EGCG-Zn配合物对老年小鼠免疫功能、空间学习及记忆力的影响

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)-锌(Zn)配合物对老年小鼠免疫系统和学习记忆功能的影响。方法18个月龄老年小鼠分别给予相同剂量的EGCG、Zn、EGCG-Zn配合物灌胃25 d,观察小鼠的一般体征,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、脑过氧化氢酶(CAT)活性,血清、肝组织中丙二醛(MDA)含量。通过Morris水迷宫试验,考察小鼠在定位航行、空间探索和工作记忆实验中的行为表现。结果 EGCG-Zn组在空间探索实验中,与空白组有显著性差异。血清SOD、MDA、脑CAT、肝MDA等各项指标与空白组相比均有显著性差异。结论 EGCG-Zn配合物对老年小鼠免疫功能有一定的促进作用,对记忆力和空间学习能力影响不大。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对低密度脂蛋白诱导的血管内皮损伤的保护作用

目的探讨茶多酚主要活性成分表没食子儿茶素没食子酸酯对低密度脂蛋白诱导的大鼠血管内皮功能不全的保护作用及其机制。方法雄性SD大鼠随机分为5组:对照组、低密度脂蛋白组、低密度脂蛋白 表没食子儿茶素没食子酸酯(10 mg/kg)组、低密度脂蛋白 表没食子儿茶素没食子酸酯(50 mg/kg)组和低密度脂蛋白 维生素E(50 mg/kg)组。舌下静脉注射低密度脂蛋白诱发血管内皮功能不全,检测血浆中非对称性二甲基精氨酸、一氧化氮、丙二醛和肿瘤坏死因子含量,并观察离体胸主动脉环的内皮依赖性舒张反应。结果单次静脉注射低密度脂蛋白能明显降低大鼠胸主动脉的内皮依赖性舒张效应,升高血浆中非对称性二甲基精氨酸、丙二醛和肿瘤坏死因子水平,减少一氧化氮的生成(P<0.01)。表没食子儿茶素没食子酸酯(10 mg/kg和50 mg/kg)可显著改善低密度脂蛋白所致的血管内皮舒张功能障碍,降低非对称性二甲基精氨酸、肿瘤坏死因子和丙二醛水平,增加一氧化氮的合成。结论表没食子儿茶素没食子酸酯能显著改善低密度脂蛋白对血管内皮舒张功能的抑制作用,其保护作用可能与降低内源性非对称性二甲基精氨酸水平有关。     

茶多酚对实验性肝损伤保护作用的研究进展

肝脏是机体的重要代谢器官和解毒器官,作用于机体的多种致病因素均可导致肝细胞的变性、坏死、凋亡以及癌变。茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是从茶叶中提取的活性成分,包括表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、表儿茶素(EC)等多种成分。TP具有清除自由基、抗氧化等多种生物活性,近年来的研究均显示TP对肝损伤具有保护作用,本文就相关研究结果作一综述。     

可溶性TNFRI-Fc融合蛋白对抗肺缺血再灌注损伤的效果及机制

目的观察TNF-α拮抗剂可溶性TNFRI-Fc融合蛋白对抗大鼠肺缺血再灌注损伤的作用,并探讨其可能机制。方法选择体质量250～350 g的雄性SD大鼠72只,随机分为3组,每组24只,假手术组(C组)仅开胸,不行肺缺血及再灌注处理;Ⅰ组与Ⅱ组开胸行左肺缺血和再灌注处理,Ⅱ组在肺门阻断前及肺门开放前5 min经颈静脉留置针推注溶于生理盐水中的可溶性TNFRI-Fc融合蛋白(3μg/kg)。分别于再灌注后或开胸后1、3、6、12 h颈动脉放血处死大鼠,取左肺上1/3制成匀浆用于检测TNF-α、IL-8、MDA、SOD,中1/3测肺组织湿/干重比(W/D),下1/3用于光镜下肺组织病理学观察。结果 C组各时间点肺组织匀浆内TNF-α、IL-8、MDA含量、SOD活力无明显变化,肺组织在光镜下无明显变化,Ⅰ组TNF-α、IL-8、MDA含量在1、3、6、12 h时间点较C组明显升高,而SOD活力明显降低,肺内有严重的毛细血管充血及炎性细胞浸润;Ⅱ组各时间点肺组织匀浆内TNF-α、IL-8、MDA含量、W/D较Ⅰ组明显降低,SOD活力升高,且TNF-α达峰时间明显错后,病理形态学检查示炎性细胞浸润明显减轻。结论可溶性TNFRI-Fc融合蛋白可对抗肺缺血再灌注损伤,其效果与其有效中和TNF-α并阻断其生物学活性有关。     

