两种检测血清HIV1 RNA方法的对比研究

目的 探讨Magene磁珠法提取核酸和巢式核酸扩增HIV1 RNA在诊断人类免疫缺陷病毒(HIV)感染中的应用价值.方法 对HIV1 2抗体阴性的梅毒感染者、有输血/手术史的住院患者和HIV1 2抗体阳性的艾滋病(AIDS)患者、HIV携带者、健康体检者采用上述方法检测血清HIV1 RNA.结果 32例HIV1 2抗体阴性者血清中未检出HIV1 RNA;4例AIDS和1例HIV携带者血清HIV1 RNA呈阳性,2例单一酶联免疫吸附试验检测血清中HIV1 2抗体阳性者和10例健康体检者未检出HIV1 RNA.结论 磁珠法提取核酸结合巢式核酸扩增能检出AIDS和HIV携带者血清中的HIV1 RNA及排除假阳性.     

血液筛查中1例低浓度HIV窗口期标本的检测

目的采用血清学和分子生物学方法,确认1例低浓度HIV RNA窗口期献血者的感染状态。方法对血清学ELISA检测结果合格的献血者标本进行核酸检测,发现1例低浓度HIV窗口期标本,利用定性、定量核酸检测(NAT)方法,对该献血者不同时期的血液标本进行HIV病毒载量检测。结果献血者首次献血标本检测结果为血清学ELISA检测阴性,核酸定性试验为反应性,随后进行的核酸定量试验小于20拷贝/ml;对随访后采集的标本进行血清学和核酸检测,最终确认为血清学转阳。结论该献血者是1例病毒载量极低的HIV窗口期献血者,NAT与ELISA检测结合能进一步保障临床用血的安全。     

1例核酸检测混检无反应性的HIV感染献血者的检出

自2015年HIV(人类免疫缺陷病毒,艾滋病病毒)核酸检测纳入血液筛查以来,HIV血清学窗口期感染检出能力的提升大大提高了血液的安全性.HIV核酸检测的最短窗口期约为7天[1],比p24和HIV抗体检测的窗口期分别缩短约1周和2周时间,这对于HIV早期感染特别是HIV血清学窗口期感染的发现有着重要意义[2].由于HIV...     

应用核酸扩增技术对血液中HBV、HCV和HIV-1检测

目的探讨采用核酸扩增技术(NAT)对血液进行HCV、HBV和HIV1核酸检测的可行性。方法采用手工法将血清学检测HBsAg、抗HCV、抗HIV1/2和TPHA呈阴性,以及ALT<40U的血浆标本进行48份×50μl混合;超速离心浓缩病毒后提取病毒核酸,采用RocheCOBASAmplicor分析系统对微量血浆混合标本进行HBVDNA、HCVRNA和HIV1RNA的检测;阳性反应的混合标本进行交叉混合和单份确认检测。结果18621份血清学检测合格的血液中,发现5份HBsAg阴性、HBVDNA呈阳性的血液,阳性率为0.027%(5/18621)。经进一步随访6～20月显示,2名献血者为HBV低水平感染,1例为HBV血清转换窗口期感染。结论NAT检测能够发现HBV低水平和窗口期感染的标本。     

应用磁珠法和巢式PCR检测血清HIV1RNA的临床研究

目的探讨磁珠法提取核酸和巢式核酸扩增HIV1RNA在HIV感染诊断中的应用价值。方法对HIV1 2抗体阴性的梅毒感染者、有输血/手术史的住院患者和HIV1 2抗体阳性的AIDS患者、HIV携带者、健康体验者采用上述方法检测血清HIV1RNA。结果24例HIV1 2抗体阴性者血清中未检出HIV1RNA;4例AIDS和1例HIV携带者血清HIV1RNA呈阳性,2例健康体检者血清中未检出HIV1RNA。结论磁珠法提取核酸结合巢式核酸扩增能检出AIDS和HIV携带者血清中的HIV1RNA及排除假阳性。     

