NSCLC外周血、区域淋巴结微转移检测对术前分期的临床价值

目的：探讨检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者术前区域淋巴结及外周血LunxmRNA表达对肺癌术前分期的临床价值。方法：采用荧光定量RT—PCR技术,检测43例初治NSCLC患者、20例肺部良性病变患者的外周血和术前经TBNA所获得的区域淋巴结,及10例健康人外周血的LunxmRNA表达。结果：NSCLC患者外周血LunxmRNA表达阳性率为51．16％（22／43）;术前获得的64枚区域淋巴结LunxmRNA阳性率为93．75％（60／64）,与病理阳性率70．31％（45／64）比较有显著差异;区域淋巴结Lunx的检出率要比常规病理和外周血Lunx的检出率高（P〈0．01）。肺癌患者外周血微转移与细胞分化程度、术前临床分期均存在密切关系（P〈0．05）。而对照组的所有标本只有1枚淋巴结检出LunxmRNA。结论：检测外周血和术前区域淋巴结LunxmRNA表达可作为诊断早期NSCLC患者微转移的参考指标,有助于完善病理C-TNM分期并指导临床综合治疗。     

非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA的表达及与临床的关系

目的：研究非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血中细胞角蛋白19（cytokeratin 19，CK19）mRNA的表达变化及与临床的关系。方法：采用逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）法进行外周血CK19mRNA表达的测定。结果：NSCLC组患者外周血CK19mRNA的阳性率为60．7％。显著高于良性病变组的3．3％和健康对照组的0（P〈0．01）；Ⅲ和Ⅳ期NSCLC患者的阳性率显著高于Ⅰ和Ⅱ期患者的阳性率（P〈0．05）；而不同病理类型NSCLC患者外周血CK19mRNA阳性率之间无显著性差异（P〉0．05）。结论：外周血CK19mRNA的检测有助于我们对NSCLC患者的病情、预后和治疗进行判断．且这并不受病理分型的影响。     

外周血癌胚抗原mRNA在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的：应用RT—PCR技术检测大肠癌患者外周血CEAmRNA，探讨与不同临床病理指标之间的关系，评估复发转移的早期预测意义。方法：应用RT—PCR技术，选择特异性CEAmRNA引物，检测29例大肠癌患者外周血CEAmRNA，同期定量检测外周血CEA和CA19-9糖蛋白。另抽取12例健康志愿者外周血标本作为对照。结果：29例大肠癌患者外周血中CEAmRNA、CEA、CAl9-9阳性率分别为24．14％（7／29）、17．24％（5／29）、13．79％（4／29）。12例对照组外周血中CEAmR—NA、CEA、CA19-9均阴性。有淋巴结转移者外周血CEAmRNA阳性率（35．29％，6／17）高于无淋巴结转移者（8．33％。1／12），但x^2=2．79，P=0．095。TNM分期Ⅳ期中外周血CEAmRNA阳性率66．67％（4／6），Ⅲ期16．67％（2／12）。Ⅰ、Ⅱ期9．09％（1／11），差异有统计学意义。x^2=7．65，P=0．022。外周血CEAmRNA表达在患者的年龄、性别、病理类型等差异无统计学意义，P〉0．05。结论：CEAmRNA、CEA和CA19-9在大肠癌患者中的阳性率，以CEA mRNA阳性率最高，随TNM分期进展，阳性率更高，提示预后不良，应加强治疗。     

胃肠道癌患者外周血癌胚抗原信使核糖核酸的检测及其临床意义

目的：应用RT—PCR法检测胃肠道癌患者外周静脉血CEAmRNA，探讨与不同临床病理指标之间的关系，评估对临床治疗和预后的指导意义。方法：应用RT—PCR技术，选择特异性CEAmRNA引物，检测41例胃癌、大肠癌患者外周血CEAmRNA，同时定量检测外周血CEA和CA19—9糖蛋白。另抽取12例健康志愿者外周血标本作为对照。结果：41例胃肠癌患者外周血中CEAmRNA、CEA、CA19—9阳性率分别为26．8％、19．5％、14．6％。12例对照外周血中CEAmRNA、CEA、CA19—9均阴性。有淋巴结转移者外周血CEAmRNA阳性率（40％，10／25）高于无淋巴结转移者（6．25％，1／16），P=0．000。TNM分期Ⅳ期中外周血CEAmRNA阳性率63．6％（7／11），Ⅲ期21．4％（3／14），Ⅰ、Ⅱ期6．3％（1／16），P=0．004。外周血CEAmRNA表达在不同年龄、性别、病理类型中无统计学差异（P〉0．05）。结论：CEAmRNA、CEA和CA19—9在胃肠道癌患者中的阳性率，以CEAmRNA阳性率最高，随淋巴结转移数目、病期进展，阳性率更高，可能预后不良。     

