胃癌外体（exosome）内miRNA-1的检测分析

目的检测胃癌细胞系来源外体(exosome)及其胃癌组织和血清中exosome内miRNA-1的表达水平并分析其临床意义。方法采用实时荧光定量RT-PCR分别检测胃癌细胞系来源exosome、胃癌患者组织及血清exosome内miRNA-1的表达水平,分析其与临床资料相关性,并绘制ROC曲线进行效能分析。结果 miRNA-1在人胃癌细胞系MGC-803(6.51±0.41)和SGC-7901(14.81±1.30)中的含量明显高于胃上皮细胞系GES-1(1.05±0.25),差异有统计学意义(t分别为11.26、10.38,P均0.01);而MGC-803、SGC-7901细胞培养上清exosome内miRNA-1的表达水平(49.98±11.77和28.68±4.66)显著高于GES-1来源exosome(1.00±0.02)差异有统计学意义(t分别为4.162、5.942,P均0.01);25对胃癌组织标本中有18例癌组织miRNA-1表达上调,7例表达下调,胃癌组织[1.110(0.070,4.307)]平均表达水平高于癌旁组织[1.149(1.110,2.075)],差异有统计学意义(Z=-1.897,P0.05)。miRNA-1在胃癌患者血清exosome内的表达水平[4.130(0.151,12.720)]较体检健康者血清exosome内表达水平[0.704(0.077,7.243)]明显增高(Z=-2.407,P0.05),且与胃癌的淋巴结转移相关;胃癌患者血清exosome内miRNA-1的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.723 0,95%可信区间(CI)为0.627 0~0.818 7,cut off值为2.39,敏感性为66%,特异性为68%。结论胃癌组织及其胃癌患者血清来源exosome内富含miRNA-1,有望成为新的胃癌诊断标志物。     

胃癌患者血清LINC00978表达及其临床意义

目的检测胃癌患者血清中LINC00978表达水平,评估其表达水平与临床病理参数的关系,并探讨其临床诊断价值。方法实时荧光定量RT-PCR检测LINC00978在胃癌细胞、体检健康者、胃良性疾病及胃癌患者血清中的表达水平,分析其与胃癌患者临床病理参数的相关性,并用ROC曲线分析其诊断效能。结果 LINC00978在人胃癌细胞系MGC-803中的表达水平(18.88±1.15)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.00±0.03),差异有统计学意义(t=-21.926,P0.05)。LINC00978在胃癌患者血清中的平均含量[3.525(1.385,8.954)]较胃良性疾病患者[0.419(0.258,1.369)]和体检健康者[0.814(0.351,2.510)]均明显升高(Z值分别为-4.834和-4.686;P均0.01),且与淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关(r分别为0.448、0.369和0.383,P均0.01);胃癌患者术后血清中LINC00978的表达水平[0.17(0.15,0.39)]较术前[0.98(0.59,1.61)]明显降低(Z=-5.731,P0.01)。与体检健康者相比,LINC00978在胃良性疾病患者血清中表达差异无统计学意义(Z=-1.693,P0.05)。胃癌患者血清LINC00978的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.807,95%可信区间(CI)为0.723~0.882,当cut-off值为1.806时,其诊断胃癌的敏感性为71.4%,特异性为75.9%。结论 LINC00978在胃癌患者血清中呈高表达,且与淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关,有望成为潜在的胃癌诊断的生物学标志物。     