都江堰地区73例WB确证阴性和不确定样本的HIV核酸结果及追踪情况

目的对都江堰地区HIV抗体确证试验即免疫印迹法(WB)条带阴性和不确定的样本, 进行HIV病毒核酸检测并追踪, 对比分析追踪前后WB和核酸结果, 以期减少WB的假阴性和不确定条带产生的假阳性。方法对都江堰地区2021年1至10月收到的286份初筛"HIV感染待确定"的样本, 通过WB检测HIV抗体, 再对WB结果阴性和不确定的样本进行病毒载量检测, 结合流行病学史和病毒载量结果对患者进行了追踪, 对追踪前和追踪后的结果进行比对。结果 286份初筛样本经过确证试验, WB阳性213份(74.48%)、WB阴性37份(12.94%)、WB不确定36份(12.58%);37份WB阴性样本追踪到10份;36份WB不确定样本追踪到18份。WB阴性和不确定的样本追踪前检测到病毒核酸的17份, 追踪后WB均转阳;追踪前未检测到核酸的追踪后排除HIV感染。结论此次追踪到的研究对象中, WB阴性存在2例假阴性, WB不确定存在3例条带假阳性, WB阴性和不确定的样本应立即进行病毒核酸检测并追踪。     

大连市血液中心血清学检测与核酸检测并行的效果观察

目的通过血清学检测和核酸检测并行的检测模式,全面合理评估血清学检测和核酸检测在降低输血相关感染风险中的相关性。方法对2010年12月2日～2011年7月7日共计30 561份献血者标本进行血清学检测(HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体、梅毒特异性抗体、谷丙转氨酶及血型),同时进行HBV、HCV、HIV的3联检核酸定性检测以及HBV DNA阳性标本测定血清学乙肝5项,即HBsAg,抗-HBs,抗-HBc(总),HBeAg和抗-HBe。统计各项检测的检出率;将血清学检测HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体酶免3项检测与核酸检测结果进行对比;分析HBV DNA阳性标本的血清学特点。结果 HBsAg、抗-HCV和HIV抗原/抗体3项检测处于灰区和灰区以下的不合格标本中无核酸检测阳性标本。单纯核酸阳性的检出率为0.07%,经鉴别,HBV DNA阳性17份,无HCVRNA和HIV RNA的检出。HBV DNA阳性标本的乙肝血清学以全阴模式居多。45份核酸酶免均不合格的标本中有29份获得鉴别,鉴别结果与酶免结果符合率为100%。核酸检测阴性而酶免检测双试剂阳性的标本有14份,HBsAg阳性6份,抗-HCV阳性8份,无HIV抗体/抗原阳性标本。结论核酸检测对于HBsAg(-)的HBV感染献血者的检出效果明显。核酸检测与血清学检测结果存在不一致,合理的解释和分析需要必要的献血者追踪和更进一步的实验室确证手段及完善的检测策略。     

1例HIV低病毒载量窗口期样本的发现及对降低血液残余风险的思考

目的确认1例低病毒载量HIV RNA窗口期献血者的感染状态。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印记试验(WB),以及定性、定量核酸检测技术(Nucleic Acid Testing,NAT),对1例HIV RNA窗口期献血者不同时期的血液样本进行检测。结果献血者献血当日样本检测结果为血清学ELISA法检测阴性,NAT反应性,核酸定量试验和WB确认试验均为阴性。对该献血者献血后不同时间进行4次随访,3周后其血清学和核酸检测结果均转为阳性,确认之前为窗口期感染。结论该献血者是1例低病毒载量HIV窗口期感染者,血站应利用高灵敏度NAT体系来避免低病毒载量样本的漏检。     

无偿献血者血液HBV核酸筛查研究

目的 评估大连地区HBV-DNA检测对于输血安全的重要性.方法 对无偿献血者的血液标本进行血清学检测(HBsAg、HCV抗体、HIV抗原/抗体、梅毒特异性抗体、谷丙转氨酶和血型),同时进行HBV、HCV、HIV的三联检核酸检测(NAT);对ELISA(-)NAT(+)的标本采用电化学发光法进行HBV血清标志物补充试验,同时对献血者进行追踪检测.结果 22416份无偿献血者样本发现35例ELISA(+)NAT(+)、3例ELISA(+)NAT(-)、12例ELISA(-)NAT(+).跟踪5位ELISA(-)NAT(+)的献血者,1例可能是免疫“窗口期”;其余4例可能是OBI.结论 核酸血液筛查可大大提高血液安全性,对提高HBsAg阴性血液标本中HBV感染检出率具有重要价值;但核酸与血清学二者检测结果存在不一致,二者对于降低输血传播HBV.     

明胶颗粒凝集(PA)法检测HIV抗体假阳性因素分析

艾滋病病毒((HIV)及其相关标志物的检测是预防HIV感染和艾滋病临床治疗中重要的环节,在艾滋病的防治工作中具有重要作用.目前作为诊断手段使用的检测主要包括抗HIV病毒抗体检测、病毒培养、核酸检测和抗原检测,其中对病毒抗体的检测是常规使用的方法.因HIV感染机体后,HIV抗体是最易检出且持续时间最长的免疫标志物,而且这类检测特异性、敏感性较高.方法相对简便、成熟.     

