载BDNF脂质体纳米微粒脂膜微泡超声造影剂的制备与初步评价

目的 探索制备一种新型的耦连包载BDNF脂质体纳米颗粒的脂膜微泡超声造影剂(BDNF-UMCA)。方法 以冷冻干燥法在“脂氟显”制备的基础上加入一定比例的含生物素化棕榈酰磷脂酰甘油钠-聚乙二醇2000-生物素[DPPG-PEG(2000)-Biotin]制备含生物素的脂质超声微泡造影剂,通过链亲和素来耦连含生物素化PEG载BDNF脂质体纳米微粒制备BDNF-UMCA,检测其理化性质、载药量、包封率、稳定性和体内声学特性进行检测。结果 BDNF-UMCA平均粒径4.2±0.79 μm,浓度为1.02×10₉/ml;总药物含量为1.18±1.96 mg/mL,包封率为71.6±2.6%;BDNF-UMCA在4℃条件下,平均粒径和包封率均无明显的变化;在24℃条件下,载BDNF脂质体纳米微粒的平均粒径随时间逐渐增大,第1、3、5、7天的粒径与初始粒径比较具有明显的统计学差异(均P<0.05),包封率在24℃下各个时间点无明显的统计学差异(均P>0.05);BDNF-UMCA能显著增强实验动物肝脏显影,平均峰值强度为21.4±0.9 dB,平均达峰时间为4.7±0.4 s。结论 应用生物素-亲和素偶联可成功制备载BDNF脂质体纳米微粒的脂膜超声微泡造影剂,为靶向显影及药物通过血脑屏障释放提供工具。     

血栓靶向脂膜超声造影剂的制备与初步评价

目的制备血栓靶向脂膜超声造影剂,并对其配体结合率进行初步评价。方法通过生物素-抗生物素蛋白桥连法,制备携带血栓靶向配体的脂膜超声造影剂,非靶向脂膜微泡为对照;采用流式细胞仪初步评价靶向微泡配体结合率及其影响因素。结果靶向微泡荧光检测为阳性,对照组为阴性;流式细胞仪分析结果显示该血栓靶向微泡配体结合率达82.96%,对照组仅为0.92%、0.89%。结论采用生物素-抗生物素蛋白桥连接法,可以成功制备血栓靶向脂膜超声造影剂。微泡纯化过程中离心速度与离心时间对配体结合率的影响具有显著意义。     

阴离子脂膜超声微泡的制备及评价

目的探索制备适用于超声治疗的阴离子脂膜超声微泡,评价其理化性质。方法通过改变配方中脂质成分比例以及聚乙二醇(PEG)的用量,制备出三种配方的脂膜超声微泡,分别检测微泡大小形态、浓度、表面电位、PH值、粒径及分布。结果三种微泡的浓度约(1~2)×1010/ml;粒径均值分别为1 066.6 nm、1 552.5 nm1、605.4 nm;pH值分别为:蒸馏水中2.94,2.63,2.52,生理盐水中3.77,2.60,2.55;微泡表面电位均值分别为:蒸馏水中-33.8 mV、-57.6 mV-、66.7 mV;生理盐水中0.1 mV-、37.5 mV-、37.8 mV。结论通过增加脂质成分中负电荷磷脂的比例,可以制备出表面带有更多负电荷的阴离子超声微泡,为超声介入治疗提供重要的工作平台。     

含生物素化脂膜超声造影剂的制备与初步评价

目的 制备一种含生物素化脂膜的超声造影剂,并对其功能进行初步评价.方法 以冷冻干燥法在自制＂脂氟显＂（对照微泡）的基础上制备含生物素化脂膜超声造影剂微泡,检测其理化性质和造影功能,同时应用激光共聚焦显微镜和平行板流动腔法观察含生物素化脂膜微泡与链亲和素的黏附性.结果 ①含生物素化脂膜微泡造影剂在理化性质与小鼠肝脏造影显像方面能力与对照微泡比较差异无统计学意义（P〉0.05）;②与异硫氰酸荧光素（FITC）标记的链亲和素孵育后,含生物素化脂膜微泡荧光检测呈阳性,对照微泡为阴性;③含生物素化脂膜微泡可结合于链亲和素包被的培养皿上,且随着链亲和素包被浓度的增加其结合稳定性也相应提高.结论 应用冷冻干燥法在制备＂脂氟显＂微泡造影剂的基础上,可成功制备含生物素化脂膜超声微泡造影剂,为今后制备靶向显影及载药（基因）超声造影剂奠定了基础.     

