异甘草酸镁对D-氨基半乳糖致急性肝衰竭大鼠模型的保护作用

目的探讨异甘草酸镁对D-氨基半乳糖致急性肝衰竭(ALF)大鼠模型的保护作用及其机制。方法 90只SD大鼠随机分为正常组(A组,n=10)、模型组(B组,n=20)、异甘草酸镁低剂量组(C组,n=20)、中剂量组(D组,n=20)和高剂量组(E组,n=20)。A组腹腔内仅注射等量无菌生理盐水,其余4组均一次性腹腔注射10%D-氨基半乳糖。C、D、E 3组在造模30 min后均于尾静脉注射异甘草酸镁注射液(25、50和100 mg/kg)。建模24和48 h后分别取肝组织行HE染色观察肝组织结构的病理变化,收集血清检测各组大鼠肝功能指标[ALT、AST、TBil、白蛋白(Alb)]、促炎症因子[肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素(IL)1β、干扰素(IFN)γ]和抑炎症因子[IL-4、IL-10、转化生长因子(TGF)β]水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果 5组大鼠的血清ALT、AST、TBil和Alb水平比较差异均有统计学意义(F值分别为74.6、108.9、25.1、58.4,P值均0.05);与A组比较,B组血清ALT、AST和TBil水平显著升高,Alb水平显著降低(P值均0.05);与B组比较,C、D、E 3组ALT、AST、TBil水平显著降低,Alb水平上升,E组变化最明显,差异均有统计学意义(P值均0.05)。5组大鼠的TNFα、IL-lβ、IFNγ、IL-4、IL-10、TGFβ水平比较差异均有统计学意义(F值分别为75.1、58.9、25.4、43.6、66.4、86.8,P值均0.05);与A组比较,B组血清TNFα、IL-lβ、IFNγ、IL-4、IL-10、TGFβ水平显著升高,差异有统计学意义(P值均0.05);与B组比较,C、D、E 3组血清TNFα、IL-1β、IFNγ水平显著降低,IL-4、IL-10、TGF-β水平显著升高,E组变化最明显,差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论异甘草酸镁可通过降低促炎因子、升高抗炎因子降低炎症反应,对ALF大鼠具有保护作用。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨毒消肝清丸对肝硬化内毒素血症大鼠肝组织炎症反应的影响

目的通过CCl4复合造模制备肝硬化内毒素血症模型,探讨毒消肝清丸对大鼠肝脏炎性损伤的保护机制。方法:66只大鼠造模过程中有17只死亡,取3只大鼠检测内毒素和观察肝脏结构,确定造模成功,剩余随机分成正常组(n=6),模型组(n=8)、乳果糖组(n=8)、毒消肝清丸高、中、低剂量组(223. 4 mg/kg、111. 7 mg/kg、58. 9 mg/kg,n=8)。采用CCl4复合造模法造模8周,制备肝硬化内毒素血症动物模型。正常组和模型组给予蒸馏水,乳果糖组予乳果糖,毒消肝清丸药物组按上述剂量每天给药1次,连续8周。测定内毒素含量变化、HE染色观察肝脏组织变化情况、采用ELISA检测肝脏组织TNFα、IL-1β、IL-6的含量;Western Blot和RT-PCR技术检测TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及其mRNA的表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t法。结果各组间大鼠血浆内毒素水平差异有统计学意义(F=26. 011,P 0. 001);模型组内毒素水平较正常组显著升高(P 0. 01);给药后乳果糖组、毒消肝清丸不同剂量组大鼠血清内毒素含量较模型组均显著降低(P值均0. 01)。各组间大鼠血清IL-6、IL-1β以及TNFα水平差异均有统计学意义(F值分别为35. 390、38. 271、40. 241,P值分别为0. 002、0. 001、0. 001);与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β、IL-6以及TNFα显著升高(P值均0. 01);给药后乳果糖组及毒消肝清丸不同剂量药物组大鼠血清IL-1β、IL-6以及TNFα水平较模型组均显著降低(P值均0. 01)。各组间大鼠肝组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白表达差异均有统计学意义(F值分别为24. 483、29. 547、19. 242、18. 752、22. 146、15. 834,P值均0. 01);与正常组大鼠相比,模型组大鼠肝脏TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白相对表达量均显著升高(P值均0. 01);乳果糖和毒消肝清丸不同剂量治疗后大鼠肝组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白相对表达量较模型组均显著下降(P值均0. 01)。与低剂量治疗组比较,中高剂量组大鼠肝脏TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白相对表达量下降尤为显著(P值均0. 01)。结论药物组可能通过下调肝脏组织TLR4/MyD88/NF-κB信号通路来抑制炎症信号的转导,减少了细胞因子TNFα、IL-1β、IL-6的表达,进而缓解内毒素血症并对肝脏组织起到保护作用。     