胃癌患者血清外泌体中DANCR表达及其临床意义

目的检测胃癌患者血清外泌体(exosome)中抗分化非编码RNA(DANCR)的表达水平并分析其临床应用价值。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞培养上清和胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,绘制ROC曲线评价其诊断效能。结果 DANCR在人胃癌细胞系HGC-27中表达水平(4.43±0.37)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.01±0.01),差异有统计学意义(P0.05)。HGC-27细胞培养上清exosome中DANCR表达水平(3.06±0.14)明显高于GES-1细胞(1.01±0.20),差异有统计学意义(P0.05)。DANCR在胃癌患者血清exosome中的平均含量[5.060(1.380,22.785)]较胃良性疾病患者[0.535(0.340,1.380)]和体检健康者[1.200(0.605,1.655)]明显升高(Z分别为-3.409,-4.229,P均0.01),且与肿瘤大小、TNM分期以及淋巴结转移相关。胃良性疾病患者与体检健康者相比,血清exosome中DANCR含量差异无统计学意义(Z=-1.308,P0.05)。胃癌患者血清exosome中DANCR的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.777,95%可信区间(CI)为0.678~0.876,cut-off值2.50,敏感性为68.6%,特异性为84.4%。结论胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平升高,有望成为胃癌诊断的新指标。     

C-myc和LIN28B蛋白及其mRNA在胃癌组织和相应癌旁正常组织中的表达及其与胃癌发生发展的相关性

目的分析反式激活活性蛋白(C-myc)与LIN28B mRNA、蛋白在胃癌组织和相应癌旁正常组织中的表达及其与胃癌发生发展的相关性。方法通过Western blot法对60例胃癌组织和相应癌旁正常组织中C-myc、LIN28B蛋白表达水平进行检测,实时荧光定量PCR法测定C-myc、LIN28B mRNA表达水平,统计分析C-myc、LIN28B蛋白表达与胃癌临床病理参数的关系。结果 C-myc、LIN28B蛋白在胃癌组织中的表达水平较癌旁正常组织均明显升高(P0. 01); C-myc、LIN28B mRNA在胃癌组织中的表达水平较癌旁正常组织均明显升高(P 0. 01)。C-myc蛋白表达与胃癌TNM分期、浸润深度及淋巴结转移均密切相关(P 0. 05); LIN28B蛋白表达与胃癌TNM分期、分化程度、浸润深度及淋巴结转移均密切相关(P 0. 05)。结论 C-myc、LIN28B蛋白及其mRNA均高表达于胃癌组织,二者与胃癌TNM分期、浸润深度及淋巴结转移均密切相关,可能共同参与胃癌的病理过程。     

胃癌患者血清和癌组织中LDH的表达与其预后的相关性分析

目的探讨乳酸脱氢酶(LDH)在胃癌患者血清、癌组织中的表达及与患者预后的相关性。方法选取2012年1月至2013年1月该院收治的80例术中经病理确诊为胃癌的患者,另选取同期来该院进行体检的健康人80例作为对照组,采用全自动生化分析仪检测两组患者血清中LDH水平。术中取癌旁组织、胃癌组织及癌旁淋巴结组织,采用免疫组织化学法对3处组织中的LDH表达情况进行分析。采用Spearman秩相关分析LDH在胃癌患者血清及癌组织中的表达情况与临床病理特征及预后的相关性。结果胃癌患者血清LDH水平为(349.41±97.23)IU/mL,明显高于健康人的(185.40±52.24)IU/mL(P0.05);胃癌组织中LDH表达最高,明显高于癌旁组织和淋巴组织中;胃癌患者血清中LDH水平与淋巴结转移、TNM分期、侵袭情况和分化程度等因素相关(P0.05),癌组织中LDH表达与年龄、淋巴结转移、侵袭情况和分化程度等密切相关(P0.05)。结论胃癌患者血清及癌组织中LDH表达明显上调,且与胃癌患者病情进展有关,是评估其预后的一项有效指标。     

Anxa2基因在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨Anxa2基因表达在胃癌发生、发展中的作用及其与临床病理特征的相关性。方法应用实时荧光定量PCR方法检测50例胃癌及癌旁组织中Anxa2基因mRNA的表达水平;用Western blot方法检测20例胃癌及癌旁组织中Anxa2蛋白的表达水平;制作组织芯片,通过免疫组化染色分析139例胃癌Anxa2蛋白表达与临床病理特征的关系。结果 Anxa2 mRNA在胃癌和癌旁组织中的表达水平分别为2.072±1.477和1.271±0.907,两组差异显著(P0.01);胃癌组织中Anxa2蛋白的表达量(2.144±1.226)高于癌旁组织(1.269±0.736),差异显著(P0.001)。免疫组化显示Anxa2定位于肿瘤细胞膜,在胃癌组织中的阳性率为49.6%(69/139),高于癌旁组织18.7%(26/139),两者差异显著(P0.001),且Anxa2过表达与胃癌组织分化、淋巴结转移和临床分期密切相关(P0.05)。结论 Anxa2过表达与胃癌的发生、发展密切相关,可能是新的治疗靶点或预后评估指标。     

