黄连生物碱及衍生物对多重耐药铜绿假单胞菌体外抗菌活性的研究

目的分析多重耐药铜绿假单胞菌耐药情况,探究黄连生物碱及8-辛基小檗碱单用及分别与头孢吡肟、左氧氟沙星联用对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抗菌效应。方法收集首都医科大学附属北京友谊医院分离的34株非重复铜绿假单胞菌。菌株由VITEK MS质谱仪鉴定,琼脂稀释法进行体外药敏试验,微量肉汤稀释法检测不同浓度黄连生物碱、8-辛基小檗碱分别与头孢吡肟、左氧氟沙星体外联合抑菌作用,时间-杀菌曲线法测定联合抗菌活性。结果①34株铜绿假单胞菌对阿米卡星(76.5%)、妥布霉素(67.6%)、庆大霉素(50.0%)敏感率较高,对美罗培南(17.7%)、亚胺培南(11.8%)敏感率较低,8-辛基小檗碱、黄连生物碱在512μg/ml浓度时不能抑制多重耐药铜绿假单胞菌的生长。头孢他啶、头孢吡肟、左氧氟沙星、环丙沙星、哌拉西林/他唑巴坦均不敏感。②黄连生物碱、8-辛基小檗碱分别与头孢吡肟、左氧氟沙星联用均可使后两者最低抑菌浓度(MIC)降低。③黄连生物碱、8-辛基小檗碱联合头孢吡肟、左氧氟沙星在体外抑制多重耐药铜绿假单胞菌生长作用较单药显著且体外协同效应随药物浓度的升高而增强。结论氨基糖苷类抗生素对铜绿假单胞菌的抗菌效果较好,8-辛基小檗碱、黄连生物碱与头孢吡肟、左氧氟沙星联用均可增强后者的抑菌效应,降低后者MIC。     

广泛药物耐药铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌对多粘菌素B的MIC值分布调查

目的通过检测多粘菌素B体外对广泛药物耐药(extensive drug-resistant,XDR)的铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度(MIC)的分布上,来评价其对此类细菌的抗菌活性,为临床治疗、控制感染提供依据。方法用纸片扩散法检测临床分离的288株细菌(铜绿假单胞菌130株,鲍曼不动杆菌158株)对临床常见的25种抗菌药物的敏感性以确定其中广泛药物耐药菌;用E-试验检测多粘菌素B及临床常用11种抗菌药物MIC值,分析菌株的MIC值分布情况。结果 288株细菌经K-B法确认均为XDR菌株,对临床常用的11种抗菌药物的敏感性均低于15%;对多粘菌素B的MIC值均≤2μg/ml;130株铜绿假单胞菌的MIC值分布情况为0.125μg/ml1株、0.19μg/ml2株、0.25μg/ml9株、0.38μg/ml37株、0.5μg/ml48株、0.75μg/ml19株、1.0μg/ml11株、1.5μg/ml4株,MIC50为0.5μg/ml,MIC90为1.0μg/ml;158株鲍曼不动杆菌的MIC值分布情况为0.125μg/ml1株、0.19μg/ml3株、0.25μg/ml12株、0.38μg/ml45株、0.5μg/ml56株、0.75μg/ml21株、1.0μg/ml13株、1.5μg/ml7株、2.0μg/ml1株,MIC50为0.5μg/ml,MIC90为1.0μg/ml。结论多粘菌素B体外对广泛药物耐药铜绿假单胞菌与鲍曼不动杆菌均敏感,本地区临床未发现有多粘菌素B耐药株;但存在敏感区域内的高MIC值菌株,应引起临床重视。     