白藜芦醇对大肠杆菌诱导的大鼠膀胱粘膜损伤保护作用机制的研究

目的 探讨白藜芦醇对大肠杆菌诱导的大鼠膀胱粘膜损伤的保护作用机制。 方法 将 45 只(170±10) g 雌性 SD 大鼠随机分为空白对照组、模型对照组和白藜芦醇实验组。 通过尿道向大鼠膀胱内植入导管并进行大肠杆 菌液灌注建立感染性膀胱粘膜损伤模型(模型对照组),白藜芦醇实验组按照 40 mg / kg 剂量灌胃给药,实验结束后 镜检观察大鼠膀胱内壁病理变化。 采用比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧 化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量;采用 ELISA 法检测膀胱组织内细胞因子白介素-1β( IL-1β)、 IL-6、IL-8、IL-10 和肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量;采用 Western Blot 法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。 结果 白藜芦醇给药显著减少膀胱黏膜中炎性细胞数量,显著降低大鼠膀胱组织中 MDA、NO 含量,提高了 SOD、GSH -Px、CAT 活性;明显降低 IL -1β、IL-8、TNF-α,提高 IL-6、IL-10 含量;显著减少 TGF-β1 的蛋白表达。 结论 白藜 芦醇通过抗氧化、抗炎和降低纤维化作用改善大肠杆菌诱导的大鼠膀胱粘膜损伤,避免对膀胱组织伤害。     

吸入高浓度氢气对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响

目的 探究高浓度氢气对大鼠肺缺血再灌注损伤的影响。方法 雄性SD大鼠30只,体重220～260 g,随机分为3组(n=10):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和氢气组(H2组)。采用阻断左侧肺门30min,再灌注1h的方法制备大鼠肺缺血再灌注模型。Sham组,只开胸,不建立缺血再灌注模型,I/R组和H2组建立缺血再灌注模型,H2组在再灌注期间吸入67%H2。再灌注1h后,采用ELISA法检测肺组织中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法检测肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的水平,并且用Western blot方法测定凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-9的含量。结果 与Sham组比较,I/R组IL-6、TNF-α和MDA水平显著升高,SOD的活性降低,caspase-3和caspase-9的含量明显升高(P<0.05)。与I/R组比较,H2组IL-6、TNF-α和MDA水平显著降低,SOD的活性升高,caspase-3和caspase-9的含量明显降低(P<0.0...     

高效液相色谱法测定砖茶中儿茶素和生物碱含量的研究

目的 建立测定砖茶中儿茶素和生物碱的色谱分析方法,同时寻找出砖茶中儿茶素和生物碱的较优提取条件.方法 采用高效液相色谱法分离检测砖茶中儿茶素和生物碱,并进行回收率、精密度、稳定性实验.分别采用水、乙醇作为提取溶剂对砖茶中儿茶素和生物碱提取情况进行正交实验,再比较水和醇的提取效果,以获得提取砖茶中儿茶素和生物碱的较优提取条件.结果 高效液相色谱法可同时分离并检测出砖茶中儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯、没食子儿茶素、表儿茶素没食子酸酯6种儿茶素以及咖啡碱、可可碱2种生物碱.各组分的峰面积和浓度之间具有良好的线性关系,决定系数(R2)范围为0.9990 ～ 0.9999;加标回收率范围为83.78％～ 106.35％.精密度较好[峰面积相对标准偏差(RSD)范围为0.50％～1.51％].砖茶中儿茶素和生物碱较优提取条件为:乙醇浓度80％、料液比1∶10、温度80℃、时间30 min.结论 乙醇作为提取剂的高效液相色谱法的较优提取条件,对砖茶中6种儿茶素和2种生物碱分离度较好,定性准确,快速灵敏.     

