外，其余因子低质量组评分要明显优于高剂量组，差异有统计学意义(均P<0.05)。与治疗前相比较，低剂量组治疗后血糖、TG、TC水平均有上升，但上升效果不明显(均P>0.05)；高剂量组治疗后血糖、TC、TG水平均明显上升，差异均具有统计学意义(均P<0.05)。 结论 给予患者20 mg的齐拉西酮联合10 mg的盐酸多奈哌齐对治疗患者老年痴呆更加具有疗效，并且高剂量对患者血糖以及血脂代谢的影响更加明显。