严重烧伤延迟复苏大鼠内脏血管通透性的变化

目的 研究严重烧伤延迟复苏大鼠内脏血管通透性的变化。方法 SD大鼠30％Ⅲ度烫伤后,随机分为烫伤组、早期复苏组、延迟复苏组。伤后9h取肺、心、肝、肾,测定脏器血管通透性、组织含水量、髓过氧化物酶（MPO）活性和一氧化氮（NO）代谢产物量）结果 与烫伤组和早期复苏组相比,伤后9h延迟复苏组大鼠肺、心、肝、肾的血管通透性、含水量和MPO活性明显增高,NO代谢产物明显减少。结论 烧伤延迟复苏大鼠内脏的血管通透性明显增加,中性粒细胞聚集和NO产生减少是其重要机理之一。     

特定浓度高渗钠盐复苏液对严重烫伤大鼠早期肺损伤的影响

目的探讨特定浓度（200 mmol/L）高渗钠盐复苏液对严重烫伤大鼠早期肺损伤的影响。方法 56只SD大鼠随机分成烫伤组（48只）和对照组（8只）,其中烫伤组又分为乳酸钠林格液（LR）组（n=24）和高渗钠盐液（HS）组（n=24）。所有大鼠全部颈静脉置管,对照组大鼠不烫伤不补液,对LR组和HS组大鼠进行烫伤后复苏治疗,分别检测各组肺组织的髓过氧化物酶（MPO）与丙二醛（MDA）的含量,将所得数据进行统计学分析;采用免疫组织化学方法测定肺组织p38MAPK的活化程度,所得图片进行比较。结果 HS组复苏后肺组织的MPO含量在注射补液2、8、24 h分别为（1.48±0.45）、（1.52±0.31）、（1.46±0.15）U/g与补液2、8、24 h MDA含量（0.80±0.09）、（0.85±0.08）、（0.80±0.12）mmol/mg明显低于对应观测时间点的LR组复苏后肺组织的MPO含量（1.91±0.32）、（1.91±0.32）、（1.79±0.22）U/g与MDA含量（1.06±0.08）、（0.85±0.08）、（0.95±0.06）mmol/mg,差异有统计学意义（P〈0.05）;与对照组的MPO含量（1.49±0.22）U/g与MDA含量（0.78±0.14）mmol/mg比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。肺组织的p38MAPK的免疫组化活性检测显示：HS组复苏后2、8、24 h的肺组织p38MAPK的表达与LR组比较明显减少,与对照组比较增加不明显,LR组与对照组比较明显增加。结论严重烫伤大鼠早期使用200 mmol/L高渗盐液进行液体复苏与乳酸钠林格液比较,通过减少肺组织的氧化应激反应与信号转导通路的活化减轻肺损伤。     

HIF-1α、VEGF与大鼠继发性脊髓损伤的相关性研究

建立大鼠脊髓损伤动物模型,分析血管内皮生长因子（VEGF）及缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达与脊髓损伤的相关性及二者之间的相关性,探讨其在继发性脊髓损伤发生发展过程中的作用。方法 健康成熟Wistar大鼠144只,雌雄不限,体质量180 ～ 220 g。随机分为脊髓损伤组和假手术组。假手术组大鼠行椎板切除术,脊髓损伤组大鼠参照Allen法制作脊髓损伤模型。2组分别于术后1、3、6、12、24、48、72、168、336 h对8只大鼠进行Tarlov评分,评分后处死。取损伤区脊髓组织进行HE染色观察脊髓组织病理学变化,免疫组织化学法测定VEGF及HIF-1α表达并对阳性细胞进行计数,做统计学分析和相关性分析。结果 各组动物均存活至实验完成。Tarlov评分结果显示：假手术组大鼠术后各时间点评分变化不明显,脊髓损伤组大鼠术后各时间点评分均较假手术组显著降低（P 〈 0.05）,其中术后24、168 h降低最明显（2.24、2.28）。脊髓损伤组术后1 ～ 6 h,损伤局部脊髓组织结构紊乱、水肿;术后168 h内,损伤区域扩大,大量炎性细胞浸润;术后336 h损伤减轻,但仍可见较多炎性细胞浸润。免疫组织化学检测,假手术组大鼠VEGF 及HIF-1α阳性细胞较少;脊髓损伤组大鼠术后6 h,VEGF及HIF-1α阳性细胞数开始增多,HIF-1α于术后24、168 h出现2次高峰,VEGF于术后168 h出现高峰,各时间点HIF-1α及VEGF阳性细胞数均较假手术组显著增加（P 〈 0.05）。VEGF与HIF-1α表达呈正相关（r = 0.526, P 〈 0.05）。结论 大鼠脊髓损伤后HIF-1α、VEGF表达升高,与继发性脊髓损伤密切相关,其表达规律与损伤时间具有相关性;HIF-1α与VEGF表达呈正相关性。     

