外泌体lncRNA在肝细胞癌中的作用

<正>肝细胞癌(HCC)是最常见的原发性肝癌,在中国,HCC发病率、病死率分别位于恶性肿瘤的第6位和第3位^[1]。HCC发生的具体病因尚未明确,其主要危险因素包括乙型/丙型肝炎病毒感染、酗酒、非酒精性脂肪性肝炎等^[2]。恶性肿瘤严重影响人类的健康,由于恶性肿瘤的发病机制复杂、进展迅速且不易早期诊断,因此,当前恶性肿瘤的早期诊断、精准诊疗成为研究热点。肿瘤的发生、发展依赖于肿瘤细胞和肿瘤微环境之间的相互作用,     

血浆外泌体A1BG-AS1对原发性肝癌诊断及预后评估价值

目的 探讨原发性肝癌(PHC)患者血浆外泌体A1BG反义RNA 1(A1BG-AS1)表达情况及其对PHC的诊断及预后评估价值。方法 选取2016年12月至2018年6月在该院治疗的75例PHC患者作为PHC组,26例单纯肝硬化患者作为肝硬化组,另选取同期50例体检健康者作为对照组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测血浆外泌体A1BG-AS1表达水平,分析A1BG-AS1表达水平与临床病理特征关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆外泌体A1BG-AS1对PHC的诊断价值,Kaplan-Meier法分析PHC患者生存曲线,Cox回归模型分析影响PHC患者预后的危险因素。结果 对照组、肝硬化组、PHC组血浆外泌体A1BG-AS1表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.01),其中肝硬化组、PHC组血浆外泌体A1BG-AS1表达水平明显低于对照组(P<0.01);PHC组血浆外泌体A1BG-AS1表达水平明显低于肝硬化组(P<0.01)。A1BG-AS1、AFP联合检测诊断PHC的曲线下面积(AUC)为0.898(95%CI:0.839～0.941),约登...     

胃癌患者血清外泌体中DANCR表达及其临床意义

目的检测胃癌患者血清外泌体(exosome)中抗分化非编码RNA(DANCR)的表达水平并分析其临床应用价值。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞培养上清和胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,绘制ROC曲线评价其诊断效能。结果 DANCR在人胃癌细胞系HGC-27中表达水平(4.43±0.37)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.01±0.01),差异有统计学意义(P0.05)。HGC-27细胞培养上清exosome中DANCR表达水平(3.06±0.14)明显高于GES-1细胞(1.01±0.20),差异有统计学意义(P0.05)。DANCR在胃癌患者血清exosome中的平均含量[5.060(1.380,22.785)]较胃良性疾病患者[0.535(0.340,1.380)]和体检健康者[1.200(0.605,1.655)]明显升高(Z分别为-3.409,-4.229,P均0.01),且与肿瘤大小、TNM分期以及淋巴结转移相关。胃良性疾病患者与体检健康者相比,血清exosome中DANCR含量差异无统计学意义(Z=-1.308,P0.05)。胃癌患者血清exosome中DANCR的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.777,95%可信区间(CI)为0.678~0.876,cut-off值2.50,敏感性为68.6%,特异性为84.4%。结论胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平升高,有望成为胃癌诊断的新指标。     

血清外泌体源性长链非编码RNA RP N2-4在胃癌中的表达及其筛查价值

目的探讨外泌体源性长链非编码RNA RPN2-4(lncRPN2-4)在胃癌患者血清中的表达及其筛查胃癌的价值。方法收集47例胃癌患者与32例行胃镜检查者血清标本;用试剂盒法分离外泌体,并提取RNA;粒径分析和透射电镜法鉴定外泌体;qRT-PCR法检测外泌体lncRPN2-4的表达水平;电化学发光法检测血清CEA、CA19-9与CA72-4的表达水平;利用ROC曲线评价其筛查胃癌的效能。结果与胃部良性疾病组[0.91(-2.98,6.92)]相比,胃癌组血清外泌体中lncRPN2-4的表达水平[3.78(-0.06,9.12)]明显降低(U=343,P0.01);LncRPN2-4的相对表达量与肿瘤分化程度(P=0.005)和淋巴结转移(P=0.033)有关; lncRPN2-4筛查胃癌时的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.772(95%CI:0.662～0.882,P0.01),当cut-off值为1.31时,其敏感性为87.2%,特异性为59.4%。结论血清外泌体来源的lncRPN2-4在胃癌患者中低表达,可能作为胃癌筛查的肿瘤标志物。     

