苦参碱治疗非酒精性脂肪性肝炎大鼠的效果观察

目的研究苦参碱的抗氧化作用,并观察其治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的疗效。方法 30只大鼠随机分为3组:对照组、NASH组和苦参碱组,每组10只。采用高脂饮食诱导建立NASH大鼠模型,并给予苦参碱36 mg·kg-1·d-1灌胃治疗。观察所有大鼠体质量、肝重变化,并采用HE染色观察各组大鼠肝组织病理学改变,测定血清ALT、AST水平及肝组织还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)活性。多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果与对照组比较,NASH组、苦参碱组的大鼠体质量均明显增加(P值均0.001),肝重均明显减轻(P值均0.001)。苦参碱组大鼠肝组织病理学改变较NASH组亦明显减轻。苦参碱组大鼠ALT、AST水平与NASH组比较均有所降低,差异均有统计学意义[(52.0±3.0)U/L vs(41.8±3.7)U/L;(233.6±9.4)U/L vs(170.1±1.8)U/L,P值均0.001)]。苦参碱组与NASH组比较,大鼠肝组织SOD、GSH水平明显升高[(17.7±2.0)μg/mg vs(27.0±3.6)μg/mg;(16.5±1.6)U/mg vs(28.5±2.1)U/mg],MDA水平明显降低[(22.9±1.9)nmol/mg vs(17.8±1.8)nmol/mg],差异均有统计学意义(P值均0.001)。结论苦参碱在治疗NASH大鼠中具有抗氧化的作用,对NASH大鼠的治疗作用显著。     

黄芩苷对体外氧化应激模型中肝型脂肪酸结合蛋白表达的影响及其意义

目的 研究黄芩苷对体外氧化应激模型中肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)表达的影响及其意义. 方法 用终浓度为400 μ mol/L的过氧化氢(H2O2) 37℃避光孵育细胞20min,建立体外诱导氧化应激模型.应用甲基噻唑基四唑法(MTT)检测不同浓度黄芩苷作用细胞的存活率,确定24h、48 h黄芩苷的半数中毒浓度(TC50).流式细胞技术检测不同浓度黄芩苷(25、50、100μmol/L)作用后活性氧(ROS)的表达、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性变化,实时PCR和Western blot检测肝细胞内L-FABP基因和蛋白表达.数据分析采用单因素方差分析.结果 根据MTT法得出25、50、100 μ mol/L的黄芩苷作用于细胞24h的存活率为83.60％±3.47％,72.36％±2.18％,70.16％±2.04％,F值为386.24,P＞0.05;作用于细胞48h的存活率为84.93％±3.11％,76.16％±2.45％,72.72％±2.31％,F值为475.92,P＞0.05.直线回归法得出黄芩苷持续作用24h和48h的TC50分别为153.2、170.6μmol/L.在此范围内,用25、50、100μmol/L浓度的黄芩苷分别作用Chang肝细胞24、48 h后,ROS含量24 h分别为37.0±3.30,22.90±3.84,29.60±2.52,F值为70.06,P＜0.05 ; 48h分别为35.77±2.35,21.80±3.10,23.87±1.98,F值为110.92,P＜0.05,而400μ mol/L H2O2组ROS含量24h和48h分别为45.50±3.47,48.80±2.70,以50μmol/L的黄芩苷作用48h效果最为显著.用50μmol/L黄芩苷处理48h后细胞内SOD活性为(51.53±1.91)μ g/mg,GSH为(49.85±1.45) U/mg;与对照组SOD为(26.36±1.23)μ g/mg,GSH为(25.11±1.74) U/mg,F值分别为93.81和92.51,P值均＜0.05).尽管50μmol/L黄芩苷处理48 h后细胞内L-FABP在mRNA水平并无明显变化,但50μmol/L黄芩苷处理48 h后细胞内L-FABP蛋白表达与对照组相比增加约80％.结论 黄芩苷能通过增强L-FABP蛋白表达,增加细胞内SOD和GSH的活性发挥抗氧化作用.     

吴茱萸次碱对大鼠动脉增龄性改变的干预影响

目的观察吴茱萸次碱对大鼠动脉增龄性变化的影响,并探讨其作用机制。方法选择Wistar大鼠32只,分为3月龄组、12月龄组、18月龄组和干预组,每组8只。各组检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛以及谷胱甘肽(GSH)含量;实时PCR法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达;Western blot法测eNOS蛋白和磷酸化蛋白表达。结果与12月龄组比较,18月龄组丙二醛水平明显升高,SOD、GSH、eNOS mRNA、磷酸化eNOS和eNOS蛋白表达明显降低(P<0.05);与18月龄组比较,干预组丙二醛[(4.96±0.22)nmol/mg vs(7.26±0.35)nmol/mg]水平明显降低,SOD[(232.07±11.16)U/mg vs(149.88±13.77)U/mg]、GSH[(12.27±1.42)μg/mg vs(5.40±0.79)μg/mg]、eNOS mRNA[(1.39±0.15)vs(0.74±0.18)]、磷酸化eNOS[(204.67±3.07)vs(121.45±2.54)]和eNOS蛋白[(591.44±2.98)vs(469.57±1.79)]表达明显升高(P<0.05);3月龄组与12月龄组上述指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论吴茱萸次碱可以提高自然增龄大鼠动脉血管的抗氧化能力,增加eNOS的表达,从而发挥延缓大鼠血管衰老的作用。     