人原发性脑干损伤后脑干nNOS和HIF-1的表达变化

目的观察原发性脑干损伤死亡者脑干内神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、低氧诱导因子-1（HIF-1）的表达变化,为原发性脑干损伤致死的病理学诊断、法医病理学死因判断提供稳定、简便、可行的检测指标及方法。方法标本分为脑干损伤组和对照组,运用常规HE染色和免疫组化方法,观察神经元的形态学改变和脑干组织nNOS和HIF-1的表达变化水平。结果对照组脑干仅见少量nNOS阳性神经细胞;伤后1h死亡组可见阳性细胞增多,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,且随时间增加阳性神经细胞数增多,表达强度增强,伤后24h达到高峰,随后表达减弱。对照组神经元偶见HIF-1α表达,伤后1h死亡组可见表达HIF-1α的神经细胞数增多,表达强度增强,差异有统计学意义（P〈0.05）;随着时间的增加,HIF-1α阳性表达的神经细胞增多,伤后48h达高峰,随后表达减弱。结论 nNOS、HIF-1α参与了原发性脑干损伤的过程,脑干损伤后nNOS、HIF-1α蛋白随损伤时间变化的规律为原发性脑干损伤的法医学鉴定提供了新的方法,可望应用于法医学实践。     

内皮素-1在烫伤大鼠脑血管损伤中的表达

目的 探讨内皮素-1（ET-1）在烫（烧）伤大鼠脑血管损伤的表达及其作用。方法应用组织学方法观察8只烫伤大鼠脑基底动脉组织结构的变化；应用RT-PCR测定48只烫伤大鼠脑基底动脉ET-1 mRNA的表达；应用Western blotting分析48只烫伤大鼠脑基底动脉ET-1的表达；应用放射免疫分析检测48只烫伤大鼠脑基底动脉ET-1 水平的变化。结果 烫伤大鼠脑基底动脉呈现病理学组织结构变化；烫伤后3h大鼠脑基底动脉ET-1 mRNA表达较正常对照组开始升高，6h 达高峰；烫伤后6h大鼠脑基底动脉ET-1 表达较正常对照组增强，12h 达高峰；烫伤后各组大鼠脑基底动脉ET-1水平较正常对照组明显升高，6h 达高峰。结论 烫（烧）伤可诱发大鼠脑血管ET-1表达增加，增加表达的ET-1可能与烫（烧）伤大鼠脑血管损伤的病理发生有关。     

川芎嗪调节血浆NO/ET、保护严重烧伤早期心脏功能研究

目的 研究川芎嗪对严重烫伤大鼠早期血浆NO／ET的比值与心肌细胞超微结构和损伤特异性指标cTnI变化的影响。方法 清洁级成年雄性Wistar大鼠104只，随机分为正常对照组（对照组），烫伤组（烫伤组）和烫伤＋川芎嗪治疗组（川芎嗪组），对照组8只；烫伤组和川芎嗪组各48只，它们又分为伤后1、3、6、12、24、48h六个时相点，检测血中NO、ET含量并计算NO／ET比值以及血浆cTnI含量，观察心肌超微结构变化。结果 烫伤组血浆NO／ET比值伤后3h即下降，12h比值达最低，以后逐渐回升，到48h仍未恢复正常，与对照组比较差异显著（P〈0．05）；川芎嗪组NO／ET比值下降幅度比烫伤组小．两者比较差异显著（P〈0．05）。烫伤组cTnI伤后1h即有升高，伤后6h升高幅度明显，12h达峰值（是伤前的82倍），以后逐渐下降，到48h尚未恢复正常，与对照组比较差异显著（P〈0．05）；川芎嗪组cTnI升高幅度明显小于烫伤组，两者比较差异显著（P〈0．05）。烫伤组伤后6h和12h心肌细胞水肿明显、肌原纤维断裂、线粒体空泡变，24h损伤有所恢复，而川芎嗪组各时相点心肌细胞损伤程度明显轻于烫伤组。结论 烧伤早期血中NO／ET比值的降低与反映心肌细胞损伤指标cTnI的异常升高以及心肌细胞损伤呈现明显的时间一致性，均在伤后12h最严重。NO／ET引起的血管舒缩功能异常、心肌供血下降可能是导致心肌细胞损伤原因之一。川芎嗪通过改变NO／ET比值调节血管舒缩功能，从而改善心肌供血起到保护严重烧伤早期心肌细胞。     

