细胞周期调控与肿瘤研究进展

近年来研究发现细胞周期调控异常与多种恶性肿瘤发生、发展和预后密切相关，细胞周期与肿瘤发病理论上的重大突破，形成对肿瘤治疗的新策略。本文对细胞周期网络调节系统与肿瘤发生、发展及治疗的关系作了综述。     

体外培养大脑皮质神经元加入淀粉样β蛋白25～35诱导细胞周期蛋白的异常表达

目的：观察加入神经毒性较强的淀粉样B蛋白25～35多肽片断诱导神经元表达细胞周期相关蛋白的变化，以及细胞周期相关蛋白表达与神经损伤之间的关系。方法：实验于2004-10／12在武汉大学医学院神经生物学实验室完成。取妊娠18d昆明小鼠，在无菌条件下分离胚脑皮质，制成单细胞悬液，在有血清培养基中培养。神经细胞进行神经元特异性烯醇化酶免疫荧光检测呈阳性后，第4天实验组加入4μL淀粉样B蛋白25～35(2g／L)继续培养，对照组加入4μL生理盐水，在第7天行免疫荧光检测，并分析细胞周期相关蛋白A和B1的表达。结果：实验组加入淀粉样B蛋白25～35继续培养3d后，神经元行细胞周期相关蛋白A和B1免疫荧光染色，神经元内分别出现蓝色颗粒(FITC荧光紊标记二抗)和红色颗粒(Cy3荧光紊标记二抗)，即细胞周期相关蛋白A、细胞周期相关蛋白B1在神经元内呈阳性表达。对照组细胞周期相关蛋白A和B1在神经元内呈阴性表达。结论：在体外神经细胞培养过程中，加入淀粉样B蛋白25～35后，细胞周期相关蛋白A和B1在神经元内异常表达，提示淀粉样B蛋白的毒性机制中有细胞周期机制或部分机制的异常激活。     

六亚甲基二乙酰胺对HL-60细胞细胞周期及其调节蛋白表达的影响

六亚甲基二乙酰胺(hexamethylene bisecetamide,HMBA)是一种极性诱导分化剂，已应用于临床治疗急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征(MDS)，但其诱导髓系白血病细胞分化的机制尚不清楚。本研究观察了HMBA对HL—60白血病细胞细胞周期及其调节蛋白表达的影响，以探讨其药理机制。用流式细胞术检测HMBA对HL—60细胞细胞周期分布和细胞周期蛋白D、E及p27表达的影响。用RT—PCR研究HMBA对细胞周期负性调控分子CKI p15，p16，p27基因mRNA表达的影响。结果表明，HMBA主要使HL—60细胞阻滞于G0/G1期，经HMBA处理后HL-60细胞胞浆内细胞周期蛋白E蛋白表达显降低，而细胞周期蛋白D和p27蛋白表达则显增高；未经HMBA处理的HL-60细胞p15，p16 mRNA均无表达；3mmol／L HMBA处理24小时后p15 mRNA出现弱阳性条带，48小时和72小时后出现强阳性条带，p16 mRNA则在48小时后出现弱阳性条带，72小时后出现强阳性条带；p27 mRNA在未经处理和处理后24，48和72小时后均出现强阳性条带，阳性程度无明显差异。结论：HMBA的药理机制之一可能是通过下调细胞周期蛋白E，上调p27蛋白的表达，同时使得p15，p16基因mRNA重获表达。阻滞HL—60细胞周期于G1期，从而发挥其抗增殖作用。     

应用紫杉醇脂质体治疗非小细胞肺癌术后淋巴结转移的临床观察

目的 评价非小细胞肺癌术后淋巴结转移应用紫杉醇脂质体与传统紫杉醇化疗的临床近期疗效和不良反应的差别.方法 将68例非小细胞肺癌术后发现淋巴结转移的患者分成两组:试验组37例,对照组31例.试验组应用紫杉醇脂质体(135 mg/m2)进行化疗,对照组应用传统紫杉醇(135 mg/m2)进行化疗.两组每周期均联合应用卡铂化疗,剂量为300 mg/m2,每3周为1周期.结果 68例患者均可评价疗效,试验组完全缓解(CR)5例(13.5％),部分缓解(PR) 13例(35.2％),总有效率48.7％.对照组CR 1例(3.2％),PR 6例(19.4％),总有效率29.0％,试验组疗效优于对照组(P＜0.05).主要不良反应为骨髓抑制、脱发、肌肉关节酸痛、消化道症状等,无严重过敏反应,试验组过敏反应、恶心、呕吐、肌肉关节痛的发生率低于对照组(P＜0.05).结论 对于肺癌术后淋巴结转移患者,紫杉醇脂质体有效率较传统紫杉醇药物高,而且紫杉醇脂质体出现毒副反应者明显减少,药物耐受性高.     