小檗碱对2型糖尿病地鼠脂肪组织肝X受体通路表达的影响

目的观察小檗碱对T2DM地鼠脂肪组织肝X受体(LXR)及其靶基因表达的影响。方法以高脂饮食结合小剂量STZ的方法建立IR及T2DM地鼠模型。成模后随机分成正常对照(Con)组、IR组、T2DM组、小檗碱治疗(BBR)组,治疗9周。结果与T2DM组相比,BBR组FPG[(13.10±0.93)vs(6.19±0.84)mmol/L]、OGTT 2hPG[(15.49±1.31)vs(8.83±1.28)mmol/L]、HOMA-IR[(14.80±2.10)vs(7.40±1.40)]降低(P0.05);RT-PCR结果提示,LXRα[(-5.56±-1.23)vs(3.29±0.68)]、LXRβ[(3.09±0.45)vs(-5.49±-0.95)]基因表达上调,并伴随着LXR靶基因表达的改变(P0.05);Western blot结果提示,LXRα[(0.11±0.03)vs(0.68±0.12)]、LXRβ[(0.13±0.03)vs(0.70±0.14)]蛋白表达上调(P0.05)。结论 LXR及其靶基因参与小檗碱治疗T2DM地鼠脂诱性脂肪组织IR的分子机制。     

四氯化碳诱导大鼠肝纤维化脂质过氧化相关蛋白表达的动态变化及一贯煎的干预效应

目的 探讨四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化脂质过氧化相关蛋白表达的动态变化及一贯煎的干预效应.方法 Wistar雄性大鼠57只,其中模型组39只,正常组18只.模型大鼠腹腔注射50％的CCl4橄榄油溶液(1ml/lg),每周2次,共9周.造模3、6周后,随机抽取正常及模型大鼠各6只,处死作动态观察.其余模型大鼠随机分为模型组15只及干预组12只,模型组大鼠在8周时处死4只观察成模情况.第7周开始,继续造模的同时,干预组用一贯煎(2.682 g/kg)蒸馏水稀释灌胃,1次/d,共计3周.用药3周结束后,处死大鼠,检测肝功能、肝组织羟脯氨酸(Hyp)和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)与谷胱甘肽(GSH)活性,以及热休克蛋白70 (HSP70)、血红素加氧酶-1(HO-1)、转铁蛋白(Transferrin)、过氧化还原酶(Prxd)6、肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)等的表达.计量资料采用单因素方差分析,计数资料采用Ridit分析. 结果 (1)与对照组比较,模型组大鼠6、9周时肝组织MDA含量显著升高[(4.23±0.45) nmol/mg比(2.22±0.59)nmol/mg; (6.29±1.23) nmol/mg比(2.22±0.59) nmol/mg,F值分别为60.13、66.99,P值均＜ 0.05];SOD活性显著降低[(196.94±39.20) U/mg比(264.50±30.44)U/mg,F=11.12,P＜ 0.05; (152.21±51.65) U/mg比(264.50±30.44) U/mg,F=23.11,P＜0.01];GSH含量显著降低[(48.47±7.27) nmol/mg比(60.74±9.04) nmol/mg,F=6.71,P＜0.05;(37.89±9.01) nmol/mg比(60.74±9.04)nmol/mg,F=24.06,P＜0.01];与9周模型组比较,干预组MDA显著降低[(4.25±0.86) nmol/mg比(6.29±1.23) nmol/mg,F=19.52,P＜ 0.01],SOD显著升高[(198.35±46.48) U/mg比(152.21±51.65) U/mg,F=4.65,P＜0.05],GSH显著升高[(53.73±7.54) nmol/mg比(37.89±9.01) nmol/mg,F=19.23,P＜0.01];(2)与正常组比较,9周时模型组大鼠HSP70蛋白表达量升高(1.21±0.06比0.58±0.07,F=166.87,P＜0.0l),HO-1蛋白表达量也升高(1.11±0.06比0.58±0.06,F=123.96,P＜ 0.01),Prdx6蛋白表达量降低(0.04±0.05比1.49±0.05,F=1215.85,P＜0.01),L-FABP表达量降低(0.24±0.02比1.44±0.14,F=219.05,P＜0.01),Transferrin蛋白表达量降低(0.67±0.03比1.67±0.04,F=301.35,P＜0.01).9周时,干预组HSP70和HO-1蛋白表达量分别为0.82±0.04、0.90±0.04,与9周时模型组比较,F值分别为92.31、26.89,P值均＜0.01,差异有统计学意义;9周时,干预组Prdx6、L-FABP和Transferrin蛋白表达分别为0.88±0.11、1.36±0.13、1.04±0.12,与9周时模型组比较,F值分别为150.17、237.19、27.53,P值均＜0.01,差异有统计学意义. 结论 一贯煎具有促进机体抗氧化物质生成、减轻脂质过氧化损伤的作用.     