旋毛虫重组成虫丝氨酸蛋白酶抑制剂对小鼠脓毒症急性肾损伤的保护作用

目的　探讨旋毛虫重组成虫丝氨酸蛋白酶抑制剂（TsadSPI）对小鼠脓毒症急性肾损伤的保护作用。方法 BALB/c雄性小鼠随机分为假手术组、模型组、TsadSPI治疗组,每组6只,共18只。模型组和TsadSPI治疗组小鼠采用盲肠结扎穿孔术（CLP）构建脓毒症急性肾损伤模型,假手术组小鼠剖腹探查,不结扎、不穿孔盲肠。术后30 min,假手术组和模型组小鼠腹腔注射100 μL PBS溶液,TsadSPI治疗组小鼠腹腔注射100 μL含有2 μg TsadSPI蛋白的PBS溶液。造模后12 h,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）水平以评价肝肾功能,HE染色观察小鼠肾脏结构改变,应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中肿瘤坏死因子（TNF）?α、白细胞介素（IL）?6、IL?10、转化生长因子（TGF）?β水平,采用免疫组化染色评估肾脏组织中髓样分化因子88（MyD88）、核因子?κB p65（NF?κB p65）表达水平。结果　术后12 h,3组小鼠血清ALT（F = 41.031,P < 0.001）、AST（F = 54.757,P < 0.001）、Cr（F = 24.142,P < 0.001）和BUN水平（F = 214.849,P < 0.001）差异均有统计学意义,模型组小鼠ALT、AST、Cr和BUN水平均显著高于假手术组（P < 0.001）,而TsadSPI治疗组小鼠ALT、AST、Cr和BUN水平均显著低于模型组（P < 0.001）。HE染色结果显示,小鼠CLP术后肾脏损伤严重,TsadSPI治疗后损伤明显缓解。ELISA检测结果表明,3组小鼠血清TNF?α（F = 47.502,P < 0.001）和IL?6水平（F = 222.061,P < 0.001）差异均有统计学意义,TsadSPI治疗组小鼠TNF?α、IL?6水平较模型组显著下降（P < 0.001）;3组小鼠血清IL?10（F = 16.227,P < 0.001）和TGF?β水平（F = 52.092,P < 0.001）差异均有统计学意义,TsadSPI治疗组小鼠血清IL?10、TGF?β水平较模型组均显著升高（P < 0.001）。免疫组化染色结果表明,模型组小鼠肾脏组织内MyD88表达水平及NF?κB p65核阳性率显著高于TsadSPI治疗组。结论　TsadSPI可减少小鼠肾脏组织内MyD88表达及NF?κB p65核阳性率,进而上调免疫调节因子、下调促炎因子水平,从而保护脓毒症造成的肾脏损伤。     

异甘草酸镁对刀豆蛋白A诱导的急性肝衰竭小鼠模型的影响

目的研究异甘草酸镁(Mg IG)对刀豆蛋白A(Con A)诱导的急性肝衰竭小鼠模型的作用及机制。方法选取健康BALB/C小鼠90只,随机分为4组,分别为对照组、Mg IG对照组,每组各10只; Con A模型组、Mg IG+Con A预处理组,每组各35只(其中15只用来计算总生存率)。提取小鼠肝脏及外周血,测定生存率、血清转氨酶水平,肝组织HE染色评价小鼠肝损伤程度,TUNEL荧光染色及caspase-3蛋白活性检测评价小鼠肝细胞凋亡水平,液相芯片法检测小鼠血清炎症细胞因子IL-1β和TNFα含量。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 Con A模型组小鼠总生存率为40%,Mg IG+Con A预处理组小鼠总生存率为80%。Con A模型组血清ALT与AST水平较对照组均显著上升(P值均0. 01),Mg IG+Con A预处理组血清ALT与AST水平较Con A模型组均显著降低(P值均0. 01)。对照组、Mg IG对照组、Con A模型组及Mg IG+Con A预处理组病理评分分别为1. 0±0. 2、1. 2±0. 3、3. 7±0. 6、2. 3±0. 5,组间比较差异有统计学意义(F=2. 7,P 0. 05);凋亡细胞/100细胞数值分别为0. 2±0. 1、0. 1±0. 1、7. 8±1. 3、2. 2±0. 4,组间比较差异有统计学意义(F=27. 6,P 0. 001); caspase-3活性分别为0. 813±0. 022、0. 930±0. 033、1. 347±0. 042、1. 060±0. 053,组间比较差异有统计学意义(F=51. 072,P 0. 001)。Con A模型组与对照组比较,血清IL-1β与TNFα水平均显著上升(P值均0. 05)。Mg IG+Con A预处理组与Con A模型组比较,血清IL-1β与TNFα均显著下降(P值均0. 05)。结论异甘草酸镁对刀豆蛋白A诱导的小鼠急性肝衰竭具有明显保护作用,减少肝细胞凋亡并减轻IL-1β和TNFα引起的肝脏炎症反应可能是其缓解肝损伤的机制。     