细胞周期蛋白G2 mRNA在急性白血病患者中的表达及临床意义

为了探讨急性白血病(AL)患者中细胞周期蛋白G2(cyclin G2)的mRNA表达及其临床意义,采用逆转录 聚合酶链反应(RT-PCR)法检测74例急性白血病患者及10例正常人骨髓细胞中的cyclin G2、G1和P53的mRNA 表达,对cyclin G2的阳性扩增产物进行序列分析。结果表明:①AL患者中cyclin G2的阳性率及mRNA表达水平 (52.7％,0.552±0.498)明显低于正常人(100％,1.953±0.675)(P<0.01)。②在初治的AL患者中,cyclin G2 阳性表达患者的完全缓解(CR)率高于阴性者(分别为69.2％和40％;P<0.05)。③耐药组AL患者cyclin G2的 阳性率(43.6％)明显低于敏感组(68.6％)(P<0.05)。④对初治28例CR的AL患者进行随访14.3个月(11- 18.5个月),11例cyclin G2低表达患者中有10例复发(90.9％),而17例cyclin G2高表达患者中有7例复发 (41.2％),两者之间有显著性差异(P<0.05)。结论:CyclinG2是影响AL患者CR的因素,其高表达可能是AL患 者良好预后的指标之一。     

周期蛋白D_1,B_1在子宫颈癌中的表达及其与临床病理间的关系

目的探讨CyclinD1,CyclinB1在子宫颈癌中的表达及其与临床病理间的关系。方法收集哈尔滨医科大学附属四院收治的38例子宫颈癌组织。采用S-P免疫组织化学法,选用CyclinD1,CyclinB1多克隆抗体,分别检测其在38例子宫颈癌中的表达率。结果 CyclinD1在38例子宫颈癌中的阳性表达率为76.32%,CyclinB1的阳性表达率为52.63%,CyclinD1的表达率高于CyclinB1,并且其表达差异有统计学意义(经Fisher确切概率法,P<0.05)。CyclinD1,CyclinB1两者的阳性表达率与淋巴结有无转移之间的关系:Cy-clinD1高于CyclinB1,但差异无统计学意义(经Fisher确切概率法,P>0.05)。结论 CyclinD1驱动细胞由G1期进入S期,促进细胞增殖,决定细胞周期进程的速度和方向,在子宫颈癌的发展过程中起着主要的作用。CyclinB1是在有丝分裂过程中起调控作用的周期蛋白,受着cyclinD1作用的影响。     

细胞周期蛋白依赖性激酶2及相关蛋白研究进展

在所有真核细胞中,细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin dependent kinase,CDK）调控着细胞周期各个环节的起始与进程,进而控制细胞的增生和凋亡。CDK2在20世纪90年代初鉴定并命名,是目前已发现的11个CDK成员中研究极为深入的细胞周期调控因子之一,在决定细胞周期进程中起着重要作用。     

体外培养大脑皮质神经元加入淀粉样β蛋白25～35诱导细胞周期蛋白的异常表达

目的:观察加入神经毒性较强的淀粉样β蛋白25～35多肽片断诱导神经元表达细胞周期相关蛋白的变化,以及细胞周期相关蛋白表达与神经损伤之间的关系。方法:实验于2004-10/12在武汉大学医学院神经生物学实验室完成。取妊娠18d昆明小鼠,在无菌条件下分离胚脑皮质,制成单细胞悬液,在有血清培养基中培养。神经细胞进行神经元特异性烯醇化酶免疫荧光检测呈阳性后,第4天实验组加入4μL淀粉样β蛋白25～35(2g/L)继续培养,对照组加入4μL生理盐水,在第7天行免疫荧光检测,并分析细胞周期相关蛋白A和B1的表达。结果:实验组加入淀粉样β蛋白25～35继续培养3d后,神经元行细胞周期相关蛋白A和B1免疫荧光染色,神经元内分别出现蓝色颗粒(FITC荧光素标记二抗)和红色颗粒(Cy3荧光素标记二抗),即细胞周期相关蛋白A、细胞周期相关蛋白B1在神经元内呈阳性表达。对照组细胞周期相关蛋白A和B1在神经元内呈阴性表达。结论:在体外神经细胞培养过程中,加入淀粉样β蛋白25～35后,细胞周期相关蛋白A和B1在神经元内异常表达,提示淀粉样β蛋白的毒性机制中有细胞周期机制或部分机制的异常激活。     