miR-345在胃癌中的表达特点及其临床意义

目的探讨miR-345在胃癌中的表达特点及其临床意义。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应检测人胃黏膜上皮细胞GES-1、3株胃癌细胞系(SGC7901、MGC803、MKN45)及48例配对的胃癌与癌旁组织中miR-345的表达水平,并对miR-345表达水平与患者临床病理特征、生存预后的关系进行相关性分析,最后通过PicTar和TargetScan软件预测miR-345潜在的重要靶基因。结果与正常组织比较,胃癌细胞系及胃癌组织中miR-345表达明显升高(P<0.05);miR-345的表达与胃癌的分化程度(P=0.005),TNM分期(P=0.003),原发肿瘤的浸润深度(P<0.001)和淋巴结转移(P<0.001)密切相关;过度表达的miR-345预示胃癌患者的术后生存期更短;miR-345潜在的重要靶基因为CDKN1A、BBC3和RUNX3。结论 miR-345与胃癌的发生、发展密切相关,可能成为胃癌诊治和评估预后的潜在生物学指标。     

CD44在胃癌患者及胃癌细胞系中的表达及意义

目的探讨CD44在胃癌患者组织及其胃癌细胞系中的表达水平,并分析其与临床病理参数的关系。方法收集60例胃癌患者手术切除的癌组织及癌旁组织,常规培养胃癌细胞系BGC-823和SGC-7901,用免疫组织化学染色及免疫荧光染色检测其CD44的表达水平,并分析其与临床病理参数的关系,体外划痕实验检测不同CD44表达水平的胃癌细胞系的迁移能力。结果 60例胃癌患者癌组织中CD44阳性表达率为81.6%(49/60),与癌旁组织26.7%(16/60)比较,差异有统计学意义(χ2=36.55,P0.05),且CD44表达水平与患者的临床分期、肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关(P均0.05);荧光免疫染色结果表明,CD44蛋白在BGC-823细胞中的荧光强度高于SGC-7901细胞;体外划痕实验结果证实,CD44表达水平较高的BGC-823细胞的迁移能力明显高于SGC-7901细胞。结论 CD44在胃癌患者癌组织及胃癌细胞系中的表达水平较高,可作为胃癌迁移能力判断及临床预后分析指标。     

胃癌中细胞间黏附分子1的表达及其临床意义

目的：研究细胞间黏附分子1(ICAM-1)在胃癌组织、癌旁胃组织及胃癌细胞系中的表达及对临床实践的价值。方法从90例胃癌组织、40例癌旁胃组织及2种胃癌细胞系(MKN45、SGC-7901)中提取蛋白质,以蛋白质印迹法检测 ICAM-1的表达水平;对90例胃癌组织以 ICAM-1为一抗进行免疫组织化学(IHC)检测,并根据 IHC 结果把患者分为 ICAM-1阳性组(68例)和 ICAM-1阴性组(22例)。结果胃癌组织及胃癌细胞系中 ICAM-1的表达水平(4.5±0.3)、(5.6±0.2)高于癌旁胃组织(1.0±0.1),差异具有统计学意义(P <0.01)。胃癌组织及癌旁胃组织中 ICAM-1阳性率分别为75.6%(68/90)、32.5%(13/40),差异具有统计学意义(P <0.01);与 ICAM-1阴性组比较, ICAM-1阳性组肿瘤大小、肿瘤浸润深度、神经周围浸润率均增高,差异均具有统计学意义(P <0.01);ICAM-1阳性组复发率高于 ICAM 阴性组(67.6% vs 22.7%),5年存活率则低于 ICAM-1阴性组(61.1% vs 80.0%),差异均具有统计学意义(P <0.05)。结论 ICAM-1在胃癌中的过表达提示癌肿侵袭性增强,预后差。     

