西门子ADVIA2400全自动生化分析仪检测总胆汁酸中的试剂污染分析及解决方案

目的研究西门子ADVIA2400全自动生化分析仪检测血清总胆汁酸(TBA)的试剂交叉污染及其消除措施。方法选用常用生化检测试剂作为污染观察对象,以新鲜混合血清为样本,通过一系列的筛查及确证试验分别研究这些项目试剂在TBA检测过程中对试剂针、加样针、搅拌棒、比色杯的交叉污染情况,并以生理盐水空白试验结果作为对照。结果西门子ADVIA2400全自动生化分析仪在检测TBA过程中经试剂针、搅拌棒污染的是尿酸(UA)试剂1(简称UA_(R1))、补体(C)3试剂1(简称C3_(R1))、胆碱酯酶(CHE)试剂1(简称CHE_(R1))、类风湿因子(RF)试剂2(简称RF_(R2)),经比色杯污染以UA_(R1)最为严重,不易消除。在检测TBA项目之前设置对搅拌棒、试剂针的特殊清洗程序或清洗/更换污染严重的比色杯,然后重新检测可消除干扰试剂的交叉污染;淘汰对TBA污染严重的UA试剂盒是最有效的解决办法。结论西门子ADVIA2400全自动生化分析仪测定TBA受多种试剂交叉污染,可采取有效措施加以消除。     

全自动生化分析仪测定高密度脂蛋白胆固醇后对镁检测的交叉污染

目的探讨全自动生化分析仪测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)后对镁(Mg)检测的交叉污染。方法单独检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)4种试剂中的Mg浓度。检测组分为TG、TC、LDL-C、HDL-C 4组。TG检测组:先测160份TG,紧接着测160份Mg;TC、LDL-C、HDL-C 3组的测定过程同TG检测组。设置比色杯特殊清洗程序后,先测160份HDL-C后紧接着测160份Mg。结果HDL-C检测组Mg检测结果显著高于对照组(P<0.01)。其余3组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。通过设置特殊清洗程序后,HDL-C检测组Mg检测结果与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论全自动生化分析仪测定HDL-C后对Mg测定有严重的交叉污染。可以通过设置比色杯特殊清洗程序消除HDL-C测定对Mg测定的干扰。     

日立7600生化分析仪检测血清镁中的试剂交叉污染及其消除措施

目的研究日立7600生化分析仪检测血清镁中的试剂交叉污染及其消除措施。方法选用生化试剂中含有镁离子（Mg2＋）的总蛋白（TP）、碱性磷酸酶（ALP）、二氧化碳（CO2）、血糖（Glu）、淀粉酶（Amy）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）10个项目作为污染观察对象,以质控血清为样本,分别研究这10个项目对Mg2＋检测中的试剂针、比色杯的交叉污染情况;对于Mg2＋检测的试剂针及比色杯交叉污染问题,分别采取设置其相应的清洗程序、分放不同模块检测,观察效果。结果对Mg2＋存在试剂针交叉污染的项目有CO2、Amy、TC 3个项目;对Mg2＋存在比色杯交叉污染的项目有CO2、Amy、TC、HDL-C、CK、CK-MB 6个项目,且试剂针污染程度不及比色杯污染严重。设置以去离子水作为清洗剂时的试剂针或比色杯清洗程序,或者上述施污染项目与Mg2＋分置于不同的模块上检测均可有效地消除其交叉污染。结论全自动生化仪测定血清Mg2＋中存在着试剂的交叉污染,可采取有效措施加以消除。     

脂肪酶试剂对总胆汁酸检测结果的影响

总胆汁酸(total bile acid,TBA)是最易受污染的生化项目之一。本实验分别通过检测样本针、试剂针、搅拌棒、比色杯携带污染程度,探讨脂肪酶(lipase,LPS)试剂对TBA测定结果的干扰及解决办法。     