核转录因子-κB和缺氧诱导因子-1α在大鼠损伤脑组织中的表达变化

目的:探讨核转录因子-κB(NF-κB)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)两种蛋白及其mRNA在脑创伤后脑组织中表达的规律,为法医学损伤时间的推断提供依据。方法:雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组和脑创伤组,分别于颅脑创伤后1、2、4、6、8、10、12、16、18 h和24 h处死,解剖取其脑组织。H-E染色观察大鼠脑组织病理学形态结构的变化,采用免疫组织化学SP法和PCR法分别检测上述两种蛋白和其mRNA在不同损伤时间组的表达及变化规律。结果:NF-κB蛋白的表达在损伤后1 h开始升高,18 h出现表达高峰期,18~24 h出现平台期,损伤组除伤后1 h和2 h组外,其他各组NF-κB阳性表达均显著高于对照组,差异具有统计学意义;NF-κB mRNA于损伤后1 h开始表达,6 h达高峰,持续至24 h,各损伤组NF-κB mRNA水平均显著高于对照组,差异具有统计学意义;HIF-1α伤后6 h呈阳性表达,随着伤后时间的延长,表达逐渐增强,伤后24 h表达最强,损伤组除伤后1、2、4 h组外,其他各组HIF-1α阳性表达均显著高于对照组,差异具有统计学意义。HIF-1αmRNA于损伤后4 h开始表达,18 h达高峰,持续至24 h,损伤组除1、2 h组外,其他各组HIF-1αmRNA水平均显著高于对照组,差异具有统计学意义。结论:大鼠脑损伤后NF-κB和HIF-1α及其mRNA的表达均随损伤时间变化而变化,具有时序性变化规律,能够成为损伤时间推断的候选因子。     

过氧化物酶增殖体激活受体α在急性肺损伤大鼠肺组织的表达及其意义

目的: 观察内毒素(LPS)复制的急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织过氧化物酶增殖体激活受体α（PPARα）表达的变化,探讨PPARα在ALI中可能的作用。方法: 将40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、LPS致伤1 h组、2 h组、4 h组和8 h组。用LPS(5 mg/kg) 静脉注射复制大鼠ALI模型，分别在LPS致伤后1 h、2 h、4 h、8 h时处死大鼠，测定各组肺组织湿/干重比（W/D）及肺组织病理变化；采用RT-PCR法检测肺组织中PPARα mRNA的表达；采用免疫组化法检测肺组织中PPARα的表达。结果: LPS致伤后2 h、4 h、8 h肺组织W/D均显著高于对照组（均P< 0.01）；LPS致伤后2h、4h PPARα mRNA表达分别显著低于对照组（均P < 0.01）；而LPS致伤4h和8h组PPARα表达阳性细胞数显著低于对照组（均P< 0.05）。结论: PPARα在ALI大鼠肺组织表达降低。表明PPARα在急性肺损伤的发病机制中具有重要作用。     