喉癌患者治疗前后外周血CK19mRNA、CK20mRNA的表达及临床意义

目的探讨喉癌患者根治性治疗前后外周血CK19mRNA、CK20mRNA的表达及临床意义。方法采用巢式RT—PCR技术检测48例喉癌患者术前和术后6、12、24个月外周血中CK19mRNA、CK20mRNA的表达情况。结果48例喉癌患者外周血术前CK19mRNA、CK20mRNA阳性率分别为37．5％（18／48）、45．8％（22／48）;患者术后6、12、24个月外周血CK19mRNA与CK20mRNA的表达均较术前下降（P〈0．05）;复发组CK19mRNA、CK20mRNA术前表达均高于无复发组（P〈0．05）;4例复发患者术前与术后6、12个月外周血CK19mRNA、CK20mRNA的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论检测喉癌患者治疗前后外周血CK19mRNA和CK20mRNA的表达水平有助于评估喉癌微转移及临床疗效,从分子生物学方面为喉癌局部复发的预测提供帮助。     

非小细胞肺癌患者骨髓CK19和LUNX mRNA的实时荧光定量检测和意义

目的：检测非小细胞肺癌患者CK19mRNA和LUNXmRNA的表达情况，探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性．方法：选择初治的非小细胞肺癌（NSCLC）患者62例，以肺部良性疾病10例作为对照组，采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（FQ—RT—PCR）和普通RT—PCR技术，检测肺癌、良性病变肺组织和骨髓的CK19mRNA和LUNXmRNA的表达。结果：肺癌和良性病变肺组织RT—PCR检测结果显示CK19mRNA和LUNXmRNA表达阳性率为100％：62例NSCLC患者骨髓标本FQ—RT—PCR检测结果显示，NSCLC患者中骨髓CK19mRNA表达阳性率45．2％（28／62），明显高于肺良性病变组10％（1／10）（P=0．037），NSCLC组骨髓LUNXmRNA表达阳性率38．7％（24／62）明显高于肺良性病变组0％（0／10）（P=0．017）；骨髓CK19mRNA表达阳性率随病理分期升高，接近统计学意义（P=0．06），而与病理类型、肿瘤分化程度无关；骨髓LUNXmRNA表达阳性率随分期升高且有统计学意义（P=0．02），而与病理类型、肿瘤分化程度无关：骨髓CK19mRNA和LUNXmRNA表达明显相关（P〈0．001）结论：CK19mRNA和LUNXmRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物，可能有助于早期诊断肺癌转移，从而指导临床分期和治疗、     

大肠癌患者外周血CK19 mRNA检测的临床意义

目的：探讨大肠癌外周血中上皮性骨架蛋白CK19 mRNA的表达，与不同临床病理指标间的关系及对术后治疗的指导意义。方法：应用RT-PCR方法检测71例大肠癌患者外周血CK19 mRNA的表达．其中35例同时测定肠系膜静脉血的CK19 mRNA表达。结果：71例大肠癌惠者外周血CK19 mRNA阳性检出率为59．1％（42／71），肿瘤回流血（肠系膜静脉血）为68．6％（24／35），两者间差异无统计学意义。71例患者中Duke’s分期C＋D期的惠者CK19 mRNA表达率（84．6％）明显高于Duke’s A＋B期（44．4％）的患者，X^2=7．86，P=0．05。CK19 mRNA表达与其他病理指标间无相关性。结论：CK19 mRNA在大肠癌外周血中有较高的检出率，随病期进展，阳性率增高。     