阿奇霉素和克拉霉素对铜绿假单胞菌生物膜形成的作用

目的研究阿奇霉素和克拉霉素对铜绿假单胞菌生物膜形成的作用。方法微量肉汤稀释法测定阿奇霉素、克拉霉素、头孢他啶、环丙沙星和庆大霉素对4株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC);银染法鉴定使用医用微孔滤膜建立的铜绿假单胞菌生物膜体外模型的生物膜形成情况;结晶紫染色法检测阿奇霉素和克拉霉素对生物膜粘附性的影响;噻唑蓝法检测阿奇霉素和克拉霉素分别与头孢他啶、环丙沙星或庆大霉素的协同作用。结果铜绿假单胞菌ATCC 27853、PA1、PA2和PA3对阿奇霉素、克拉霉素、头孢他啶、环丙沙星和庆大霉素的MIC值分别为(32,64,1,≤0.125,0.25μg/m L)、(32,256,8,0.25,1μg/m L)、(64,128,256,32,2μg/m L)和(64,128,8,2,0.25μg/m L);银染法发现4株铜绿假单胞菌的培养微孔滤膜表面覆盖物均为灰黑色,浓厚致密,呈棉絮状膜样;与不加抗菌药物对照组相比,加入1/16 MIC或1/4 MIC的阿奇霉素以及1/16 MIC或1/4 MIC的克拉霉素均可显著降低4株菌生物膜的粘附性(P均0.05);与单独使用1 MIC头孢他啶、环丙沙星和庆大霉素相比,各抗菌药物联合1/16 MIC的阿奇霉素或1/16 MIC的克拉霉素均可分别降低以上4株菌生物膜中的活菌数量,差异有统计学意义(P均0.01)。结论阿奇霉素和克拉霉素可有效抑制铜绿假单胞菌生物膜的形成,并与头孢他啶、环丙沙星或庆大霉素联合应用有协同作用。     

碳青霉烯耐药的铜绿假单胞菌的耐药性研究

目的分析159株临床分离的非重复碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药性;为临床合理联合应用抗菌药物治疗碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌感染提供实验室证据。方法收集2010年5月至2011年5月,首都医科大学附属北京友谊医院临床检验中心细菌室分离的来自不同患者的铜绿假单胞菌159株。测定单药的最低抑菌浓度(MIC),测定联合用药的MIC,计算部分抑菌指数(FIC),判断药物组合的效应。结果 159株临床分离的非重复碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌,单药MIC显示铜绿假单胞菌对于美国临床实验室标准化委员会2010推荐和临床常用抗菌药物敏感率低,呈现多重耐药表型。不同药物组合对于碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌的作用也有很大差异。全部菌株在亚胺培南单药耐药的情况下,亚胺培南+妥布霉素表现出53.3%的相加作用,美罗培南+妥布霉素的相加作用与此类似,接近50%。结论碳青霉烯耐药的铜绿假单胞菌通常情况下也会对头孢菌素类、β-内酰胺/β-内酰胺酶抑制剂、氨基糖甙类、氟喹诺酮类等产生多重耐药性。对于碳青霉烯耐药的铜绿假单胞菌,三代头孢菌素联合氨基糖甙类体外实验表现出较高比率的协同作用。     

儿童临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的了解儿童临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的耐药特征。方法收集我院住院患儿中分离的120株多重耐药铜绿假单胞菌，作药敏试验，用琼脂稀释法测定抗菌药物的MIC值，按照2005年CLSI推荐标准判断结果。数据分析使用WHONET5．3软件。结果多重耐药铜绿假单胞菌对氨曲南的耐药率最高（86．7％），头孢他啶仍具较好的抗菌活性；环丙沙星耐药率最低（2．5％）。亚胺培南和美罗培南的耐药率分别达到34．2％、35．8％，两者MIC50和MIC50相同，分别为4和32mg／L。59株细菌对碳青霉烯类抗生素耐药，占49．2％。碳青霉烯类抗生素耐药株与非耐药株对头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-三唑巴坦的耐药率差异有显著性（P〈0．05）。结论目前从儿科临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的多重耐药现象严重。     