硫辛酰胺对db/db小鼠肝损伤的保护作用研究

目的观察硫辛酰胺(ALM)对db/db小鼠肝损伤的保护作用及可能机制。方法db/db小鼠随机分为糖尿病组(DM)和ALM组,C57BL/6J小鼠为正常对照组(NC),每组各6只。ALM组于第9周时予ALM[100 mg/(kg·d)]进行灌胃干预,干预8周后处死小鼠,检测生化指标及肝组织谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醇(MDA)表达量,油红O、HE染色观察肝脏病理学改变,Western blot法检测肝组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白水平。结果与NC组比较,DM组体重、TG、TC、FBG升高,MDA含量升高[(0.73±0.04)vs(0.92±0.17)nmol/mg,P<0.05],CAT活性降低[(1.08±0.18)vs(0.52±0.14)U/mg,P<0.05],ALT、AST活性升高[(16.85±3.84)vs(22.42±4.56)U/g,(6.07±1.91)vs(8.19±1.51)U/g,P<0.05],Nrf2、HO-1的表达升高[(0.33±0.25)vs(1.81±0.34),(0.29±0.13)vs(1.25±0.19),P<0.05]。与DM组比较,ALM组体重、TG、TC降低,MDA降低[(0.92±0.17)vs(0.56±0.11)nmol/mg,P<0.05],CAT活性升高[(0.52±0.14)vs(0.91±0.20)U/mg,P<0.05],ALT、AST活性降低[(22.42±4.56)vs(17.08±5.08)U/g,(8.19±1.51)vs(5.10±0.46)U/g,P<0.05],Nrf2、HO-1表达降低[(1.81±0.34)vs(1.01±0.30),(1.25±0.19)vs(0.52±0.17),P<0.05]。结论ALM可抑制T2DM小鼠肝损伤的发生发展,其机制可能是通过改善肝组织脂质沉积、抑制氧化应激,调节Nrf2、HO-1蛋白表达以实现。     

双乙酰丙酮氧钒和小檗碱联用对1型糖尿病大鼠影响的研究

目的探讨双乙酰丙酮氧钒[VO(acac)_2,VO]和小檗碱(Berberine,Ber)联合用药对T1DM大鼠的影响。方法腹腔注射STZ建立T1DM大鼠模型,随机分为模型组(DM)、VO0.5组(0.5 mg/kg)、VO_2组(2 mg/kg)、VO_5组(5 mg/kg)和VO+Ber组(2 mg/kg VO+200 mg/kg Ber),设置正常对照组(NC)。检测各组体重、血糖、血管形态与钙化情况、血脂四项和氧化应激水平。结果与DM、VO_2组比较,VO+Ber组血糖降低[(27.44±3.28)vs(28.13±4.40)vs(17.93±2.60)mmol/L,P0.05]。与DM组比较,VO0.5、VO_2、VO+Ber组血管中膜结构和钙化情况改善,VO5组血管钙化情况改善但血管中膜出现明显裂隙。与DM组比较,VO_2、VO+Ber组TG、TC、LDL-C降低[(1.40±0.15)vs(0.86±0.22)vs(0.76±0.01)mmol/L,(3.11±0.33)vs(2.25±0.33)vs(2.01±0.23)mmol/L,(2.08±0.16)vs(1.55±0.15)vs(1.40±0.33)mmol/L,P0.05或P0.01],超氧化物歧化酶含量升高(P0.05),丙二醛含量降低(P0.01),VO+Ber组谷胱甘肽过氧化物酶含量升高[(216.97±34.38)vs(263.45±30.37)U/ml,P0.05]。结论 VO与Ber联用较单用VO降糖效果显著,对T1DM大鼠血管损伤产生保护作用,与其调节血脂紊乱并改善氧化应激水平能力密切相关。     