男性HIV和HCV并发感染者HCV抗体的表达

目的 观察人免疫缺陷病毒(HIV)男性患者并发丙型肝炎病毒(HCV)感染后HCV抗体的表达情况,探讨影响HCV抗体表达的因素.方法 选取经筛选检测最终确诊的HIV/HCV并发感染男性患者23例,每隔3个月随访一次共随访6个月.检测HIV及HCV病毒载量、CD4+T细胞计数及HCV抗体.结果 首次HCV RNA检测阳性时78.3％的患者HCV抗体阴性;3个月后,34.8％的患者为HCV抗体阴性;6个月后,17.4％的患者HCV抗体为阴性.结论 HIV 并发HCV的男性感染者,HCV抗体阳性率表达较低,应早期联合核酸检测.     

阴道分泌物检测人类免疫缺陷病毒抗原抗体筛查艾滋病的实验研究

目的探讨通过阴道分泌物检测人类免疫缺陷病毒（HIV）抗原抗体筛查艾滋病的可行性。方法设健康对照组40例和检测组HIV感染者30例,应用HIV抗原抗体试剂盒血清学方法,分别对两组人员的阴道分泌物进行HIV抗原抗体检测,以其血清HIV抗原抗体检测结果为对照,分析试剂的其敏感性和特异性。结果HIV感染者血清检测HIV抗原抗体阳性30例,健康对照组血清HIV抗原抗体阴性40例;两组70例检测者阴道分泌物HIV抗原抗体阳性30例,阳性敏感性为100％,阴性40例,特异性为100％。结论HIV抗原抗体试剂盒应用于阴道分泌物HIV抗原抗体检测,阳性敏感性与血清的敏感性一致性高,应用于妇科、性病患者这一特殊人群的艾滋病筛查是一种有效、简便的方法。     

当前HIV实验诊断中的若干问题

人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染可通过检测HIV特异性抗体、抗原、核酸或病毒分离培养加以确立,常规使用的标准诊断项目是血清学抗体检测.HIV抗体检测包括筛查试验、复检试验和确认试验3个部分.筛查试验按检测标本种类分为血液检测、唾液检测和尿液检测;按测试原理分为酶联免疫法(ELISA)、凝集法和层析法;按检测速度分为常规法和快速法(如快速试剂)以及介于两者之间的简单法(如明胶颗粒凝集试验,PA).若筛查试验阳性,则需做确认试验[1,2].我国多年来的实践表明,尚有些问题值得商榷.     

术前/输血前筛查血源性传播疾病风险检测方法比较的多中心研究

目的对医院术前/输血前患者开展血源性传播疾病筛查方法比较的多中心研究, 以探索更优的临床血源性传播疾病筛查方案。方法收集2021年7月至2021年12月10家医院拟进行术前/输血前血源性传播疾病检测的入院患者血浆样本, 进行横断面研究。采用核酸检测技术检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA、丙型肝炎病毒(HCV)RNA和人类免疫缺陷病毒(HIV)(1+2)RNA, 并同时与参与医院现行的免疫血清学检测方法的结果进行比较, 用χ2检验和Kappa检验统计分析核酸检测和免疫血清学这2种方法的差异。结果 10家医院共收集到有效样本8 655例。在HCV的检测中, 2种方法的阳性检出率差异有统计学意义(P<0.001);在HBV和HIV的检测中, 2种方法的阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05), 但HBV DNA和HIV RNA检出的阳性例数(分别为238、4例)均多于相应的血清学检测结果(分别为216、2例)。HBV、HCV和HIV的免疫血清学均存在漏检情况, 其中, HBsAg阴性、HBV DNA阳性28例, HCV抗体阴性、HCV RNA阳性 2例, HIV抗原/抗体阴性、H...     

当前HIV实验诊断中的若干问题

人类免疫缺陷病毒 (humanimmunodeficiencyvirus,HIV)感染可通过检测HIV特异性抗体、抗原、核酸或病毒分离培养加以确立 ,常规使用的标准诊断项目是血清学抗体检测。HIV抗体检测包括筛查试验、复检试验和确认试验 3个部分。筛查试验按检测标本种类分为血液检测、唾液检测和尿液检测 ;按测试原理分为酶联免疫法 (ELISA)、凝集法和层析法 ;按检测速度分为常规法和快速法 (如快速试剂 )以及介于两者之间的简单法 (如明胶颗粒凝集试验 ,PA)。若筛查试验阳性 ,则需做确认试验[1,2 ] 。我国多年来的实践表明 ,尚有些问题值得商榷。一、筛查…     