新型抗菌肽α4-短肽体外对铜绿假单胞菌的抑制作用

目的 探讨抗菌肽α4-短肽体外对铜绿假单胞菌生长的抑制作用，为临床治疗以铜绿假单胞菌为主的肺部感染性疾病提供新思路。方法 体外观察α4-短肽对铜绿假单胞菌标准株PAO1体外生长曲线和生物膜形成的影响，并分析α4-短肽对PAO1刺激后巨噬细胞（RAW264.7）炎症水平的影响。选取若干株临床耐药菌株，体外观察α4-短肽对其生长曲线的影响。结果 α4-短肽可抑制PAO1生长及生物膜的形成，8μmol/L时效果达最佳（P<0.001）。α4-短肽预处理RAW264.7后，由PAO1引起的IL-6和TNF-α的mRNA表达下调，8μmol/L时效果最佳（P<0.001）。分离得到4株铜绿假单胞菌多重耐药菌株和2株肺炎克雷伯菌耐药菌，α4-短肽对其生长均产生较好的抑制作用。结论 α4-短肽能较好地抑制铜绿假单胞菌生长及其生物膜形成，降低铜绿假单胞菌导致的炎症水平，并对临床耐药菌株有较好的抑制效果。     

头孢哌酮联合β-内酰胺酶抑制剂体外抗菌活性分析

目的 评价头孢哌酮联合不同含量酶抑制剂对临床常见致病菌的体外抗菌活性.方法 用琼脂稀释法检测药物对临床分离的318株革兰阴性杆菌的MIC值,分析其耐药率.结果 头孢哌酮/他唑巴坦(8∶1)、头孢哌酮/舒巴坦(1∶1)、头孢哌酮/舒巴坦(2∶1)联合较头孢哌酮单用对大肠埃希菌(包括产ESBLs)、肺炎克雷伯菌(包括产ESBLs),阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的MIC50/MIC90分别降低2～32和2～8倍.对于肠杆菌科产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌,头孢哌酮/他唑巴坦(8∶1)的抗菌活性优于头孢哌酮/舒巴坦(1∶1和2∶1);对于非发酵菌铜绿假单胞菌三者MIC50/MIC90为8/64、16/64、16/64 μg/mL,鲍曼不动杆菌对三者的MIC50/MIC90为64/128、16/32、16/64 μg/mL.不同病原菌对抗菌药物显示不同的耐药性.结论 头孢哌酮与他唑巴坦或舒巴坦联合应用可不同程度地提高头孢哌酮的体外抗菌活性,对于临床常见致病菌头孢哌酮/他唑巴坦(8∶1)体外抗菌活性优于头孢哌酮/舒巴坦(1∶1)和(2∶1).而对于泛耐药鲍曼不动杆菌,头孢哌酮/舒巴坦(1∶1)抗菌活性最高.     

某院铜绿假单胞菌的分布及耐药性分析

目的分析某院2014年病房铜绿假单胞菌分离株的分布及其耐药情况。方法对临床铜绿假单胞菌分离株使用西门子医学诊断公司的M/W-96全自动细菌鉴定/药敏鉴定仪进行药敏试验,细菌药敏结果根据2013版临床和实验室标准协会(CLSI)M100-S23文件判读。结果 8 486例送检标本共检出铜绿假单胞菌249株,其中多重耐药铜绿假单胞菌54株。不同标本铜绿假单胞菌分离株、多重耐药铜绿假单胞菌检出株构成比不同,差异有统计学意义(P=0.000);呼吸道标本与非呼吸道标本中铜绿假单胞菌分离株、多重耐药铜绿假单胞菌检出株构成比存在显著性差异(P=0.000);不同标本多重耐药铜绿假单胞菌检出率差异无统计学意义(P=0.875)。不同科室铜绿假单胞菌分离比、多重耐药铜绿假单胞菌检出比差异有统计学意义(P=0.000)。铜绿假单胞菌对不同抗菌药物耐药率差异有统计学意义(P=0.000)。结论铜绿假单胞菌对常用抗菌药物耐药率处于较高水平,必须引起临床和院感部门的重视,并采取一定的监管措施。     