细胞周期依赖性蛋白激酶调节蛋白与脑肿瘤的研究进展

肿瘤是一类细胞周期性疾病(cellcycle disease)。细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK)的时相性激活是细胞周期调控机制的核心,其调节蛋白包括细胞周期蛋白(cyclin)、CDK抑制物(CKI)等。细胞周期蛋白发挥正调节作用,CKI发挥负调节作用。脑肿瘤发生、发展的主要机制与细胞周期蛋白和CKI的失衡有关。     

Cks1在P27蛋白泛素化降解过程中的作用

在细胞分裂周期中，Cks1蛋白参与并促进P27蛋白泛素化降解，从而解除其对细胞周期蛋白激酶的抑制作用，促使细胞通过G1／S转折期。在大部分肿瘤细胞中Cks1蛋白表达上调，P27蛋白过多泛素化降解，Cks1蛋白参与并促进P27蛋白泛素化降解与细胞周期调控和肿瘤发生发展关系密切。本文综述了Cks1蛋白参与P27蛋白泛素化降解的基础和临床研究进展。     

内质网分子伴侣Grp94的表达与细胞周期的关系

目的进一步分析正常组织来源的细胞系ＣＶ１和人大肠癌细胞系ＣＣＬ２２９的Ｇｒｐ９４的表达及其与细胞周期的关系。方法对细胞中ＤＮＡ和内质网分子伴侣Ｇｒｐ９４进行同时染色,进行双参数流式细胞术分析。结果两种细胞的Ｇｒｐ９４的表达情况相似,在细胞周期各时相中内质网分子伴侣Ｇｒｐ９４均有表达,Ｇ０＋Ｇ１期表达量较少,Ｓ期的表达量无明显增加,Ｇ２＋Ｍ期的表达量最高。结论Ｇｒｐ９４在细胞周期各时相的表达呈渐增的趋势,但在Ｓ期增加不明显,表明Ｇｒｐ９４的表达与细胞周期各时相的变化存在着密切的关系。     

PTEN蛋白在细胞周期调节中的作用

PTEN是第一个被发现的具有磷酸酶活性的抑癌基因，它能特异性地使3，4，5—三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3)去磷酸化，拮抗三磷酸肌醇激激(PI3K／AKT)信号转导系统，使细脆周期阻滞于G1期。也可通过灶性粘连激酶(FAK)途径和致细脆分裂素激活的蛋白激酶(MAPK)途径来调节细胞周期进展和细胞凋亡等，从而抑制多种肿瘤的发生和发展。在白血病细胞系中，PTEN基因通过直接或间接失活机制出现表达异常，其机制需进一步研究。     

三氧化二砷阻滞人Burkitt淋巴瘤细胞增殖和细胞周期作用及其相关机制

本研究探讨As2O3 对人Burkitt淋巴瘤细胞增殖和细胞周期的影响及相关的分子机制,为As2O3临床应用于Burkitt淋巴瘤的治疗提供依据。以人Burkitt淋巴瘤Namalwa细胞株为模型,用不同浓度As2O3作用不同时间,以MTT法、流式细胞术、RQ—PCR和Western—blot分别检测As2O3对细胞增殖、增殖周期和凋亡发生及细胞周期重要调节基因CyclinE、CDK2和P2I表达的影响。结果表明：As2O3显著抑制Namalwa细胞的生长增殖,并显示明显的浓度和时间依赖性;As20,明显阻滞Namalwa细胞于G1期,并显示明显的量效关系;As2O3诱导Namalwa细胞凋亡,呈现明显的作用浓度和作用时间依赖性;As2O3明显下调Namalwa细胞CyclinE、CDK2基因的转录及蛋白表达,明显上调CDK抑制蛋白P2j基因的转录及蛋白表达,且呈现出浓度依赖性。结论：As2O3明显抑制人Burkitt淋巴瘤细胞株Namalwa的生长增殖,此作用与As2O3阻滞细胞周期于G1期及诱导细胞凋亡有关,而As2O3对细胞周期的阻滞与其下调细胞周期的重要驱动基因CyclinE和CDK2的表达、上调CDK抑制因子P2I基因的表达密切相关。     

