欣力康提取物调控STAT3/NF-κB信号通路对膀胱癌细胞增殖、迁移的影响

目的 探讨欣力康提取物调控信号转导和转录激活因子(STAT)3/核因子(NF)-κB信号通路对膀胱癌细胞增殖、迁移的影响。方法 体外培养膀胱癌细胞,设空白对照组和不同浓度的欣力康组。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测欣力康提取物对细胞增殖能力的影响,采用Transwell检测细胞的侵袭能力,采用划痕实验检测细胞的迁移能力,采用Western印迹检测细胞侵袭、迁移相关蛋白的影响;采用荧光酶报告基因法检测欣力康提取物对信号通路活性抑制率的影响。结果 与对照组相比,不同浓度的欣力康提取物组对膀胱癌细胞均有明显增殖抑制作用,且呈剂量依赖性(P<0.05);与对照组相比,不同浓度欣力康组侵袭细胞数明显较低(P<0.05);与对照组相比,不同浓度欣力康组细胞迁移率明显较低(P<0.05);与对照组相比,欣力康提取物作用细胞后,侵袭和迁移相关蛋白表达明显较低(P<0.05);与对照组相比,不同浓度的欣力康组STAT3/NF-κB信号通路活性抑制率明显较高(P<0.05)。结论 欣力康提取物可以通过抑制STAT3/NF-κB信号通路来抑制膀胱癌增殖和迁移。     

Survivin对食管癌细胞Tak1、NF-κB表达调控以及细胞周期和凋亡的影响

目的 探讨存活蛋白(Survivin)对食管癌细胞转化生长因子β激活激酶1(Tak1)、核因子κB(NF-κB)表达调控以及细胞周期和凋亡的影响。方法 常规体外培养人食管癌细胞Eca109,随机分为空白对照组、Survivin-siRNA组、Survivin-siRNA空载体组、Survivin过表达组、Survivin过表达空载体组、YM155组,Survivin-siRNA组与Survivin-siRNA空载体组分别转染Survivin siRNA载体、Survivin siRNA空载体,Survivin过表达组与Survivin过表达空载体组分别转染Survivin过表达载体、Survivin过表达空载体,转染6 h,更换新鲜培养基继续培养24 h,收集细胞。空白对照组不予转染,YM155组加入Survivin抑制剂YM155,于各转染组同期收集细胞。采用Western blotting法检测Survivin、磷酸化Tak1(p-Tak1)、NF-κB p65表达,采用流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡率。结果 与空白对照组比较,Survivin过表达组Survivin相对表达...     

大黄素对急性肝衰竭大鼠NF-κB信号通路的调控作用的影响

目的研究急性肝衰竭大鼠采用大黄素治疗后对核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的调控作用.方法以D氨基半乳糖/脂多糖腹腔注射造模,治疗组和阳性对照组于造模前分别给予大黄素,联苯双酯,正常组以等量生理盐水腹腔注射,连续3 d造模16 h后,尾静脉取血处死.检测各组大鼠血清谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、NO、白介素(interleukin,IL)-1β含量及肝组织中Caspase 3、Caspase 8活性;HE染色检测肝脏病理学形态;Western blot检测iNOS、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bcl-associated x protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、增殖细胞核抗原(proliferation cell nucleus antigen,PCNA)、NF-κB p65及IκBα蛋白的表达.结果正常组较模型组血清中ALT、AST含量明显升高(P0.01);大黄素治疗组可有效抑制ALT、AST含量的升高(P0.01).急性肝功能衰竭(acute liver failure,ALF)模型组血清中ALT、AST、NO、IL-1β含量及肝组织中Caspase 3、Caspase 8活性显著上升;iNOS、COX-2、Bax表达量升高,Bcl-2、PCNA表达量下降;NF-κB p65、IκBα磷酸化显著,大黄素治疗组可抑制此变化.结论大黄素通过NF-κB信号通路,可降低ALF大鼠血清中肝功能酶和炎症因子含量,调节细胞凋亡相关蛋白表达,从而改善ALF大鼠症状.     