头孢哌酮钠舒巴坦钠诱导对铜绿假单胞菌的耐药性影响

目的探讨体外高浓度头孢哌酮钠舒巴坦钠(SCF)诱导铜绿假单胞菌后耐药谱的变化。方法收集4株SCF敏感的临床铜绿假单胞菌以及1株实验室标准株,经过体外3.2倍最低抑菌浓度(MIC)的SCF诱导50代后,得到耐药铜绿假单胞菌。采用微量肉汤稀释法测定SCF、美罗培南等12种抗菌药物对诱导耐药株的MIC,根据2017年临床与实验室标准化所(CLSI)M100-S29的药物敏感性标准对结果进行判定。利用实时定量PCR(RT-qPCR)对铜绿假单胞菌的耐药相关基因的表达进行检测。结果经过3.2倍MIC的SCF诱导50代后,铜绿假单胞菌对抗假单胞菌的β-内酰胺类或β-内酰胺酶抑制剂抗菌药物的MIC平均增加14.0倍,对抗假单胞菌的头孢菌素类抗菌药物MIC平均增加9.0～16.0倍,对美罗培南的MIC至少增加4.0倍,但是对亚胺培南的MIC影响很小,对单环-β-内酰胺类抗菌药物MIC平均增加6.0倍,对喹诺酮类和氨基糖苷类抗菌药物的MIC大多保持不变。RT-qPCR结果显示,SCF诱导后外排泵基因mexD表达升高,孔道蛋白OprD表达降低(P均<0.05)。结论 SCF使用可引起敏感的铜绿假单胞...     

铜绿假单胞菌碳青霉烯耐药的机制研究

目的分析159株临床分离的非重复碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药性,探究体外联合药敏试验对碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌表现不同作用的机制。方法收集来自不同患者的铜绿假单胞菌159株,亚胺培南及美罗培南耐药。采用三维水解试验检测β-内酰胺酶、聚合酶链式反应(PCR)等方法检测多重耐药菌可能存在的耐药机制。结果 159株临床分离的非重复碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌,通过三维实验检测,其中15株产MBL、13株产AmpC酶。体外联合药物敏感试验,加入MC-207,110后约38%的菌株对碳青霉烯类抗生素的MIC下降4个梯度。检测试验菌株,21株携带IMP基因,18株携带ampC基因;检测OprD2通道蛋白,159株中约有48%的菌株OprD2丢失。结论北京友谊医院碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因不是IMP、AmpC水解酶;碳青霉烯耐药铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的重要原因可能是外排泵及外膜孔道蛋白。     

一种抗菌织物的抗菌性能研究

摘要 目的 研究一种抗菌织物的抗菌性能,评价其实际应用中的卫生价值。方法 采用振荡瓶试验和细菌定量培养法,测定某抗菌织物体外抑菌效果。结果 未经洗涤的该抗菌织物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑菌率均为100%;该抗菌织物经过洗涤20次和50重复洗涤,对大肠杆菌的抑菌率分别为99.99%和92.78%,对金黄色葡萄球菌的抑菌率分别为99.99%和95.42%,对白色念珠菌的抑菌率分别为99.48%和93.72%。结论 该抗菌织物的抗菌作用随着洗涤次数的增加而减弱,但反复洗涤50次之后仍具有一定的抗菌作用,符合抗菌材料的各级别的要求。     

不同类型抗菌织物的抗菌性能研究

摘要 目的 观察14种新型抗菌织物的抑菌性能。方法 采用振荡瓶法和吸附法,对14种不同类型抗菌织物的抗菌性能和安全性进行评价。结果 抗菌无纺布、护理无纺布和有机抗菌无纺布对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌抑菌率均＞99%;涤棉混纺面料、徕卡抗菌面料和洗涤50次后的抗菌面料对白色念珠菌的抑菌率均＞99%。抗菌织物所用抗菌制剂对小鼠急性经口毒性属于无毒级物质,对家兔皮肤黏膜均无刺激性。结论 本研究14种抗菌织物均不同程度显示出良好的抑菌效果,对实验动物毒性实验结果显示出较好的安全性。     

Topical antibacterial agents

Decreased systemic toxicity, ease of application, and increased concentrations at the target site are some of the important advantages topical antibacterial agents offer. This article reviews the literature on selected indications for these agents and provides in-depth examination of specific agents for the prophylaxis and treatment of skin and wound infections.     