哮喘患者外周血单个核细胞IL-23/Th-17轴及相关因子mRNA的表达与临床意义

目的:探讨哮喘患者外周血单个核细胞(PBMCs)中白细胞介素23(IL-23)、白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNFα)、转化生长因子β(TGFβ)、Foxp3(Foxp3)基因mRNA的表达及其临床意义。方法:以实时定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测68例急性发作期哮喘患者及60例健康体检者PBMCs中IL-23、IL-17、TNFα、TGFβ、Foxp3基因mRNA的表达情况,并进一步分析其内在关联性。结果:与对照组相比,哮喘急性发作期患者PBMCs中的IL-23和TNFα mRNA表达水平显著增高(P0.05),TGFβ mRNA表达水平显著下降(P0.05);而IL-17、Foxp3 mRNA表达水平差异无统计学意义(P0.05);TNFα表达水平分别与IL-17、IL-23呈正相关性,而Foxp3与TGFβ呈正相关性;IL-23 mRNA水平与哮喘患者病程、疾病严重程度和疾病控制程度存在一定关联性。结论:IL-23/Th-17轴在哮喘炎症反应过程中可能发挥潜在的重要作用,IL-23与哮喘的严重程度密切相关,有望作为其治疗监测、预后转归的潜在生物评价指标。     

恩替卡韦联合IFN-α对肝炎肝纤维化患者的疗效及TGFβ含量的影响

目的探讨恩替卡韦联合IFN-α对肝炎肝纤维化患者的疗效及TGFβ含量的影响。方法收集2012年1月至2017年10月间,我院收治的61例肝炎合并肝纤维化患者,采用随机数字表法分为观察组(n=31)和对照组(n=30),其中对照组采用恩替卡韦治疗,观察组在对照组的基础上给予干扰素(IFN-α)治疗,比较两组治疗后临床疗效,治疗前后转化生长因子-β(TGFβ)及纤维化指标的变化。结果观察组临床治疗总有效率为96.78%,对比对照组的80.00%具有统计学差异(P0.05)。与治疗前相比,治疗后两组患者血清TGFβ及IL-17水平均下降,对比差异具有统计学意义(P0.05);同时观察组治疗后各个时间点血清TGFβ及IL-17水平均低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。与治疗前相比,两组治疗后肝纤维化指标均显著下降(P0.05),且观察组治疗后肝纤维化各指标均明显低于对照组(P0.05)。结论恩替卡韦联合IFN-α对肝炎肝纤维化患者的临床效果更佳,可有效降低TGFβ水平,改善肝纤维化指标。     

哮喘患儿血清维生素D水平改变与炎症因子和肺功能的相关性研究

目的探讨哮喘患儿血清维生素D水平改变与炎症因子和肺功能的相关性。方法收集80例哮喘患儿和40例健康儿童,比较两组肺功能情况和血清维生素D水平差异。结果哮喘患儿血清25(OH)D3、TGFβ水平降低,INFγ、TNFα和IL-6增高与对照组比较有显著性差异(P均0.05);哮喘组患儿血清维生素D水平与TGFβ呈正相关,与IL-1β和IL-6呈负相关(P均0.05)。结论哮喘患儿血清维生素D水平明显较低,与炎症因子具有一定的相关性。     