高迁移率族蛋白1对内毒素急性肺损伤大鼠中性粒细胞凋亡改变的影响

目的 观察体外高迁移率族蛋白1（HMGB1）对内毒素急性肺损伤（ALI）大鼠中性粒细胞（PMN）凋亡改变的影响，以探讨HMGB1在ALI发病机制中的作用。方法 脂多糖注射复制大鼠急性肺损伤模型，在LPS致伤后不同时相点（有或无正丁酸钠干预时）获取肺组织、外周血中性粒细胞（PMN）、支气管肺泡灌洗液（BALF）。RT-PCR检测肺组织HMGB1 mRNA表达，流式细胞术（FCM）、Giemsa染色及TUNEL法检测PMN的凋亡改变。结果 与对照组比较，LPS急性肺损伤大鼠PMN凋亡率逐渐减低，鼠BALF中PMN凋亡开始时间及无存活细胞时间明显延长；LPS致伤后6-24h肺组织HMGB1 mRNA表达明显增高。正丁酸钠（SB）处理组动物肺组织于伤后6、12h肺组织HMGB1 mRNA表达均显著抑制，与LPS组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）；形态学检查显示，LPS致伤后大鼠肺组织出现水肿及明显的病理变化，SB干预可减轻肺损伤的严重程度。致伤后肺损伤程度与肺组织HMGB1表达水平及PMN凋亡改变有关。结论 LPS致伤后，鼠肺HMGB1 mRNA高表达发生较晚，但持续较长时间；SB处理可削弱LPS诱导的PMN凋亡延迟及抑制，下调肺组织HMGB1 mRNA表达。HMGB1可能参与内毒素急性肺损伤时PMN的凋亡延迟及抑制效应。     

褪黑素对烟雾吸入所致大鼠急性肺损伤的保护作用

目的通过建立褪黑素干预大鼠烟雾吸入性损伤模型,探讨褪黑素对急性肺损伤的保护作用。方法成年清洁级雄性SD大鼠72只随机分为空白组、损伤组和褪黑素组。空白组不做任何处理,损伤组于吸入性损伤处理后腹腔注射1%乙醇生理盐水（10ml/kg）,褪黑素组于吸入性损伤处理后腹腔注射褪黑素（10mg/kg,1次/8h）。三组大鼠分别在3h、12h、24h三个时相腹主动脉取血2ml后处死,动脉血离心后检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）含量和白细胞介素10（IL-10）。肺组织匀浆测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、髓过氧化物酶（MPO）的含量。取右下肺组织作病理切片,光镜下观察肺组织病理情况。结果光镜下见空白组大鼠肺泡腔结构完整,壁光滑;损伤组肺泡壁增厚,肺间质炎症细胞浸润;褪黑素组肺组织较损伤组病理表现有所减轻。褪黑素组各时相点血清TNF-α和IL-6含量高于空白组（P〈0.05）,低于损伤组（P〈0.05）。损伤组各时相点IL-10含量与空白组相比无统计学差异（P〉0.05）,而褪黑素组IL-10含量与空白组、损伤组相比均升高（P〈0.05）。褪黑素组各时相点肺组织SOD含量均高于损伤组（P〈0.05）,低于空白组（P〈0.05）。褪黑素组各时相肺组织MDA和MPO含量均高于空白组（P〈0.05）,低于损伤组（P〈0.05）。结论褪黑素可以减轻炎症及氧化应激,对烟雾吸入性损伤所致急性肺损伤发挥一定的保护作用。     

大鼠严重烧伤后结肠平滑肌细胞表型转化的实验研究

目的观察大鼠严重烧伤后胃肠运动功能改变及肠道平滑肌细胞表型转化。方法正常对照组大鼠麻醉后脱毛不烫伤,烧伤组制备30%TBSAⅢ度烧伤大鼠模型,依照伤后时相点的不同分为伤后2h、6h、12h、24h、48、72h组,按时相点检测炭末推进率,观察严重烧伤后胃肠运动功能的改变;按时相点取材结肠标本,免疫组织化学染色,图像分析,观察严重烧伤后肠道平滑肌细胞表型转化的改变。结果伤后不同时相点,炭末推进率较正常对照组(74.20±4.28)%均显著降低,伤后6h最低为(38.52±3.93)%,黏膜下肌层平滑肌细胞的α-平滑肌肌动蛋白在伤后6h表达的阳性单位值较正常对照组(25.11±5.65)明显下降,伤后24h表达的阳性单位值最低(10.56±2.68),并持续到伤后72h且黏膜下肌层平滑肌组织明显增生,而肠壁组织平滑肌的α-平滑肌肌动蛋白表达无明显变化。结论大鼠严重烧伤后胃肠运动功能明显抑制;严重烧伤可引起肠道黏膜下层平滑肌细胞表型的改变,伤后胃肠运动功能抑制可能是由于肠道黏膜下层平滑肌细胞发生表型转化,α-平滑肌肌动蛋白可能在大鼠严重烧伤后起下调炎症反应及保护细胞的作用。     