姜黄素调控miR-21对病毒性心肌炎细胞凋亡、炎症反应及NF-κB信号通路的影响

目的:探讨姜黄素(Cur)是否通过调控微小RNA-21(miR-21)影响病毒性心肌炎(VMC)心肌细胞的凋亡及炎症反应。方法:用柯萨奇病毒B3(CVB3)感染心肌细胞建立VMC心肌细胞模型记为CVB3组,未经任何处理的心肌细胞作为对照组。以不同浓度(0.25,0.50,1.00μmol)的Cur处理心肌细胞进行干预,采用流式细胞术检测细胞凋亡率;以酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的含量;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Cur对miR-21表达水平的影响;分别将anti-miR-con、anti-miR-21转染至心肌细胞后使用CVB3处理,分别将miR-con、miR-21 mimics转染至心肌细胞后使用Cur与CVB3处理,采用上述方法检测细胞凋亡率及炎性因子的含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、核因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白表达。结果:与对照组比较,CVB3组心肌...     

siRNA阻断NF-κB信号通路联合5-FU对食管鳞癌细胞凋亡的促进作用

目的: 利用RNAi技术特异性的抑制NF-κB亚单位p65的表达,观察其对p65表达的抑制作用及联合5-FU对食管鳞癌细胞Eca109和EC9706的影响.方法:将终浓度为50 nmol/L的p65 siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中,通过RTPCR检测0、24、48和72 h时段p65 mRNA的表达水平.Western blotting法检测p65和Bcl-2蛋白表达,Annexin V/PI复染结合流式细胞仪检测细胞凋亡,显微镜下观察p65 siRNA与5-FU单独或联合应用对食管鳞癌细胞形态学特性的影响.结果:EC9706和Eca109细胞转染p65 siRNA 24、48和72 h后,p65 mRNA的表达水平随时间的延长逐渐下调,在72 h的阻断效率最为明显,与0 h相比,差异有显著性(0.12±0.01 vs 0.28±0.05,0.1±0.01 vs 0.38±0.04,均P<0.05),转染72 h后,p65和Bcl-2蛋白表达水平下调.EC9706和Eca109转染p65siRNA后,细胞凋亡指数明显升高(6.65%±0.27% vs 2.03%±0.08%,8.03%±0.06% vs 2.66%±0.25%,均P<0.05);p65 siRNA转染72 h后,EC9706和Eca109细胞增殖较慢;当p65 siRNA与5-FU联合作用,细胞增殖明显受到抑制.结论:p65 siRNA可阻断NF-κB信号通路,下调NF-κB下游基因中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,表明活化的NF-κB信号通路可成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点.     

siRNA阻断NF-κB信号通路联合5-FU对食管鳞癌细胞凋亡的促进作用

目的: 利用RNAi技术特异性的抑制NF-kappaB亚单位p65的表达, 观察其对p65表达的抑制作用及联合5-FU对食管鳞癌细胞Eca109和EC9706的影响. 方法: 将终浓度为50 nmol/L的p65 siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中, 通过RT-PCR检测0、24、48和72 h时段p65 mRNA的表达水平. Western blotting法检测p65和Bcl-2蛋白表达, Annexin V/PI复染结合流式细胞仪检测细胞凋亡, 显微镜下观察p65 siRNA与5-FU单独或联合应用对食管鳞癌细胞形态学特性的影响. 结果: EC9706和Eca109细胞转染p65siRNA 24、48和72 h后, p65 mRNA的表达水平随时间的延长逐渐下调, 在72 h的阻断效率最为明显, 与0 h相比, 差异有显著性(0.12±0.01 vs 0.28±0.05, 0.1±0.01 vs 0.38±0.04, 均P<0.05), 转染72 h后, p65和Bcl-2蛋白表达水平下调. EC9706和Eca109转染p65siRNA后, 细胞凋亡指数明显升高(6.65%±0.27% vs 2.03%±0.08%, 8.03%±0.06% vs 2.66%±0.25%, 均P<0.05); p65 siRNA转染72 h后, EC9706和Eca109细胞增殖较慢; 当p65 siRNA与5-FU联合作用, 细胞增殖明显受到抑制. 结论: p65 siRNA可阻断NF-kappaB信号通路, 下调NF-kappaB下游基因中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达, 表明活化的NF-kappaB信号通路可成为食管鳞癌基因治疗中一个重要的分子靶点.     