天麻素对大鼠心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨天麻素(Gastrodin,GAD)对大鼠心脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法:将大鼠随机分为假手术组(Sham组),缺血/再灌注损伤组(MI/R组)和天麻素低、中、高剂量组(GAD组)。通过结扎冠状动脉左前降支构建心肌缺血再灌注损伤模型。测定各组大鼠乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、心肌梗死面积、心脏收缩和舒张功能、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β和肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达。结果:天麻素预处理可明显减少心肌梗死面积以及降低LDH、CK、AST、MDA、IL-6、IL-1β和TNF-α表达。此外,天麻素预处理还可改善心脏收缩和舒张功能,增加CAT、GPx和SOD活性。结论:天麻素预处理可通过抑制炎症反应和氧化应激而减轻心脏缺血再灌注损伤。     

β-谷甾醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤和ERK1/2信号通路的影响

目的研究β-谷甾醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤和ERK1/2信号通路的影响。方法 30只SD雄性大鼠随机分成3组:假手术组、模型组和β-谷甾醇处理组;采用HE染色观察大鼠心肌组织损伤,监测大鼠心脏指数(CI)、每搏量(SV)和每搏指数(SI)等心肌功能指标的变化;采用酶联免疫吸附剂法测定大鼠血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;采用蛋白印记法检测大鼠心脏组织中细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2结合蛋白X(Bax)的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠心肌指标CI、SV和SI,血清中SOD水平及心脏组织中Bcl-2的表达均显著下降,血清中MDA、ROS、CK、CK-MB、IL-1β、IL-6、TNF-α和心脏组织中ERK1/2和Bax的表达显著上升(P 0. 05);与模型组相比,β-谷甾醇处理组大鼠心肌指标CI、SV和SI,血清中SOD水平和心脏组织中Bcl-2的表达均显著上升,血清中MDA、ROS、CK、CK-MB、IL-1β、IL-6、TNF-α和心脏组织中ERK1/2和Bax的表达显著下降(P 0. 05)。结论β-谷甾醇可保护大鼠心肌缺血再灌注损伤,可能参与ERK1/2信号通路,缓解心肌缺血再灌注大鼠出现的氧化应激和炎症损伤,并抑制其心肌细胞的凋亡。     

鸡尾酒疗法对肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ表达的影响

目的:研究鸡尾酒疗法对肝纤维化大鼠肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)及Ⅲ型胶原(COLⅢ)表达的影响.方法:采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型, 实验分为: 牛磺酸组、表没食子儿茶素没食子酸酯组、三羟基异黄酮组、鸡尾酒组、秋水仙碱组、模型组和正常组. 在实验的第10周末取肝组织, HE染色法观察肝组织改变, 免疫组织化学法检测肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ的表达.结果:病理组织学观察发现各组能明显改善肝纤维化大鼠肝组织结构和肝纤维化, 免疫组织化学检测表明鸡尾酒组、三羟基异黄酮组、表没食子儿茶素没食子酸酯组、牛磺酸组的肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ表达量与模型组比较均显著降低(TGF-β1: 2.57±0.23, 4.21±0.35, 4.93±0.21, 4.81±0.16 vs12.11±0.62, P <0.05; COLⅠ: 2.69±0.10, 4.88±0.42, 5.04±0.31, 4.79±0.29 vs 13.06±0.24,P <0.05; COLⅢ: 3.17±0.42, 5.73±0.23, 5.51±0.25, 5.24±0.18 vs 15.15±0.43, P <0.05), 并且鸡尾酒组与单一用药各组相比有统计学意义(P <0.05).结论:鸡尾酒疗法能对肝纤维化大鼠的肝脏起保护作用, 与单一用药相比更能有效降低TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ的表达, 可能具有更高的抗肝纤维化能力.     

