Th17、Treg在肺纤维化小鼠外周血、肺组织中的表达及意义

目的观察CD4+IL-17+辅助性T细胞(Th17)及Th17/CD4+CD2+5Foxp3+调节性T细胞(Treg)在博来霉素皮下注射致小鼠肺纤维化模型外周血及肺组织的表达及意义。方法 20只雌性BALB/c小鼠随机分为模型组和对照组各10只:模型组皮下注射博莱霉素4周,对照组相同条件下注射0.1 mL PBS。采用HE染色和Masson’s染色观察两组肺组织炎症和纤维化的病理改变;流式细胞术检测两组肺组织及外周血Th17、Treg及Th17/Treg的表达;应用酶联免疫吸附试验检测两组血清IL-17水平;免疫荧光定量PCR法检测两组肺实质组织中IL-17和维甲酸相关孤独受体(RORγt)的mRNA的表达,并分析上述各指标的相互关系。结果模型组肺部纤维化评分、肺组织炎症程度和羟脯氨酸的含量均显著高于对照组(P均<0.01);外周血和肺组织Th17、Th17/Treg及外周血IL-17含量较对照组均显著增高(P均<0.01);肺实质RORγt和IL-17 mRNA水平较对照组明显增高(P均<0.05)。相关性分析结果显示,外周血和肺组织Th17及Th17/Treg、外周血IL-17的水平与肺组织羟脯氨酸水平、肺部纤维化评分、肺组织炎症反应均呈显著正相关(P均<0.01)。结论肺纤维化模型Th17及Th17/Treg表达均增高;Th17可能通过分泌IL-17参与肺纤维化的发病,Th17/Treg失衡可能通过加重肺纤维化免疫炎症,促进肺部胶原纤维的沉积,在肺纤维化的发病发挥重要作用。     

CCR6-CCL20趋化轴在TH17细胞介导的肺纤维化大鼠肺组织中作用机制的研究

目的探讨CCR6-CCL20趋化轴在Th17细胞介导的肺纤维化大鼠肺组织中作用。方法随机将63只雄SD大鼠为:N组(生理盐水对照组)、B组(肺纤维化模型组)、D组(地塞米松治疗组),采用经气管内注入博来霉素致大鼠肺纤维化模型,对各组大鼠肺组织,分别采用HE染色观察病理变化;流式细胞术计数Th17细胞;免疫组化法评价CCR6表达;酶联免疫吸附试检测CCL20水平;结果 TH17细胞、CCR6、CCL20、在B、D组大鼠肺组织中不同时间点与N组相比较表达均明显增高(P0.05),以造模7 d最为显著。TH17细胞计数水平与CCR6、CCL20表达有显著的相关性(Th17 vs.CCR6,r=0.693,P0.01;Th17 vs CCL20,r=0.761,P0.01)。结论 Th17细胞介导大鼠肺组织纤维化过程中,CCR6-CCL20起到重要的趋化Th17细胞作用。     

调节性T细胞及辅助性T细胞在慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的表达及临床意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞(Th17)的表达及临床意义。方法按随机数字法将80只大鼠随机分为模型组和对照组各40只,分别测定两组大鼠肺功能,包括用力肺活量(FVC)、0.3 s用力呼气容积(FEV 0.3)、用力呼气峰值流速(PEF)、FEV0.3/FVC以及炎性因子,包括白细胞介素(IL)-6、IL-17、IL-1β、IL-35以及IL-10水平,并检测肺组织IL-17、Fox P3及外周血Treg水平。结果模型组大鼠日渐少动、皮毛无光泽、大便稀、呼吸急促,有咳嗽、痰鸣音和分泌物;对照组大鼠则正常活动和呼吸。模型组大鼠FEV0.3、FVC、PEF、FEV0.3/FVC较对照组显著降低(P0.01);模型组大鼠血清IL-6、IL-17、IL-1β水平较对照组显著升高,而IL-10及IL-35水平显著降低(P0.001);模型组肺组织中Fox P3的相对表达量显著低于对照组,而IL-7相对表达量显著高于对照组(P0.001),且模型组外周血Treg水平显著低于对照组(P0.001)。结论 COPD病变存在高炎性反应,与Th17和Treg表达失衡,调节功能降低,以致炎性反应进一步加重有关。     