线粒体靶向抗氧化剂SS-31对脓毒症小鼠模型急性肝损伤的影响

目的 探究线粒体靶向抗氧化剂SS-31对脓毒症小鼠模型急性肝损伤的作用。方法 将24只C57BL/6J成年雄性小鼠随机分为control 组、control+SS-31组、脂多糖(LPS)组(脓毒症组)、LPS+SS-31组,每组6只。小鼠腹腔注射LPS(10 mg/kg)制备脓毒症急性肝损伤模型或对照组腹腔注射等体积PBS液,继之腹腔注射SS-31(10 mg/kg)进行治疗或对照组腹腔注射等体积生理盐水, 12 h后ELISA法检测ALT、AST、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、TNFα、IL-1β、IL-6水平,HE染色观察肝脏组织病理学。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与LPS组相比,LPS+SS-31组小鼠血清中ALT[(140.05±12.22) U/L vs (102.64±8.75)U/L]、AST[(80.22±4.71)U/L vs (69.26±5.37)U/L],以及肝组织中ROS[(1 030.21±115.87) pg/mL vs (847.84±63.65) pg/mL]、TNFα[(767.18±...     

肥胖哮喘患儿急性期血清趋化素水平改变及其临床意义研究

目的探讨肥胖哮喘患儿血清趋化素(chemerin)水平改变及其临床意义。方法纳入120例哮喘急性发作期的肥胖患儿和90例健康肥胖患儿。分别于患儿入院当天和出院当天检测血清总氧化态(TOS)、总抗氧化态(TAS)、氧化应激指数(OSI)和chemerin水平。结果哮喘组患儿TAS明显低于对照组(2.1±0.5 umo L Trolox Eq/L vs.3.9±0.9 umo L Trolox Eq/L,P0.05),而TOS(28.1±8.4umo L H2O2Eq/L vs.10.1±5.9 umo L H_2O_2 Eq/L,P0.05)和OSI(15.5±5.7U vs 3.5±1.0U,P0.05)明显高于对照组,哮喘组出院时TAS水平轻度升高(P0.05),而TOS(28.1±8.4 umo L Trolox Eq/L vs.13.6±6.9 umo L Trolox Eq/L,P0.05)和OSI(15.5±5.7 umo L Trolox Eq/L vs.5.5±1.8 umo L Trolox Eq/L,P0.05)水平明显下降。在血清chemerin方面,入院时哮喘组明显高于对照组(3.8±0.9mg/L vs.2.4±0.7mg/L,P0.05),哮喘组出院时chemerin水平明显下降(3.8±0.9 mg/L vs.2.4±0.7mg/L,P0.05)。危重度亚组患儿入院时和出院时TOS(入院时:28.0±7.1 umo L H2O2Eq/L vs 31.2±9.2 umo L H2O2Eq/L,P0.05;出院时:10.1±5.2 umo L H2O2Eq/L vs 13.4±4.7 umo L H2O2Eq/L,P0.05)、OSI(入院时:13.2±5.3U vs 15.2±5.6U,P0.05;出院时:5.1±1.2U vs 6.4±2.5U,P0.05)和chemerin(入院时:3.3±0.6mg/L vs 4.2±0.8mg/L,P0.05;出院时:2.2±0.3mg/L vs 2.7±0.5mg/L,P0.05)水平均明显高于轻度亚组患儿。入院时chemerin水平诊断哮喘急性发作的AUC为0.818。相关性分析提示chemerin与哮喘急性发作(r=0.678,P0.05)和严重分级(r=0.621,P0.05)呈正相关。Logistics回归分析提示OSI(OR=1.11,P0.05)和chemerin(OR=1.45,P0.05)是哮喘急性发作发生的独立危险因素。结论新型脂肪因子chemerin通过调控体内氧化应激水平参与到肥胖患儿哮喘急性发作的病理生理学机制,chemerin水平可以作为肥胖患儿哮喘急性发作潜在标记物。     

肾交感神经消融对心肌梗死后室性心律失常发生的影响及其机制

目的探索肾交感神经消融对心肌梗死(MI)后室性心律失常的影响以及可能机制。方法将18只成年杂种犬随机分为假手术(SO)组、MI组、和肾交感神经消融加MI(RD+MI,肾交感神经消融:选用3.5 mm消融电极,6~8W消融60s)组,每组6只。记录各组MI后1 h内心电图(SO组,暴露双侧肾动脉后记录心电图1 h);记录左侧星状神经节(LSG)活性(SO组:记录心电图1 h后记录LSG活性;MI组和RD+MI组:记录MI后LSG活性);测量各组心肌组织内组胺、5羟色胺(5-HT)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达。结果 SO组无室性心律失常事件的发生。与MI组比较,RD+MI组中1 h内室性心律失常事件{单发室早[(35±6.7)个vs(87±24)个,P0.05]、成对室早[(14±7.3)个vs(26±10)个,P0.05]、室性心动过速[(2.1±1.3)次vs(6.3±2.4)次,P0.05]}发生、LSG活性、心肌组织组胺[(8.70±1.46)ng/ml vs(15.66±1.74)ng/ml,P0.05]、5-HT[(51.79±5.95)ng/ml vs(63.24±10.21)ng/ml,P0.05]表达水平和氧化应激水平{MDA[(2.47±0.50)nmol/mg vs(4.36±0.98)nmol/mg,P0.05]表达降低,SOD[(502.22±66.35)U/mg vs(392.15±33.33)U/mg,P0.05]表达增加}均明显降低。结论 RD可显著抑制MI中心脏神经活性的增加和心律失常事件发生,其机制可能与抑制心肌组织组胺、5-HT和氧化应激水平有关。     