人类免疫缺陷病毒检测技术的研究进展

人类免疫缺陷病毒（HIV）检测的主要目的是用于获得性免疫缺陷综合症即艾滋病（AIDS）的病原体诊断、指导抗病毒药物的治疗及检出HIV携带者，以阻断HIV的传播途径。早期对HIV的检测主要是通过血清学试验，检测HIV的抗原或抗体，直接或间接地诊断HIV感染。目前，HIV血清学诊断仍然是AIDS早期诊断的主要依据，要建立特异、敏感、实用的检测方法用于监测、诊断或血液筛查，控制AIDS的流行显得最为重要，如P24抗原检测、免疫印迹试验、CD4＋T淋巴细胞检测、核酸病毒载量测定等。随着生物芯片和生物传感技术的飞速发展，HIV的实验室诊断方法取得了很大的进展，基因芯片技术已成为HIV实验室诊断的发展方向。本文就近年来HIV检测的研究进展综述如下。     

血液筛查的核酸扩增技术:当前的问题,未来的挑战

本文报告分子检测如何使受血者免受病毒感染的几个现实的问题,尤其是HIV和HCV。血清学检测血液污染是检测病毒抗体(或病毒相关的蛋白质)的出现,而核酸扩增技术确定血液是否被感染,是检测病毒特有的核酸序列。后者可将单一病毒分子的DNA或RNA扩增十亿倍以上,能够阻断可能逃过现行检测已被感染的血液,预防输血传播疾病。尽管NAT具备技术优     

人类免疫缺陷病毒感染抗体检测窗口期血清的检出

目的　搜索高危人群中HIV抗体“窗口期”样品。方法　使用HIV抗体检测、HIV 1 p2 4抗原检测和病毒载量检测等多种方法对 1 580份高危人群血清和血浆进行筛查。结果　发现 1份样品抗体检测为阴性 ,p2 4抗原检测为阳性 ,病毒载量HIV 1RNA含量极高 ,拷贝数为每毫升 41万 (RT PCR法 )和 76万 (NASB法 )。结论　该份样品HIV抗体水平极低 ,用国内目前使用的进口和国产HIV抗体检测试剂均不能检出 ,确定其为 1份处于HIV感染抗体窗口期的样品     

4例COVID-19患者不同类型标本的SARS-CoV-2核酸及抗体检测结果分析

目的选择合适的标本类型进行SARS-CoV-2检测,为新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的早期诊断提供依据。方法采集咽拭子核酸检测阳性的4名COVID-19患者的鼻拭子、粪便、尿液、血液(分离血清)标本,用实时荧光RT-PCR进行SARS-CoV-2核酸检测,用化学发光法检测患者血清IgM和IgG。结果 4名患者咽拭子和3例粪便标本的SARS-CoV-2核酸检测阳性、2例鼻拭子核酸检测阳性;1例患者感染SARS-CoV-2一周内血清IgM及IgG出现,其余3例患者同期血清抗体检测阴性。结论 SARS-CoV2可以通过多种途径进行传播,选择多种类型标本联合检测可提高病毒的检出率;同时血清学抗体检测可以作为核酸检测的补充。     

Pooling PCR技术用于发现病程早期HIV感染者的研究

目的研究探讨Pooling PCR技术诊断识别病程早期(急性感染期)艾滋病病毒感染者的能力,并评估该方法是否经济可行、是否可以在部分人群的艾滋病病毒感染状态的诊断中取代艾滋病抗体检测方法。方法收集4家医疗机构留存的4类人群的HIV抗体阴性血样,对血样进行Pooling PCR法检测,并计算人均检测成本。结果男男同性恋人群HIV核酸阳性率为554.27/万,性病门诊就诊者人群次之,为不低于119.13/万,体检人群没有发现HIV核酸阳性;医疗机构1(结核病防治机构)的其他就诊者人群核酸阳性率(≥85.54/万)要高于医疗机构2的其他就诊者人群(≥21.04/万)。4个医疗卫生机构所留存的4类人群的抗体检测阴性样本中有2类人群检出HIV病毒核酸阳性,共检出病程早期(HIV抗体阴性,但核酸阳性)样本3例,其中男男同性恋人群检出2例、性病门诊就诊者人群检出1例。结论 Pooling PCR检测技术方法敏感且经济,适合于在男男同性恋、性病门诊就诊者及结核病病人等HIV高危人群/高度可疑病人中发现病程早期HIV病毒感染者。