胶体金免疫层析法与酶联免疫吸附法结合使用在乙型肝炎检测中的应用

胶体金免疫层析法与酶联免疫吸附法(ELISA)单独用于乙型肝炎的检测,已广泛应用于临床。由于二者标记物、灵敏度、特异性等方面的不同,在检测方面体现出不同的优缺点,二者结合使用,在乙型肝炎检测中,尤其在乙型肝炎特殊模式出现时,给临床检验带来了很大的方便。1　材料与方法1 1　标本来源选择2 0 0 1 2～2 0 0 3 2两年内临床上经ELISA法检测的两对半(乙肝5项)不同模式血清35 6份,其中不同模式血清份数如表1。1 2试剂、方法HBsAg检测免疫金标试纸条:MaysunClinicalRe agentCenter　Lot:0 30 12 8　Exp :0 7 2 0 0 4HBsAg检测ELISA…     

登革热病毒快速检测NS1抗原和IgG/IgM抗体的临床应用评价

目的采用胶体金免疫层析法(GICA)检测登革热病毒(DENV)NS1抗原和/或IgG/IgM抗体,初步评价其临床应用效果。方法将2633例经聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法检测DENV核酸的血清样本分为3组:Ⅰ组为948例样本,用GICA检测NS1抗原;Ⅱ组为1156例样本,用GICA检测IgG/IgM抗体;Ⅲ组为529例样本,用GICA同时检测NS1抗原和IgG/IgM抗体。另5例流行性出血热抗体阳性样本、4例风疹/麻疹抗体阳性样本和50名健康人群样本为Ⅳ组,用GICA检测NS1抗原和IgG/IgM抗体。结果Ⅰ组结果与PCR结果相比,阳性、阴性、总体符合率分别为89.09%、92.41%、89.87%(P0.01);Ⅱ组结果与PCR结果相比,阳性、阴性、总体符合率分别为64.68%、66.41%、64.88%(P0.01);Ⅲ组结果与PCR结果相比,阳性、阴性、总体符合率分别为93.56%、61.82%、86.96%(P0.05),Ⅲ组中有419例样本经PCR检测结果为阳性,NS1抗原阳性率为85.20%,IgG/IgM抗体阳性率为63.25%,NS1抗原和/或IgG/IgM抗体阳性符合率为93.57%;Ⅳ组结果均为阴性,特异性为100%。结论GICA对NS1抗原和IgG/IgM抗体的联合检测结果与PCR检测结果较接近,且特异性良好,可用于DENV感染的早期辅助诊断和筛查。     

化学发光免疫分析法快速检测血清登革热病毒NS1 抗原方法的建立及初步应用评价

目的 建立一种化学发光免疫分析法( chemiluminescence immunoassay,CLIA) 用于血清中登革热病毒（denguevirus,DENV）NS1 抗原的定量检测。方法 先制备NS1 单抗与吖啶酯发光剂的偶联物,同时活化磁珠并标记抗NS1的配对单抗,基于双抗体夹心检测方法的技术原理构建定量检测血清中NS1 抗原浓度的化学发光检测方法。通过对其灵敏度、特异度和参考区间等试验评估其检测性能。取85 例临床确诊的登革热阳性血清样本和20 份健康志愿者阴性血清样本,采用美国Cortez 公司的登革热NS1 快速检测试剂盒和该方法进行临床样本验证。结果 该方法对血清中NS1抗原的检测灵敏度为1.12ng/ml,线性范围在0.1 ～ 1 000ng/ml;与血清中常见干扰物质的交叉反应率均低于2%,检测特异度较好;参考区间的cut off 值为3.66ng/ml;对临床样本的检测准确度较高,与Cortez 公司NS1 检测试剂盒比较无显著性差异（χ2 检验P=1.000,一致性检验,Kappa=0.876）。结论 建立了一种可定量检测血清中登革热病毒NS1抗原的CLIA 法,该方法具有高灵敏度、高准确度、操作简单和方便快捷等优点,有望为登革热临床样品的早期准确筛查提供一种新的选择。     