脓毒症患儿循环外泌体中长链非编码RNA HOXA11-AS的表达及临床价值

摘要：目的?探讨脓毒症患儿循环外泌体中长链非编码RNA HOXA11-AS(LncRNA HOXA11-AS)的表达水平及对脓毒症的筛查效能。方法?选取2018年10月至2019年10月就诊的脓毒症患儿80例作为脓毒症组，另选取同期性别和年龄相匹配的体检健康儿童60例作为对照组。采集2组外周静脉血标本并提取外泌体。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测2组外泌体中LncRNA HOXA11-AS的表达水平。ROC曲线分析LncRNA HOXA11-AS对脓毒症患儿的筛查效能。结果?脓毒症患儿外周循环外泌体中LncRNA HOXA11-AS的表达水平明显高于对照组(1.54±0.89 vs 0.53±0.17,?t=15.23,?P<0.001)。LncRNA HOXA11-AS的表达与SOFA评分呈正相关(r=0.589，P<0.001)。脓毒症患儿C反应蛋白(CRP)浓度与SOFA评分呈正相关(r=0.432，P<0.01)。LncRNA HOXA11-AS的表达与WBC及CRP浓度呈正相关(r分别为0.561、0.614，P均<0.001)。外周循环外泌体中LncRNA HOXA11-AS筛查脓毒症的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.947，当cut-off值为1.23时，敏感性为90.9%，特异性为93.9%。结论?外周循环外泌体中LncRNA HOXA11-AS对儿童脓毒症的诊断具有较高的筛查价值。     

LncRNA FTH1P3通过调控PI3K/AKT信号通路促进胃癌细胞增殖和迁移能力

目的 研究长链非编码RNA铁蛋白重链1伪基因3(LncRNA FTH1P3)在胃癌组织中的表达及临床意义,并探讨LncRNA FTH1P3通过调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路促进胃癌细胞增殖和迁移的作用机制。方法 收集胃癌和癌旁组织标本,采用qRT-PCR检测LncRNA FTH1P3在胃癌组织中的表达,分析LncRNA FTH1P3的表达与胃癌患者病理参数和预后的关系。常规培养胃癌细胞,分为si-NC组和si-LncRNA FTH1P3-1组、si-LncRNA FTH1P3-2组,采用LncRNA FTH1P3 siRNA转染胃癌细胞,qRT-PCR检测各组细胞中LncRNA FTH1P3的表达;CCK8实验检测各组细胞增殖能力;Transwell实验检测各组细胞迁移能力;体内成瘤实验检测各组细胞体内成瘤能力;Western blot检测各组细胞PI3K/AKT信号通路相关蛋白PI3K、AKT、磷酸化PI3K(pPI3K)、磷酸化AKT(pAKT)的表达。结果 LncRNA FTH1P3在胃癌组织中表达上调(P<0.05)。LncRNA F...     

血浆外泌体hsa_circ_0064910在胃癌诊断中的临床应用价值

目的:评估血浆外泌体源环状RNA（circRNA）hsa_circ_0064910在胃癌中的诊断效能,分析其与胃癌患者临床病理特征的相关性。方法:回顾性研究,纳入2019年10月至2020年12月在河南大学第一附属医院入院治疗的60例胃癌患者,30例慢性胃炎患者（疾病对照组）以及同期健康体检的30名健康者（健康对照组）...     

血浆外泌体非编码RNA H19在乳腺癌中的诊断价值

目的探讨血浆外泌体长链非编码RNA(lncRNA)H19在乳腺癌患者的诊断价值。方法用RT-PCR分别检测50例乳腺癌患者、25例乳腺良性病变者及25例体检健康者血浆外泌体及全血浆H19的表达水平,分析血浆外泌体H19表达水平与乳腺癌患者临床病理参数的相关性,绘制ROC曲线分析血浆外泌体与全血浆中H19对乳腺癌的诊断价值。结果 H19在乳腺癌患者血浆外泌体中的表达水平高于乳腺癌、乳腺良性病变者及体检健康者全血浆(P均<0.01);相关性分析结果显示,H19与雌激素受体、孕激素受体、c-erbB-2、Ki-67、P120(膜)及淋巴结转移相关(P均<0.05);血浆外泌体H19单独诊断乳腺癌的曲线下面积(AUCROC)为0.779,敏感性和特异性均为70%,均明显高于全血浆组。结论血浆外泌体高表达的H19可能成为乳腺癌诊断的一个潜在的生物学标志物。     