1,25(OH)_2D_3干预IL-17及巨噬细胞炎性蛋白3α表达抑制大鼠肝纤维化形成的作用机制

目的探讨在肝纤维化形成过程中肝组织及外周血中IL-17和巨噬细胞炎性蛋白(MIP)3α的表达变化,以及1,25(OH)2D3经干预IL-17通路抑制肝纤维化形成的作用机制。方法 48只SD大鼠随机分为4组:正常组(橄榄油)、模型组(CCl4橄榄油溶液)、药物对照组(CCl4橄榄油溶液+橄榄油灌胃)、治疗组(CCl4橄榄油溶液+1,25(OH)2D3橄榄油溶液灌胃)。8周后取肝组织行HE染色和Masson染色,并对其纤维化程度进行病理分期;采用ELISA法检测干预后不同时间点(4、6、8周)血清中IL-17水平;免疫组化法分析不同时间点(4、6、8周)各组大鼠肝组织IL-17和MIP3α的蛋白表达;real time-PCR法检测第8周各肝组织IL-17和MIP3α的mRNA表达。计量资料的组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验,相关性检验采用直线相关分析。结果 8周时模型组及药物对照组肝纤维化显著,治疗组肝纤维化程度明显减轻。4组间各个时间点(4、6、8周)血清IL-17水平比较差异均有统计学意义(F值分别为6.13、5.79、7.18,P值均0.05);正常组血清IL-17水平很低,各个时间点(4、6、8周)模型组及药物对照组血清IL-17水平与正常组比较显著升高(P值均0.01);治疗组各时间点血清中IL-17表达水平较模型组和药物对照组均显著降低(P值均0.05),但均以第4周表达水平最高。免疫组化和real time-PCR法检测显示,对照组肝组织中几乎不表达IL-17,且MIP3α表达甚微;随着肝纤维化的进展,血清中IL-17水平逐渐降低,肝组织中IL-17水平逐渐升高(r=-0.793,P0.01);4组间各时间点(4、6、8周)肝组织表达IL-17、MIP3α水平差异有统计学意义(IL-17:F值分别为11.02、9.61、7.45,P值均0.05;MIP3α:F值分别为9.47、8.93、6.15,P值均9.05);模型组及药物对照组各时间点(4、6、8周)肝组织表达IL-17、MIP3α蛋白较正常组均显著升高(P值均0.01),治疗组肝组织各时间点表达量较模型组和药物对照组均明显降低且差异均有统计学意义(P值均0.05),均于第8周时表达量最高。模型组及药物对照组第8周IL-17、MIP3αmRNA表达水平较正常组明显增多,治疗组较药物对照组和模型组显著减少,组间比较差异有统计学意义(F值分别为7.36、10.15,P值均0.05)。结论 (1)在肝纤维化发生发展过程中,血清IL-17水平先升高后降低,而肝组织中IL-17表达水平呈逐渐升高趋势,提示肝纤维化后期血清中Th17渐被趋于肝脏;(2)1,25(OH)2D3治疗组肝脏中IL-17和MIP3α蛋白及mRNA水平较模型组及药物对照组均明显降低,提示IL-17通路可能为1,25(OH)2D3抑制肝纤维化发生发展的作用机制之一。     

罗格列酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织Kruppule样因子6信号通路的影响

目的观察罗格列酮对NASH肝纤维化大鼠肝组织kruppule样因子（KLF）6及其下游靶基因TGFβ1信号通路的影响。方法36只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、高脂组和罗格列酮组,24周末处死所有大鼠,留取肝组织行HE和Massson染色,检测血清TG、游离脂肪酸、AST、ALT及HA、LN、CⅣ等,RT-PCR检测核转录因子KLF6、TGFβ1以及反映HSC活化的特异性标记α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）mRNA的变化,免疫组织化学检测KLF6、过氧化物酶体增殖物激活受体γ、α-SMA的蛋白表达。结果模型组大鼠24周末出现典型脂肪性肝纤维化,治疗组纤维化程度明显减轻和改善。模型组血清生物化学指标及肝纤维化指标均有不同程度增高,罗格列酮干预16周后上述各指标均见明显改善,两组间差异有统计学意义（P〈0.01）。RT-PCR显示模型组KLF6 mRNA（0.96±0.08）、TGFβ1 mRNA（0.91±0.07）和α-SMA mRNA （1.08±0.19）的相对表达量均明显上升,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;治疗组则显示增高的上述基因呈不同程度的下降,差异有统计学意义（P〈0.01）。免疫组织化学显示罗格列酮组KLF6、α-SMA蛋白的表达较模型组减少,而PPARγ的表达较模型组增加,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论罗格列酮可以激活PPARγ,降低NASH肝纤维化大鼠肝组织核转录因子KLF6及其下游靶基因TGFβ1的表达,抑制HSC的活化,阻止肝纤维化形成,这可能是其发挥抗肝纤维化的作用之一。     