胶体金免疫层析法在HBsAg检测中的应用评价

胶体金免疫技术是八十年代继三大标记技术（荧光索、放射性同位素和酶标记）发展起来的固相标记免疫测定技术，该法优点是可单份测定，简单快速。2005年卫生部门要求所有做胃镜与肠镜患者检测前必须进行HBsAg检测，因时间关系，这部分病人均采用GICA进行。GICA能否取代ELISA，成为至关重要的一个问题，现将两种方法检测HBsAg进行比较，结果报告如下。     

登革热不同病程中核酸、NS1抗原及IgM/IgG抗体测定的价值

目的探讨核酸、NS1抗原和Ig M/Ig G抗体在登革热(DF)不同病程中的检测价值,为合理选择DF检测项目提供科学依据。方法以开始发热为病程第1天,收集138例DF住院患者不同病程的血清标本共254例,以实时荧光PCR法检测登革病毒核酸,免疫层析法分别检测登革病毒特异性NS1抗原和Ig M/Ig G抗体,分析这4个指标在DF不同病程中的诊断价值。结果核酸总阳性率为78.7%,其中第1~5天核酸阳性率均为100%,第6天开始下降;NS1总阳性率为85.4%,第1~8天均大于80%,第9天开始降低;Ig M抗体总阳性率为68.9%,从第3天开始检出,第5天以后大于80%;Ig G抗体总阳性率为28.7%,第1~7天阳性率均低于20%,第8天开始迅速升高。第1~8天核酸联合NS1检测阳性率均为100%,第7天开始NS1联合Ig M/Ig G检测阳性率为100%。结论核酸、NS1和Ig M/Ig G抗体分别适用于病程早期、中期和后期的检测,而病程早中期核酸联合NS1、后期NS1联合Ig M/Ig G可以实现100%的检出率。     

酶联免疫吸附试验测定HBsAg弱阳性标本的处理

目的探讨基层医院对乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)弱阳性标本的处理。方法用胶体金层析法和酶联免疫吸附试验(ELISA)双孔法对HBsAg弱阳性标本复查。结果 63份初筛ELISA弱阳性标本中,立即采用胶体金层析法复查,查出47份阳性,第2天用ELISA双孔法对63份标本再次复查,查出51份阳性,其中有2份继续为弱阳性,假阳性12份。结论基层医院对HBsAg弱阳性标本首先用胶体金层析法复查,复查阴性者可采用ELISA双孔法再次复查。     

胶体金法与酶联免疫吸附试验筛查人类免疫缺陷病毒临床应用评价

目的了解胶体金法和酶联免疫吸附试验(ELISA)的临床应用和价值,为实验室筛查人类免疫缺陷病毒(HIV)提供试剂选用依据。方法采用胶体金法和ELISA同时对4 599例监测对象的标本进行检测,阳性反应标本用Western blot确证。结果胶体金法和ELISA阳性率分别为5.04%和5.31%。确证后阳性率分别为4.37%和5.26%,两种方法检测结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。胶体金法和ELISA的灵敏性分别为86.64%和99.18%。结论 ELISA具有较高的敏感性,用于筛查HIV感染者可降低漏检率。     

探讨胶体金免疫层析法检测呼吸道病原体抗原的意义

目的:探讨胶体金免疫层析法(GICA)检测呼吸道病原体抗原的意义,为临床提供快速诊断依据.方法:回顾性分析2019年4月～2020年1月常州市第一人民医院1442例呼吸道感染患者的实验室数据,记录并分析包括肺炎支原体(MP)、腺病毒(ADV)、甲型流感病毒(FluA)、乙型流感病毒(FluB)和呼吸道合胞病毒(RSV)...     

不同抗原用于酶联免疫法对结核病的诊断价值

目的：探讨采用不同抗原的酶联免疫法对结核病的诊断价值。方法：分别以人型结核菌纯蛋白衍化物（PPD）与脂阿拉柏酸甘露聚糖（LAm）作为抗原,用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清结核分枝杆菌抗体在各类结核病及非结核病患者中的敏感性和特异性。结果：以PPD为抗原ELISA方法的敏感性为79.7%,特异性为53.2%;以LAm为抗原ELISA方法的敏感性为86.4%,特异性为82.2%。结论：酶联法检测抗结核抗体的主要关键在于抗原。     