表没食子儿茶素没食子酸酯对脂多糖诱导胶质细胞炎症的保护作用

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对细菌脂多糖(LPS)所致大鼠神经胶质细胞炎症的保护作用。方法取新生乳鼠原代神经胶质细胞培养,利用LPS激活小胶质细胞引起炎症反应。荧光探针检测细胞内超氧化自由基的水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western印迹检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-8、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、炎性因子蛋白含量的变化。结果 LPS激活神经小胶质细胞,促进其释放超氧化自由基,诱导炎症因子的过度表达,大幅上调TNF-α、IL-1β、IL-8炎性因子和升高i NOS蛋白质水平(P0.05),EGCG明显抑制超氧化自由基及上述炎症因子的过度产生,减轻LPS对神经胶质细胞的毒性。结论 EGCG能减弱LPS引起的体外培养神经胶质细胞的炎症反应。     

辣椒素对放射性肺损伤的保护作用研究

目的探讨辣椒素对γ射线致肺损伤的保护作用及机制。方法将30只C57大鼠随机均分为正常组、辐射组和辣椒素组(n=10)。辣椒素组术前给予辣椒素腹腔注射,通过给予γ射线照射3天构建建立放射性肺损伤模型。Western blotting检测Wnt、β-catenin、Bax和BCL-2的表达; TUNEL法检测肺脏细胞凋亡; HE染色检测肺组织病理形态;血气分析仪检测二氧化碳分压(PaCO_2)和氧分压(PaO_2),肺功能分析仪检测肺功能。结果显示:与辐照组相比,辣椒素组肺功能明显好转,肺组织病理损伤明显减轻,Wnt、β-catenin、Bax、TUNEL和PaCO_2的表达明显减少,而BCL-2和PaO_2的表达明显增加。结论辣椒素可通过抗凋亡途径降低γ射线诱导的肺脏损害,其保护机制与下调Wnt/β-catenin通路激活相关。     

七氟醚对大鼠急性肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨七氟醚对大鼠急性肠缺血—再灌注损伤的保护作用及其机制。方法SD大鼠30只,随机分为对照（S）组、缺血再灌注（IR）组和七氟醚（Sevo）组,各10只。建立大鼠急性肠IR损伤模型,2 h后分别检测其血清IL-6、TNF-α及血浆超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）,同时观察肠组织的病理变化。结果与S组相比,IR组和Sevo组血清IL-6、TNF-α水平明显上升（P均〈0.01）,但Svo组IL-6、TNF-α低于IR组（P〈0.05）;缺血再灌注后,IR组血浆SOD活力降低、MDA升高（P均〈0.01）,Sevo组SOD活力、MDA分别高于和低于IR组（P均〈0.05）,Sevo组肠组织病理损伤分级明显低于IR组（P〈0.05）。结论七氟醚对大鼠肠IR损伤有一定的保护作用,可能是通过抑制炎症介质的释放和抗氧自由基反应发挥作用。     