NF-κB信号通路与骨质疏松

核因子Kappa B(NF-κB)最初发现是一种能与免疫球蛋白κ轻链基因增强子κB序列特异结合并调节κ轻链转录的核蛋白因子.随后发现NF-κB参与细胞生长、分化及炎症反应等基因表达调控[1,2],同时研究表明在很多常见的情况下出现NF-κB的异常激活或抑制,如肿瘤、糖尿病、动脉粥样硬化等,这些都表明NF-κB无论是在正常还是疾病状态下都扮演着重要的角色[3].骨质疏松(OP)是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征的,致使骨的脆性增加以及易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病.OP发生是由于骨形成和骨吸收的失衡,大量研究表明,NF-κB信号通路不仪在骨形成和骨吸收起着重要作用,而且通过与其他信号通路相互联系,彼此作用,影响OP的发生.因此,我们就NF-κB信号通路在成骨细胞和破骨细胞中的作用进行综述.     

安罗替尼通过NF-κB信号通路对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨安罗替尼通过核因子κB(NF-κB)信号通路对人脑胶质瘤细胞（T98G细胞）增殖、凋亡的影响。方法 体外培养T98G细胞,并将其随机分为对照组、5μmol/L安罗替尼组、10μmol/L安罗替尼组、20μmol/L安罗替尼组、阳性药物组、抑制剂组。对照组不予干预,5μmol/L安罗替尼组、10μmol/L安罗替尼组、20μmol/L安罗替尼组分别以5、10、20μmol/L安罗替尼进行干预,阳性药物组以50 mg/L的5-氟尿嘧啶进行干预,抑制剂组加入10μmol/L安罗替尼+5μmol/L NF-κB通路抑制剂BAY 11-7082进行干预。用CCK-8法检测细胞活力,用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷法测算细胞增殖率,用Hoechst33258染色法测算细胞凋亡率,用Western blotting法检测细胞增殖、凋亡相关蛋白与NF-κB信号通路相关蛋白[细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(NF-κB p65)]表达。结果 与对照组比较,5μmol/L安罗替尼组细胞活力差异...     

Twf1基因对心肌细胞凋亡及NF-κB信号通路的影响研究

目的探讨抑制Twf1基因表达对高糖诱导的心肌细胞增殖、凋亡及NF-κB信号的影响。方法高糖刺激H9c2细胞,将H9c2细胞分为对照组(5.5 mmol/L的葡萄糖处理细胞)、NC组(瞬时转染无干扰作用的si RNA后用5.5 mmol/L的葡萄糖刺激细胞)、高糖组(瞬时转染无干扰作用的siRNA后用25 mmol/L的葡萄糖刺激细胞)和Twf1-siRNA组(瞬时转染干扰Twf1表达的siRNA后用25 mmol/L的葡萄糖刺激细胞)。Western blotting检测蛋白表达,CCK8检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率及ROS含量。结果高糖可引起H9c2细胞Twf1表达升高,转染Twf1-siRNA后H9c2细胞Twf1的表达明显降低;高糖组细胞活力低于NC组,细胞凋亡率、ROS含量及p-IκBα、Bax和TNF-α的表达均高于NC组,差异均有统计学意义(P0.05);Twf1-siRNA组的细胞活力高于高糖组,细胞凋亡率、ROS含量及p-IκBα、Bax和TNF-α的表达均低于高糖组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论抑制H9c2细胞Twf1基因表达可逆转高糖诱导的细胞活力降低及凋亡的增加,其机制可能与细胞内ROS含量降低及NF-κB信号下调有关。     