肺癌患者外周血CK19mRNA与微转移的实验研究

目的：检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CK19mRNA的表达情况,探讨其诊断NSCLC外周血微转移的临床意义。方法：选取初治NSCLC患者40例及健康志愿者50例,用实时荧光定量RT—PCR方法检测外周血CK19mRNA,相对定量分析结果。结果：肺癌组与健康对照组CK19mRNA阳性表达率分别为72．5％（29／40）、14．0％（7／50）,差异显著（P〈0．05）;相对表达量分别为1．69±0．44、0．28±0．12,有显著差异（P〈0．05）。阳性表达率与原发肿瘤部位、原发肿瘤大小、临床分期、分化程度及病理类型无相关性;相对表达量在中央型、T3＋T4、Ⅲ期＋Ⅳ期及低分化患者数值较高,但不具有统计学意义,鳞癌患者高于腺癌,且有显著差异（P〈0．05）。结论：CK19mRNA作为Real—time RT—PCR法检测NSCLC外周血微转移的分子标记物,具有一定临床应用价值,但特异性仍需提高,应进一步扩大样本进行研究及随访。相对定量分析是一种值得推荐、准确简便的荧光实时相对定量方法。     

大肠癌患者外周血中细胞角蛋白19和癌胚抗原的表达及临床意义

目的:应用巢式逆转录聚合酶链反应（nested RT-PCR）技术检测大肠癌患者外周血中CK19 mRNA、CEA mRNA的表达及临床意义,探讨其作为大肠癌微转移检测分子标记物的可能性。方法:应用巢式RT-PCR技术检测20例健康人、20例大肠腺瘤疾病患者和90例大肠癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA的表达。结果:大肠癌组CK19 mRNA和CEA mRNA表达的阳性率为58.89%（53/90）和53.33%（48/90）;20例健康人外周血中无CK19 mRNA和CEA mRNA的表达; 20例大肠腺瘤疾病患者有1例CK19 mRNA的表达,阳性率为5.00%（1/20）,无CEA mRNA的表达。大肠癌患者中CK19 mRNA、CEA mRNA的阳性率与肿瘤分期及肿瘤转移有显著相关性（P＜0.05)。结论:CK19 mRNA和CEA mRNA作为检测大肠癌患者外周血微转移的分子标记物具有良好的敏感度和特异性,同时可作为判断大肠癌患者的预后指标。     

外周血CK19 mRNA检测在判断乳腺癌微转移中的应用

目的 探讨CKl9mRNA检测对判断乳腺癌微转移的价值。方法 应用RT—PCR法检测66例乳腺癌患者术前和综合治疗6个月、1年后外周血中CKl9mRNA表达状况，并以30例乳腺良性疾病患者和30例正常使康女性作为对照。结果 66例乳腺癌和30例乳腺良性疾病患者CKl9mRNA的阳性率分别为90．9％(60／66)和3．3％(1／90)，30正常使康女性均阴性，相互比较有非常显著性差异(P＜0．01)。有淋巴结转移者和无淋巴结转移者阳性率分别为97．7％(43／44)和77．3％(1742)，相互比较有显著性差异(P＜0．05)。综合治疗6个月和1年后阳性率分别为28．8％(19／66)和33．3％(22／66)，与术前(90．9％，60／66)比较有非常显著性差异(P＜0．01)。结论 CKl9mRNA检测可以早期预测乳腺癌发生的血道微转移。     

检测细胞角蛋白在食管癌外周血和骨髓微转移中的意义

目的：探讨食管癌患者外周血和骨髓中CK18mRNA基因表达及临床意义。方法：采用巢式RT—PCR方法检测50例M0、10例M0的食管癌患者及10例食管良I生病变患者外周血及肋骨骨髓中细胞角蛋白CK18mRNA基因的表达。结果：50例M0食管癌患者外周血、骨髓中CK18mRNA阳性表达率分别为38．0％（19／50）和42．0％（21／50）;10例M,的食管癌患者外周血、骨髓中CK18mRNA阳性表达率分别为90．0％（9／10）、100％（10／10）;食管良性病变患者的外周血和骨髓中K18mRNA阳性表达率均为0％（0／10）,CK18mRNA阳性表达在三组间差异有显著性（P〈0．01）。CK18mRNA在Ⅳ期食管癌患者外周血和骨髓中阳性表达率与III期以前患者相比,有显著性差异（P〈0．05）。CK18mRNA在外周血和骨髓中表达无差异（P〉0．05）,但呈正相关性（r=0．704,P〈0．01）。结论：应用RT—PCR法检测食管癌患者外周血或骨髓中CK18mRNA微转移有助于食管癌的分期和预后的判断。     