总蛋白检测对钙离子检测携带污染来源分析

目的：分析总蛋白(TP)检测对钙离子(Ca2+)检测存在的携带污染。方法采用 AU5800型全自动生化分析仪对同一份混合血清标本进行连续10次 Ca2+检测,计算检测结果的均值(均值 A)。在 TP 检测1次后连续4次检测 Ca2+,结果记为T1~T4,重复10次,并保证测定所用的比色杯相互独立,若 T1均值与 T4均值相差5%或以上,判为试剂针污染,若 T3均值与T1均值相差5%或以上,判为搅拌棒污染。在 TP 测定完后常规清洗比色杯,并采用同一比色杯进行 Ca2+检测,重复10次,计算均值 B,若均值 B 与均值 A 相差5%或以上,判为比色杯携带污染。结果T1均值与 T3、T4均值的偏差幅度均小于5%;均值 B与均值 A 偏差幅度为11.352%。结论AU5800型全自动生化分析仪检测 TP 对 Ca2+测定不存在试剂针和搅拌棒携带污染,但存在明显的比色杯携带污染。合理设置 TP、Ca2+检测反应所在比色杯位置及增加纯水清洗程序,可有效避免比色杯携带污染。     

观察生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析以及改进措施

目的分析探讨生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析。方法选取2015年1~3月该院收集的混合血清标本20份作为检测标本。该次研究所有的检测仪器为贝克曼DXC800全自动生化分析仪。该次研究所涉及的常规生化试剂有总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和尿酸(UA),TBA测定方法为酶循环法。观察特殊清洗前后生化试剂组合TBA测量结果。结果生化试剂处理前,TC/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,TG/TBA为(218.03±6.45)μmol/L,HDL-C/TBA为(8.13±0.05)μmol/L,LDL-C/TBA为(184.01±5.16)μmol/L,UA/TBA为(474.11±10.24)μmol/L。经统计学检验,TG、LDL-C以及UA对TBA有影响(P0.05)。生化试剂处理后,TC/TBA为(8.13±0.05)μmol/L,TG/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,HDL-C/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,LDL-C/TBA为(8.12±0.04)μmol/L,UA/TBA为(8.12±0.04)μmol/L。经统计学检验,特殊清洗处理后生化试剂对TBA无影响(P0.05)。结论生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸有干扰。因此,要提高改进措施如加强清洗及科学性的有序检测从而避免污染,保证检测结果准确性。     

全自动生化分析仪上胱抑素C试剂对血清钙测定的影响

目的研究在全自动生化分析仪上胱抑素C试剂对血清钙测定的影响。方法单独测定血清钙,在测定胱抑素C后再测定血清钙,比较两结果的异同;将混合血清用不同浓度的胱抑素C试剂I稀释,测定血清钙浓度,观察试剂I对结果的影响。结果单独测定血清钙浓度是（2．56±0．056）mmol／L,在测定胱抑素c后测得的血清钙浓度是（2．28±0．053）mmol／L,差异有统计学意义（t=22．97≥t0.05．19=2．093,P〈0．05）;混合血清用不同浓度的胱抑素c试剂I稀释后,血清钙检测结果减少的幅度与胱抑素C试剂I的浓度呈直线正相关（r=0．982）。结论胱抑素C试剂对血清钙测定有负干扰,在生化分析仪上检测时应放在不同检测单元中进行。     

全自动生化分析仪测定高密度脂蛋白胆固醇后对镁检测的交叉污染

目的探讨全自动生化分析仪测定高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）后对镁（Mg）检测的交叉污染。方法单独检测甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）4种试剂中的Mg浓度。检测组分为TG、TC、LDL—C、HDL—C4组。TG检测组：先测160份TG,紧接着测160份Mg;TC、LDL—C、HDL—C3组的测定过程同TG检测组。设置比色杯特殊清洗程序后,先测160份HDL—C后紧接着测160份Mg。结果HDL—C检测组Mg检测结果显著高于对照组（P〈0．01）。其余3组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。通过设置特殊清洗程序后,HDL—C检测组Mg检测结果与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论全自动生化分析仪测定HDL—C后对Mg测定有严重的交叉污染。可以通过设置比色杯特殊清洗程序消除HDL—C测定对Mg测定的干扰。     