α-硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变的疗效观察

目的观察糖尿病周围神经病变(DPN)患者加用α-硫辛酸后对神经症状及氧化应激反应的作用。方法选取DPN患者45例,分为α-硫辛酸联合甲钴胺(A)组17例及单药甲钴胺(B)组28例,比较两组治疗前后神经症状评分(NSS)、神经缺陷评分(NDS)及氧化应激指标水平。结果与治疗前相比,治疗后A组NSS得分下降[(4.88±0.94)vs(4.06±0.91)分,P0.05],过氧化氢酶(CAT)上升[(33.50±3.60)vs(37.07±6.47)U/L,P0.05],丙二醛(MDA)下降[(3.16±0.51)vs(2.77±0.27)mmol/L,P0.05],还原型谷胱甘肽(GSH)上升[(82.93±9.55)vs(88.78±13.16)ng/L,P0.05],氧化型谷胱甘肽(GSSG)下降[(115.00±23.20)vs(102.25±13.20)ng/L,P0.05]。B组仅CAT上升[(34.16±6.47)vs(37.12±5.99)U/L,P0.05],SOD、MDA、GSH和GSSG水平治疗前后比较差异无统计学意义。结论与单药甲钴胺相比,加用α-硫辛酸可更显著改善DPN患者氧化应激水平,从而更好地改善症状。     

丹参酮Ⅰ在肝缺血再灌注损伤小鼠模型中的保护作用

目的探讨丹参酮Ⅰ(T-Ⅰ)在小鼠肝缺血再灌注损伤(HIRI)模型中的保护作用。方法C57BL/6J小鼠36只随机分为假手术(sham)组(n=6)、缺血再灌注(IR)组(n=6)、IR+T-Ⅰ(5 mg/kg)组(n=6)、IR+T-Ⅰ(10 mg/kg)组(n=6)、IR+T-Ⅰ(20 mg/kg)组(n=6)和IR+T-Ⅰ(40 mg/kg)组(n=6),各组均腹腔注射给药,sham组与IR组注射等量溶剂橄榄油,IR+T-Ⅰ组每日给药1次,连续给药7 d,末次给药2 h后建立70%的HIRI模型,再灌注6 h后收集血清及肝脏标本;试剂盒检测血清ALT、AST水平,检测肝组织内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、Caspase-3及还原型谷胱甘肽(GSH)指标;HE染色观察肝组织病理情况,TUNEL法检测肝细胞凋亡水平,免疫组化检测Caspase-3、血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果IR+T-Ⅰ(20 mg/kg)组的血清ALT[(192.48±23.67)U/L]、AST[(123.19±9.16)U/L]较IR组[ALT:(336.90±41.52)U/L,AST:(206.90±18.81)U/L]均显著下降(P值均<0.01),确定了20 mg/kg为最佳浓度;与IR组[MDA:(3.48±0.95)μmol/mg;Caspase-3:(1.04±0.35)μmol/mg;SOD:(160.29±27.37)U/mg;GSH:(1.03±0.42)μmol/mg]比较,IR+T-Ⅰ(20 mg/kg)组的MDA[(1.34±0.21)μmol/mg]、Caspase-3[(0.69±0.97)μmol/mg]均显著降低(P值均<0.05),而SOD[(274.47±30.53)U/mg]及GSH[(2.12±0.27)μmol/mg]均明显升高(P值均<0.05);HE染色显示,IR组肝小叶结构紊乱,肝细胞灶性或大面积变性坏死;与IR组相比,IR+T-Ⅰ(20 mg/kg)组肝细胞坏死面积减小,肝组织结构基本完整;免疫组化结果显示,与IR组比较,IR+T-Ⅰ(20 mg/kg)组的小鼠肝细胞凋亡数目明显减少,Caspase-3蛋白表达明显减少,HO-1蛋白表达明显增加。结论T-Ⅰ通过抑制肝脏氧化应激反应和肝细胞凋亡对小鼠HIRI中起到保护作用。     