酶联免疫吸附试验测定α1-酸性糖蛋白

为了建立α１－酸性糖蛋白测定方法。以α１－酸性糖蛋白纯品免疫家兔，得抗α１－酸性糖蛋白抗体，用双抗体夹心酶联免疫吸附技术测定血清及体液α１－酸性糖蛋白。方法线性为０．０５～５ｍｇ／Ｌ，批内变异系数平均为５．６％，批间变异系数平均为９％，平均回收率为１０３％。该方法操作简便，测定只需５０分钟，可用于血清和体液α１－酸性糖蛋白的临床常规测定     

ELISA法和荧光免疫层析法检测马尔尼菲蓝状菌抗原的应用价值

目的评价双抗体夹心ELISA法和荧光免疫层析法检测马尔尼菲蓝状菌Mp1p抗原的临床应用价值。方法用ELISA法和荧光免疫层析法检测335例住院患者血清中的马尔尼菲蓝状菌抗原,比较2种方法检测结果与血培养结果的一致性。结果以血培养结果为金标准,ELISA与荧光免疫层析法检测马尔尼菲蓝状菌抗原的敏感性分别为75.0%和78.1%,特异性均为100%,准确度分别为97.6%和97.9%,Kappa值分别为0.844和0.866。结论双抗体夹心ELISA法和荧光免疫层析法检测马尔尼菲蓝状菌抗原快速、简便,结果可靠,适用于临床急性期马尔尼菲蓝状菌感染的辅助诊断。     

流行性乙型脑炎病毒IgG抗体捕获酶联免疫吸附试验检测方法的建立

目的利用流行性乙型脑炎(乙脑)病毒特异性单克隆抗体建立检测人血清中乙脑病毒IgG抗体的捕获ELISA方法。方法将乙脑病毒特异性单克隆抗体包被在固相载体上,加入灭活并经过纯化的乙脑病毒抗原,再加入待测血清,经洗涤、显色等判定最终检测结果。采用免疫荧光法作为对照。结果与免疫荧光法相比较,本方法的灵敏度为95.6%,特异度为85.7%,一致性为91.3%;本方法的灵敏度和特异度高于市售的两种检测试剂。结论本研究所建立的乙脑病毒IgG抗体捕获ELISA方法具有良好的检测性能,可以应用于正常人群血清中乙脑病毒IgG抗体的筛查。     

金标层析法与酶联免疫吸附试验初筛 HIV1＋2型抗体对比分析

目的：对金标层析法（GICA）试剂和酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂初筛 HIV1＋2进行对比分析,评估GICA试剂的品质,并将筛查出阳性血清进行免疫印迹试验（WB）确认,探讨筛查结果与WB试验结果的关系。方法选用市面上口碑较好的5个厂家的艾滋病病毒（HIV ）抗体GICA快速筛查试剂与ELISA HIV抗体初筛试剂平行检测16780例血清标本,初筛阳性血清送疾控中心用WB试验做确认,对WB试验结果不确定者进行4、8周随访检测,8周随访标本补充HIV-1病毒载量检测。结果7种试剂敏感性为99．23％～100．00％,其中3种GI-CA试剂在敏感性上已经达到ELISA试剂的水平（100％）,假阳性率为0．08％～0．12％,功效率均在99．80％以上,282例初筛阳性血清经WB法确认有260例为阳性,5例不确定血清经随访检测确定均为阴性,初筛试剂阳性率可达92．20％。结论 GICA检测试剂筛检HIV抗体检测敏感性、特异性和功效率均较高,某些厂家生产的试剂在敏感性、特异性方面已经达到了ELISA试剂的水平,且快速、简便、价廉,是理想的HIV抗体筛查试剂。     

胶体金免疫层析法检测HBsAg在献血初筛中的应用

随着《献血法》的实施,无偿献血在全国范围内推行。为确保临床用血安全,人们越来越重视用血前血液质量的检查。由于本市自然人群ＨＢｓＡｇ阳性率在１２%左右,为减少现场献血由于ＨＢｓＡｇ阳性而造成血源的浪费,适应某些特定场合采血要求快速检测的特点,笔者用胶体金免疫层析测定(ＧＩＣＡ)试剂作现场无偿献血者ＨＢＳＡｇ的初筛,探讨ＧＩＣＡ试剂的应用价值。材料和方法一、材料１．检测ＨＢｓＡｇ的ＧＩＣＡ试条:北京万泰生物药业有限公司(批号２００００１２５)。２．检测ＨＢｓＡｇ的ＥＩＡ试剂盒:北京万泰生物药业有限公司(批号２０…     