检测外周血Lunx mRNA表达在诊断非小细胞肺癌微转移中的临床价值

  目的  探讨检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血Lunx mRNA表达对于诊断肿瘤微转移的临床价值。  方法  采用荧光定量RT-PCR技术分别对98例NSCLC患者和20例正常对照组外周血Lunx mRNA的表达进行检测分析。  结果  NSCLC组患者外周血Lunx mRNA的阳性率为74.5%, 显著高于对照组的15%(χ2=25.642, P < 0.05);Ⅲ期NSCLC患者的阳性率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者的阳性率(χ2=21.014, P < 0.05);淋巴结转移阳性和阴性患者的外周血中CK19mRNA阳性率分别为93.2%和46.2%, 差异有统计学意义(χ2=27.372, P < 0.05);不同细胞分化程度与NSCLC患者外周血微转移阳性率有密切关系(χ2=30.004, P < 0.05);NSCLC患者外周血微转移与年龄、性别、吸烟史、原发肿瘤部位无密切关系(P>0.05)。  结论  Lunx mRNA的高表达可能与非小细胞肺癌的微转移有关, 可作为检测NSCLC患者微转移的分子标志物, 其有助于早期诊断肺癌转移, 指导临床分期和治疗。      

荧光定量PCR检测外周血CK20 mRNA对子宫内膜癌微转移的诊断意义

目的：研究子宫内膜癌患者外周血中角蛋白20（CK20）mRNA的表达情况，并探讨荧光定量PCR（FQ-PCR）检测子宫内膜癌微转移的可行性及临床价值。方法：采用FQPCR方法对64例子宫内膜癌患者外周血、42例良性子宫病变患者及20位健康女献血员外周血中的CK20mRNA表达水平进行检测；并同法检测20例术中切除的肿瘤组织的CK20mRNA。结果：子宫良性病变患者及健康女性外周血中CK20mRNA表达均〈10^3 copiesuL的检测下限；子宫内膜癌组织CK20 mRNA表达水平为（2．08&#177;0．84）&#215;10^4 copies／uL，阳性率为100％。而64例子宫内膜癌患者外周血中CK20 mRNA表达水平为（5．52&#177;1．14）&#215;10^4 copies／uL，高表达率（阳性率）为40．6％（26／64）。CK20 mRNA表达水平与临床分期差异有统计学意义，P〈0．05，与病理分级无关，P〉0．05。结论：FQPCR可快速、灵敏地定量子宫内膜癌外周血CK20 mRNA的表达，对预测子宫内膜癌微转移以及判断患者预后具有一定指导意义。     

NSCLC外周血、区域淋巴结微转移检测对术前分期的临床价值

目的:探讨检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者术前区域淋巴结及外周血Lunx mRNA表达对肺癌术前分期的临床价值.方法:采用荧光定量RT-PCR技术,检测43例初治NSCLC患者、20例肺部良性病变患者的外周血和术前经TBNA所获得的区域淋巴结,及10例健康人外周血的Lunx mRNA表达.结果:NSCLC患者外周血Lunx mRNA表达阳性率为51.16%(22/43);术前获得的64枚区域淋巴结Lunx mRNA阳性率为93.75% (60/64),与病理阳性率70.31%(45/64)比较有显著差异;区域淋巴结Lunx的检出率要比常规病理和外周血Lunx的检出率高(P＜0.01).肺癌患者外周血微转移与细胞分化程度、术前临床分期均存在密切关系(P＜0.05).而对照组的所有标本只有1枚淋巴结检出Lunx mRNA.结论:检测外周血和术前区域淋巴结Lunx mRNA表达可作为诊断早期NSCLC患者微转移的参考指标,有助于完善病理C-TNM分期并指导临床综合治疗.     

