bFGF对兔眼视网膜挫伤Müller细胞Vimentin表达的影响

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对兔视网膜挫伤后Müller细胞的影响.方法 26只白兔通过3J能量自由落体的方式制作兔眼挫伤性视网膜病变模型,随机分为bFGF实验组、生理盐水对照组、单纯挫伤组、正常对照组.其中正常对照组2只(4只眼),单纯挫伤组4只(8只眼),bFGF实验组和生理盐水对照组各10只(20只眼).bFGF实验组每2d玻璃体腔内注射bFGF 2μg (10μL),生理盐水对照组注射生理盐水10μL.采用免疫组织化学染色检测视网膜挫伤后3h,1、3、7、14d各时间点Müller细胞波形蛋白(Vimentin)的表达.结果 bFGF实验组视网膜Müller细胞Vimentin的表达高于生理盐水对照组,且呈上升趋势,两组比较各时段差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 bFGF可以增强视网膜Müller细胞Vimentin的阳性表达,加速Müller细胞的活化,促进损伤修复.     

兔视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin表达的变化

目的：探讨兔视网膜挫伤后Müller细胞波形蛋白（Vimentin）表达的变化 方法：通过3J能量自由落体方式制作兔眼挫伤性视网膜病变模型,于伤后1/8,1,3,7,14d时处死动物取材,免疫组化染色和计算机图像分析仪检测视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin的表达和分布。 结果：视网膜挫伤后1d Vimentin开始阳性表达增强,7d达到高峰,14d略有下降。随着视网膜挫伤时间的延长,Vimentin的免疫染色范围也逐渐向外扩展,3d时免疫染色达外界膜,7d时视网膜全层都有表达,二组比较,各时段差别均P〈0.01,存在统计学差异。 结论：视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin反应动态增强。     

bFGF诱导兔眼视网膜下新生血管形成的实验研究

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导青紫兰兔视网膜下新生血管动物模型的方法及可行性。方法健康成年青紫兰兔40只，随机分为2组。第1组实验组兔眼视网膜下注入0．005％（wt／vol）bFGF50μl，第2组对照组兔眼视网膜下注入0．9％生理盐水50μl，对侧眼均作为空白对照，不行视网膜下注射。术后3d，1、2、3、4、6、8、12周分别行眼底检查、摄片、眼底荧光血管造影（FFA）和吲哚青绿血管造影（ICGA），并行眼球组织病理学检查。结果视网膜下注射后所有眼即见视网膜直径4～5PD的青灰色半球形隆起，实验组与对照组分别于注射后2周和1周后平伏。术后2～12周FFA造影可见实验眼于视网膜隆起处下方早期斑点状高荧光，后期荧光增强并融合扩大。ICGA显示FFA高荧光相应部位荧光染料积存。对照组眼FFA、ICGA造影检查均未见类似表现。病理检查结果显示：视网膜下注射bFGF后2～12周，实验眼视网膜感光细胞层下有新生血管形成。结论视网膜下注入bFGF能成功诱导青紫兰兔视网膜下新生血管形成。     

视网膜Mailer细胞调控豚鼠形觉剥夺性近视形成的研究

目的研究视网膜Maller细胞在豚鼠形觉剥夺性近视形成中的作用。方法眼罩遮盖建立豚鼠形觉剥夺性近视眼模型，分为正常对照组、DL—α-氨基己二酸（DL—α—AAA）组、生理盐水组、遮盖组、遮盖＋DL—d—AAA组、遮盖＋生理盐水组。DL-α-AAA组和遮盖＋DL-α—AAA组右眼玻璃体内注射8μgDL—α—AAA。14d后检影验光测屈光度，A型超声测眼轴长度，免疫组织化学、Western blotting检测视网膜中Vimentin的表达，TUNEL染色检测凋亡细胞。结果眼罩遮盖14d后，豚鼠遮盖眼眼轴延长，近视形成。Vimentin蛋白阳性表达于视网膜MUller细胞。DL—α-AAA组右眼远视度数高于正常对照组，但视网膜Vimentin蛋白表达量下调（P〈0，05）。DL-α-AAA引起遮盖眼近视度数减轻、视网膜Vimentin蛋白表达量下调（P〈0．05）。各实验组的视网膜均未发现凋亡细胞。结论玻璃体内注射DL—α-AAA能特异性作用于视网膜Mtiller细胞，有效抑制豚鼠眼球正视化和近视形成。     

兔视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin表达的变化

目的:探讨兔视网膜挫伤后Müller细胞波形蛋白(Vimentin)表达的变化方法:通过3J能量自由落体方式制作兔眼挫伤性视网膜病变模型,于伤后1/8,1,3,7,14d时处死动物取材,免疫组化染色和计算机图像分析仪检测视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin的表达和分布.结果:视网膜挫伤后1d Vimentin开始阳性表达增强,7d达到高峰,14d略有下降.随着视网膜挫伤时间的延长,Vimentin的免疫染色范围也逐渐向外扩展,3d时免疫染色达外界膜,7d时视网膜全层都有表达,二组比较,各时段差别均P＜0.01,存在统计学差异.结论:视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin反应动态增强.     