RhoC基因在胃癌中的表达及其意义

目的 研究胃癌与癌旁胃黏膜中RhoC mRNA的表达情况及其与胃癌主要临床病理特征的关系. 方法 采用半定量RT-PCR方法检测23例新鲜胃癌组织和相应的癌旁胃黏膜组织中RhoC mRNA的表达. 结果 胃癌组织中RhoC mRNA的表达水平高于相应的癌旁组织,其吸光度比值分别为1.40±0.23和0.36±0.15(P<0.01);同时RhoC mRNA在胃癌组织中的表达水平与胃癌浸润深度、TNM分期和有无淋巴结转移有相关性(均P<0.01). 结论 RhoC mRNA在胃癌组织中过表达可能与胃癌的发生发展密切相关,有望成为胃癌的早期诊断指标.     

miR-195启动子甲基化对膀胱癌细胞功能的影响

目的分析miR-195在膀胱癌组织和细胞系中的表达情况及其对细胞增殖及凋亡的影响,探讨miR-195启动子甲基化与膀胱癌细胞功能的关系。方法实时荧光定量PCR检测miR-195在膀胱癌及癌旁组织、膀胱癌细胞系T24中的表达水平;用寡核苷酸片段NC-mimics和miR-195-mimics转染膀胱癌T24细胞系,噻唑蓝(MTT)法、克隆形成实验、细胞凋亡试验检测转染后对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响;用DAC(甲基化酶抑制剂)处理T24细胞后,实时荧光定量PCR检测miR-195表达水平。结果膀胱癌组织中miR-195的表达水平[-10.35,(-27.58,-4.38)]较癌旁组织[1.01,(1.00,1.02)]明显降低(Z=-7.75,P0.01),T24细胞中miR-195的表达水平是SV-HUC-1细胞中的[3.81×10~(-5)(3.05×10~(-6),7.63×10~(-6))]倍(Z=-2.09,P0.01)。与阴性对照组(转染NC-mimics)和空白对照组(只加转染试剂)比较,T24细胞转染miR-195 mimics后第1天(F=15.8,P0.01)、第2天(F=220.43,P0.01)和第3天(F=2 779.00,P0.01)时细胞增殖能力受到明显的抑制,并且细胞出现凋亡。空白对照组、阴性对照组和实验组的细胞克隆形成数分别为(895±5)个、(790±5)个、(390±10)个,差异有统计学意义(F=1 710.27,P0.01)。与空白对照组比较,1μmol/L DAC处理组及3μmol/L DAC处理组中T24细胞在24 h(F=186.5,P0.01),48 h(F=120.88,P0.01),72 h(F=16 275.00,P0.01)时的miR-195表达水平均明显上调。26例癌组织中miR-195启动子区的甲基化水平较癌旁组织升高(χ2=25.28,P0.01)。结论膀胱癌组织中miR-195低表达,miR-195可能参与调控食管癌T24细胞的增殖和凋亡,miR-195启动子甲基化与膀胱癌细胞的功能密切相关。     