四种生化分析试剂对生化分析仪测定血清镁结果的影响

目的 探讨肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)4种分析试剂对奥林帕斯AU2700全自动分析仪测定血清镁结果的影响.方法 4个项目各检测后再测镁与单测血清镁结果作比较;混合血清加入生理盐水和4种分析试剂1,制成5份标本,每份均重复测定10次;混合血清单测镁10次作为对照,分别测定每一项目5次后,再连续测定混合血清镁10次.结果 CK或CK-MB、HDL-C、TG测定后再测镁与单测镁结果比较,差异均具有统计学意义(P＜0.01);4种分析试剂1对血清镁测定结果均有明显的正干扰;测CK或CK-MB、TG后再测镁对结果影响持续到第2管,测HDL-C后再测镁对结果影响持续到第3管.结论 自动生化分析仪测定CK或CK-MB、TG后再测定血清镁,中间间隔至少要有2个、测定HDL-C后再测定血清镁,中间间隔至少要有3个对镁离子测定无干扰的分析项目或启用试剂针特殊的清洗程序,如为高级生化分析仪应将该实验的项目置于不同的分析模块,以避免试剂针携带污染对测定结果的影响.     

两种匀相法检测低密度脂蛋白胆固醇的结果比较

目的:比较两种匀相法检测低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的结果并分析甘油三酯(TC)的干扰作用.方法:分别用A、B两种匀相法试剂对40例患者的血清LDL-C以及不同TG水平下LDL-C的回收率和线性进行分析.结果:TG低于1.7 mmoL/L时A试剂LDL-C结果(2.47±0.57)mmol/L与B试剂结果(2.45±0.62)mmoL/L无统计学差异(P<0.05);TG高于1.7 mmoL/L时A试剂LDL-C结果[2.66(1.82～3.42)mmoL/L]显著高于B试剂结果(1.97±0.69)mmol/L,JP<0.01,两者差值与TG浓度显著相关(r=0.937,P<0.01);两种试荆LDL-C回收率和线性无显著差异.结论:TG浓度对其中至少一种试剂LDL-C检测有严重干扰作用,而且这种干扰作用不能通过室内质控或稀释样品的方法得到纠正.     

血清葡萄糖检测试剂对无机磷测定结果的影响

目的探讨在使用全自动生化分析仪检测标本时,血清葡萄糖检测试剂对无机磷测定结果的影响因素及影响程度。方法通过实验设计,利用全自动生化仪的不同设置,分别测定样本针、试剂针、搅拌棒及比色杯的携带污染对血清无机磷测定结果的影响程度。结果血清葡萄糖试剂对无机磷测定结果的影响主要来自于试剂针的携带污染。结论应用全自动生化分析仪检测标本时,虽然具备高速、精确、自动化程度高等特点,但同时在部分检测项目间也存在着交叉污染,应根据实际情况设定仪器清洗程序和合理的分析顺序。     

试剂携带污染对血清总胆汁酸测定结果的影响及消除措施

目的消除循环酶法测定血清总胆汁酸(TBA)时试剂携带污染对结果的干扰。方法循环酶法测定20份血清标本中的TBA含量,然后分别测定总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)等9个项目后再测定TBA含量。结果在测定TC、TG、HDL-C后测定TBA导致20份血清标本结果存在系统误差,分别为14.95、15.36、22.20μmol/L。3种干扰试剂组分中的TBA含量分别为1 016.9、1 061.2、1 216.8μmol/L。结论合理安排TBA与其他检测项目的分析顺序,或设置避免试剂携带污染功能程序,用碱性清洗液冲洗试剂针,可以有效地消除TC、TG、HDL-C试剂对血清TBA测定结果的干扰。     

日立7170A生化仪交叉污染程序设置去除血清镁检测干扰

目的血清镁检测时易受含镁离子试剂污染,通过防交叉污染程序去除血清镁检测干扰。方法采用日立7170A型全自动生化分析仪,以单独测定血清镁作为对照组,以已设置防交叉污染程序(A组)和未设置防交叉污染程序(B组)作为研究组。取新鲜混合血清在A、B两组条件下与三酰甘油、碱性磷酸酶、肌酸激酶及其同工酶同时检测,观察研究组与对照组之间的偏倚率。结果观察A、B两组条件下血清镁测定结果与对照组单独测定血清镁结果的偏倚率,其中A组偏倚率为1.10%,B组偏倚率为54.95%。结论三酰甘油、肌酸激酶试剂含有镁离子,与血清镁同时测定时,由于试剂探针的残留携带,出现交叉污染,干扰血清镁检测,出现假性升高。通过日立7170A型全自动生化分析仪防交叉程序设置,增加试剂针冲洗次数,可有效避免干扰。     

BECKMAN DXC800生化分析仪携带污染的纠正措施

目的 探讨并建立BECKMAN DXC800自动生化分析仪携带污染的纠正措施.方法 以血清总蛋白与血清铜离子项目间的携带污染为例,通过初步分析样品针及搅拌棒携带污染、比色杯携带污染、试剂针携带污染的状况,检出污染源,并作出相应处理后进行有效性验证.结果 样品针及搅拌棒、比色杯、试剂针的携带污染率分别为0.81％、-0.41％、186.5％,所以试剂针的携带污染为污染源,对其处理后的携带污染率为0.81％,满足实验室要求.结论 建立的BECKMAN DXC800生化仪分析携带污染的纠正措施可行且有效.     

OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪携带污染检出及解决措施

目的:探讨OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪标本检测时可能存在的携带污染及其处理措施.方法:收集健康正常人混合血清,对31项常用分析项目各测试10次,取其平均值作为对照值.其后对各项目按比色杯内外圈分成两组逐一配对检测,以超过对照值5％或3个标准差为标准筛选出疑似污染项目.最后对疑似污染项目进行确认,并制订相应措施避免携带污染.结果:除Ca外的所有项目重复性均较好,Ca的10次检测结果以高低值相间规律出现,经分析后发现低值组检测所使用的比色杯前一次均是检测TP所用,初步认定TP测定对Ca测定有比色杯携带污染,最后选用高值组的均值作为Ca的对照值.外圈组14项及内圈组17项测试项目逐一配对进行425项测试,其中有37项次结果超过对照值5％或3个标准差,判定为疑似污染.经过确认实验,认定7项次(1.89％)结果存在试剂针或搅拌棒携带污染.但TP测定并未对Ca测定有试剂针或搅拌棒携带污染,故再次确认存在比色杯携带污染.将TP和Ca分别设在内圈和外圈,并增设纯水清洗程序,有效消除了上述携带污染.结论:OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪携带污染率较低,合理设置项目的比色杯内外国及增设纯水清洗程序可以消除携带污染.     

四种生化分析试剂对生化分析仪测定血清镁结果的影响

目的探讨肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、甘油三酯（TG）4种分析试剂对奥林帕斯AU2700全自动分析仪测定血清镁结果的影响。方法4个项目各检测后再测镁与单测血清镁结果作比较;混合血清加入生理盐水和4种分析试剂1,制成5份标本,每份均重复测定10次;混合血清单测镁10次作为对照,分别测定每一项目5次后,再连续测定混合血清镁10次。结果CK或CK-MB、HDL-C、TG测定后再测镁与单测镁结果比较,差异均具有统计学意义﹙P〈0.01﹚;4种分析试剂1对血清镁测定结果均有明显的正干扰;测CK或CK-MB、TG后再测镁对结果影响持续到第2管,测HDL-C后再测镁对结果影响持续到第3管。结论自动生化分析仪测定CK或CK-MB、TG后再测定血清镁,中间间隔至少要有2个、测定HDL-C后再测定血清镁,中间间隔至少要有3个对镁离子测定无干扰的分析项目或启用试剂针特殊的清洗程序,如为高级生化分析仪应将该实验的项目置于不同的分析模块,以避免试剂针携带污染对测定结果的影响。     

改良酶法肌酐测定试剂的研制

目的探讨建立一种改良酶法肌酐(Cr)测定试剂,并考察其与进口Cr测定试剂(日本东洋纺公司酶法Cr试剂)对血清测定的可比性及偏倚。方法采用酶法测定Cr反应前后吸光度的变化,探讨试剂各成分和浓度对检测性能的影响,并在同一台全自动生化分析仪上同时测定两种试剂的空白吸光度(A值)、分析灵敏度,对自主研发试剂的精密度、线性范围及方法学指标进行评价。结果自主研发试剂的空白A值为0.009,分析灵敏度的A值变化率为0.13,优于进口试剂。自主研发试剂高、低值血清测定变异系数分别为1.5%和1.1%;线性范围为0~2 850μmol/L;方法学比对回归方程为Y=0.98 X+1.15,r=0.999;估计偏倚低于允许误差。以相对偏差不小于10%作为有明显干扰的评判指标,结果显示35mmol/L肌酸、3.42mmol/L胆红素、0.03g/L维生素C、5g/L血红蛋白、1 450浊度乳糜对高、低值浓度标本检测结果均无干扰。结论自主研发的Cr测定试剂性能良好,与进口试剂之间具有良好的相关性,符合临床应用基本要求。     