姜黄素防治兔眼增生性玻璃体视网膜病变的实验研究

背景先前的系列研究表明,姜黄素可以诱导体外培养的兔视网膜色素上皮（RPE）细胞凋亡,抑制其RPE细胞的增生,且在玻璃体内应用后不良反应较小,具有防治增生性玻璃体视网膜病变（PVR）的潜在价值。目的探讨姜黄素玻璃体内注射对RPE细胞诱导的兔眼PVR模型的防治效果。方法新西兰白兔20只40只眼,所有兔眼玻璃体注射前先抽取0．2ml玻璃体液,然后在兔眼玻璃体内注射0．1ml（2×10^6）同种RPE细胞,每只兔随机选取1只眼立即注入1mg／L的姜黄素0．1ml作为姜黄素组（20只眼）,对侧眼注入等量的含质量分数0．5‰DMSO的生理盐水作为对照组（20只眼）。注药后1、3、7、14、21、28d裂隙灯显微镜下观察角膜、房水、晶状体的透明度及眼前节炎症反应情况;使用间接检眼镜、眼底彩色照相和B型超声检查玻璃体视网膜情况。以视网膜脱离发生眼数作为检测指标,评价姜黄素对PVR的防治效果。结果玻璃体注药后1d、3d所有兔眼发生眼前节炎症反应,玻璃体轻中度混浊,但未见增生条带及视网膜脱离。玻璃体注药后7d,所有兔眼前节炎症反应基本消退,对照组14只眼（75％）玻璃体出现增生条带,姜黄素组2只眼（10％）玻璃体内出现增生条带,差异有统计学意义（P〈0．01）,但2组均未见视网膜脱离。注药后14d,对照组11只眼（55％）出现视网膜脱离,姜黄素组2只眼（10％）出现视网膜脱离,差异有统计学意义（P〈0．01）;注药后21d,对照组16只眼（80％）出现视网膜脱离,姜黄素组3只眼（15％）出现视网膜脱离;注药后28d,对照组19只眼（95％）出现视网膜脱离,姜黄素组3只眼（15％）出现视网膜脱离,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论姜黄素玻璃体腔内注射可以有效预防RPE细胞诱导的兔眼实验性PVR的发生发展。     

谷氨酸对视网膜Muller细胞超微结构和谷氨酰胺合成酶表达的影响

目的探讨谷氨酸对大鼠视网膜Muller细胞超微结构和谷氨酰胺合成酶（GS）表达的影响。方法取5～7d清洁级Wistar乳鼠视网膜,在含质量分数10%新生牛血清的Dulbecco改良Eagle培养基中传代培养大鼠视网膜Muller细胞。第3代Muller细胞培养基中加入终浓度分别为10、20、50、100、200μmol/L的谷氨酸作用10min。正常对照组Muller细胞培养基中未加入谷氨酸。通过免疫细胞化学法检测GS的表达鉴定视网膜Muller细胞。透射电镜观察各组Muller细胞超微结构的改变。采用Westernblot法半定量检测GS的表达。结果培养的Muller细胞中,GS阳性细胞达95%以上。透射电镜下正常对照组Muller细胞超微结构正常,谷氨酸10、20、50μmol/L组Mller细胞超微结构无明显改变。100μmol/L谷氨酸组可见Muller细胞线粒体肿胀和染色质的凝集、边聚。在200μmol/L谷氨酸组可见Muller细胞空泡样变性和凋亡小体。Westernblot结果显示,10、20、50μmol/L组GS在Muller细胞中表达较正常对照组升高,差异均有统计学意义（q=29.32、q=75.54、q=48.36、q=130.20,P〈0.01）,50μmol/L谷氨酸组GS的表达达高峰,100μmol/L谷氨酸组表达开始下降,200μmol/L谷氨酸组的表达低于正常对照组（q=46.67,P〈0.01）。结论谷氨酸浓度影响视网膜Muller细胞中GS的表达,谷氨酸浓度超过50μmol/L可引起视网膜Muller细胞超微结构的改变。     