酶联免疫吸附试验的影响因素分析及控制方法

酶联免疫吸附试验（ELISA）是一种非均相免疫分析技术，具有操作简便、特异性强、重复性好等优点，广泛用于各种抗原和抗体的检测，是目前临床实验室主流的免疫学检测方法。但由于影响ELISA的因素较多，用适当的方法控制影响因素是保证实验准确性的重要手段，本文详尽分析了试验的影响因素及控制方法，以期同行参考。     

胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒抗原快速检测结果分析

目的分析胶体金免疫层析法对呼吸道合胞病毒(RSV)抗原快速检测的灵敏度和特异度。方法用RSV抗原检测试剂盒(胶体金免疫层析法)对197例疑似RSV感染患者的鼻咽抽吸物或鼻咽拭子标本进行检测,以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)核酸检测结果为参考,比较胶体金免疫层析法对不同类型标本和不同年龄组患者的灵敏度。结果 197例患者标本中经RT-PCR检测,95例(48.2%)为阳性。以RT-PCR核酸检测结果为标准,胶体金免疫层析法的灵敏度和特异度分别是34.7%和100%。该方法对鼻咽抽吸物的阳性检出率较鼻咽拭子高(36.2%对8.6%,P<0.01),鼻咽抽吸物标本的灵敏度明显高于鼻咽拭子(22.1%对12.6%)。RSV检出率与年龄呈负相关(P<0.01),1岁以下患儿的阳性检出率最高(29.5%),而在>5岁患儿中阳性检出率为0。结论胶体金免疫层析法对1岁以下幼儿的鼻咽抽吸物中的RSV有较好检测效果,可辅助临床进行早期筛查。但鉴于该方法灵敏度较低,且适用于5岁以下儿童,临床上还需用RT-PCR对RSV进行确认和补充检测,以免漏诊。     

免疫层析法用于甲型H1N1流感病毒抗原筛查的初步评价

目的 评估免疫层析法检测甲型H1N1流感病毒抗原的准确性,推广免疫层析法在甲流H1N1抗原检测中的临床应用.方法 收集2009年8至12月广东省中医院356例甲型H1N1流感疑似患者的鼻拭子标本,采用免疫层析法进行甲型H1N1流感病毒抗原的快速检测,同时将患者咽拭子送往广州市疾病预防控制中心(CDC)进行甲型H1N1流...     

酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎病毒抗体在酶标仪应用中的探讨

目的探讨酶联免疫吸附试验在检测丙型肝炎病毒抗体中的敏感性和特异性。方法采用TECAN半自动酶标仪及配套的洗板机,以天津市临检中心提供的质控血清为参照,使用上海科华丙型肝炎病毒抗体酶免疫检测试剂盒,对阳性标本采用胶体金快速吸附法同时检测,对同一标本,在同一时间和同一温度下采用半自动酶标仪及肉眼判读。结果酶标仪判读阳性率高于肉眼判读,同时高于胶体金快速吸附法。结论酶标仪检测结果优于肉眼判读结果,洗板机洗板优于手工洗板,但应选择合适的洗板次数。     

胶体金标记免疫层析试纸条在儿童HbsAg检测中的应用评价

目的 :寻求一种灵敏快速易懂的儿童血检法。方法 :试用一种胶体金标记免疫层析 (CIA)试纸条 ,一步法快速、定性检测 196 5例儿童未梢全血中乙型肝炎病毒表面抗原 (HbsAg)。结果 :胶体金标记免疫层析试纸条与全血中的HbsAg具有特异性的结合能力 ,阳性检出率达 95 .0 0 % (5 7/ 6 0 )。对HbsAg灵敏度高达 2ng/ml,不出现前带现象 ,接近EIA法。经胶体金标记免疫层析试纸条检出的 6 7例阳性儿童 ,再行静脉抽血用EIA法进行第二次复查比较 ,6 7例标本HbsAg全部呈阳性 ,阳性符合率达 10 0 %。结论 :胶体金标记免疫层析试纸条特异性强 ,灵敏度高 ,简便快速 ,结果易懂 ,无需特殊仪器设备 ,适合广大基层门诊 ,尤其大面积的儿童HbsAg的普查 ,街头无偿献血等过筛应用。