miR-26b通过信号通路Wnt调控肝癌细胞分化、增殖、凋亡

目的探讨miR-26b对肝癌细胞分化增殖凋亡的影响及机制。方法以qRT-PCR方法检测肝癌细胞SMMC-7721、HuH-7、HepG2和正常肝细胞HL-7702中miR-26b的表达水平。在肝癌细胞中转染miR-26b mimic、mimic control,qRT-PCR测定转染后细胞中miR-26b水平。CCK-8测定细胞增殖情况,流式细胞术测定细胞凋亡情况,Western印迹测定细胞中β-连环蛋白(catenin)、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、剪切型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。结果 HL-7702细胞中miR-26b表达水平显著高于SMMC-7721、HuH-7、HepG2细胞(P0.05)。SMMC-7721细胞中miR-26b表达水平显著低于HuH-7、HepG2细胞(P0.05)。选用SMMC-7721细胞作为研究对象。转染miR-26b mimic后的细胞中miR-26b水平显著升高(P0.05)。高表达miR-26b后的肝癌细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著提高,细胞中促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Bax水平也显著升高,细胞中Wnt关键蛋白β-catenin、CyclinD1水平显著降低(均P0.05)。结论 miR-26b诱导肝癌肝癌细胞凋亡,抑制肝癌细胞增殖,作用机制与抑制Wnt信号通路有关。     

葫芦巴碱通过NF-κB/MMP-9信号通路对肾细胞癌细胞侵袭、迁移的影响

目的 探讨葫芦巴碱对肾细胞癌细胞侵袭、迁移的影响及其可能的作用机制。方法 将786-O细胞分为：对照组、葫芦巴碱低(50μmol/L)、高剂量组(150μmol/L)、舒尼替尼组(2μmol/L)、葫芦巴碱高剂量+脂多糖(LPS)组(150μmol/L葫芦巴碱+1μg/ml LPS);CCK-8法和平板克隆实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞侵袭;划痕实验检测细胞迁移;Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、核因子(NF)-κB-p65蛋白表达。以QNZ(NF-κB抑制剂)或SB-3CT(MMP-9抑制剂)与150μmol/L葫芦巴碱共处理786-O细胞48 h以验证NF-κB/MMP-9通路上下游关系;将786-O细胞悬液皮下注射到裸鼠体内,30 d后,裸鼠分为裸鼠对照组、裸鼠葫芦巴碱低(25 mg/kg)、高剂量组(50 mg/kg)、裸鼠舒尼替尼组(40 mg/kg)、裸鼠葫芦巴碱高剂量+LPS组(50 mg/kg葫芦巴碱+0.5 mg/kg LPS),给药4 w后,绘制肿瘤生长曲线,麻醉后处死裸鼠分离出肿瘤并...     

GRP78的表达对急性肺损伤上皮细胞凋亡和NF-κB信号通路的影响

目的探究免疫球蛋白重链结合蛋白(GRP78)的表达量降低对急性肺损伤(ALI)上皮细胞凋亡、增殖以及核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法采用脂质体Lipofectamine 2000将siRNA-GRP78转入肺上皮MLE-12细胞中,使用10μg/m L脂多糖(LPS)作用于生长状态良好的细胞24 h,建立急性肺损伤模型。实验分为4组:对照组为未经处理的细胞,模型组为LPS干预的细胞,空载体组为先把siRNA-NC转入细胞中然后经LPS干预,低表达组为先把siRNA-GRP78转入细胞中后经LPS干预。CCK-8检测细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞的凋亡率,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中GRP78、P65、核因子κB抑制蛋白(IκB)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达量。结果与对照组相比,模型组、空载体组、低表达组细胞中GRP78蛋白的表达量显著升高(P0.05);与模型组相比,低表达组显著降低(P0.05)。与对照组相比,模型组、空载体组、低表达组细胞的存活率显著下降(P0.05),凋亡率显著升高(P0.05);与模型组相比,低表达组细胞的存活率显著升高(P0.05),凋亡率显著降低(P0.05)。与对照组相比,模型组和空载体组细胞中P65(P0.05)、IκB(P0.05)、Cyclin D1(P0.05)蛋白的表达量显著降低;与模型组相比,低表达组细胞中P65、IκB、Cyclin D1蛋白的表达量显著升高(P0.05)。结论下调GRP78表达抑制急性肺损伤上皮细胞凋亡,促进其增殖,其作用机制可能是通过抑制NF-κB信号通路介导的下游靶基因的表达来发挥作用。     