糖皮质激素通过抑制p38MAPK信号通路缓解大鼠内毒素性急性肺损伤

目的： 研究糖皮质激素对内毒素导致的急性肺损伤的影响及作用机制。方法: 成年雄性SD大鼠被随机分为6组：对照组（control 组,n=6）;LPS组（n=24）;地塞米松＋LPS组（Dex＋LPS组,n=24）;糖皮质激素受体拮抗剂RU486组（RU486组,n=6）;RU486+LPS组（n=24）以及RU486＋Dex＋LPS组（n=24）。除对照组和RU486组外,其余4组在注射LPS后1、3、6、12 h又被分为4个亚组。分别检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中TNF-α和IL-6的浓度,肺组织的病理变化,以及肺组织中p38MAPK的活化状态和MKP-1的表达情况。另外又分别比较了LPS组与RU486＋LPS组、Dex＋LPS组与RU486＋Dex＋LPS组大鼠48 h的死亡率。结果: 注射LPS后,BALF中TNF-α 和IL-6的浓度明显升高（P<0.05）,HE染色显示肺组织内广泛炎症反应。而这些现象在应用RU486后变得更加严重,并且RU486＋LPS组的死亡率也明显高于LPS组(P<0.05)。地塞米松能明显缓解LPS导致的肺损伤,糖皮质激素受体(GR)参与此作用。另外,在注射LPS后,肺组织中磷酸化的p38MAPK的表达明显升高,而MKP-1的表达则明显受到抑制。地塞米松能显著降低p38MAPK的磷酸化,这一作用也是GR依赖的。结论: 糖皮质激素活化GR诱导肺组织中MKP-1的表达,进而抑制p38MAPK的活化,从而发挥其抗炎作用,缓解LPS诱导的肺损伤。     

复方丹参对严重烫伤大鼠血脑屏障的保护作用

目的　观察复方丹参注射液对严重烫伤大鼠血脑屏障通透性及脑内ZO-1mRNA影响,探讨复方丹参对严重烫伤大鼠血脑屏障损伤的保护作用。 方法　将大鼠随机分成假烫伤组、烫伤组、复方丹参治疗组。紫外分光光度计检测各组大鼠脑组织内伊文氏蓝的含量,RT-PCR检测严重烫伤大鼠脑内ZO-1 mRNA表达变化。 结果　大鼠严重烫伤后3～48 h脑内ZO-1mRNA表达下降。脑内伊文氏蓝（EB）含量从烫伤后3h开始升高,在6～12 h显著升高。用复方丹参治疗后, 严重烫伤大鼠脑内EB含量降低,以3、6 h下降最明显（P<0.010）;脑内ZO-1mRNA表达升高,以烫伤3 h治疗组最为明显。 结论　复方丹参注射液可防止严重烫伤大鼠脑内ZO-1mRNA的下降,减轻严重烫伤对大鼠血脑屏障的损害。     

严重烫伤早期血胃泌素、胃动素及β-内啡呔的测定和意义

目的：检测严重烫伤休克后血清胃泌素（GAS）、β-内啡呔（β-EP）及血浆胃动素（MTL）浓度的动态变化并分析其意义方法：复制豚鼠背部30%Ⅲ°烫伤模型（假烫组，烫伤组），分别在其伤后3 h、6 h、12 h、24 h、48 h及72 h处死取血，RIA法测血清GAS、β-EP及血浆，MTL的浓度，同样方法复制10%Ⅲ°、20%Ⅲ°豚鼠背部烫伤模型，并对20%Ⅲ°烫伤豚鼠部分延迟复苏，后按时段采血。结果：GAS在伤后3h降至最低值，6 h至24 h一直维持于低水平，至48 h上升到对照值水平；MTL伤后3 h开始明显降低于对照值，12 h达最低值，其后略有上升但仍显著低于对照组；β-EP在伤后48 h内各时点均高于对照组，但在伤后6 h和12 h最高，以后有所下降。烫伤越重，休克复苏越延迟，血GAS、MTL、β-EP变化越大结论：严重烫伤早期血胃肠激素水平有明显变化，休克程度和延迟复苏对其影响很大。     