活动性肺结核患者抗结核治疗后血清不同炎症因子的水平改变研究

目的探讨活动性肺结核患者抗结核治疗后血清不同炎症因子的水平改变。方法连续性随机选取自150例肺结核患者,分别于抗结核治疗前,治疗后2、4、6个月共四个时间点检测促炎因子(IL-12,IFNγ,TNFα,IL-1β以及Il-6)和抗炎因子(IL-10,TGFβ以及IL-4)的水平变化。综合分析促炎因子和抗炎因子水平动态变化与抗结核疗效和临床预后的关系。结果肺结核组患者,治疗前IL-12,IFNγ,TNFα,IL-1β以及Il-6水平均高于对照组(P0.05)。经过治疗后,IFNγ和IL-6明显下降(P0.05)。肺结核组患者治疗前TGFβ以及IL-4水平均低于对照组(P0.05),经过治疗后TGFβ明显上升(P0.05)。相关性分析可见,IL-1β和IL-4与BMI呈负相关(P0.05),TNFα与痰涂片细菌数量呈负相关(P0.05),IL12与INFγ呈正相关(P0.05),IL-6与IL-1β和TNFα(P0.05)呈负相关。通过ROC曲线分析提示治疗前INFγ和IL-6均有中等诊断学意义(INFγ:AUC=0.768,P=0.041;IL-6:AUC=0.768,P=0.041)。结论肺结核患者血清INFγ、IL-6和TGFβ水平在治疗过程中动态变化,与病情发展和临床预后转归密切相关,是潜在评价抗结核疗效的标记物。     

辛伐他汀抑制肝星状细胞活化及其对腺苷酸活化蛋白激酶活性的影响

目的 研究辛伐他汀治疗非酒精性脂肪性肝纤维化的作用机制.方法 高脂饲料喂养大鼠复制非酒精性脂肪性肝纤维化模型,辛伐他汀灌胃治疗后,病理学染色观察肝组织病理改变,RT-PCR和Western blot法测定肝组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α的mRNA和蛋白质表达水平,同时测定血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、ALT、AST和血清肿瘤坏死因子(TNF)α水平.体外用促进脂肪细胞分化的培养液诱导人肝星状细胞株LX-2获得静止表型,分别用转化生长因子β1(TGFβ1)、辛伐他汀、TGFβ1+辛伐他汀处理静止型LX-2细胞,RT-PCR和Western blot法检测AMPKα的mRNA及蛋白质表达变化.多组间数据比较用单因素方差分析或析因设计方差分析,两组间数据比较用q检验. 结果 高脂饮食24周成功复制大鼠非酒精性脂肪性肝纤维化模型.随造模时间的延长,肝组织炎症、脂肪变和纤维化程度加重,血清TC、TG、ALT、AST和TNFα水平逐渐升高(P值均＜0.01),肝组织AMPKα的mRNA相对表达量及活性逐渐降低(P＜0.01或P＜0.05).与模型对照组相比,辛伐他汀治疗组TC、TG、ALT、AST和TNF α[水平明显下降(P值均＜0.05),AMPKα mRNA(0.31±0.05比0.24±0.07)和AMPK α[活性(0.45±0.07比0.27±0.07)明显升高(q值分别为3.22和6.44,P＜0.01或P＜0.05);肝星状细胞的AMPKα活性明显增强(静止型为0.93±0.10比0.72±0.09,活化型为0.72±0.10比0.54±0.10,q值分别为7.00和6.00,P值均＜0.01),α-平滑肌动蛋白的mRNA和蛋白质表达明显减少(分别为0.30±0.02比0.36±0.02和0.30±0.03比0.38±0.02,q值分别为11.245和11.216,P值均＜0.01),I型胶原的mRNA和和蛋白质表达也明显减少(分别为0.30±0.03比0.37±0.03和0.25±0.03比0.33±0.03,q值分别为8.791和11.163,P值均＜0.01).结论 辛伐他汀可以通过提高AMPK活性,抑制肝星状细胞活化,延缓非酒精性脂肪性肝纤维化的发生和发展.     