血清外泌体源性长链非编码RNA H19在骨肉瘤中的表达及其临床意义

摘要:目的?检测骨肉瘤患者血清外泌体长链非编码RNA(LncRNA) H19的表达水平，分析其与患者临床病理参数的关系，探讨其在骨肉瘤诊断中的价值。方法?采用实时荧光定量RT-PCR分别检测46例骨肉瘤患者及50例体检健康者血清外泌体LncRNA H19的表达水平；采用ELISA法检测各组血清中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子2(IGF-2)的表达水平；分析血清外泌体LncRNA H19表达水平与骨肉瘤患者临床病理参数的相关性；绘制ROC曲线，并分析血清外泌体LncRNA H19对骨肉瘤的诊断价值。结果?血清外泌体LncRNA H19的表达水平与骨肉瘤患者的病程及是否发生远处转移相关，差异有统计学意义(P均<0.01)，而与患者的性别、年龄、居住地及发病部位均无显著相关性(P均>0.05)；骨肉瘤患者血清外泌体中LncRNA H19的表达水平显著高于健康人对照组(P<0.01)；血清外泌体LncRNA H19诊断骨肉瘤的ROC曲线下面积(AUCROC) 为 0.881，敏感性为87.2%，特异性为75.6%，均高于其余各单项指标组。结论?外泌体高表达的LncRNA H19可能成为骨肉瘤诊断、靶点的个体化治疗及疗效监测的生物学标志物。     

工程化外泌体靶向治疗急性心肌梗死研究进展

急性心肌梗死是临床常见心血管疾病,目前经皮冠状动脉介入、溶栓等治疗方法有一定疗效,但存在心肌缺血再灌注损伤、出血等风险。外泌体作为细胞间通讯和非编码RNA、蛋白质和脂质的载体,具有受损心肌修复作用,是心肌梗死的潜在治疗途径。但天然外泌体存在稳定性较差、组织靶向性不足等缺点,使其临床转化应用受限。近年采用生物工程技术对外泌体进行修饰,获得有特定功能的工程化外泌体,有望在急性心肌梗死治疗中发挥重要作用。本文就工程化外泌体靶向治疗急性心肌梗死的研究进展作一综述。     

长链非编码RNA LINC00473对人胃癌细胞增殖和迁移能力的影响

目的探讨LINC00473在人胃癌细胞系中的表达水平及其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测胃癌细胞中LINC00473的表达水平;转染靶向LINC00473的siRNA片段或LINC00473过表达载体以构建敲减或过表达的胃癌细胞系;通过CCK-8细胞增殖实验、平板克隆形成实验、Transwell迁移实验、western blot实验检测细胞的增殖和迁移能力以及EMT相关蛋白标志物表达水平的变化。结果与GES-1细胞相比,LINC00473在胃癌细胞中的表达水平明显降低(P0.05)。与siNC转染对照组相比,敲减LINC00473表达后,靶细胞的增殖能力(F=163.10,P0.01)、克隆形成(t=3.29,P0.05)和迁移能力(t=4.68,P0.05)明显增加;E-cadherin表达减弱(t=4.08,P0.05),N-cadherin(t=5.06,P0.01)、Snail(t=7.69,P0.01)和Vimentin(t=3.82,P0.05)蛋白的表达水平升高。与Vector转染对照组相比,上调LINC00473表达后靶细胞的增殖能力(F=186.00,P0.01)、克隆形成(t=3.22,P0.05)和迁移能力(t=5.52,P0.01)明显下降;E-cadherin表达升高(t=2.90,P0.05),N-cadherin(t=7.44,P0.01)、Snail(t=2.78,P0.05)和Vimentin(t=4.64,P0.01)蛋白的表达水平降低。结论敲减LINC00473的表达可促进胃癌细胞的增殖、迁移的能力,可能通过调控EMT参与胃癌细胞的迁移。     

MALAT1参与胃癌发生发展机制的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一种长度>200 nt、不能编码蛋白质,但在细胞生理活动中具有重要调控功能的RNA.研究发现,lncRNA涉及许多病理生理过程,与肿瘤的发生发展密切相关.肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)是lncRNA家族中的重要成员,在胃癌组织及细胞中高表达,且在胃癌的发生发展中发挥重要而复杂的...     