低频超声联合微泡及脑源性神经营养因子预防治疗大鼠缺血性卒中

目的 探讨脑源性神经营养因子（BDNF）在超声联合微泡介导下对急性缺血性脑卒中大鼠模型的预防性治疗作用。方法 将27只健康SD大鼠随机分为假手术组、BDNF组和BDNF超声组,每组9只,建立大脑中动脉梗阻（MCAO）模型,评价术后24 h脑组织中BDNF含量,并于术后第1、3和7天进行MR检查以及行为学评价。结果 BDNF超声组脑组织中的BDNF含量明显高于BDNF组及假手术组（P均<0.05）。BDNF超声组脑梗死面积随时间延长而逐渐缩小,第7天时,梗死面积明显小于BDNF组。BDNF超声组和BDNF组术后第7天行为学评价差异有统计学意义（P<0.05）。结论 超声介导下BDNF可增强对急性缺血性脑卒中大鼠模型的预防性治疗作用,并可明显减小梗死灶,改善行为学表现。     

纳米级超声微泡造影剂的制备及其性状的初步研究

目的制备适用于超声诊断的纳米级超声微泡造影剂,并对其性状进行初步研究。方法通过低速离心分级分离法制备纳米级的脂膜超声微泡,检测微泡大小形态、表面电位、粒径、分布,测试其与抗体结合情况,体外初步测试其增强显像效果。结果微泡呈圆形,分布均匀,粒径均值为623.4nm;微泡表面电位均值1.3mV,与抗体结合情况良好,体外初步测试能明显增强显像效果。结论通过低速离心分级分离法可以制备纯度较高的纳米级超声微泡,为超声造影剂的小型化和靶向性发展提供重要的工作平台。     

脑源性神经营养因子研究进展

脑源性神经营养因子（BDNF）是继神经生长因子之后第二个被发现的神经营养因子,是一类分子量为12．3kD的碱性蛋白质,由119个氨基酸残基构成,并含有3对二硫键,在体内以二聚体的形式存在,主要分布在中枢神经系统,其中以海马及皮层组织中含量最高,另外在外周组织如心脏、肺、肌肉中也检测到BDNF的存在。BDNF不但对多种类型神经元的发育、分化以及神经的生长和再生起着维持和促进作用,     

聚糖纳米微泡超声造影剂的制备及其超声显影效果

目的 制备聚糖纳米微泡超声造影剂,观察其基本特征及动物超声显影效果.方法 高速剪切法制备纳米微泡超声造影剂,光学显微镜和透射电镜观察纳米微泡大小、形态,马尔文粒度分析仪测粒径分布,细胞计数板计数纳米微泡,Zeta电位仪测表面电位,对比超声观察大鼠肾、心脏超声显影效果并测量声强度.结果 纳米微泡呈空心球形结构,分散均匀,形态规则,平均粒径(617±12)nm,浓度(7.2±0.6)×109/ml,Zeta电位(52.9±1.3)mV.24 h、45 d和90d三个时间点浓度、平均粒径和表面电位无明显差异(P＞0.05).用其可使小鼠肾、心脏超声显影明显增强,最大视频强度分别达(15.6±1.1)GU、(27.3±2.5)GU,可视增强持续时间(10±2)min.结论 聚糖纳米微泡稳定性和显像效果良好,有可能成为可穿过血管内皮间隙的新一代超声造影剂.     