壳脂胶囊治疗非酒精性脂肪性肝炎的效果观察

目的观察壳脂胶囊对非酒精性脂肪性肝炎的临床疗效及安全性。方法选取2013年11月-2015年12月于上海市第八人民医院就诊的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者100例,随机分为治疗组、对照组各50例,分别予壳脂胶囊和多烯磷脂酰胆碱胶囊,疗程24周。观察两组治疗前后肝功能、血脂水平及肝/脾CT值的变化。计量资料组间比较采用两独立样本的t检验,组内比较采用配对样本t检验,计数资料组间比较采用χ2检验。结果两组患者治疗后AST[(49.2±21.7)U/L vs(119.5±44.2)U/L,t=10.0,P0.01;(52.4±33.1)U/L vs(115.2±48.3)U/L,t=7.6,P0.01]、ALT[(41.8±14.8)U/L vs(92.8±42.1)U/L,t=8.1,P0.01;(42.9±16.6)U/L vs(95.3±40.4)U/L,t=8.5,P0.01]、GGT[(52.3±23.7)U/L vs(168.4±85.9)U/L,t=9.2,P0.01;(54.8±30.2)U/L vs(177.6±88.7)U/L,t=9.3,P0.01]、TG[(1.78±1.01)mmol/L vs(3.52±2.35)mmol/L,t=4.8,P0.01;(2.51±1.08)mmol/L vs(3.65±2.43)mmol/L,t=3.0,P=0.02]、TC[(3.81±1.28)mmol/L vs(6.13±5.22)mmol/L,t=3.0,P=0.02;(3.63±1.39)mmol/L vs(5.27±4.54)mmol/L,t=2.6,P=0.03]水平及肝/脾CT比值[肝/脾CT比值:(0.94±0.16)vs(0.74±0.18),t=5.8,P0.01;(0.89±0.13)vs(0.70±0.20),t=5.6,P0.01]均较各自治疗前均明显改善。治疗结束时,治疗组在TC、TG水平下降较对照组更为明显,差异均有统计学意义(t值分别为3.5、2.8,P值均0.01)。结论壳脂胶囊能有效改善肝功能,降低血脂水平,减轻肝脂肪变性程度,且无明显毒副作用。     

姜黄素对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的作用及其机制初探

目的探讨姜黄素对高脂饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用及其机制。方法 SD大鼠36只随机分为正常组、模型组和治疗组(每组12只)。正常组全程饲以普通饲料,另两组均给予高脂饮食。6周末,每组各处死2只大鼠。验证非酒精性单纯性脂肪肝(NAFL)造模成功后,给予治疗组50mg·kg-1·d-1姜黄素灌胃,正常组、模型组给予相应体积的0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)灌胃。6周治疗结束后,留取血样和肝组织,计算肝指数,进行血脂、肝功能和病理组织学检查;检测肝脏组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;Western印迹检测肝脏转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)的水平。结果模型组大鼠肝组织出现NASH的病理特征。治疗组大鼠与模型组相比,血清三酰甘油、TC、ALT、AST及肝组织MDA水平均明显降低(0.36±0.17)mmol/L比(0.67±0.14)mmol/L,(1.01±0.06)mmol/L比(1.40±0.20)mmol/L,(43.67±3.22)U/L比(83.00±4.36)U/L,(82.50±7.42)U/L比(122.33±3.51)U/L,(0.54±0.95)nmol/mgprot比(1.57±0.03)nmol/mgprot;均P<0.01。肝组织脂肪变、炎症程度明显改善,GSH含量和SOD的活性升高(1.64±0.17)mg/gprot比(1.17±0.17)mg/gprot,(420.12±42.03)U/mgprot比(335.53±25.81)U/mgprot;均P<0.05。且该组肝组织内Nrf2蛋白表达较正常组、模型组显著升高(均P<0.01)。结论姜黄素可通过降脂、减弱氧应激,延缓大鼠从NAFL向NASH的进展,该作用可能与其诱导Nrf2在肝脏中的表达相关。     

CUE结构域蛋白2对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响研究

目的探讨CUE结构域蛋白2(CUEDC2)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响。方法肾小管上皮细胞HK-2分为高糖处理组(HG)、转染对照载体后给予高糖处理组(NC+HG)、转染过表达CUEDC2载体后给予高糖处理组(CUEDC2+HG)及对照组(Con)。流式细胞仪测定细胞凋亡;试剂盒检测细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平和培养液中TNF-α、IL-8水平。结果与Con组比较,HG组细胞凋亡率、MDA、TNF-α及IL-8升高[(6.23±0.65)%vs(18.56±3.14)%,(0.06±0.01)vs(0.15±0.02)nmol/mg,(29.54±3.56)vs(56.10±6.30)mg/L,(10.42±1.23)vs(19.59±1.68)mg/L;P0.05],SOD活性降低[(36.20±2.78)vs(20.17±1.45)U/mg,P0.05];与NC+HG、HG组比较,CUEDC2+HG组细胞凋亡率、MDA、TNF-α及IL-8降低[(17.14±2.98)%vs(18.56±3.14)%vs(11.47±1.20)%,(0.14±0.01)vs(0.15±0.02)vs(0.10±0.02)nmol/mg,(55.49±5.97)vs(56.10±6.30)vs(41.20±3.75)mg/L,(19.59±1.68)vs(20.12±2.35)vs(14.65±1.42)mg/L,P0.05],SOD活性升高[(20.17±1.45)vs(19.64±1.37)vs(25.96±3.26)U/mg,P0.05]。结论过表达CUEDC2可减少高糖诱导的肾小管上皮细胞炎症因子释放,降低细胞氧化应激,减少细胞凋亡,保护高糖诱导损伤的肾小管上皮细胞。     