血清总胆固醇、总甘油、游离甘油和甘油三酯标准物质的研制

目的 研制与临床标本基质相似的血清总胆固醇(TC)、总甘油(TTG)、游离甘油(FG)和甘油三酯(TG)标准物质.方法 按国家标准物质技术规范的要求,制备4种血脂浓度的健康人新鲜混合血清,用酶法测定TC检测均匀性,用HPLC法检测稳定性并定值,评估不确定度.结果 4种血清均匀性检验数据方差分析P值分别为0.339、0.212、0.275、0.196(均＞0.05),说明均匀性良好;稳定性研究结果显示4种血清TC和TG在-20℃保存至少可稳定4年;4种血清的标准值和不确定度TC分别为(5.110±0.064)mmol/L、(4.761±0.062)mmol/L、(3.941±0.050)mmol/L和(3.158±0.041)mmol/L;TTG分别为(2.212±0.043)mmol/L、(1.679±0.033)mmol/L、(1.275±0.027)mmol/L和(1.067±0.023)mmol/L;FG分别为(0.142±0.005)mmol/L、(0.149±0.004)mmol/L、(0.146±0.003)mmol/L和(0.122±0.003)mmol/L;TG分别为(2.069±0.043)mmol/L、(1.530±0.033)mmol/L、(1.129±0.027)mmol/L和(0.945±0.023)mmol/L.结论 研制的血清总胆固醇、总甘油、游离甘油和甘油三酯标准物质均匀性和稳定性良好,定值可靠,已被国家质量监督检验检疫总局发布为国家一级标准物质(GBW 09145、GBW 09146、GBW 09147、GBW 09148).     

脂肪酶试剂携带污染导致钙离子检测假性升高识别与处理

目的研究贝克曼AU5400全自动生化分析仪中脂肪酶试剂携带污染对血清钙离子检测的影响和处理措施。方法通过复检所有的血清钙检测标本,发现不符的检测结果。将脂肪酶试剂(去离子水作对照)按5%体积比混入到血清中,比较钙离子检测值偏倚。将潜在的干扰试剂放置于不同的工作模块或比色杯圈,防止干扰的发生。结果钙离子原检测系统复检与原始检测结果不符标本12份(3.82%),脂肪酶试剂添加组与对照组钙离子检测值比较,差异有统计学意义(P0.05﹚;脂肪酶试剂与钙离子检测试剂分入不同的比色杯圈,之后复检血清钙离子标本426份,未发现不符合。结论脂肪酶检测试剂携带污染可以导致钙离子检测假性升高,将含潜在干扰物的试剂与钙离子检测试剂放入不同的比色杯圈,可以消除干扰。     

血清总蛋白测定试剂的改良与应用效果评价

目的　探讨能消除脂质与葡聚糖双重干扰的血清总蛋白测定方法。方法　用氢氧化钾代替Doumas法试剂中的氢氧化钠,使脂质的溶解度增大,以消除或减低脂质所致反应液混浊。优选调整酒石酸钾钠的浓度,以消除葡聚糖对测定的干扰。用正交法设计实验,优选氢氧化钾和酒石酸钾钠的最佳浓度。结果　含氢氧化钾 143mmol/L、酒石酸钾钠 56.7mmol/L的改良试剂与含 TG 5.6mmol/L、葡聚糖60g/L的血清反应均不显混浊,可不设标本空白。TG>5.6mmol/L时,反应液混浊程度较Doumas法轻,可用标本空白纠正。对蛋白标准液和新鲜混合血清反应的吸收曲线相同。吸收峰530~560nm,最大峰值546nm,与Doumas法一致。改良试剂和Doumas试剂与蛋白反应的比吸光度分别为0.299 2L·g-1·cm-1和0.303 6L·g-1·cm-1。测定线性范围28~140g/L。回归方程y=0.892 5+0.272 7xL·g-1·cm-1,r=0.999 5。与 Doumas法平行测定外观正常的血清 72 例。配对 t检验,t=0.99,P>0.2。结论　改良试剂性能稳定,成本低廉,既能消除脂质与葡聚糖的双重干扰,又保留了Doumas法的优点。适合手工、半自动和全自动生化分析仪测定血清总蛋白。