老年缺血性脑卒中患者氧化型低密度脂蛋白与辅助性T细胞和调节性T细胞轴的关系

目的探讨老年缺血性脑卒中患者氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)与辅助性T细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)轴功能平衡的关系。方法选择老年缺血性脑卒中患者141例,其中缺血性脑卒中初次发作79例(初发组),复发62例(复发组),另外选择无缺血性脑卒中老年人76例(对照组)。检测各组血浆ox-LDL水平和外周血Th17/Treg频率及相关效应因子表达水平。结果与对照组比较,初发组ox-LDL、白细胞介素(IL)-17及TNF-α显著升高,Treg、Foxp3mRNA及IL-10显著降低;复发组ox-LDL、Th17、Th17/Treg、RORγt mRNA、IL-17、IL-6、IL-23及TNF-α显著升高,Treg、Foxp3mRNA及IL-10显著降低(P0.05)。相关及回归分析显示,ox-LDL与Th17、Th17/Treg、RORγt mRNA、IL-17、IL-6、IL-23及TNF-α呈显著正相关(r=0.482,r=0.528,r=0.419,r=0.439,r=0.233,r=0.262,r=0.459,P0.05);ox-LDL与Treg、Foxp3mRNA及IL-10呈负相关(r=-0.466,r=-0.478,r=-0.406,P0.05)。ox-LDL是影响Th17/Treg轴相关指标的独立因素(P0.01)。结论ox-LDL升高是老年缺血性脑卒中患者Th17/Treg轴功能平衡失调的重要影响因素。     

中药单体绿原酸对深静脉血栓形成大鼠Th17/Treg亚群失衡的影响

目的观察中药单体绿原酸对深静脉血栓形成(DVT)大鼠Th17/Treg亚群失衡的影响。方法将60只大鼠随机分为6组各10只,A、B、C、D组Reyers法建立大鼠DVT模型,分别给予绿原酸40、20、10 mg/kg及等量生理盐水灌胃7 d;E组为假手术组,F组不处理。分离大鼠脾脏单核细胞,流式细胞术检测各组Th17、Treg亚群比例,ELISA法检测大鼠血清IL-17、TGF-β蛋白,分析Th17/Treg比例与血清IL-17、TGF-β相关性。结果与E、F组比较,B~D组脾脏Th17亚群比例升高、Treg亚群比例降低、Th17/Treg升高、IL-17表达升高、TGF-β表达降低,P均<0.05;与D组比较,A、B、C组Th17亚群比例降低、Treg亚群比例升高、Th17/Treg降低、IL-17表达降低、TGF-β表达升高(P均<0.05);Th17/Treg值与IL-17呈正相关(r=0.618,P<0.05),与TGF-β呈负相关(r=-0.577,P<0.05)。结论在大鼠DVT发病过程中存在Th17/Treg亚群失衡,中药单体绿原酸诱导T细胞向Treg亚群偏移,逆转Th17/Treg亚群失衡状态,进而减轻炎症反应,保护血管内皮,抑制血栓形成。     

青蒿素对 AECOPD 患者外周血中炎症因子及 Th17/Treg 失衡的调控

目的：通过检测青蒿素干预前后慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者外周血中 Th17细胞,Treg 细胞占 CD4+ T 细胞的比例,炎症因子 IL-6、IL-21、转化生长因子β(TGF-β)的含量,初步探讨青蒿素对 COPD 患者外周血中炎症因子和 Th17/Treg 失衡的调控机制。方法随机收集 AECOPD 20例,将其分为1640干预组和青蒿素干预组,收集同一时期肺功能正常健康体检者20例作为对照组,抽取清晨空腹静脉血,采用流式细胞术检测所有实验对象 CD4+ Th17细胞和 Treg 细胞占 CD4+ T 细胞的比例;采用 ELISA 方法检测所有实验对象血清中炎症因子 IL-6、IL-21、TGF-β的水平。结果①CD4+ Th17细胞/CD4+ T 细胞和 Th17/CD4+ Treg 细胞的比例1640干预组高于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。Treg 细胞/CD4+ T 细胞的比例1640干预组则低于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。炎症因子 IL-6和 IL-21的水平1640干预组高于青蒿素干预组和对照组;青蒿素干预组高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。④炎症因子 TGF-β的水平1640干预组则低于青蒿素干预组和对照组,青蒿素干预组低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。⑤Th17/Treg 细胞的比值与炎症因子 IL-6(r =0.095,P <0.05),IL-21(r =0.051,P <0.05)的水平呈正相关,与 TGF-β(r =-0.002,P <0.05)的水平呈负相关;炎症因子 TGF-β的水平与炎症因子 IL-6(r =-2.075,P <0.05),IL-21(r =-2.869,P <0.05)的水平呈负相关。结论 AECOPD 患者外周血中存在 Th17/Treg 的失衡,炎症因子 IL-6、IL-21、TGF-β与 Th17/Treg 的失衡密切相关,青蒿素可能能够通过下调 IL-6和 IL-21的表达,上调 TGF-β的表达来调节其失衡。     