维拉帕米对兔眼挫伤后视网膜谷氨酸含量的影响

目的观察探讨Ca^2＋通道阻滞剂维拉帕米对兔眼挫伤后视网膜谷氨酸含量的影响及其在跟挫伤中的作用。方法60只兔（60眼）建立右眼挫伤模型,治疗组每日球结膜下注射维拉帕米,挫伤组每日球结膜下注射生理盐水,分别于30min、6h、1d、3d、7d、14d取材,高压液相色谱仪定量检测视网膜谷氨酸水平。另5只兔10眼为正常对照。结果兔眼挫伤后视网膜谷氨酸含量高于正常,并在6h、7d形成两个高峰。维拉帕米治疗可明显抑制6h高峰,并使7d高峰的峰值降低。结论提示维拉帕米可降低眼桦伤后视网膜谷铕西夸7k平。     

出血性视网膜脱离模型的建立

目的探索在兔眼建立出血性视网膜脱离（hemorrhagic retinal detachment，HRD）模型的方法，为HRD损害及其救治的研究奠定基础。方法14只健康青紫蓝兔 28只眼，随机分为HR D组（12只眼）和对照组（16只眼）。HRD组兔眼用特制的玻璃微管直视下经玻璃体腔在视网膜下注入自体抗凝血0.2 ml，造成HRD。对照组兔眼用同样方法在视网膜下注入0.2 ml 含肝素钠（2.5 U/ml）的生理盐水(肝素盐水对照组，6只眼)或生理盐水（盐水对照组，3只眼），形成视网膜脱离（retinal detachment，RD）。并建立假注射对照（单纯视网膜穿刺而不注射，3只眼）和正常对照（2只家兔的4只正常眼）。手术后1 h~28 d行直接检眼镜、光相干断层扫描（optical coherence tomography，OCT）、A和（或）B型超声检查以观察和分析视网膜脱离的发生和表现。结果手术后HRD组兔眼均发生HRD，视网膜明显隆起，范围为10～12个视盘直径（disc diameter, DD），持续约14 d，28 d 时仍可见视网膜下部分血液残留。肝素盐水及盐水对照组兔眼均发生RD，该RD仅在手术后12 h内明显。假注射对照组兔眼视网膜穿刺孔多在手术后2 d内消失，正常对照组兔眼视网膜无变化。结论经玻璃体腔在兔眼视网膜下注入自体抗凝血建立HRD动物模型的方法简便、实用、有效。（中华眼底病杂志，2003，19：175-178）     

透明质酸酶对外伤性玻璃体积血转归的影响

目的探讨透明质酸酶对兔眼外伤性玻璃体积血转归的影响。方法28只新西兰白兔,右眼为外伤性玻璃体积血模型,左眼为空白对照眼。1d后随机分为实验组和阳性对照组,每组14只兔（14只眼）。实验组玻璃体腔注射透明质酸酶0．002umol／（min·L）,阳性对照组玻璃体腔注射0．1mL BSS。分别于给药后1、3、7、14、21、28d测量眼压,行裂隙灯及眼底检查。每组抽取2只实验兔行眼球摘除,抽取玻璃体液测定碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的质量浓度,取眼球壁行组织病理学检查。结果给药14d后,实验组的玻璃体混浊程度明显低于阳性对照组,各组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。给药后1d、3d,实验组眼压和空白对照组眼压比较差异均有统计学意义（P〈0．05）,与阳性对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。随着时间推移,玻璃体中bFGF的质量浓度均增高,阳性对照组增高更明显。组织病理学检查见实验组和阳性对照组视网膜均出现了水肿和神经节细胞空泡样变、内界膜增厚等改变,但实验组较阳性对照组形成增生膜少。结论透明质酸酶20IU于兔眼玻璃体腔内注射对视网膜无毒性作用,可加速外伤性玻璃体积血的消散,造成眼压一过性降低。     

高糖对视网膜Meller细胞VEGF，EPO和EPO RmRNA表达的影响

目的：观察高糖条件下VEGFmRNA,EPOmRNA和EPORmRNA在体外培养的Muiler细胞中的表达情况。方法：胰蛋白酶将新生小鼠视网膜组织吹打消化后,制成单细胞悬液,体外培养Muller细胞,RT．PCR测定高糖条件下视网膜Mailer细胞VEGF,EPO和EPOR基因的表达。结果：成功获得视网膜Muller细胞,传代后90％以上的细胞呈兔抗鼠谷氨酰胺合酶（GS）染色阳性。Muller细胞VEGFmRNA,EPO mRNA和EPORmRNA在高糖条件下表达升高,且呈浓度依赖性（P〈0．05）,但糖浓度50mmol／L组较40mmol／L组差异无统计学意义,无明显时间依赖性。结论：Muller细胞在高糖条件下VEGF,EPO,EPOR的表达增加。     