局部应用没食子儿茶素-3-没食子酸抑制移植静脉内膜增生

目的探讨局部应用没食子儿茶素-3-没食子酸对移植静脉内膜增生的抑制作用及其发生机制。方法应用异硫氰酸荧光素荧光标记技术和高效液相色谱法体外定性和定量测定血管对没食子儿茶素-3-没食子酸的吸收情况。日本大耳白兔20只,随机分为没食子儿茶素-3-没食子酸处理组和对照组(n=10)。建立兔颈外静脉与颈内动脉间置移植模型,移植前没食子儿茶素-3-没食子酸处理组血管在0.1 g/L没食子儿茶素-3-没食子酸中常温保存1 h,而对照组血管保存在生理盐水中。组织学方法测定移植三周后移植静脉血管新生内膜厚度、内膜中膜厚度比,原位DNA断裂位点的3′-羟基末端标记、Ki67免疫组织化学染色测定新生内膜阳性细胞百分比。结果0.1g/L没食子儿茶素-3-没食子酸中保存1 h2、h4、h,静脉血管的吸收量分别为2.9±0.9 mg/g、5.8±2.1 mg/g和8.0±2.3 mg/g,分布在血管壁全层。两组移植血管术后3周的通畅率均为90%(9/10)。移植术后3周没食子儿茶素-3-没食子酸处理组较对照组内膜厚度(41.1±13.6μm比89.9±48.3μm,P<0.01)及内膜/中膜厚度比(0.40±0.18比0.77±0.31,P<0.05)均显著降低,新生内膜Ki67阳性染色平滑肌细胞百分比也显著下降(22.4%±8.6%比8.8%±2.4%,P<0.05),而凋亡细胞百分比(0.40%±0.55%比0.60%±0.89%,P>0.05)无明显变化。结论局部应用没食子儿茶素-3-没食子酸能够抑制移植静脉内膜增生,可能与其抑制内膜平滑肌细胞增殖有关。     

过表达Krüppel样因子9对脂多糖诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响及机制

目的:探讨Krüppel样因子9(KLF9)对脂多糖(LPS)诱导的人肺泡上皮细胞A549增殖、凋亡和炎症的影响及机制。方法:A549细胞随机分为四组:NC组、LPS组、LPS+pcDNA-con组和LPS+pcDNA-KLF9组。qRT-PCR检测KLF9、IL-6、IL-1β和TNF-αmRNA的表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测KLF9、CyclinD1、Bax、Bcl-2、β-catenin和GSK-3β蛋白的表达。结果:与NC组相比,LPS组的细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著增加,KLF9、CyclinD1和Bcl-2蛋白的表达显著降低,Bax蛋白和炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的表达显著升高;与LPS+pcDNA-con组相比,LPS+pcDNA-KLF9组细胞存活率显著升高,细胞凋亡率显著降低,KLF9、CyclinD1和Bcl-2蛋白的表达显著升高,Bax蛋白和炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的表达显著降低(P<0.05)。过表达KLF9可抑制LPS诱导的A549细胞中Wnt/β-catenin信号通路的激活。结论:过表达KLF9可减轻脂多糖诱导的肺泡上皮细胞损伤,这可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

巨噬细胞刺激蛋白对烟熏大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激和细胞因子产生的影响

目的 探讨巨噬细胞刺激蛋白(MSP)对烟熏大鼠肺泡巨噬细胞氧化应激和细胞因子产生的影响.方法 培养正常和烟熏不同时间(1个月、2个月、3个月)的大鼠肺泡巨噬细胞,给予不同浓度MSP处理24 h,采用酶联免疫法检测细胞上清液中细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介索8(IL-8)和IL-1β的浓度,比色法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平.结果 ①MSP呈浓度依赖性促进正常组和各烟熏组大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8和IL-1β;经MSP处理后,各烟熏组大鼠肺泡巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-8和n-1β浓度均高于正常组(P＜0.05);大鼠肺泡巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-8和IL-1β浓度随烟熏时间延长呈时间依赖性增加.②MSP呈浓度依赖性促进正常组和各烟熏组大鼠肺泡巨噬细胞分泌MDA,抑制其产生SOD;烟熏2个月组和烟熏3个月组大鼠肺泡巨噬细胞上清液中MDA水平均高于正常组(P＜0.05),SOD水平均低于正常组(P＜0.05);随着烟熏时间延长,大鼠肺泡巨噬细胞上清液中MDA水平呈时间依赖性增加,SOD水平呈时间依赖性降低.结论 MSP呈浓度依赖性促进正常和烟熏大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8、IL-1β和MDA,抑制其产生SOD.MSP促烟熏大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8、IL-1β、MDA及抑制其产生SOD的作用较正常大鼠更显著,且烟熏时间越长此作用越明显.     