AKIP1在胃癌中的临床意义及生物学功能

目的:研究A激酶相互作用蛋白1(A kinase-interacting protein 1,AKIP1)在胃癌组织中的表达水平及临床意义,并探讨AKIP1在胃癌中的生物学功能。方法:采用qRT-PCR检测AKIP1 mRNA在50例胃癌组织和其配对的癌旁组织中的表达水平,分析AKIP1 mRNA在胃癌组织中的表达水平与患者临床病理参数的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析AKIP1 mRNA表达对患者预后的影响。采用蛋白质印迹法检测4对新鲜胃癌组织和癌旁组织中AKIP1蛋白的表达。采用qRT-PCR和蛋白质印迹法检测AKIP1 mRNA、蛋白质在胃癌细胞系SGC-7901,MKN-45,MGC-803和人正常胃黏膜上皮细胞RGM-1中的表达;MGC-803经脂质体分别转染AKIP1 siRNA(si-AKIP1)和对照(si-NC)48 h后,采用MTS实验检测各组细胞增殖能力,采用Boyden实验检测各组细胞侵袭能力,采用Transwell实验检测各组细胞转移能力。结果:qRT-PCR结果显示AKIP1 mRNA在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织,其高表达与TNM分期和淋巴结转移有关(P0.05),胃癌组织中AKIP1 mRNA表达高水平的患者生存期较短。蛋白质印迹法结果显示AKIP1蛋白在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织。AKIP1mRNA和蛋白在胃癌细胞系SGC-7901,MKN-45,MGC-803中的表达均显著高于人正常胃黏膜上皮细胞RGM-1,且在MGC-803细胞中的表达最高(P0.05);转染AKIP1 siRNA后,MGC-803细胞增殖、侵袭和转移能力均下降(P0.05)。结论:AKIP1在胃癌组织和细胞系中均高表达,且高表达与TNM分期、淋巴结转移及不良预后相关,同时干扰AKIP1的表达抑制胃癌细胞增殖、侵袭和转移。AKIP1可以作为胃癌患者预后分子标志物及潜在治疗靶点。     

原发性肝癌组织中LASP-1 mRNA和HPA-1 mRNA表达水平及其临床意义

目的定量检测LIM和SH3蛋白1(LASP-1)mRNA和乙酰肝素酶-1(HPA-1)mRNA在原发性肝癌组织中的表达水平,探讨二者与肝癌发生、侵袭和转移的关系。方法利用实时荧光定量PCR检测法分别检测62例原发性肝癌癌组织、配对癌旁组织(距癌2 cm)和正常肝脏组织(距癌大于5 cm)中LASP-1mRNA和HPA-1 mRNA的表达水平,并分析二者与肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织、癌旁组织、正常肝组织中HPA-1 mRNA表达水平分别为47.25±16.65、23.15±14.89、7.56±5.15,LASP-1 mRNA的表达水平分别为51.66±20.12、35.73±15.07、10.17±8.29。HPA-1 mRNA及LASP-1 mRNA在癌组织中的表达高于癌旁组织和正常组织(P均<0.05)。HPA-1及LASP-1的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05,P<0.01),与患者年龄、性别及肿瘤大小无关(P均>0.05)。Spearman等级相关分析显示LASP-1 mRNA和HPA-1 mRNA的表达呈正相关(OR=0.421,P<0.05)。结论肝癌组织中LASP-1 mRNA与HPA-1 mRNA的表达与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移及TNM分期等密切相关。二者联合表达水平的增加可能促进肝癌的侵袭转移。     

PLK1基因及β-catenin-STAT3通路在胃癌患者中的表达及意义

目的检测PLK1基因及β-catenin-STAT3通路在胃癌患者中的表达水平,探讨其与胃癌临床参数的关系。方法用实时荧光定量PCR检测胃癌患者PLK1基因表达水平,免疫组化染色法检测β-catenin-STAT3蛋白的表达水平,对PLK1与β-Catenin及STAT3蛋白进行相关性分析,用Kaplan-Meier曲线分析PLK1的表达量与患者术后生存率的关系,探讨胃癌患者的临床参数与PLK1表达水平的关系。结果实时荧光定量PCR结果表明,与癌旁组织的0.053±0.031比较,PLK1基因在胃癌组织中的表达量为0.380±0.071,差异有统计学意义(t=19.08,P0.01);免疫组化染色结果表明,PLK1、p-STAT3(Y705)、β-catenin蛋白在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(3 041±1 077 vs 1 431±763,1 852±492 vs 582±163,1 743±562 vs 1 093±224),差异均有统计学意义(t分别为3.57,4.37,3.09,P均0.01)。PLK1的表达水平与肿瘤的大小及浸润深度有关(P均0.01),且PLK1蛋白与p-STAT3及β-catenin蛋白呈正相关(r分别为0.782,0.812,P均0.01),而p-STAT3与β-catenin蛋白间也呈正相关(r=0.821,P0.01)。Kaplan-Meier曲线分析结果表明,PLK1的表达量与胃癌患者术后的生存率呈反比[风险比(HR)=2.246,χ2=27.51,P0.01]。结论 PLK1在胃癌组织中过量表达,且与β-cateninSTAT3通路共同参与了胃癌的进展。     