NF-κB信号通路的阻断对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡与炎症的影响

目的探讨核因子(NF)-κB信号通路的阻断对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞凋亡与炎症的影响。方法分离正常滑膜组织及RA滑膜组织中成纤维滑膜细胞(FLS),分为正常FLS组(正常组),RA FLS组(模型组),NF-κB抑制剂(PDTC)低、中、高剂量组(2,5,10μmol/L)(PDTC组)。四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测PDTC对RA FLS细胞活力的影响,Annexin V-FITC流式双染检测各组细胞凋亡情况,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α,白介素(IL)-1β含量,Western印迹检测各组细胞中环氧化酶(COX)-2,Bax,Bcl-2蛋白的表达。结果与模型组比较,PDTC低、中、高剂量组能显著抑制RA FLS活力,诱导RA FLS凋亡,抑制RA FLS细胞释放TNF-α、IL-1β因子,下调COX-2和Bcl-2表达,上调Bax表达(均P0.05)。结论阻断NF-κB信号通路能够显著抑制RA FLS细胞炎症并诱导细胞凋亡。     

Corin基因通过NF-κB信号通路对心肌细胞增殖凋亡的机制研究

目的探讨Corin基因通过核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对心肌细胞增殖凋亡的影响。方法通过脂质体LipofectamineTM2000将过表达Corin转染H9c2细胞及H2O2刺激细胞,细胞分为Control组、pcDNA3.1组、H2O2组(150μmol/L的H2O2处理细胞6 h)和pcDNA3.1-Corin组(转染pcDNA3.1-Corin后再用H2O2处理细胞6 h),BAY 11-7082作为NF-κB信号通路抑制剂,各组细胞活力通过CCK8法检测,凋亡率通过流式细胞仪检测,通过Western blotting检测各组细胞中增殖相关蛋白ki67、凋亡相关蛋白p53及NF-κB信号通路NF-κB和IκBα的蛋白表达。结果 H2O2刺激的H9c2细胞中Corin的表达明显降低,过表达Corin后Corin的表达显著升高;与pcDNA3.1组比较,H2O2组细胞活力及ki67和IκBα的表达均显著降低,凋亡率及p53和NF-κB的表达均显著升高(P0.05);与H2O2组比较,pcDNA3.1-Corin组细胞活力及ki67和IκBα的表达均显著升高,凋亡率及p53和NF-κB的表达均显著降低(P0.05);与pcDNA3.1-Corin组比较,pcDNA3.1-Corin+BAY 11-7082组细胞活力及ki67和IκBα的表达均显著升高,凋亡率及p53和NF-κB的表达均显著降低(P0.05)。结论过表达Corin可通过抑制NF-κB信号通路提高心肌细胞活力及降低细胞凋亡。     

益母草碱抑制ERK/NF-κB信号通路对心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的:观察益母草碱抑制细胞外调节蛋白激酶(ERK)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:将大鼠随机分为Control组、HF组,低剂量益母草碱(L-益母草碱)组、高剂量益母草碱(H-益母草碱)组及ERK抑制剂组。采用腹腔注射阿霉素法建立HF模型,HF模型建立成功后根据分组进行给药干预,连续14 d。利用彩色多普勒动物超声仪测量心功能指标[左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室舒张末期内径(LVEDD)、左室短轴缩短率(LVFS)]变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡情况;免疫组化法检测心肌组织凋亡相关蛋白表达情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测心肌组织ERK/NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果:与Control组比较,HF组LVEF、LVFS及心肌组织Bcl-2蛋白表达均减少,LVESD、LVEDD、心肌细胞凋亡率及心肌组织Bax蛋白表达均增加(P<0.05);与HF组比较,L-益母草碱组、H-益母草碱组、ERK抑制剂组LVEF、LVF...     