下调miR-122对非酒精性脂肪性肝炎小鼠的炎症发生及肝细胞凋亡的影响

目的探讨下调miR-122对非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis, NASH)小鼠的炎症发生及肝细胞凋亡的影响。方法 qRT-PCR检测各组小鼠肝组织中miR-122的表达情况;HE染色观察各组小鼠肝组织病理损伤情况;油红O染色观察各组小鼠肝组织脂肪堆积情况;ELISA检测各组小鼠血清中甘油三脂(TG)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达情况;TUNEL荧光染色观察各组小鼠肝细胞凋亡情况;Western blotting检测各组小鼠肝组织中Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果 miR-122 mRNA的表达水平在MCD组和MCD+miR-NC组小鼠肝组织中表达水平上调(P均0.01),在MCD+miR-122 inhibitor组小鼠肝组织中表达水平下调(P0.001);MCD组和MCD+miR-NC组小鼠的肝脏出现中度至重度肝细胞空泡化和大量脂质滴(P均0.001),MCD+miR-122 inhibitor组小鼠的肝脏组织表现出轻度至中度的肝细胞空泡和脂质滴也减少(P0.05);MCD组和MCD+miR-NC组小鼠血清中TG、ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平上调(P均0.01),MCD+miR-122 inhibitor组小鼠血清中TG、ALT、AST、TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平下调(P均0.05);MCD组和MCD+miR-NC组肝细胞凋亡指数升高(P均0.001),MCD+miR-122 inhibitor组肝细胞凋亡指数下降(P0.05);MCD组和MCD+miR-NC组小鼠肝组织中Bax蛋白表达水平上调(P0.01),Bcl-2蛋白表达下调(P均0.001),MCD+miR-122 inhibitor组小鼠肝组织中Bax蛋白表达水平下调(P0.05),Bcl-2蛋白表达上调(P0.05)。结论下调miR-122可抑制炎症的发生、抑制肝细胞凋亡,对NASH有一定的治疗作用。     

补阳还五汤对肝纤维化小鼠肝功能、肝组织转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α水平的作用及机制

目的探讨补阳还五汤(BHD)对肝纤维化(LF)小鼠肝功能、转化生长因子(TGF)-β1和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的影响和机制。方法雄性小鼠随机分成对照组,模型组,秋水仙碱组(0.001 g/kg),BHD高、中、低剂量组(37.06、18.53、9.26 g/kg)。采用30%CCl4(1 ml/kg)腹腔注射诱导LF小鼠。放射免疫法检测小鼠血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)水平。生化分析法检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平。Masson染色和透射电镜观察小鼠肝形态结构并计算肝指数。酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝TGF-β1和TNF-α水平。结果与模型组比较,BHD高、中剂量组小鼠血清HA、LN、ALT和AST明显降低(P<0.05),LF明显减轻,肝指数明显降低(P<0.05),肝TGF-β1和TNF-α明显降低(P<0.05)。结论 BHD可改善小鼠LF,这与降低小鼠肝TGF-β1和TNF-α表达有关。     

TGF-β1、TNF-α mRNA在肝包虫囊肿周围人体纤维囊壁中的特异性分层表达

目的探讨TGF鄄β1、TNF鄄αmRNA在形成肝包虫囊肿周围人体纤维囊壁中的作用及其临床意义。方法采用原位杂交方法检测转化生长因子鄄β1(TGF鄄β1)及肿瘤坏死因子鄄α(TNF鄄α)的mRNA在40例肝包虫囊肿周围纤维囊壁中表达。结果TGF鄄β1、TNF鄄α在肝包虫囊肿周围纤维囊壁中出现特异性分层表达。靠近虫体侧纤维囊壁中,TGF鄄β1、TNF鄄α的阳性细胞表达率分别为(10.24±2.90)%、(16.22±2.84)%。靠近肝实质侧纤维囊壁中,TGF鄄β1、TNF鄄α的阳性细胞表达率分别为(37.51±7.45)%、(25.76±5.05)%。TGF鄄β1、TNF鄄α在2层中表达的差异均有显著意义(P<0.01)。靠近肝实质侧纤维囊壁中TGF鄄β1与TNF鄄α之间表达的差异也有显著意义(P<0.05)。结论肝包虫囊肿周围人体纤维囊壁分层,TGF鄄β1、TNF鄄α与肝实质侧纤维囊壁的形成有密切关系。     