载长春新碱长循环聚合物超声微泡造影剂的制备及性能评价

目的 制备载硫酸长春新碱的聚乳酸-乙醇酸-聚乙二醇共聚物(PLGA-PEG)超声微泡造影剂,观察微泡的一般特性及体内、外显影效果.方法 采用W/O/W复乳-溶剂挥干法制备超声微泡造影剂,正交实验设计获得最佳制备工艺,采用紫外分光光度法测定微泡的包封率和载药量,光学显微镜观察微泡形态,以马尔文激光粒径测量仪测定微泡造影剂的粒径、Zeta电位,并观察微泡在兔心腔的显影效果.结果 获得的微泡造影剂为球形,平均粒径约为1.27 μm,包封率为(37.63±0.61)%,Zeta电位为-24.88 mV,静脉注射载药微泡后,能增强兔心腔超声显影效果.结论 采用复乳-溶剂挥干法成功制备超声微泡造影剂,能增强体内外超声显影效果.     

载多西紫杉醇脂质微泡超声造影剂的制备及其性质

目的 制备载多西紫杉醇脂质微泡并测定性质及观察其体内显像效果.方法 制备载多西紫杉醇脂质微泡,测定粒径、包封率等性质;观察60Co射线灭菌前后微泡性质的差异,观察超声辐照后载药微泡药物的释放,并观察其对兔VX2肝癌的显像效果.结果 载多西紫杉醇微泡的浓度为2.2×109～3.2×109个/ml;粒径分布范围为473.4～706.6 nm,平均粒径为623.1 nm;微泡的包封率为70%以上,载药量为(17.5±0.8)%;Zeta电位为-(3.1±0.9)mV;超声辐照微泡溶液后,药物可释放;静脉注射此微泡后,兔肝实质见良好、持续的增强显像,肝癌病灶可见明显的"快进快出"显影表现.结论 载多西紫杉醇脂质微泡包封率较高,性质较佳,体内显像效果好,提高了超声在肝癌等肿瘤诊断中的价值,超声辐照能促使微泡中的药物释放,有望在实时监控下体内定点靶向给药,实现对肿瘤的靶向治疗.     

脑源性神经营养因子与自杀行为的关系

据世界卫生组织(WHO,2002年)估计,全世界每年有87万人自杀死亡,1000万人自杀未遂.至2020年自杀导致的疾病负担约将会占全球疾病负担的2.4%.我国每年约有28.7万人自杀死亡,占所有死亡的3.6%;每年至少有200万人自杀未遂.一般认为,自杀行为的发生与生物、心理、社会文化因素有关.目前对自杀行为的研究主要集中在心理、社会文化因素,对生物学因素研究较少,且主要是针对5-HT系统.     

脑源性神经营养因子与脑梗死的关系

<正>脑梗死(cerebral infarction CI)又称为缺血性脑卒中(cerebral ischeme stroke),是由于脑部血液循环障碍,缺氧、缺血导致的局部脑组织缺血性坏死或软化。近几年来脑梗死的发病率逐年升高且出现年轻化的趋势,患者死亡率高、后遗症多,迫切需要有效的治疗方案。早在上个世纪80年代国外就有学者从猪脑提取液中发现了一种大分子物质[1],后被称为脑源性神经营养因子(brain-derived neuro-     

脑源性神经营养因子的研究现状

神经营养因子（neurotrophic factors,NTFs）是-类小分子多肽物质,在神经系统发生、发育过程中能够促进细胞的增殖、生长、分化、存活及功能表达,影响突触可塑性,在成熟的神经系统中具有维持神经细胞生存的作用,在神经系统损伤的情况下具有神经保护与修复的作用。     

脑源性神经营养因子与糖尿病及抑郁症

糖尿病足一种与心理因素密切相关的身心疾病,常带来许多社会问题及各种心理障碍,其中抑郁症最为常见.2004年中国糖尿病防治指南明确指出糖尿病心理障碍是糖尿病的14种常见并发症与伴发病之一[1].WHO以来开展全球疾病负担研究显示糖尿病患者中抑郁症的发病率为21.8%～60.8%[2],是正常人群的3倍.因此,糖尿病合并抑郁症越来越受到社会的关注.     