硫苷脂对烧伤延迟复苏大鼠脏器血管通透性的影响

目的 研究硫苷脂对烧伤延迟复苏大鼠远隔脏器损伤的保护作用。方法 SD大鼠给予30%Ⅲ度烧伤延迟复苏,伤后随机分为对照组和硫苷脂治疗组。在烧伤后9h,测定两组动物肺、心、肝,肾的血管通透性,含水量,髓过氧化物酶（MPO）活性。结果 硫苷脂治疗组在伤后9h,肺、心、肝、肾的血管通透性明显降低,MPO活性明显减少,结论 硫苷脂对烧伤延迟复苏大鼠远隔脏器血管通透性的增高有保护作用。硫苷脂对中性粒细胞聚集的抑制是其重要机理之一。     

纯氧与空气复苏对窒息新生大鼠肺泡超微结构的对比观察

目的研究纯氧和空气复苏窒息新生大鼠后,肺泡超微结构的变化。方法选用清洁级7d龄SD大鼠（n=30）,随机分为正常对照组、实验组（空气组和纯氧组）,将实验组建立缺氧模型后,分别给与空气和纯氧复苏,每组又分为24h、72h两个亚组（n=5）。制作常规电镜标本,在透射电镜下观察。结果1.与正常组比较,实验组出现AECⅠ局部肿胀、胞质脱落,AECⅡ线粒体肿胀、板层小体失去正常结构及数目减少、游离面微绒毛稀少,间质细胞水肿及染色体淡染等超微病理学改变,但空气组的病理改变较纯氧组轻微;2.无论空气组还是纯氧组,其各自的72h组与24h组两个亚组比较,超微病理学改变并无明显差异。结论与空气复苏比较,采用纯氧复苏窒息新生大鼠对于肺组织超微结构损伤严重。     

烫伤大鼠早期小肠内热休克蛋白70表达的研究

目的探索大鼠烫伤早期小肠内热休克蛋白70（HSP70）的表达规律及临床意义。方法将30只健康Wistar大鼠分为6组：烫伤后2h．8h、24h、3d．7d和正常对照组。各组大鼠分别取小肠标本,HE染色观察组织结构变化,免疫组化染色结合图像分析测定HSP70的表达。结果大鼠烫伤后各组小肠组织HSP70的表达均迅速增加,与正常对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）;烫伤大鼠早期HSP70在小肠表达强弱与其病理损伤评分成正相关关系（rs=0．943／1．000,P〈0．05）。结论大鼠烫伤后组织器官内HSP70的表达情况在一定条件下可以作为判断其损伤程度的指标。     