褪黑素对大气细颗粒物（PM 2.5）暴露大鼠肺部炎症反应和氧化应激的影响及其机制研究

目的：探讨褪黑素对大气细颗粒物(PM 2.5)暴露大鼠肺部炎症反应和氧化应激的影响及其机制。方法将48只清洁级 SD 大鼠随机(随机数字法)分成4组：空白对照组、NS 对照组、PM 2.5组及褪黑素(melatonin,MT)组,每组各12只。通过气管向肺内注入 PM 2.5悬液构建大鼠肺组织PM 2.5染毒模型,并通过灌胃溶液,采用肺组织 HE 染色、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)及蛋白印迹等方法分别检测肺组织病理改变,如 TNF-α、IL-6、IL-1、MPO、SOD、MDA 以及 NF-κB p65蛋白表达。结果①与空白对照组及 NS 对照组比较,PM 2.5组大鼠肺组织出现明显损伤改变,MT 组大鼠肺组织损伤较 PM 2.5组明显减轻;②PM 2.5组大鼠肺组织 TNF-α、IL-6、IL-1表达明显增加(P <0.05),MT 组较 PM 2.5组 TNF-α、IL-6、IL-1表达明显下降(P <0.05);③PM 2.5组大鼠肺组织 SOD 表达较空白对照组及 NS 对照组明显下降(P <0.05),而 MPO 及 MDA 表达明显增加(P <0.05),而与 PM 2.5组比较,MT 组大鼠肺组织 SOD 表达增加,MPO 及 MDA 表达下降(P <0.05);④PM 2.5组 p65蛋白表达明显上调(P <0.05),而MT 组较 PM 2.5组 p65蛋白表达明显下降(P <0.05)。结论 PM 2.5能通过介导肺组织炎性反应及氧化应激导致肺组织损伤,且与活化 NF-κB 相关,MT 能显著抑制 PM 2.5所致 NF-κB 活化,减轻炎性反应及氧化应激,改善PM 2.5暴露大鼠肺损伤。     

富氢液腹腔注射对心肌缺血/再灌注大鼠急性肺损伤的预防作用及其机制

目的 观察富氢液对心肌缺血/再灌注大鼠急性肺损伤的预防作用,并探讨其相关作用机制.方法 成年雄性SD大鼠随机分为心肌缺血/再灌注+富氢液+HO-1抑制剂组(抑制剂组)、心肌缺血/再灌注+富氢液组(HS组)、心肌缺血/再灌注组(I/R组)、假手术组(S组).采用冠脉结扎术制备心肌缺血/再灌注急性肺损伤模型.抑制剂组大鼠在冠脉结扎术前30 min腹腔注射锌原卟啉(ZnPPIX,25 mg/kg),于再灌注前5 min腹腔注射富氢液10 mL/kg.HS组大鼠于再灌注前5 min腹腔注射富氢液10 mL/kg.I/R组大鼠分离左冠状动脉前降支并结扎30 min后,松开结扎线再灌注120 min.S组大鼠仅穿线不结扎.再灌注2 h时,检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)总蛋白,采用ELISA法检测各组大鼠血清和肺组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)及肺组织血红素氧合酶-1(HO-1).再灌注2 h时,取各组大鼠组织测肺湿/干重比;采用HE染色观察各组大鼠肺组织损伤程度并评分;采用Western blotting法检测各组大鼠肺组织HO-1.结果 与S组相比,I/R组、HS组、抑制剂组大鼠BALF总蛋白含量、肺W/D和肺组织病理评分均高(P均<0.05);血清和肺组织TNF-α、IL-1β和IL-10水平均高(P均<0.05);肺组织HO-1蛋白浓度和水平均高(P均<0.05).与I/R组相比,HS组大鼠BALF总蛋白含量、肺W/D和肺组织病理评分均低,血清和肺组织TNF-α、IL-1β水平均低,IL-10水平高(P均<0.05);肺组织HO-1蛋白浓度和水平均高(P均<0.05).与HS组相比,抑制剂组大鼠BALF总蛋白含量、肺W/D和肺组织病理评分均高(P均<0.05);血清和肺组织TNF-α、IL-1β水平均高,IL-10水平低(P均<0.05);肺组织HO-1蛋白浓度和水平低(P均<0.05).结论 富氢液可减轻心肌缺血/再灌注大鼠急性肺损伤,其机制可能与上调HO-1从而抑制肺组织炎性反应有关.     