慢性阻塞性肺疾病患者辅助性T细胞17/调节性T细胞变化及其与肺功能的相关性研究

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者辅助性T细胞17(Th17细胞)/调节性T细胞(Treg细胞)变化,探讨其与肺功能的相关性。方法选取2013年9月—2015年9月四川省成都市西区医院收治的老年COPD稳定期患者36例作为稳定期组,COPD急性加重期患者29例作为急性加重期组;另选取同期在本院体检健康者50例作为对照组,其中吸烟者22例作为吸烟对照组,不吸烟者28例作为正常对照组。比较4组受试者外周血Th17细胞分数、Treg细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值,血清IL-17、IL-10水平及肺功能指标〔第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、用力肺活量占预计值百分比(FVC%)及第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC)〕,并分析外周血Th17细胞分数、Treg细胞分数及Th17细胞/Treg细胞比值与肺功能指标的相关性。结果急性加重期组和稳定期组患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值及血清IL-17水平高于吸烟对照组和正常对照组,外周血Treg细胞分数及血清IL-10水平低于吸烟对照组和正常对照组(P0.05);急性加重期组患者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值及血清IL-17水平高于稳定期组,外周血Treg细胞分数及血清IL-10水平低于稳定期组(P0.05);吸烟对照组受试者外周血Th17细胞分数、Th17细胞/Treg细胞比值高于正常对照组(P0.05)。4组受试者FVC%比较,差异无统计学意义(P0.05);急性加重期组和稳定期组患者FEV1%、FEV1/FVC低于吸烟对照组和正常对照组,急性加重期组患者FEV1%、FEV1/FVC低于稳定期组(P0.05)。Pearson相关性分析结果显示,外周血Th17细胞分数与FEV1、FEV1%/FVC呈负相关(r值分别为-0.736、-0.694,P0.05),Th17/Treg细胞比值与FEV1、FVC%、FEV1%/FVC呈负相关(r值分别为-0.892、-0.222、-0.748,P0.01),而外周血Treg细胞分数与FEV1、FVC%、FEV1%/FVC呈正相关(r值分别为0.837、0.368、0.822,P0.01)。结论 COPD患者存在Th17/Treg细胞失衡,而Th17/Treg细胞失衡与吸烟、COPD病情变化及肺功能损伤等密切相关。     

调节性T细胞和辅助性T细胞17的平衡变化在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的 研究调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)的平衡变化在慢性HBV感染中的作用.方法 应用ELISA法和流式细胞术分别对34例慢性乙型肝炎(CHB)患者、20例HBV相关慢加急性肝功能衰竭(ACHBLF)患者和20例健康对照者外周血中Treg和Th17分化相关细胞因子及外周血Th17和Treg细胞水平进行检测.计数资料应用Fisher's确切概率法,计量资料应用单因素方差分析和Tukey's多重比较检验.结果 ACHBLF组Th17分化相关因子IL-1β为(3.97±2.85) pg/mL,IL-6为(12.75±8.87)pg/mL,IL-21为(360.0±335.7)pg/mL,比健康对照组的IL-1β[(1.87±0.94)pg/mL,q=4.559,P＜0.01)、IL-6[(5.28±o.72)pg/mL,q=7.309,P＜0.01)和IL-21[(46.68±20.17) pg/mL,q=6.946,P＜0.01)均明显上调.ACHBLF组外周血Th17细胞比例明显高于健康对照组(q=3.972,P＜0.05).与健康对照组和ACHBLF组相比,CHB组Treg细胞分化相关因子TGF-β明显升高(q=4.536、5.323,均P＜0.01),外周血Treg比例也明显升高.ACHBLF组Th17细胞效应因子IL-17A水平最高,ACHBLF患者外周血Th17细胞比例与血清TBil水平呈正相关(γ=0.74,P＜0.01).结论 慢性HBV感染中,宿主免疫存在Th17和Treg失衡,ACHBLF组以Th17细胞活动为主,CHB组以Treg细胞活动为主.     