miR-1在淮安地区食管癌患者癌组织中的表达特征及其临床意义

目的探讨miR-1在淮安地区食管癌中的表达特征及其临床意义。方法采用荧光定量PCR技术检测34例食管癌患者癌组织和癌旁组织中miR-1相对表达水平,并分析其与肿瘤发生部位、肿瘤分期的关系。结果 (1)淮安地区食管癌患者癌组织及癌旁组织中的miR-1相对表达量分别为(0.048 4±0.013 1)、(0.136 9±0.025 7),癌组织明显低于癌旁组织(t=3.065,P0.01);(2)食管鳞状细胞癌中miR-1表达水平与TNM分期有关,随Ⅰ、Ⅱ期呈逐渐下降的趋势,Ⅱ期患者癌旁组织中miR-1水平显著低于Ⅰ期患者(t=2.422,P0.05);(3)食管癌miR-1表达水平与发生部位有关,食管上段及中段癌组织miR-1表达水平均显著低于癌旁组织(t=-2.522,P0.05;t=-2.931,P0.01),而食管下段癌组织与癌旁组织中miR-1表达水平差异无统计学意义(t=2.251,P0.05)。结论 miR-1参与淮安地区食管患者食管癌的发生机制。     

Nodal在喉癌组织中表达及临床意义

目的探讨胚胎成形素Nodal在喉癌组织中的表达情况及临床意义。方法 63例喉癌患者,取其喉癌组织(喉癌组)和癌旁正常组织(对照组),采用反转录-PCR检测Nodal mRNA表达水平,采用免疫组织化学检测Nodal蛋白表达情况和微血管密度,采用Western blot法检测Nodal蛋白表达水平,并分析Nodal表达水平与喉癌临床特征及微血管密度的关系。结果喉癌组Nodal mRNA(63.5±12.6)和蛋白(58.0±11.8)表达水平明显高于对照组(7.4±1.8、16.5±4.6)(P0.01);喉癌患者Nodal mRNA和蛋白表达水平在TNM分期上差异有统计学意义(P0.05),在性别、年龄上差异无统计学意义(P0.05);随TNM分期增高,Nodal蛋白表达水平和微血管密度逐渐增强,Ⅳ期患者最高;不同临床分期喉癌组织中Nodal蛋白表达与相应微血管密度变化趋势呈正相关(r=0.485,P=0.035)。结论喉癌组织中Nodal mRNA和蛋白呈高表达,Nodal可能促进新生肿瘤血管形成而促进肿瘤发展。     

miR-145在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨miR-145在胃癌中的表达及其临床意义。方法选取2011年2月至2012年6月江苏省中医院就诊的67例胃癌患者,采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)技术检测胃癌患者miR-145的表达情况,取肿瘤边缘外5cm处的非癌胃黏膜作为对照,比较miR-145在正常组织及胃癌组织中的表达差异及与胃癌临床病理参数的相关性。结果 54例(80.60%)胃癌患者胃癌组织miR-145表达明显低于正常组织,miR-145的表达在不同性别、年龄及TNM分期患者间的差异无统计学意义(P>0.05),但在不同组织学分级及淋巴结转移情况患者间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-145在胃癌中呈低表达,可能与胃癌的发生、发展密切相关,可成为胃癌诊断及预后判断的指标。     