肾缺血再灌注损伤大鼠肺内CAT的表达变化

目的 观察肾缺血再灌注损伤大鼠肺内过氧化氢酶(catalase,CAT)的表达变化,探讨CAT在抗氧化应激反应中的作用.方法 大鼠切除右肾,无损伤动脉夹夹闭左肾动脉,建立肾缺血再灌注损伤模型.再灌注24 h后取材(血、肾、肺).酶偶联速率法和苦味酸法分别检测血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serum creatinine,SCr)浓度;HE染色法观察大鼠肾形态;硫代巴比妥酸比色法检测肺内丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量;采用RT-PCR和Western blot方法分别测定大鼠肺组织内抗氧化酶CAT的mRNA与蛋白表达水平.结果 HE结果显示肾缺血再灌注损伤组大鼠的肾组织受损明显.与对照组相比,肾缺血再灌注损伤组血清中的BUN和SCr、肺组织中的MDA含量均明显升高(P<0.05或P<0.01),CAT的mRNA表达水平与蛋白表达水平均明显升高(P值均<0.01).结论 肾缺血再灌注损伤后,肺内发生了过氧化损伤.CAT在肾缺血再灌注损伤大鼠肺内发挥了抗氧化应激的作用.     

小鼠缺血再灌注损伤后海马齿状回Wnt1、Wnt3a的表达变化

目的 探讨Wnt/β-catenin相关因子在缺血再灌注小鼠海马中的表达变化.方法 将80只1月龄健康雄性昆明小鼠随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注1、3、7、14、21、28 d组,通过夹闭小鼠双侧颈总动脉0.5h再通的方法建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型,采用腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核甘(BrdU)检测海马齿状回区神经干细胞(NSCs)增殖规律及通过原位杂交法和免疫组织化学染色方法检测Wnt/β-catenin信号通路重要信号分子Wnt1 、Wnt3a的表达变化.结果 BrdU检测显示正常组和假手术组小鼠海马齿状回区可见少量BrdU阳性细胞,缺血再灌注后3 d BrdU阳性细胞开始增高(P＜0.01),缺血再灌注后7d达高峰(P＜0.01),随着灌注时间的延长呈下降趋势,缺血再灌注后28 d,BrdU阳性细胞数降至正常水平(P＞0.05).原位杂交法结果显示正常组、假手术组海马齿状回颗粒细胞下层均无明显Wnt1、Wnt3a阳性表达.缺血再灌注各组均可见Wnt1、Wnt3a阳性细胞,再灌注后1d表达开始增加,14 d达高峰,28 d减少至正常水平.与正常组和假手术组比较,缺血再灌注各组Wnt1、Wnt3a阳性细胞数明显增多(P＜0.05).结论 小鼠脑缺血再灌注损伤可激发内源性NSCs的增殖.当Wnt/β-catenin途径被激活时,Wnt1、Wnt3a在海马齿状回颗粒细胞下层的表达,为进一步研究Wnt信号通路在脑缺血再灌注损伤中的作用及其机制奠定了基础.