吴茱萸次碱对氧化应激诱导血管平滑肌细胞增殖和一氧化氮合酶的影响

目的观察氧化应激对吴茱萸次碱作用血管平滑肌细胞增殖和一氧化氮合酶(NOS)的影响。方法血管平滑肌细胞分空白组、二甲基亚砜组、药物A组(吴茱萸次碱0.4μmol/L)、药物B组(吴茱萸次碱1μmol/L)、药物C组(吴茱萸次碱4μmol/L),后4组药物刺激2h后,加入过氧化氢诱导氧化应激损伤,24h后检测细胞增殖率、活性氧、丙二醛、超氧化物歧化酶(SOD)、内皮型NOS(eNOS)、诱导型NOS(iNOS)mRNA和蛋白表达。结果与空白组比较,二甲基亚砜组细胞增殖率明显升高[(104.48±4.89)%vs(94.58±1.87)%,P0.05],活性氧和丙二醛明显升高,SOD明显下降[(82.55±17.31)U/mg vs(111.76±18.25)U/mg,P0.05]。与二甲基亚砜组比较,药物A组、药物B组、药物C组细胞增殖率、活性氧和丙二醛明显下降,药物B组、药物C组SOD明显升高(P0.05);药物A组、药物B组、药物C组iNOS mRNA和蛋白表达明显下降,eNOS mRNA和蛋白表达明显升高(P0.05)。结论吴茱萸次碱在氧化应激状态下能抑制平滑肌细胞增殖、抗氧化、维持NOS相对稳定。     

同型半胱氨酸对高密度脂蛋白逆转运和抗氧化功能的影响

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对HDL逆转运和抗炎抗氧化功能的影响。方法选择顺德第一人民医院住院患者120例,根据血Hcy水平,将患者分为正常对照组60例和高Hcy组60例,记录患者的人口学特点和检测血液生化指标,同时测定患者血卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)和胆固醇酯转运蛋白(CETP)水平,患者HDL颗粒中的对氧磷酶1(PON1)、髓过氧化物酶(MPO)活性以及脂质过氧化物(LPO)含量。结果与正常对照组比较,高Hcy组患者血LCAT[(925.6±127.0)U/mg vs(1015.3±131.1)U/mg,P=0.000]、CETP[(26.3±4.1)μg/mg vs(34.6±5.0)μg/mg,P=0.000]和PON1[(213.4±71.4)U/ml vs(416.5±85.1)U/ml,P=0.000]活性显著降低,MPO[(4.8±1.9)U/L vs(3.3±1.5)U/L,P=0.000]活性和LPO[(0.93±0.08)U/L vs(0.83±0.09)U/L,P=0.000]含量显著升高。结论高Hcy通过降低血LCAT、CETP浓度,降低HDL胆固醇逆转运功能,并通过降低HDL颗粒中PON1活性,升高HDL颗粒中MPO活性,导致HDL颗粒中LPO含量升高,从而降低HDL的抗炎抗氧化功能。     

小檗碱对胰岛素抵抗大鼠肝脏葡萄糖激酶及其调节蛋白的影响

目的:研究小檗碱对胰岛素抵抗大鼠肝脏葡萄糖激酶(GK)活性及肝脏GK与葡萄糖激酶调节蛋白(GKRP)表达的影响.方法:选用♂Wistar大鼠,以高脂高热量饲料喂养8 wk,复制胰岛素抵抗大鼠模型,成模后随机分成模型组、小檗碱组、二甲双胍组,各药干预4 wk后,比较各组大鼠胰岛素敏感性、肝糖原、肝脏GK活性、肝脏GK与GKRP蛋白(Western blot法)表达的差异.结果:比模型组比较,小檗碱组胰岛索敏感性提高(-4.93±0.30 vs-5.35±0.40,P＜0.05),肝糖原含量明显升高(136.58±52.57 μg/g vs 65.88±27.80 μg/g,P＜0.05),肝脏GK活性升高(226.55±10.62 μkat/g vs 92.69±6.43 μkat/g,P＜0.05),肝脏GK蛋白表达增强(1.71±0.49 vs 1.24±0.22,P＜0.05),而GKRP表达减弱(1.19±0.20 vs 1.94±0.56,P＜0.01);与二甲双胍组比较,小檗碱组肝糖原含量高(136.584±52.574 μg/g vs 89.427±31.97l μg/g,P＜0.05),余指标无显著性差异(P＞0.05).结论:小檗碱改善胰岛素抵抗的作用机制可能与提高肝脏GK活性有关.     