Cyclin D1表达与肿瘤关系的研究进展

近年研究表明细胞周期紊乱与细胞癌变已不再是两个分割的细胞事件.在细胞发生恶性转化过程中,除了癌基因/抑癌基因的正负调节失控外,细胞周期调控因子也是参与癌变过程的调节位点.已知的细胞周期蛋白(cyclins)至少有11种:cycli以、B1-2、C、D1-3、E、F、G及H.其中与肿瘤关系最密切的是D型cyclin.Cyclin D1作为细胞周期调节因子之一,其过度表达是多种人类原发性肿瘤的特征,对肿瘤的诊断及预后具有重要意义.     

细胞周期蛋白E在胃癌中的表达及其与细胞增殖活性的关系

目的：研究细胞周期蛋白Ｅ有胃部细胞中的表达与细胞增殖活性经临床病理因素的关系。方法：用免疫组织化学方法检测４０例胃部细胞中细胞周期蛋白Ｅ和Ｋｉ－６７的表达。结果：胃癌细胞中细胞周期蛋白Ｅ和Ｋｉ－６７表达阳性率分别为４５％和７２．５％,在细胞周期蛋白Ｅ阳性胃癌中Ｋｉ－６７阳性率明显高于细胞周期蛋白Ｅ阳性胃癌（Ｐ〈０．０５）。此外还发现细胞周期蛋白Ｅ在胃癌中的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和ＴＮＭ分期     

不同强度跑台运动对脑缺血大鼠学习记忆及细胞周期蛋白表达的影响

目的:探讨不同强度跑台运动预处理对脑缺血大鼠学习记忆及细胞周期蛋白表达的影响。方法:将80只健康雄性SD大鼠随机分为正常组(n=20)、模型组(n=20)、强度Ⅰ组(n=20)和强度Ⅱ组(n=20)。造模前2周开始对强度Ⅰ和强度Ⅱ组大鼠进行跑台运动训练,其中强度Ⅰ组设置为20m/min*30min,强度Ⅱ组使大鼠运动强度递增,在3min内由10m/min的速度提高到预定的19.3m/min的速度,保持速度直到力竭。用四血管阻断法(Pulsinelli 4VO法)制备全脑缺血模型,分别在建模后3h、6h、24h、48h进行HE染色法观察各组大鼠脑组织神经元细胞形态的变化情况,免疫组织化学染色法检测各组大鼠脑组织海马区细胞周期蛋白A(CyclinA)和细胞周期蛋白E(CyclinE)的表达情况。建模后48h大鼠在处死前采用水迷宫检测各组大鼠学习记忆功能。结果:与正常组比较,其他三组神经元存活数目显著减少,逃避潜伏期明显延长,穿台次数明显减少,差异均有显著性意义(P0.05)。其中,模型组神经元存活数目、穿台次数明显少于强度Ⅰ组(P0.05),显著高于强度Ⅱ组(P0.05),逃避潜伏期明显长于强度Ⅰ组(P0.05),显著短于强度Ⅱ组(P0.05)。与正常组比较,模型组各时间点CyclinA、CyclinE的表达水平明显增加(P0.05)。这两个因子的表达在模型组中多于强度Ⅰ组(P0.05),但明显少于强度Ⅱ组(P0.05)。结论:中强度的跑台运动可保护脑组织,改善全脑缺血大鼠学习记忆功能,但高强度的运动会产生不良反应,可能与调控全脑缺血再灌注大鼠细胞周期蛋白的表达有关。     

细胞周期蛋白在恶性肿瘤中的表达及其在肿瘤治疗中的作用

细胞周期蛋白（Cyclins）是细胞周期调节的核心分子,与细胞周期蛋白依赖性激酶（CDKs）、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子（CKIs）等组成细胞周期调控网络系统。细胞周期调控机制的异常与肿瘤的发生发展密切相关,细胞周期蛋白的异常表达与CDKs结合形成的复合物,将导致细胞周期紊乱、细胞增殖失控,最终促使多种细胞癌变。Cyclins在多种恶性肿瘤中高表达,并在肿瘤的治疗中发挥重要作用。     

细胞周期相关因子geminin及其临床意义

随着分子生物学的飞速发展,人们对细胞周期相关因子geminin的深入研究已经成为热点,对geminin的生物学特性有了较深入的认识,现对geminin蛋白的产生、功能、调控机制及临床意义做一综述。