白介素17及其受体在大鼠重症肺炎克雷伯菌肺炎中的表达

目的 探讨白介素17(interleukin-17,IL-17)及IL-17受体(interleukin-17 receptor,IL-17R)在大鼠重症肺炎克雷伯菌肺炎发病过程中的表达.方法 72只SD大鼠随机分为模型组和对照组,通过气管内注射肺炎克雷伯菌3.6×10~9cfu/只,建立大鼠重症肺炎模型,采用实时荧光定量PCR方法检测各时间点肺组织IL-17、IL-17R、IL-1β、肿瘤坏死因子α mRNA表达水平;动态观察支气管肺泡灌洗液白细胞总数和中性粒细胞分类计数,并取肺组织病理学观察.结果 IL-17及IL-17R mRNA的表达于造模后4 h开始升高,第3天达到高峰,分别为对照组的(282.32±21.22)倍、(18.01±0.67)倍(P<0.01),至第7天基本降至基础水平.IL-1β及肿瘤坏死因子α mRNA的表达高峰延迟于IL-17及IL-17R,于第5天达到高峰.IL-17 mRNA的表达量与支气管肺泡灌洗液中性粒细胞计数呈显著正相关(r=0.82,P<0.01).模型组肺组织明显充血、水肿及出血,于第3天出现显著炎症细胞浸润.结论 IL-17及其受体在重症肺炎中高表达,是参与重症肺炎克雷伯菌肺炎发生发展的重要细胞因子,其促炎作用与上调中性粒细胞聚集及刺激IL-1β、肿瘤坏死因子α等细胞因子表达有关.     

类风湿关节炎并发骨质疏松患者外周血淋巴细胞亚群的表达水平

目的检测类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)并发骨质疏松(osteoporosis,OP)患者外周血淋巴细胞亚群的表达水平并探讨其临床意义.方法收集山西医科大学第二医院住院诊治的734例RA患者的基本临床资料、外周血淋巴细胞亚群及骨密度(bone mineral density,BMD)检查结果,根据BMD结果以及是否曾有脆性骨折史将以上患者分为RA未并发OP组551例和并发OP组183例,比较两组临床资料的不同,同时选取81例健康人群作为健康对照组,分析3组外周血淋巴细胞亚群的差异,并对RA并发OP患者行BMD与外周血淋巴细胞亚群间的相关性分析.结果RA患者OP发生率为24.93%,其中12.57%有骨折史.RA并发OP组女性患者比例明显高于未并发OP组(P=0.021),且年龄较大(61.85±10.36 vs.56.63±12.01,P<0.001),病程更长(7.17±5.82 vs.5.28±6.33,P=0.001),疾病活动相关指标更高(P<0.05).相较于健康对照组,RA未并发OP组B细胞水平下降,Th17细胞水平升高,但差异均无统计学意义,Th2细胞及Th17/Treg比值明显升高(P<0.01),Treg细胞及Th1/Th2比值降低(P<0.05);RA并发OP组B细胞绝对计数下降(P<0.05),Th17细胞水平及Th17/Treg比值明显升高(P<0.01),Treg细胞水平显著下降(P<0.001).相较于RA未并发OP组,并发OP组B细胞及Treg细胞水平均明显下降(P<0.01),Th17细胞水平及Th17/Treg比值升高(P<0.05).RA并发OP患者的腰椎BMD与B淋巴细胞和Treg细胞绝对计数及百分计数呈正相关(B淋巴细胞r=0.290、0.315;Treg细胞r=0.318、0.248,P<0.05),与Th17细胞绝对计数和百分计数及Th17/Treg比值呈负相关(Th17细胞r=-0.254、-0.265;Th17/Treg r=-0.242,P<0.05);同样股骨BMD与B淋巴细胞和Treg细胞绝对计数及百分计数也呈正相关(B淋巴细胞r=0.238、0.256;Treg细胞r=0.259、0.255,P<0.05),与Th17细胞绝对计数和百分计数及Th17/Treg比值也呈负相关(Th17细胞r=-0.248、-0.283;Th17/Treg r=-0.216,P<0.05).结论RA并发OP患者存在B细胞显著下降和Th17/Treg比例失衡,此与RA患者本身的免疫紊乱密切相关,在RA疾病早期关注免疫微环境并调节其平衡对预防骨质疏松的发生至关重要.     