豚鼠近视眼视网膜Müller细胞近视因子基因的表达

目的研究视网膜近视因子基因在原代培养的豚鼠近视眼视网膜Müller细胞中的表达变化。方法3～4周龄断乳三色豚鼠40只,取20只建立近视眼模型（以右眼作为实验眼,以对侧未遮盖眼作自身对照）,剩余的20只豚鼠作正常对照。用眼罩遮盖法建立豚鼠近视眼模型,用酶消化法原代培养其视网膜Müller细胞。RT-PCR检测酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）、诱导型一氧化氮合成酶（induciblenitric oxide synthase,iNOS）、神经型一氧化氮合成酶（neu-ronal nitric oxide synthase,nNOS）、内皮型一氧化氮合成酶（endothelial nitric oxide synthase,eNOS）、视黄醛脱氢酶（retinaldehyde dehydrogenase,RALDH）、醛脱氢酶（aldehydedehydrogenase,ALDH）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fi-broblast growth factor,bFGF）、转化生长因子β（transforminggrowth factor-β,TGF-β）的mRNA在正常对照眼、自身对照眼和近视眼视网膜Müller细胞中的表达情况。数据分析采用One-way ANOVA检验。结果眼罩遮盖10d后,遮盖眼眼轴延长,近视形成。酶消化法成功培养出视网膜Müller细胞。正常对照眼、自身对照眼和遮盖眼视网膜Müller细胞均阳性表达nNOS、bFGF、TH、TGF-βmRNA,且遮盖眼表达nNOS、bFGF和TGF-βmRNA上调（P〈0.05）,TH mRNA下调（P〈0.05）。iNOS mRNA仅在遮盖眼视网膜Müller细胞阳性表达。三组视网膜Müller细胞均不表达eNOS、RALDH和ALDHmRNA。结论豚鼠近视眼视网膜Müller细胞表达nNOS、iNOS、bFGF和TGF-βmRNA上调,TH mRNA下调。Müller细胞是近视眼视网膜信号因子一氧化氮（nitric oxide,NO）、多巴胺（dopamine,DA）、bFGF和TGF-β的一个重要来源。     

新生大鼠视网膜Muller细胞原代培养方法的改良

背景目前,视网膜Muller细胞的干细胞特性日益受到关注,优化Muller细胞的培养方法对视网膜干细胞治疗的进一步研究具有重要意义。目的对视网膜Muller细胞的原代培养方法加以改良,建立一种简单、有效的实验室分离纯化Muller细胞的方法。方法取新生SPF级SD大鼠眼球,培养基浸泡后室温条件下避光过夜,显微镜下分离视网膜,直接吹打成微小组织悬液后接种于培养瓶中,8～10d后行第1次换液,之后2～3d换液1次,至细胞完全融合后进行传代。细胞形态一致后于光学显微镜下观察细胞的形态特征,免疫荧光法检测Muller细胞标志物谷氨酰胺合成酶（GS）和波形蛋白（Vimentin）的表达,进行细胞鉴定;采用流式细胞术对所得细胞进行纯度检测。结果原代培养的Muller细胞胞体狭长,细胞质丰富。传至3代的细胞95％以上对GS和Vimentin反应阳性,阳性染色主要位于细胞质和细胞核。Vimentin阳性染色主要位于细胞质。流式细胞仪检测显示传3代后99．7％的细胞GS表达阳性。结论采用Muller细胞改良法一流式细胞术对所得细胞进行纯度检测,简单可行,收获的细胞数量多、纯度高。     