脑源性神经营养因子与缺血性脑卒中康复

缺血性脑卒中是在全球成人中患病率、死亡率、致残率都很高的疾病,因而其康复治疗十分重要,中国传统医学与现代康复治疗手段的结合已成为缺血性脑卒中康复治疗的重要发展方向[1]。脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)是继神经生长因子(nerve growth factor,NGF)后第二个被发现的神经营养因子(neurotrophic factors,NTFs)家族成员,能支持多种神经元生存、发育、分化及修复。研究表明,BDNF在体内能营养某些对NGF无反应的感觉神经元,对胆碱能神经元、多巴胺能神经元、运动神经     

免疫脂质体微泡造影剂的制备及体外靶向研究

目的制备抗人肝细胞癌免疫脂质体微泡造影剂,并探讨其体外靶向作用.方法采用静电吸附法将抗人肝细胞癌单克隆抗体HAb18结合到本试验室研制的脂膜氟烷微泡造影剂表面,制备免疫脂质体微泡造影剂;采用玻片凝集实验、荧光免疫染色实验证明抗体与脂质体微泡的结合;通过花环形成及花环形成阻断实验研究免疫脂质体微泡的靶向作用.结果静电吸附法可使单抗HAb18牢固地结合到脂质体微泡上;免疫脂质体微泡围绕靶细胞形成花环,花环形成率达90%以上.结论采用静电吸附法制备的免疫脂质体微泡造影剂在体外能与人肝癌细胞高效特异结合.     

机械振荡法制备脂膜超声造影剂的初步实验研究

目的探讨机械振荡法制备脂膜超声造影剂的可行性,初步评价其制备效果。方法机械振荡仪系胶囊式调合器改装而成,造影剂制备后,用光镜观察微泡大小、形态,血球计数板测定微泡浓度,激光粒度分析仪测定粒径及分布、表面电位、pH值,在体实验观察造影剂对兔正常肝脏的增强效果。结果造影剂微泡的粒径均小于8μm,平均粒径为(1.67±0.11)μm,平均浓度为(2.56±0.15)×1010/ml,表面电位为(-37.5±0.3)mV,pH值为6.46±0.21,其对肝实质的增强持续时间达60min,而且重复性好。结论机械振荡法是制备脂膜超声造影剂的一种很有效的方法。     

超声微泡造影剂制备中乳化剂的选择

采用乳液聚合法对微泡超声造影剂的制备进行研究,重点对反应中所必需的乳化剂进行选择,并在此基础上讨论了乳化剂的用量及配比等对实验结果的影响.由本方法所制得的微泡粒径以2～8 μm的居多,浓度在9.51×109 /ml左右,单体转化率达到71%,有利于更进一步的研究.     

一种载基因阳离子微泡超声造影剂的制备及特性研究

目的 制备一种新型的阳离子超声造影剂,评价其理化性质,载基因及体内显影能力.方法 采用水浴机械震荡法,加入DC-胆固醇制备一种阳离子脂质微泡;观察其形态、粒径、表面电位等物理特性,并考察平均粒径及浓度在一定条件下随时间变化情况;检测其载基因量,评价其体内显像效果及对细胞的毒性作用. 结果 所制备的阳离子微泡形态规则,稳定性好,马尔文电位仪测得平均表面电位为(29.02±1.30) mV.与普通脂质微泡比较,阳离子微泡载基因量明显增加,最大基因结合量达4 μg/108个微泡,最大基因结合率为39.2％.对细胞无明显毒性,且体内实验阳离子微泡持续增强兔肝脏显影超过15 min.结论 自制的新型阳离子微泡是一种理想的超声造影剂,并能显著增加基因携带量,可望提高超声靶向微泡破坏技术介导的基因转染效率.     

脑源性神经营养因子与抑郁障碍相关性研究进展

脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）是1982年德同神经生物学家从猪脑中分离出来的小分子蛋白质,有促进突触生长、维持神经元生存的作用。抑郁障碍是以兴趣降低和快感缺乏为显著特征的情感性精神疾病,随着现代生活节奏加快、竞争日益激烈化等社会因素的加剧,其发病率逐年升高,严重危害着人们的心身健康。