胃癌CD4+CD25highFoxp3+调节性T淋巴细胞数量和分布及Foxp3基因表达与肿瘤分期的相关性

目的 研究胃癌患者CD4+CD25highFoxp3+调节性T淋巴细胞(Treg)的存在数量、分布情况,及其功能基因Foxp3的表达变化与胃癌临床国际肿瘤淋巴转移分类(TNM)分期的关系.方法 用四色流式细胞术以Foxp3-FITC/CD25-PE/CD4-PerCP/CD3-PC7抗体组合分析20名健康对照者及47例胃癌患者(临床TNM分期Ⅰ期11例、Ⅱ期18例、Ⅲ期10例、Ⅳ期8例)外周血、腹腔积液、肿瘤组织浸润淋巴细胞(TIL)及癌旁淋巴结中CD4+CD25highFoxp3+Treg的数量及分布情况.实时荧光定量PCR技术检测Treg Foxp3 mRNA表达水平.结果 胃癌患者外周血CD4+CD25highFoxp3+Treg占CD4+T淋巴细胞的百分比为(8.03±3.47)%,高于正常健康对照组(5.83±2.93)%,差异具有统计学意义(P＜0.05).胃癌患者腹腔积液、肿瘤浸润淋巴细胞、癌旁淋巴结中Treg占CD4+T淋巴细胞比例均高于外周血,差异有统计学意义(分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01).胃癌组织局部TIL和癌旁淋巴结中Treg的Foxp3平均荧光强度显著高于外周血和腹腔积液(P＜0.05).Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期胃癌患者Treg比例分别为(5.72±1.95)%、(6.45±2.23)%、(9.58±3.13)%、(11.70±2.30)%,这提示Treg与肿瘤TNM分期显著相关(r=0.784,P＜0.01).胃癌患者外周血单个核细胞Foxp3基因mRNA表达水平明显高于健康对照组(P＜0.01).Foxp3基因表达水平与胃癌TNM各分期呈显著相关性(r=0.623,P＜0.05).结论 胃癌患者CD4+CD25highFoxp3+Treg的比例升高,其增高程度与肿瘤临床分期呈显著正相关.胃癌患者外周血和癌组织局部Treg的数量、分布情况及特异性转录因子Foxp3的表达强度均有所不同,提示肿瘤局部免疫抑制功能增强,这可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制,CD4+CD25highFoxp3+Treg将来可作为胃癌患者病情进展的重要判断指标之一.     

人胃癌组织FAF1 mRNA和蛋白表达研究

目的:探讨FAF1表达在人胃癌发生发展中的作用。方法:应用实时荧光定量PCR(FQ-RT-PCR)和免疫组化方法,对40例胃癌患者癌组织、癌旁组织及相对正常组织中FAF1mRNA和蛋白的表达进行分析。结果:FAF1mRNA在胃癌组织中的表达水平(0.27±0.12),明显低于在癌旁组织(0.40±0.06)及正常组织(0.48±0.08)中的表达水平(P<0.01),而在癌旁组织中的表达水平明显低于正常组织中的表达水平(P<0.01)。胃癌组织的FAF1蛋白的阳性表达率(37.50%)明显低于癌旁组织(62.50%,P<0.05)和正常组织(72.50%,P<0.01)。结论:FAF1表达的减少在胃癌的发生发展过程中起着重要作用。     

microRNA-152在胃癌中表达及与临床病理间关系研究

目的探讨microRNA152（miR152）在胃癌中的表达及其与临床病理特衙间关系。方法采用实时荧光定量PCR法检测70例胃癌组织及其相应癌旁正常组织中miR152表达水平,分析其与患者临床病理指标间关系。结果58例（82．9％）胃癌组织中miR-152表达下调;胃癌组织miR-152表达水平（△CT=5．30±1．47）低于癌旁正常组织（△CT=3．87±1．79）（P〈0．01）;胃癌组织中miR152低表达在肿瘤浸润深度、有无淋巴转移及TNM分期上差异有统计学意义（P〈0．05）。结论miRNA152在胃癌组织中表达明显下调,可促进胃癌发生、发展,可能成为胃癌诊断与治疗的重要生物学标志物。