胃癌相关长链非编码RNA的作用及其意义

近年来,研究显示长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)与包括胃癌在内的多种人类肿瘤的发生发展有关。一些lncRNA可能作为胃癌诊断的生物标志物或治疗靶点。因此,探索lncRNA的具体功能,不仅有助于更好地了解胃癌的发病机制,而且对胃癌患者的个体化治疗极其重要。现结合国内外相关研究报道,对近年来发现的一些与胃癌相关的lncRNA作简单综述。     

LncRNA HOTAIR与BRCA-1在胃癌组织中的表达水平与顺铂化疗抵抗的影响

目的:研究lncRNA HOTAIR与BRCA-1在胃癌组织中的表达水平与顺铂化学药物治疗(以下简称化疗)抵抗的相关性。方法:选择2014年2月至2016年5月滨海县人民医院收治的胃癌根治术后并接受顺铂进行化疗的120例患者。采用实时定量PCR法检测所有患者胃癌组织、配对正常组织中lncRNA HOTAIR和BRCA-1的表达水平。比较患者胃癌组织与正常组织中lncRNA HOTAIR,BRCA-1表达水平,分析lncRNA HOTAIR与BRCA-1的表达与顺铂化疗效果的相关性。结果:在lncRNA组患者胃癌组织中lncRNA HOTAIR表达阳性者73例(60.8%),相对表达水平为7.63±0.14;在正常组织中lncRNA HOTAIR表达阳性者26例(21.7%),相对表达水平为2.32±0.06;lncRNA HOTAIR表达阳性者使用顺铂化疗2年的无复发率为8.33%(10例),阴性患者2年的无复发率为16.67%(20例)。在BRCA-1组患者胃癌组织中BRCA-1表达阳性者70例(58.3%),相对表达水平为15.39±4.28;在正常组织中BRCA-1表达阳性者4例(3.3%),相对表达水平为5.71±2.13;BRCA-1表达阳性者使用顺铂化疗2年的无复发率为5.00%(6例),阴性患者2年的无复发率为14.17%(17例)。结论:LncRNA HOTAIR及BRCA-1在胃癌组织中的表达量显著高于正常组织,与顺铂化疗抵抗具有一定的关联性,这两种标志物可作为胃癌患者术后化疗药物选择及预后判断的参考依据。     

长链非编码RNA LINC00922促进胰腺导管腺癌的增殖、迁移和侵袭

目的 检测长链非编码RNA linc00922在胰腺癌组织及胰腺癌细胞系中表达,并探究linc00922对胰腺癌细胞系增殖、迁移和侵袭的影响。方法 利用illumina HiSeq X Ten高通量测序仪针对2015年-2016年间4对胰腺导管腺癌组织与癌旁组织进行高通量测序,建立lncRNA及mRNA表达谱,并挑选其中胰腺癌组织中显著高表达的lncRNA linc00922做为进一步研究对象。应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术验证linc00922在10例胰腺癌及癌旁组织中表达情况。通过CCK-8增殖实验,划痕实验及Transwell实验探究linc00922对胰腺癌细胞系BXPC-3增殖、迁移及侵袭的调控作用。采用配对样本t检验,或独立样本t检验进行统计学分析。结果 前期通过高通量测序分析,发现胰腺癌组织中470个差异表达lncRNA,4373个差异表达mRNA,其中linc00922在胰腺癌组织中显著高表达。在10例胰腺癌组织及癌旁组织样本中,利用RT-qPCR进一步验证了linc00922在胰腺癌组织中显著高表达(p<0.05)。CCK-8增殖实验提示敲低linc00922表达的BXPC-3胰腺癌细胞增殖活力显著低于阴性对照组(p<0.05)。划痕实验提示敲低linc00922表达的BXPC-3胰腺癌细胞的迁移能力显著低于较阴性对照组(p<0.05)。Transwell侵袭实验提示敲低linc00922表达的BXPC-3胰腺癌细胞的侵袭能力显著低于较阴性对照组(p<0.05)。结论 linc00922在胰腺癌中显著高表达,并具有促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的能力。     

探讨血清lncRNA联合检测CEA、CA724、CA199在胃癌诊断中的临床意义

目的 探讨血清长链非编码RNA(lncRNA)FOXD2-AS1、含铜胺氧化酶4的假基因(AOC4P)的相对表达水平,以及与肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA)199、CA724的联合检测在胃癌(GC)诊断中的临床应用价值。方法 收集该院80例GC患者和85例年龄相仿的体检健康者的血清以及16组GC组织与癌旁组织。利用TCGA数组库分析FOXD2-AS1在GC及癌旁组织中的表达;应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测组织AOC4P,以及血清FOXD2-AS1、AOC4P的相对表达量;化学发光法检测血清CEA、CA199、CA724的水平。应用受试者工作特征(ROC)曲线评价FOXD2-AS1、AOC4P单独诊断以及其与CEA、CA199、CA724联合检测对GC的诊断效能。结果 初诊GC患者血清FOXD2-AS1、AOC4P相对表达量升高,且显著高于健康对照者,差异有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,FOXD2-AS1、AOC4P、CEA、CA199和CA724的曲线下面积(AUC)分别为0.879、0.856、0.699、0.654和...