还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠肾脏保护作用的机制研究

目的 探讨还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏线粒体保护及机制.方法 STZ诱导糖尿病大鼠模型,将糖尿病大鼠随机分为糖尿病非干预组(DM组)和GSH干预组(DM+GSH组),并以正常组(NC组)作对照.干预8周后,测定各组大鼠尿白蛋白排泄率(UAER)、血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平,光镜观察肾脏组织形态学变化,检测血清和肾皮质中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量以及各组肾脏线粒体膜电位和肿胀度的变化.结果 DM组大鼠UAER、SCr、BUN较NC组显著升高(均P＜0.05),肾脏组织发生糖尿病肾病病理改变,血清MDA(μmol/L)和肾皮质中MDA(μmol/g)显著升高(5.59±1.03 vs 2.97±0.77;4.80±0.83 vs 2.98±0.75;均P＜0.01),血清SOD(U/ml)和肾皮质中SOD(U/mg)含量显著降低(89.13±22.73 vs 124.1±9.27;46.05±10.24 vs 89.89±17.62;均P＜0.01),肾脏线粒体膜电位明显降低(495.79±124.71 vs 965.77±246.48,P＜0.05),线粒体肿胀度趋势明显减弱.与DM组相比,DM+GSH组大鼠UAER、SCr、BUN显著降低(均P＜0.05),肾脏病理形态得到一定改善.血清MDA(μmol/L)和肾皮质中MDA(μmol/g)降低(4.15±0.59 vs 5.59±1.03;3.39±0.61 vs 4.80±0.83;均P＜0.05),血清SOD(U/ml)及肾皮质中SOD(U/mg)升高(112.92±8.93 vs 89.13±22.73;83.15±16.75 vs 46.05±10.24;均P＜0.05),肾脏线粒体膜电位显著升高(715.97±188.65 vs 495.79±124.71,P＜0.05),线粒体肿胀度趋势增强.结论 还原型谷胱甘肽对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏病变有一定程度的保护作用,其机制可能与线粒体的功能改变有一定关系.     

芹菜素对H2O2诱导人肝细胞L02氧化损伤模型的影响

目的探索芹菜素对H_2O_2致人肝细胞L02损伤模型的保护作用。方法以H_2O_2诱导L02细胞建立氧化损伤模型,CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA法检测细胞活性氧的生成,试剂盒检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,Hoechst染色观察细胞凋亡情况,试剂盒检测caspase-3的活性。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果芹菜素浓度为≥20μmol/L时对L02细胞的增殖有显著抑制作用(P值均001);与空白对照组L02细胞活力相比,500μmol/L及以上的H_2O_2浓度均可使细胞活力极显著降低(P值均0.001),500μmol/L为H_2O_2的建模浓度;模型组细胞活力与空白对照组相比差异显著(P0.01),与模型组相比,芹菜素5、10μmol/L组细胞存活率显著提高(P值均0. 01);空白对照组细胞状态较好,模型组细胞间收缩变圆,细胞破损变形严重,芹菜素5μmol/L组与模型组相比,明显得到改善,变圆破损细胞较少;空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间相对荧光强度比较差异有统计学意义(1. 00±026 vs 32.94±1. 29 vs 13. 49±1. 23, F=1.10,P0. 001),模型组相对荧光强度较空白对照组明显增强(P0. 001),芹菜素/L组与模型组比较,芹菜素可明显清除H_2O_2诱发的ROS(P0.001);模型组中LDH和MDA水平均明显升高,SOD水平明显降低,与正常对照组相比差异均有统计学意义(F值分别为3.21、2.03、3.32,P值均0. 05),芹菜素(5μmol/L)处理后,与模型组相比,LDH和MDA水平均明显降低,SOD水平明显升高(P值均0. 05);空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间细胞凋亡率比较差异有统计学意义(7. 54%±0. 52%vs 39. 77%±3. 44%vs 14. 40%±0. 79%,F=9.44,P 0. 01);模型组细胞凋亡率显著高于对照组(P 0. 01);给与芹菜素处理后,相比于模型组凋亡率明显降低(P0. 01);空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间caspase-3活性比较差异有统计学意义[(4. 38±0. 59)U/mg vs(16. 44±1. 13)U/mg vs(10. 60±1. 04)U/mg,F=1.17,P005],模型组细胞caspase-3活性与对照组相比明显增强(P 005),芹菜素处理后,相比于模型组caspase-3活性明显降低(P005)。结论芹菜素可能通过消除ROS的生成、降低caspase-3活性对H_2O_2诱导的L02细胞损伤产生保护作用。