肺纤维化大鼠上皮细胞凋亡及Bcl-xl和Bid动态变化

目的 探讨肺纤维化大鼠中Bcl-2家族部分蛋白介导的线粒体途径引起上皮细胞凋亡的动态变化及相关关系.方法 选取SD大鼠48只,随机分为4组:空白对照组(24只)、模型7d组(8只)、模型14 d组(8只)、模型28 d组(8只).应用博莱霉素(5 mg/kg)气管内注入建立实验性大鼠肺纤维化模型,空白对照组注入等量生理盐水,各组动物于第7、14、28天随机处死8只,取肺组织采用HE染色观察病理变化,TUNEL法检测肺组织细胞凋亡,RT-PCR和免疫组化法分别检测肺组织Bid、Bcl-xl mRNA以及蛋白的表达.结果 实验性大鼠肺纤维化发病过程中,呈现典型的肺泡炎(7 d)、肺泡炎与纤维化并存(14 d)及稳定的肺纤维化(28 d)等表现;同时间段模型组肺组织细胞凋亡指数、Bid mRNA及蛋白表达均显著高于空白对照组(P＜0.01),Bcl- xl mRNA及蛋白表达显著低于空白对照组(P＜0.01);模型组细胞凋亡与Bid蛋白及mRNA从第7天开始逐步升高,第28天达最高峰,Bid mRNA与细胞凋亡指数呈正相关(r=0.8275,t =7.937 5,P＜0.01);模型组Bcl-xl蛋白与Bcl-xl mRNA表达在第7天开始下降,第28天达最低峰,Bcl-xl mRNA与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.633 8,t=-4.489,P＜0.01); Bcl-xl mRNA与Bid mRNA无明显相关性(r=-0.3869,t=-2.2986,P＞0.05).结论 细胞凋亡在肺纤维形成中起重要作用,肺纤维化细胞凋亡可能与Bcl-2家族蛋白的表达失衡有关.     

Th17及Th2细胞在博莱霉素致小鼠肺纤维化中的表达及相互关系

目的探讨T辅助细胞17(Th17)及Ⅱ型辅助性T细胞(Th2)在肺纤维化(PF)形成中的表达及相互关系。方法将20只雌性BALB/c小鼠随机分为两组各10只,其中博来霉素(BLM)组每日注射BLM建立PF模型,对照组注射PBS,两组均连续注射4周。采用HE、Masson染色观察两组肺部病理改变,进行PF评分;样本碱水解法检测肺组织中的羟脯氨酸(HYP)含量;RT-PCR技术检测肺组织中的IL-6 mRNA表达,ELISA法检测外周血中的IL-17A、IL-6,流式细胞计数检测外周血、肺组织中的Th17及Th2细胞水平;并分析上述指标间的相关性。结果与对照组比较,BLM组肺HYP、PF评分、IL-17A、IL-6、Th17、Th2细胞均明显升高(P均<0.01)。外周血Th17、Th2细胞、IL-17A及IL-6分别与PF评分、肺HYP含量密切相关,肺组织中的Th17、Th2细胞及IL-6 mRNA分别与PF评分、肺HYP含量密切相关,Th17细胞分别与Th2细胞、IL-6及IL-17A密切相关,Th2细胞分别与IL-17A、IL-6密切相关(P均<0.01)。结论 Th17、Th2细胞与PF病变密切相关,两者可能均参与PF的发病过程,且有协同效应;IL-6可能为影响Th17、Th2细胞相互作用的关键因子。     