丁酸钠对50%总体表面积烫伤大鼠肺血管内皮糖萼层保护作用和机制研究

目的研究丁酸钠对严重烫伤大鼠肺血管内皮糖萼层的保护作用及可能机制。 方法将144只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分成假伤＋盐水组(n＝24),假伤＋丁酸钠组(n＝24),烫伤＋盐水组(n＝48),烫伤＋丁酸钠组(n＝48)。制作50%总体表面积Ⅲ度烫伤模型：烫伤＋盐水组和烫伤＋丁酸钠组大鼠麻醉、备皮后置于80 ℃水浴锅中(背部15 s,腹部8 s,双下肢15 s),假伤＋盐水组和假伤＋丁酸钠组大鼠浸入37 ℃水相同时间。假伤＋丁酸钠组和烫伤＋丁酸钠组立即皮下注射丁酸钠(300 mg/kg);假伤＋盐水组和烫伤＋盐水组立即皮下注射0.5 mL 0.9%氯化钠溶液。于伤后3、6 h分别处死动物并取材,测定肺泡灌洗液蛋白(BALF)浓度,肺湿干重比;采用蛋白质印迹法和酶联免疫法检测肺组织多配体蛋白聚糖-1(SDC-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达和含量率的变化。数据比较采用单因素方差分析和Newman-Kueuls法。 结果(1)伤后3、6 h,烫伤＋盐水组BALF蛋白浓度分别为(0.657 5±0.045 5)、(0.684 1±0.076 0) mg/mL,高于假伤＋盐水组[(0.476 6±0.065 8) mg/mL],差异均有统计学意义(q＝7.188、8.243,P值均小于0.05);伤后3、6 h,烫伤＋盐水组肺湿干重比分别为4.545 1±0.444 4,4.795 1±0.606 6,均高于假伤＋盐水组(2.636 0±0.157 5),差异均有统计学意义(q＝10.950、12.380,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤＋丁酸钠组BALF蛋白浓度分别为(0.541 0±0.071 )、(0.538 1±0.063 6) mg/mL,均低于烫伤＋盐水组[(0.657 5±0.045 5)、(0.684 1±0.076 0) mg/mL],差异均有统计学意义(q＝4.610、5.799,P值均小于0.05);且伤后3、6 h,烫伤＋丁酸钠组肺湿干重比值3.626 6±0.446 1、3.477 9±0.510 7,均低于烫伤＋盐水组,差异均有统计学意义(q＝5.269、7.555,P值均小于0.05)。(2)蛋白质印迹法检测结果显示,伤后3、6 h,烫伤＋盐水组肺组织SDC-1表达水平分别为0.376 1±0.075 7、0.329 8±0.074 9,假伤＋盐水组肺组织SDC-1表达水平均为1.000 0±0,2组比较差异均有统计学意义(q＝13.280、14.260,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤＋丁酸钠组肺组织SDC-1表达水平分别为0.760 5±0.207 1、0.678 3±0.117 9,均高于烫伤＋盐水组,差异均有统计学意义(q＝8.180、7.417,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤＋盐水组肺组织MMP-9、VEGF表达水平分别为(MMP-9：2.683 4±0.318 8、2.655 6±0.448 9;VEGF：3.806 3±0.703 8、2.850 0±0.396 3),假伤＋盐水组MMP-9、VEGF表达水平均为1.000 0±0,烫伤＋盐水组均低于假伤＋盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9: q＝9.356、9.202),(VEGF: q＝12.700、8.375); P值均小于0.05 ]。伤后3、6 h,烫伤＋丁酸钠组肺组织MMP-9、VEGF表达水平分别为(MMP-9：0.995 2±0.378 5、1.527 1±0.342 8;VEGF：1.574 6±0.216 0、1.721 5±0.341 8),均低于烫伤＋盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9: q＝9.383、10.100),(VEGF: q＝6.272、5.108); P值均小于0.05]。(3)酶联免疫法检测结果显示,伤后3、6 h,烫伤＋盐水组与假伤＋盐水组比较,肺组织MMP-9、VEGF蛋白含量均显著增高,差异均有统计学意义[(MMP-9: q＝8.850、8.436), (VEGF：q＝9.090、9.186); P值均小于0.05];SDC-1蛋白含量显著降低,差异均有统计学意义(q＝8.296、8.331,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤＋丁酸钠组肺组织MMP-9、VEGF蛋白含量均低于烫伤＋盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9: q＝6.579、6.939),(VEGF：q＝7.853、7.768);P值均小于0.05];SDC-1蛋白含量高于烫伤＋盐水组(q＝6.265、4.456,P值均小于0.05)。 结论丁酸钠能减轻严重烫伤大鼠肺组织水肿,保护肺血管内皮糖萼层,其作用机制可能与抑制MMP-9和VEGF通路相关。     

HIF-1α和MMP-2在大鼠脑出血灶周脑组织中的表达

目的：通过动态观察脑出血灶周脑组织中缺氧诱导因子(HIF)-1α和基质金属蛋白酶(MMP)-2的表达,探讨HIF-1α和MMP-2表达之间的联系。方法：50只SD大鼠随机分成假手术组和脑出血模型组,分别于术后6 h,24 h,72 h,7 d,21 d处死大鼠。RT-PCR方法检测脑出血灶周组织HIF-1α和MMP-2 mRNA的表达及免疫组织化学方法检测HIF-1α和MMP-2蛋白的表达,并对HIF-1α和MMP-2的表达进行相关分析。结果：模型组术后灶周组织出现HIF-1α, MMP-2 mRNA表达上调和大量黄色的HIF-1α,MMP-2蛋白阳性细胞,于24~72 h达高峰。HIF-1α mRNA及其蛋白表达分别与MMP-2 mRNA及其蛋白表达呈正相关(分别r=0.588, P=0.002; r=0.765, P＜0.001)。结论：脑出血灶周脑组织中HIF-1α和MMP-2的表达上调,且HIF-1α可能调控MMP-2的表达。     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对致死性烫伤大鼠脑损伤保护作用的研究