羟基红花黄色素A缓解脂多糖诱导内皮细胞炎症因子表达升高的研究

目的:研究羟基红花黄色素A(HSYA)抑制脂多糖(LPS)诱导的脐静脉血管内皮细胞(Eahy926细胞)炎症因子表达升高的作用。方法:采用RT-qPCR法测定Toll样受体4(TLR4)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNFα)mRNA表达水平及ELISA法测定IL-6、IL-1β和TNFα蛋白表达水平。结果:HSYA浓度为5×10-6mol/L、10×10-6mol/L和20×10-6mol/L时可抑制LPS(终浓度为1μg/mL)诱导的Eahy926细胞IL-6、IL-1β和TNFαmRNA(模型组vs.正常组P值均<0.01;HSYA干预中高剂量组vs.模型组P值均<0.01;HSYA干预低剂量组vs.模型组,P值均<0.05)和TNFα蛋白(模型组vs.正常组,P值均<0.01;HSYA干预IL-1β表达的中高剂量组vs.模型组,P值<0.05;HSYA干预TNFα表达的中剂量组vs.模型组,P值<0.05;高剂量组vs.模型组,P值<0.01。HSYA干预IL-6表达的低剂量组vs.模型组,P值<0.05;HSYA干预中高剂量组vs.模型组,P值<0.01)表达的升高,并随HSYA剂量升高可见药效增强。结论:HSYA对LPS诱导的Eahy926细胞TLR4、IL-6、IL-1β、TNFα表达升高有抑制作用。     

大麻素受体1、FAKmRNA在小鼠肝纤维化形成过程中肝组织中的表达及相互关系

目的研究大麻素受体1（CB1）mRNA在肝纤维化形成过程中表达的变化,从基因转录水平探讨其与黏着斑激酶（FAK）的关系。方法采用10％四氯化碳腹腔注射制备肝纤维化模型,分别于造模第2、4、6、8周留取小鼠的肝组织及血清。通过肝组织病理对肝纤维化程度进行评分,荧光定量PCR检测CB1mRNA和FAKmRNA水平,ELISA方法检测血清中转化生长因子（TGF）β1的含量。结果与正常对照组相比,各模型组小鼠肝组织中CB1mRNA和FAKmRNA含量显著升高（P〈0．05）,而且随造模时间的延长,CB1mRNA和FAKmRNA含量亦逐渐增高,各组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。CB1mRNA的含量不但与肝纤维化评分呈显著正相关（r=0．747）,而且与肝组织中FAKmRNA含量也呈显著正相关（r=0．907）,P值均〈0．01。各模型组小鼠血清中TGF[M的水平随造模时间延长而不断升高,各组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。肝组织中CB1mRNA的含量与血清TGF[M水平呈显著正相关（r=0．542,P〈0．01）。结论CB1可能通过激活FAK,以磷脂酰肌醇-3-激酶（P13K）通路诱导肝星状细胞（HSC）增殖并分泌大量TGFβ1,从而促进肝纤维化的形成。     

日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏CTGF、TGFβ_1-mRNA的表达及意义

目的研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)mRNA与转化生长因子-β1(transforminggrowth factor-beta1,TGFβ-1)mRNA在日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏中的表达及意义。方法用昆明小鼠感染尾蚴复制小鼠日本血吸虫病肝纤维化模型,模型组分别在6、10、14、18周杀鼠,治疗组在6周时予吡喹酮治疗后10、14、18周杀鼠;masson染色并图像分析进行胶原半定量;RT-PCR检测小鼠肝脏CTGFmRNA、TGFβ-1mRNA表达。结果模型组10周时小鼠血吸虫病肝纤维化形成,胶原量进行性增加,肝脏CTGFmRNA表达达高峰,10周、14周、18周时与治疗组相比均有明显的统计学差异(P均<0.01);模型组TGFβ-1mRNA表达水平和CTGFmRNA有相同的变化趋势,但18周时与治疗组已无明显差别(P>0.05);模型组CTGFmRNA和TGF-β1mRNA的表达具有直线相关性。结论CTGF与TGF-β1的基因表达与小鼠日本血吸虫病肝纤维化形成有密切关系;TGF-β1的致纤维化作用可能部分通过CTGF的生物学作用介导;通过阻断CTGF的传导通路可能是肝纤维化治疗的有效靶点。     