调节性T细胞、辅助T细胞在慢性阻塞性肺疾病患者肺功能降低中的作用

目的探讨调节性T细胞(Treg)、辅助T细胞(Th)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能降低中的作用。方法采用肺功能仪观察COPD患者肺功能变化,采用酶联免疫吸附法检测血清γ-干扰素(IFN)、白介素(IL)-4、IL-17变化,采用流式细胞术检测外周血Treg表达。结果与正常组比较,COPD患者肺功能参数降低,6 min步行距离缩短,血清IL-4、外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg降低,而血清IFN-γ、IL-17升高(P<0.05或P<0.01)。相关分析结果显示,COPD患者Treg与IL-17呈负相关,IL-17、IFN-γ与IL-4呈负相关;Treg与IL-4呈正相关,IFN-γ与Th1/Th2、IL-17呈正相关;最大呼气流量(PEF)与IL-17呈负相关,FEV1/FVC与IFN-γ、Th1/Th2呈负相关;FEV1与IL-4、Treg呈正相关,FEV1/FVC与Treg呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论 COPD患者Treg表达降低,免疫抑制功能明显下降,失去对炎性细胞的抑制作用,引起Th1/Th2失衡或Th17细胞过表达,导致COPD发生和肺功能降低。     

慢性特发性血小板减少性紫癜CD_4~+T细胞亚群变化的特点

目的 测定慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者CD_4~+T细胞亚群[Th1、Th2、Th17和调节性T细胞(Treg)]和相应血浆细胞因子水平,探索其在ITP发病机制中的作用.方法 将35例成人慢性ITP患者分为疾病活动组、未缓解组、缓解组,18例体检正常者设为对照组.应用流式细胞仪检测表达细胞内因子干扰素(IFN)γ~+、白细胞介素(IL)-4~+、IL-17~+细胞及表达CD_(25)~+Foxp3~+细胞分别占CD_4~+细胞的百分率.应用ELISA检测血浆中IFNγ、IL-4、IL-17和IL-10的水平,分析活动组患者血浆细胞因子水平与血小板、骨髓巨核细胞计数间的相关性.结果 Th1、Th17细胞百分率及Th1/Th17比例在各组间比较差异均无统计学意义;Th2细胞百分率:活动组[(1.01±0.88)%]、未缓解组[(1.22±1.04)%]与对照组[(1.86±0.59)%]比较明显下降(P<0.05);Th1/Th2比例:活动组(15.04±9.67)、未缓解组(11.65±9.32)与对照组(7.02±3.01)比较明显增高(P<0.05); Treg细胞百分率:活动组[(0.89±0.58)%]、未缓解组[(1.46±1.27)%]与对照组[(5.73±0.71)%]比较明显下降(P<0.01).IFNγ、IL-17水平在各组间比较差异无统计学意义;IL-4水平:活动组[(2.25±2.05)ng/L]、未缓解组[(2.33±2.14)ng/L]与对照组[(5.54±4.00)ng/L]比较明显下降(P<0.05);IL-10水平:活动组[(5.07±4.10)ng/L]、未缓解组[(5.66±4.35)ng/L]与对照组[(14.21 ±7.31)ng/L]比较明显下降(P<0.01).上述各参数(Th2、Treg细胞百分率、IL-4、IL-10水平)在缓解组与对照组间比较差异无统计学意义.活动组患者血浆IL-10水平与血小板计数呈正相关(r=0.16,P=0.03),与骨髓巨核细胞数间无相关性(r=0.41,P=0.06).结论 慢性ITP患者疾病活动组Th1/Th2比值升高,这是由Th2细胞的百分率下降所致.Treg细胞百分率下降可能与慢性ITP发病机制有关,但Th17细胞百分率可能与慢性ITP疾病状态无关.     

普拉梭菌对溃疡性结肠炎不典型增生患者Treg细胞水平及IL-23/IL-17轴的影响北大核心CSCD

目的研究普拉梭菌(Faecalibacteriumprausnitzii)对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)不典型增生患者调节性T细胞(Treg)水平及白介素23(IL-23)/白介素17(IL-17)轴的影响。方法收集25例UC不典型增生患者和20例健康对照者的新鲜粪便以及UC不典型增生患者病变、正常肠黏膜组织。提取新鲜粪便中的细菌基因组DNA,采用实时荧光定量PCR检测普拉梭菌基因拷贝数,采用免疫组化和Western blot检测组织IL-17和IL-23表达水平,采用流式细胞术检测全血Treg细胞水平,比较不同组受试者普拉梭菌含量以及Treg、IL-23、IL-17的差异性,采用Pearson相关分析普拉梭菌含量与Treg细胞水平及IL-23/IL-17的关系。结果UC不典型增生组患者新鲜粪便普拉梭菌含量以及全血Treg细胞水平均显著高于对照组(均P<0.01);病变肠黏膜组织IL-17和IL-23表达水平均显著高于正常组织(P<0.01)。Pearson分析显示,粪便中普拉梭菌含量与外周血Treg细胞水平呈正相关性(r=0.526,P<0.01),而与组织中的IL-23、IL-17水平呈负相关性(r值分别为-0.474和-0.487,均P<0.01)。结论普拉梭菌可改善UC不典型增生患者结肠组织病理学状态,其机制可能为促进Treg细胞的表达以及抑制IL-23/IL-17轴。     