PKC对豚鼠近视眼视网膜Mller细胞近视因子基因的调控作用

目的研究蛋白激酶C（PKC）对豚鼠近视眼视网膜Mtiller细胞中酪氨酸羟化酶（TH）、诱导型NO合成酶（iNOS）、神经型NO合成酶（nNOS）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、转化生长因子B（TGFl3）基因表达的调控作用。方法眼罩遮盖法建立豚鼠近视眼模型,酶消化法原代培养其视网膜Müller细胞,GFAP免疫组织化学染色进行细胞鉴定。根据干预因素不同,把Müler细胞分为正常对照组、近视组、近视＋GF109203X组、近视＋PMA组和近视＋DMSO组。RT—PCR检测TH、iNOS、nNOS、bFGF和TGFβmRNA的表达情况。结果与正常对照组比较,近视眼视网膜Mtiller细胞iNOS、nNOS、bFGF和TGFβmRNA表达上调,THmRNA表达下调（P〈0．05）。PKC激活剂（PMA）激活PKC后,近视眼视网膜Müller细胞表达nNOS、iNOS、TH和bFGFmRNA上调（P〈0．05）;GF109203X抑制PKC活性后,这些因子的mRNA表达下调（P〈n05）。结论豚鼠近视眼视网膜Müller细胞nNOS、iNOS、bFGF和TH基因的表达受PKC调控,Müller细胞可能为近视信号因子的一个重要来源。     

缺氧对视网膜Muller细胞上水通道蛋白-4表达的影响

目的利用体外培养的视网膜Muller细胞，研究在缺氧条件下视网膜Muller细胞上水通道蛋白-4（AQP-4）表达的变化。方法采用组织块培养法从新西兰大白兔视网膜中获取Mullerr细胞，在含20％胎牛血清的DMEM培养液中原代培养，培养的细胞通过胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫细胞化学染色及透射电子显微镜进行鉴定。取第2代细胞进行实验，将化学缺氧诱导剂CoCl，联合DMEM培养液培养24h的细胞作为缺氧组；将DMEM培养液单独培养24h的细胞作为对照组。采用免疫细胞化学法及半定量RT．PCR法分别检测2组Muller细胞上AQP-4蛋白及AQP-4mRNA的表达。结果Muller细胞（第2代）上GFAP的阳性率为90％以上，细胞质染色呈棕色。细胞内含特征性的中间丝，细胞表面有微绒毛，细胞质内含丰富的细胞器。CoCl，联合DMEM培养液培养24h后Muller细胞上AQP-4蛋白的表达较对照组明显增加（t=6．74，P〈0．05）；AQP-4mRNA的表达亦明显增加（t=21．79，P〈0．05）。结论缺氧能增强Muller细胞上AQP-4的表达，进而使视网膜内液体的积聚增加。提示Muller细胞在糖尿病视网膜病变（DR）或增生性视网膜病变的视网膜水肿形成过程中起重要作用。     

高糖对体外培养的视网膜Mǖller细胞活性的影响

背景视网膜Mǖiler细胞具有为视网膜组织提供营养、维持视网膜的正常结构等多种生理功能,研究发现Mǖiler细胞的病变会导致视网膜血管发生相应的改变。探讨高糖对视网膜Mǖiler细胞的影响对于糖尿病视网膜病变（DR）的发病机制研究具有重要意义。目的研究不同浓度的葡萄糖对体外培养的视网膜Mǖiler细胞活性的影响。方法取出生后10d清洁级SD大鼠的视网膜组织,用组织块培养法在含质量分数20％胎牛血清的DMEM培养液中体外原代培养Mǖiler细胞并传代,取第3代细胞用免疫组织化学法对细胞进行鉴定。将不同浓度（5．5、30．0、40．0mmol／L）的葡萄糖加入培养基中培养4d,MTT比色法测定各组波长570nm处Mǖller细胞的吸光度（A570）值,计算各组细胞的相对存活率;采用流式细胞仪检测各组Mǖller细胞的凋亡率。结果培养的细胞贴壁生长,呈长梭形;95％以上细胞神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）反应阳性。MTT比色法检测显示,正常葡萄糖组及30．0mmo／L、40．0mmol／L葡萄糖处理组Mǖller细胞A570值分别为0．24±0．01、0．21±0．03和0．20±0．02,总体差异有统计学意义（F=6．755,P〈0．05）。与正常葡萄糖组比较,30．0mmol／L、40．0mmol／L葡萄糖处理组A570值均明显降低,差异有统计学意义（q=0．645、0．486,P〈0．05）。流式细胞仪检测结果表明,正常葡萄糖组、30．0mmol／L和40．0mmol／L葡萄糖处理组Mǖller细胞凋亡率分别为（26．40±0．25）％、（30．19±0．16）％和（36．23±0．19）％,总体差异有统计学意义（F=294．530,P〈0．05）,与正常葡萄糖组比较,30．0mmol／L、40．0mmol／L葡萄糖组凋亡率均明显升高,差异有统计学意义（q=0．754、0．484,P〈0．05）。结论高浓度葡萄糖可抑制视网膜Mǖller细胞的生长并增加其凋亡率,葡萄糖的上述作用呈浓度依赖性。     