急性肝衰竭TNF-α、Caspase-3及TGF-β1 mRNA的表达及罗格列酮的干预

目的: 观察D-氨基半乳糖(D-Ga lN)联合脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肝衰竭TNF-α、Caspase-3、TGF-β1 mRNA的表达,并探讨罗格列酮的干预作用.方法: ♂昆明小鼠随机分为3组: 正常组、对照组、干预组.对照组和干预组以D-Ga lN/LPS腹腔注射构建小鼠急性肝衰竭模型,正常组则相应予以生理盐水腹腔注射;干预组于造模前2 h予以罗格列酮灌胃,正常组和对照组则相应予以生理盐水灌胃.比较各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,肝组织病变程度及肝组织TNF-α、Caspase-3,TGF-β1 mRNA的表达水平.结果: D-GalN联合LPS腹腔注射成功构建了小鼠急性肝衰竭模型,对照组肝组织中TNF-α、Caspase-3、TGF-β1 mRNA的表达较正常组明显增高( P＜0.001);干预组小鼠血清ALT,AST水平明显低于对照组(403.6±76.1 U/L vs 3664.8±646.1 U/L,464.6±63.0 U/L vs 3514.0±468.9 U/L,均P＜0.001),肝组织中TNF-α、Caspase-3、TGF-β1 mRNA表达水平明显低于对照组(0.270±0.042 vs 0.459±0.072,0.388±0.033 vs 0.553±0.033,0.261±0.031 vs 0.403±0.042,均P＜0.001);与对照组比较,干预组肝组织炎性细胞浸润明显减少,肝细胞以变性为主,未见明显坏死.结论: 罗格列酮可能通过下调T N F - α、Caspase-3、TGF-β1的表达对D-GalN/LPS小鼠急性肝衰竭起保护作用.     

雷公藤多苷联合依那西普治疗老年类风湿关节炎及其对血清炎性因子和骨代谢因子的影响

目的探讨雷公藤多苷联合依那西普治疗老年类风湿关节炎(RA)的疗效及其对血清炎性因子和骨代谢因子的影响。方法选取老年RA患者120例,根据随机数表法分为研究组和对照组,每组各60例。对照组给予依那西普联合甲氨蝶呤进行治疗,研究组给予雷公藤多苷联合依那西普进行治疗。比较两组临床疗效、不良反应及血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子(TNF)-α、总Ⅰ型胶原氨基端延长肽(TPⅠNP)、β-胶原降解产物(CTX)、骨钙素(BGP)水平。结果两组总有效率比较差异无统计学意义(P0.05)。两组治疗后血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均较治疗前明显下降,且研究组血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平均明显低于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。两组治疗后TPⅠNP、BGP水平均较治疗前明显上升,β-CTX水平较治疗前明显下降,差异均有统计学意义(P0.05),治疗后两组TPⅠNP、β-CTX、BGP水平比较差异无统计学意义(P0.05)。两组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论雷公藤多苷联合依那西普可有效治疗老年RA,并可降低血清炎性因子水平,改善骨代谢异常情况,且不良反应少而轻微。     

甘氨酸对内毒素性肝损害保护作用的实验研究

目的探讨甘氨酸(Gly)对内毒素(LPS)性肝损害的保护机制。方法BABL／c小鼠随机分为两组,LPS组经腹腔注射10 mg／kg的LPS,Gly组在注射相同剂量LPS前3 d开始喂饲含5％Gly的饲料。光镜观察组织病理学改变、免疫组织化学法检测Toll样受体4(TLR4)表达水平；酶联免疫吸附法检测血浆肿瘤坏死因子(TNF)α、白细胞介素10(IL-10)浓度及逆转录聚合酶链反应检测肝组织中TNFα、IL-10及TLR4的mRNA表达水平。结果Gly能明显提高小鼠存活率,肝脏病理损害程度减轻；Gly组TNFα水平显著低于LPS组,差异有统计学意义[(1852.80±126.64)pg／ml对(708.83±51.29)pg／ml,P＜0.05]；Gly组IL-10增加且高峰前移,与LPS组比较差异有统计学意义[(418.64±38.86)pg／ml对(344.09±31.70)pg／ml,P＜0.05]；Gly组肝组织中TNFα及TLR4表达也明显减弱,IL-10表达明显增强,与LPS组比较差异均有统计学意义[分别为TNFα：A值1.59±0.14对0.91±0.11；TLR4：A值0.97±0.12对0.53±0.11；IL-10：A值0.62±0.08对1.06±0.15；P值均＜0.05]。结论Gly能明显减轻LPS所致的肝损害,其机制可能与其下调肝脏各种细胞的TLR4表达,同时上调IL-10的水平有关。