Novel antibacterial class

We report the discovery and characterization of a novel ribosome inhibitor (NRI) class that exhibits selective and broad-spectrum antibacterial activity. Compounds in this class inhibit growth of many gram-positive and gram-negative bacteria, including the common respiratory pathogens Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Staphylococcus aureus, and Moraxella catarrhalis, and are nontoxic to human cell lines. The first NRI was discovered in a high-throughput screen designed to identify inhibitors of cell-free translation in extracts from S. pneumoniae. The chemical structure of the NRI class is related to antibacterial quinolones, but, interestingly, the differences in structure are sufficient to completely alter the biochemical and intracellular mechanisms of action. Expression array studies and analysis of NRI-resistant mutants confirm this difference in intracellular mechanism and provide evidence that the NRIs inhibit bacterial protein synthesis by inhibiting ribosomes. Furthermore, compounds in the NRI series appear to inhibit bacterial ribosomes by a new mechanism, because NRI-resistant strains are not cross-resistant to other ribosome inhibitors, such as macrolides, chloramphenicol, tetracycline, aminoglycosides, or oxazolidinones. The NRIs are a promising new antibacterial class with activity against all major drug-resistant respiratory pathogens.     

一种植物抑菌液的抑菌效果与皮肤刺激观察

摘要 目的 观察一种植物抑菌液的抑菌效果及其皮肤刺激性,为实际应用提供科学依据。方法 采用抑菌环试验和动物试验法,对该抑菌液的体外抑菌效果和多次皮肤刺激试验进行观察。结果 该抑菌液由栀子、诃子和川楝子等植物提取物组成，其原液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌均有抑菌作用。将该抑菌液密封包装放置于37℃存放3个月,其抑菌效果基本不下降。该抑菌液对家兔完整皮肤多次刺激试验刺激指数为0.98。结论 该植物抑菌液对细菌繁殖体和真菌具有一定抑菌作用,对家兔多次皮肤刺激强度为轻刺激性。     

苯妥英钠的抑菌活性

背景：苯妥英钠在创面愈合过程中的抑菌作用仍不明确。目的：通过体外及动物实验观察苯妥英钠在创面愈合过程中是否具有抑菌作用。方法：①体外实验：采用水解酪蛋白肉汤稀释法检测苯妥英钠的最低抑菌浓度、琼脂扩散法观察1024mg/L的苯妥英钠的体外抑菌活性。②动物实验：将30只SD大鼠随机等分为3组,在大鼠背侧脊柱旁设计一2cm×3cm矩形创面,分别用10,20mg/cm2苯妥英钠糊剂或单纯凡士林纱布进行处理,创面均外加凡士林油纱及干纱包扎固定。隔日换药,于第4,8,12,16天进行创面表面细菌定量培养。结果与结论：①水解酪蛋白肉汤稀释法结果：应用质控菌株、临床菌株进行试验,不同苯妥英钠浓度的试管中均呈现浑浊状态。②琼脂扩散法结果：应用质控菌株进行试验,未发现抑菌圈的形成。③实验动物创面细菌定量培养结果：应用10,20mg/cm2苯妥英钠糊剂处理的创面细菌定量略低于单纯凡士林纱布处理的创面,但各组之间差异均无显著性意义（P〉0.05）。表明苯妥英钠尚无明确的体外及体内抑菌活性,对创面细菌的清除无明显作用。