过敏性哮喘患儿外周血Th17/Treg比值变化及免疫球蛋白、血IDO、白介素的相关性分析

目的观察过敏性哮喘患儿外周血Th17/Treg比值变化与免疫球蛋白、血IDO、白介素之间的关系,以评估Th17/Treg与过敏性哮喘病情发展的内在联系。方法择取过敏性哮喘患儿130例设为观察组;另于同期选取健康体检小儿130例设为健康对照组。检测两组Th17细胞、调节性T细胞(Treg)、血浆中免疫球蛋白、IL-17A、Il-6、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)及IDO水平,并应用Pearson相关性分析Th17/Treg与IgE、IL-17A、Il-6、IL-10、TGF-β的相关性。结果观察组Th17(2.45±0.77 vs. 1.73±0.42)、Th17/Treg(0.59±0.10 vs. 0.38±0.09)明显高于对照组、Treg(4.29±1.59 vs. 4.83±1.70)明显低于对照组(P0.05);两组免疫球蛋白IgA、IgM、IgG均无显著差异(P0.05);观察组IgE(0.89±0.21 vs. 0.63±0.18)明显高于对照组(P0.05);观察组IL-17A(177.46±46.47 vs. 137.54±39.86)、IL-6(4.22±0.85 vs. 3.36±0.68)明显高于对照组,IL-10(9.78±1.53 vs. 12.62±2.16)、TGF-β(25.35±3.16 vs. 37.24±5.32)、IDO(3.04±0.36vs. 4.35±0.52)均明显低于对照组,差异均具有统计学意义(P0.05);经Pearson相关分析结果显示,IgE(r=0.834,P0.05)、IL-17A(r=0.660,P0.05)、IL-6(r=0.650,P0.05)与Th17/Treg呈显著正相关;IL-10(r=-0.650,P0.05)、TGF-β(r=-0.774,P0.05)、IDO(r=-0.816,P0.05)与Th17/Treg呈显著负相关。结论对于过敏性哮喘患儿外周血Th17/Treg比值多存在异常增高情况,Th17/Treg比值与IgE、IL-17A、IL-6、IL-10、TGF-β及血IDO密切相关,参与过敏性哮喘发生及发展过程,或可用于过敏性哮喘患儿病情诊断及评估。     

Th17/IL-17水平在儿童哮喘发病中的变化及临床意义

目的探讨Th17细胞及IL-17水平在哮喘儿童外周血中水平的变化及其临床意义。方法选取35例轻度哮喘患儿、25例中重度哮喘患儿及30例健康儿童为研究对象,采用流式细胞术检测外周血Th17细胞百分率,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-17水平,观察两者变化及与哮喘严重程度的关系。结果中重度哮喘组患儿Th17细胞百分率明显高于健康对照组及轻度哮喘组,差异具有统计学意义(P0.01),轻度组与健康对照组之间差异无统计学意义(P0.05);血清IL-17水平在中重度哮喘组中明显高于轻度哮喘组和健康对照组,差异具有统计学意义(P均0.01),而在健康对照组与轻度哮喘组中,差异无统计学意义(P0.05);相关性分析结果显示,哮喘患儿外周血Th17细胞百分率与血清IL-17水平呈正相关(r=0.918,P0.05),外周血Th17细胞百分率均与哮喘严重程度呈正相关(r=0.867,P0.05);血清IL-17水平与哮喘严重程度也呈正相关(r=0.954,P0.05)。结论中重度支气管哮喘儿童外周血Th17细胞表达及IL-17水平增高,且与病情严重程度呈正相关。     