三叶青黄酮通过调控miR-497表达对肺癌细胞增殖、凋亡的影响

目的 探讨三叶青黄酮(RTHF)对肺癌细胞增殖、凋亡的影响及其对miR-497的调控作用。方法 体外培养人肺癌细胞A549,加入不同剂量的RTHF处理细胞;miR-NC、miR-497 mimics转染至A549细胞,anti-miR-NC、anti-miR-497转染至A549细胞后加入RTHF处理细胞;采用噻唑蓝(MTT)实验与流式细胞术分别检测细胞增殖及细胞凋亡率;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肺癌组织、癌旁组织及各组A549细胞中miR-497的表达量;Western印迹法检测B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达量。结果 RTHF可明显提高细胞增殖抑制率、凋亡率及p21、Bax蛋白水平明显降低细胞周期蛋(Cyclin)D1、Bcl-2蛋白水平(均P<0.05);与癌旁组织比较,肺癌组织中miR-497的表达水平明显降低(P<0.05);RTHF可明显提高A549细胞中miR-497的表达水平(P<0.05);转染miR-497 mimics可明显提高细胞增殖抑制率与凋亡率及p21、Bax蛋白水平,明显降低Cyc...     

NF-κB信号通路与炎症性肠病

炎症是多种细胞及细胞因子参与的机体防御性反应,但严重或长期的炎症则会造成机体损伤.炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一组以慢性、周期性炎症为特征的胃肠道疾病,长期、反复的胃肠道炎症不仅影响患者生活质量,而且增加了肠道纤维化及癌变的风险,而核因子Kappa B(nuclear f...     

异甘草酸镁对急性胰腺炎NF-κB通路的影响以及肝损伤的保护作用

正急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)发病机制复杂,病情进展迅速~([1]),特别是进展到重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)阶段,体内大量炎性介质失控释放,会诱发多个胰外器官的损伤~([2]),肝脏是人体代谢最旺盛的器官之一,参与多种细胞因子的灭活与产生,是多种细胞因子的靶器官,因此,肝脏也是急性胰腺炎患者较早发生损伤的胰外器官~([3])。异甘草酸镁是以天然植物甘草中的甘草酸为底物合成的18α-异     

NF-κB信号通路在急性弓形虫感染小鼠神经系统功能异常中的调控作用

目的探究NF-κB信号通路的活化对弓形虫感染过程中神经系统功能异常的调控作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为感染组(TDI)和对照组(NC),使用浓度为2×10~4个/ml的RH株弓形虫速殖子腹腔感染TDI组小鼠,NC组注射等量生理盐水。通过水迷宫实验(包含定航实验和空间探索实验,使用SuperMaze水迷宫图像记录系统进行监测、分析)、细胞因子检测(ELISA法,应用SoftMax Pro 4.3.1LS软件计算细胞因子含量)、Western blot(使用BCA法进行定量)分别检测TDI组和NC组小鼠学习记忆及认知能力、血清中IL-6和TNF-α产生水平、脑组织中NF-κB和caspase3蛋白水平,采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析。结果与NC组相比,感染第3、4、5 d TDI组小鼠逃避潜伏期延长、目标象限花费时间明显减少、新物体认知能力显著降低(均P0.01);TDI组小鼠脑组织中NF-κB蛋白为(1.10±0.01)pg/ml,是NC组(0.51±0.01)pg/ml的2.16倍(P0.01);TDI组小鼠外周血中TNF-α、IL-6的水平显著升高,分别是NC组的10倍、15倍(均P0.01);TDI组小鼠脑组织中caspase3蛋白显著升高,为(0.44±0.05)pg/ml,是NC组(0.31±0.02)pg/ml的1.42倍(P0.01)。结论急性弓形虫感染过程中,小鼠的学习记忆和认知能力受到影响,可能与NF-κB信号通路的活化密切相关。其作用的潜在机制可能是NF-κB活化后诱导TNF-α及IL-6炎性细胞因子分泌增加和/或诱导caspase 3凋亡蛋白的表达从而引起脑神经胶质细胞凋亡而发挥作用。