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊酸钠对50%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烫伤大鼠脑损伤的保护作用。 方法采用随机数字表法将80只清洁级雄性SD大鼠随机分为4组：假伤对照组,单纯烫伤组,2-甲基-2-戊烯酸(2M2P)组和丙戊酸钠(VPA)组,每组20只。假伤对照组大鼠浸入37 ℃水浴中制备假伤模型,单纯烫伤组、2M2P组和VPA组采用96 ℃水浴浸泡大鼠背部15 s、双下肢15 s、腹部8 s,制作50%TBSA Ⅲ度烫伤模型。烫伤后即刻,2M2P组和VPA组分别腹腔注射300 mg/kg 2M2P和VPA,假伤对照组和单纯烫伤组分别腹腔注射3 mL/kg 0.9%氯化钠溶液。各组大鼠分别于烫伤后4、8 h 2个时间点以腹主动脉采血法被处死,断脑取脑组织,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测脑组织S-100β蛋白表达水平,干/湿重法测定大鼠脑组织含水率,采用蛋白质印迹法检测脑组织中热休克蛋白(HSP)70、组蛋白H3赖氨酸9位乙酰化(H3K9ac)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达水平。另取80只大鼠用于观察各组烫伤后4、24 h生存率(大鼠分组、烫伤模型制备以及治疗方案同上)。数据比较采用单因素方差分析、t检验和χ²检验。 结果烫伤后4、8 h,4组大鼠脑组织S-100β蛋白水平和含水率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。烫伤后4、8 h,单纯烫伤组、2M2P组和VPA组大鼠脑组织S-100β蛋白表达水平和含水率与假伤对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);烫伤后4、8 h,2M2P组和VPA组大鼠S-100β蛋白表达水平和含水率与单纯烫伤组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);烫伤后4、8 h,VPA组脑组织S-100β蛋白表达水平分别为(0.54±0.05)、(0.79±0.05)μg/L,与2M2P组[(1.02±0.07)、(1.41±0.08) μg/L]比较均显著降低,差异均有统计学意义(t＝2.369、2.251,P<0.05)。烫伤后4、8 h,VPA组脑组织含水率分别为(78.62±0.58)%、(81.25±0.57)%,与2M2P组[(80.15±0.64)%、(83.15±0.61)%]比较均显著降低,差异均有统计学意义(t＝2.054、2.191,P<0.05)。烫伤后4、8 h,4组大鼠脑组织HSP70、H3K9ac、HIF-1α蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。烫伤后4、8 h,单纯烫伤组、2M2P组和VPA组大鼠脑组织HSP70、H3K9ac、HIF-1α蛋白表达水平与假伤对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。烫伤后4、8 h,2M2P组和VPA组大鼠脑组织HSP70、H3K9ac、HIF-1α蛋白水平与单纯烫伤组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);烫伤后4、8 h,VPA组大鼠脑组织HSP70蛋白水平分别为0.63±0.05、0.81±0.04,与2M2P组(0.41±0.03、0.59±0.04)比较,VPA组大鼠脑组织HSP70蛋白水平升高更显著,差异均有统计学意义(t＝2.413、2.152,P<0.05);烫伤后4、8 h,VPA组大鼠脑组织H3K9ac蛋白水平分别为1.26±0.09、1.58±0.07,与2M2P组(1.06±0.06、1.24±0.07)比较升高更显著,差异均有统计学意义(t＝2.031、2.167,P<0.05);烫伤后4、8 h,VPA组HIF-1α蛋白表达水平分别为2.23±0.21、1.86±0.23,与2M2P组(3.01±0.24、2.74±0.21)比较均显著降低,差异均有统计学意义(t＝2.157、2.425,P<0.05)。烫伤后4、24 h,单纯烫伤组大鼠的存活率为80.0%(16/20)和0(0/20);2M2P组为90%(18/20)和20%(4/20);VPA组为100%(20/20)和40%(8/20)。烫伤后4、24 h,VPA组和2M2P组大鼠存活率均显著高于单纯烫伤组,差异均有统计学意义(χ²＝11.31、11.96,P<0.05)。烫伤后4、24 h,VPA组大鼠存活率均高于2M2P组,差异均有统计学意义(χ²＝11.32、12.05,P<0.05)。 结论VPA能减轻50%TBSAⅢ度烫伤大鼠的脑损伤并提高生存率,其机制可能与VPA降低脑组织S-100β的蛋白表达水平和脑组织含水率,促进脑组织HSP70和H3K9ac蛋白表达和抑制HIF-1α的活性有关。