TGF—β2干预的缺氧状态下补肾活血剂对Muller细胞及谷氨酰胺合成酶活性的影响

目的观察在缺氧和（或）转化生长因子-β2（TGF—β2）干预条件对体外培养的Muller细胞活力以及谷氨酰胺合成酶（GS）的影响。方法用出生7d的SD大鼠体外培养视网膜Muller细胞，将第2代细胞在含20％胎牛血清的DMEM中培养24h后，换用无血清的DMEM孵育24h。分组为：空白血清对照组（20％正常SD大鼠血清的DMEM）；TGF—β2组（20％正常SD大鼠血清的DMEM及终质量浓度为150ng／L的TGF—β2）；模拟缺氧组（20％正常SD大鼠血清的DMEM及终浓度1．0mmol／L的连二亚硫酸钠）；TGF—β2＋缺氧组（20％正常SD大鼠血清的DMEM液、终浓度1．0mmol／L的连二亚硫酸钠和终质量浓度为150ng／L的TGF—β2）；中药血清组（20％中药SD大鼠血清的DMEM）；中药血清＋TGF—β2＋缺氧组（20％中药SD大鼠血清的DMEM、终浓度1．0mmol／L的连二亚硫酸钠和终质量浓度为150ng／L的TGF—β2）。以透射电镜观察视网膜Muller细胞超微结构、以490型酶标仪测定细胞外液乳酸脱氢酶（LDH）释放量及GS活性。结果在缺氧条件下Muller细胞的超微结构发生明显的改变，如：细胞核变形，固缩；细胞器破坏；微绒毛内糖原明显增多。与正常对照组比较，TGF-β2干预组、缺氧组、TGF-β2＋缺氧组的LDH释放量均明显增加（P〈0．05），缺氧组、TGF—β2＋缺氧组的GS活性均明显下降（P〈0．01）；与缺氧组比较，TGF-β2＋缺氧组的LDH释放量明显增加、GS活性明显下降（P〈0．05、P〈0．01）。补肾活血中药血清能降低24h及48h时正常以及TGF—β2与缺氧同时存在条件下LDH的释放量（P〈0．05），增强12h时正常条件下以及12h和24h时TGF-β2与缺氧同时存在条件下GS的活性（P〈0．05、P〈0．01）。结论TGF—β2可加重缺氧条件下Muller细胞活力与GS活性的降低；补肾活血中药含药血清能增强视网膜Muller细胞活力及GS活性。     

牛磺酸对低氧诱导的大鼠视网膜Müller细胞细胞骨架蛋白的影响

目的观察牛磺酸对低氧培养的视网膜Mller细胞特征性骨架蛋白的影响。方法体外纯化培养并鉴定大鼠视网膜Mller细胞,流式细胞技术检测低氧培养时牛磺酸干预对细胞周期的影响,免疫荧光法观察细胞中的胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、波形蛋白和S-100的变化。结果低氧降低Mller细胞24h活性,牛磺酸促进阻滞于G0/G1期的细胞进入S期和G2/M期。低氧引起Mller细胞GFAP和波形蛋白表达增强,S-100表达核质比降低。0.1、1、10mmol/L的牛磺酸预处理减弱低氧引起的GFAP和波形蛋白的过表达。S-100表达核质比在牛磺酸处理后趋于正常。结论低氧导致的Mller细胞特征性蛋白表达变化可被牛磺酸减轻或阻止。     

缺氧条件下高糖及高胰岛素对Mller细胞VEGF表达的影响

目的观察缺氧、高糖及高胰岛素对视网膜Muller细胞胞浆内血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法采用组织块悬浮贴壁法原代培养兔视网膜Miiller细胞,于正常和缺氧条件下分别分为对照组、高糖组、高浓度胰岛素组、高糖高浓度胰岛素组,通过AO／EB染色法观察不同缺氧时相Mtiller细胞的凋亡情况,免疫细胞化学染色测定各组Mailer细胞胞浆内VEGF的表达。结果免疫细胞化学技术测定结果显示缺氧条件下1、2、3d各实验组与对照组相比VEGF表达量增加差异均有统计学意义（P〈0．05）。缺氧2d、3d各实验组与正常条件下各实验组相比VEGF表达增加,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论缺氧条件下高糖及高胰岛素环境刺激Mtiller细胞VEGF表达作用增强。