非小细胞肺癌患者外周血CEA mRNA表达与临床及病理的相关性研究

目的 分析外周血CEA mRNA表达与非小细胞肺癌（NSCLC）的临床病理相关性,探讨CEA mRNA定量检测对非小细胞肺癌治疗及预后的临床意义.方法 以CEA mRNA为靶基因,运用逆转录-实时定量PCR技术,定量检测49例非小细胞肺癌患者治疗前后、10例良性肺部病变患者、10例健康人员外周血CEA mRNA的表达情况.结果 ①10例健康人员及10例肺部良性疾病患者外周血中CEA mRNA均无表达,NSCLC患者外周血中CEA mRNA表达阳性率77.6%,5例NSCLC组织均检测到CEA mRNA.②Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者外周血中 CEA mRNA 阳性检出率分别为42.9%（3/7）、71.4%（5/7）、83.3%（15/18）、88.2%（15/17）,随着病程进展,表达阳性率增高,Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期比较差异有显著性（χ^2=4.689,P＜0.05;t=-2.296,P＝0.026）.③NSCLC患者手术前后外周血中CEA mRNA变化差异显著（t=2.267,P＝0.033）.④Ⅲb期及Ⅳ期NSCLC患者放、化疗前后外周血CEA mRNA变化差异显著（t＝2.584,P＝0.016）,临床疗效不同的患者其外周血中CEA mRNA表达量变化不同（F=7.228,P＝0.004;γ=0.629,P=0.01）.结论 逆转录-实时定量PCR法能特异、灵敏地检测非小细胞肺癌患者外周血中CEA mRNA表达.非小细胞肺癌早期可能就有隐匿性的远处转移,检测外周血中癌细胞可能对判断疗效及改进治疗方案具有积极地临床意义.     

血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)在非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学方法检测96例NSCLC组织中VEGF、bFGF蛋白水平的表达，其中36例应用RT－PCR技术检测上述基因mRNA表达。结果：NSCLC中VEGF mRNA主要表达分泌性VEGF121和VEGF165，阳性率分别为69．5％（25／36）和41．7％（15／36），bFGF mRNA阳性率为52．8％（19／36）；免疫组化显示VEGF、bFGF阳性表达率分别为55．6％（20／36）和58．3％（21／36），二者之间呈正相关（P＝0．002）；VEGF、bFGF表达与患者年龄、性别、病理类型、分化程度、TNM分期、肿瘤转移、生存期等临床资料之间无统计学意义。结论：VEGF、bFGF在NSCLC血管形成中起重要作用，且二者具有协同作用。     

非小细胞肺癌化疗前后外周血LUNX mRNA检测的临床意义

 目的 通过检测中晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血中循环癌细胞的Lunx mRNA表达情况,探讨全身化疗对外周血循环癌细胞的影响。 方法 NSCLC组为63例中晚期NSCLC患者,化疗方案为含铂类的两药联合方案,化疗2周期后评价客观疗效。分别在化疗前、化疗1周期后、化疗2周期后抽取外周血静脉血。肺部良性疾病患者10例和健康志愿者10例为对照组。用RT PCR法检测外周血中循环癌细胞Lunx mRNA的表达情况。 结果 NSCLC组化疗前外周血Lunx mRNA阳性表达率为73.02%,而肺部良性疾病患者和健康志愿者外周血均没有表达。外周血循环癌细胞Lunx mRNA表达情况与年龄、性别、不同病理类型、行为状态评分的关系不密切,而与临床分期密切相关（P=0.04）。化疗完成2周期的60例中CR 0例,PR 21例、SD 23例、PD16例。外周血Lunx mRNA阳性率在化疗1周期和2周期后均为38.33%,较化疗前显著降低（P=0.00）。Lunx mRNA阳性率在PR、SD、PD三个亚组分别为23.81%、26.09%、75.00%,PR组和SD组的阳性率较化疗前显著降低（P=0.01、P=0.00）,而PD组与化疗前 相比差异无统计学意义（P=0.65）。 结论 Lunx mRNA是检测NSCLC外周血微转移的良好分子标志物。患者临床分期越晚,外周血循环癌细胞阳性率越高。全身化疗可显著降低有效或稳定患者的外周血循环癌细胞检出率,对病情进展的患者则没有作用,而且这种变化在化疗初始阶段即已出现,可帮助我们提前判断化疗对病情的控制情况,从而制定更合理的治疗计划。