肺纤维化大鼠肺组织血小板源性生长因子和纤溶酶原激活物抑制剂1表达的研究

目的 观察肺纤维化大鼠肺组织中血小板源性生长因子(PDGF)和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)表达的变化,探讨其在肺纤维化中的作用机制.方法 30只 Wistar大鼠随机分为博莱霉素组(BLM组)和对照组(NS组):①BLM组,气管内灌注BLM(5 mg/kg)诱导肺纤维化;②NS组,气管内灌注NS(剂量与用法同上).于气管内灌注后第7、14和28天各分别处死5只大鼠,取右肺支气管肺泡灌洗液(BALF),进行细胞分类、计数;留取左肺组织匀浆测定羟脯氨酸含量;采用免疫组织化学法测定PDGF和PAI-l蛋白的表达.结果 ①BLM组肺组织中胶原含量在第7天开始升高,第14、28天进行性增高,明显高于NS组(P＜0.01);②BLM组肺组织中PDGF蛋白表达在第7天达高峰,之后下降,第28天时仍高于NS组(P ＜0.05),与BALF中的细胞总数密切相关;③BLM组肺组织中PAI-1的表达在第7天开始升高,第28天达到高峰,与肺组织中胶原的含量密切相关(r=0.952,P＜0.01).结论 PDGF和PAI-1可能通过影响细胞外基质的代谢及胶原的沉积促进肺纤维化的发生.     

急性脑梗死合并2型糖尿病患者外周血T淋巴细胞亚群比例异常观察

目的探讨急性脑梗死(ACI)合并2型糖尿病(T2DM)患者外周血免疫调节T淋巴细胞的表达特点及相关影响因素。方法选取在我院治疗的ACI患者129例,根据是否合并有T2DM将其分为单纯ACI组67例和ACI合并T2DM组62例。另同期选取30例健康体检者为正常对照组(NC组)。检测各组外周血辅助性T细胞1 (Th1)、Th2、Th17、调节性T细胞(Treg)亚群及相关效应因子表达水平。结果与NC组相比,ACI合并T2DM组Th1、Th17、Th1/Th2、Th17/Treg及白介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)升高,Th2、Treg及白介素-10(IL-10)降低;与单纯ACI组相比,ACI合并T2DM组Th1、Th17、Th1/Th2、Th17/Treg及IL-17和TNF-α升高,Treg降低,差异均具有统计学意义(P 0. 05)。Pearson相关分析显示:糖化血红蛋白(Hb Alc)与Th1、Th1/Th2、Th17/Treg、IL-17和TNF-α呈正相关(r=0. 35～0. 56,P 0. 05);与Treg和IL-10呈负相关(r=-0. 46,-0. 39,P 0. 05)。多元回归分析结果显示:低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)是Th1影响因素,舒张压(DBP)和Hb Alc是Th2及Th1/Th2影响因素,LDL-C和空腹血糖(FPG)是Th17影响因素,TG和Hb Alc是Treg影响因素,LDL-C和Hb Alc是Th17/Treg影响因素。结论 ACI合并T2DM患者外周血存在Treg数目减少及Th1/Th2和Th17/Treg比例失衡。     

外源性H_2S对肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子-β1及结缔组织生长因子的干预作用

目的动态观察硫化氢(H2S)对博莱霉素(BLM)致肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法采用气管内一次注射BLM 5 mg/kg致大鼠肺纤维化的造模方法,将健康雄性Wistar大鼠54只随机分为对照组、肺纤维化组和NaHS(H2S供体)+肺纤维化组,造模后第2天开始:NaHS+肺纤维化组每天腹腔注射0.5 ml NaHS(28μmol/kg),对照组及肺纤维化组每天腹腔内注射等量生理盐水。各组在给药后7、14、28 d分别随机处死6只取材,碱水解法检测肺组织羟脯氨酸(HYP)水平的变化,免疫组化法检测TGF-β1及CTGF蛋白在肺组织的表达。结果与对照组相比,肺纤维化组各期大鼠肺组织HYP含量、TGF-β1及CTGF蛋白表达均显著升高(P<0.01);与肺纤维化相比,NaHS+肺纤维化各组大鼠HYP含量、TGF-β1及CTGF蛋白表达在各期均显著降低(P<0.01、0.05)。各组各期肺组织TGF-β1与CTGF呈显著正相关(r=0.891⁰.968,P均<0.01)。结论外源性H2S可以通过抑制TGF-β1信号通路,下调CTGF蛋白表达发挥抗纤维化作用。