猪苓多糖对小鼠NK,LAK活性的影响

猪苓多糖2mg/只,rIL—2 5×1~4U/只,腹腔注射C57BL/6小鼠,连续9天,能明显抑制小鼠皮下移植性B16恶性黑色素瘤的生长,与对照组及单用rIL—2组比较有显著性差异(P<0.05～0.01)。~3H—TdR掺入法检测小鼠脾细胞NK及内源性LAK活性,发现只有猪苓多糖 rIL—2组的NK及内源性LAK活性提高显著(P<0.05),其它单用猪苓多糖与rIL—2两组的NK及内源性LAK活性增加不显著(P>0.05)。说明猪苓多糖与rIL—2有协同作用,猪苓多糖可作为生物反应调节剂(BRM),用于LAK/rIL—2为主的肿瘤生物学疗法。     

胸腺因子D对LAK细胞活性诱导的影响

本文报道利用ＭＴＴ法和４小时５１Ｃｒ释放法，在有或无ＩＬ－２存在的情况下，研究了ＴＦＤ对正常人ＰＢＭＣ体外增殖、ＬＡＫ活性诱导的影响。结果表明：单纯ＴＦＤ不能促进静止的淋巴细胞增殖，也不能诱导出高活性的ＬＡＫ细胞，但可促使经ＩＬ－２活化的淋巴细胞进一步增殖如先用ＩＬ－２活化淋巴细胞２４小时，再加入ＴＦＤ联合诱导，第４天时，ＬＡＫ活性可达８１．３±６．５％，明显高于单用ＩＬ－２组（Ｐ＜０．０１）。     

硒对LAK细胞活性的影响及其机理研究

研究了硒在体外对LAK细胞活性的影响及作用机理,结果证明在LAK细胞的诱导阶段加入10~5～10mol/L亚硒酸纳能增强LAK细胞的杀伤和增殖活性。采用流式细胞仪测Tac(IL—2Rα)表达,Slot-Blot检测硒对LAK细胞的IL—2RαmRNA水平的影响,结果表明硒能增强LAK细胞的Tac抗原表达和IL-2RαmRNA的水平,提示硒可能通过促进Tac的表达增强了LAK细胞对IL—2的敏感性,从而提高了LAK细胞的增殖及杀伤活性。因此硒可望作为一种新型的免疫调节剂用于抗肿瘤治疗。     

胰岛素对LAK细胞的增殖和杀伤活性的影响

LAK细胞调节因素的研究对揭示LAK细胞的内在规律以及免疫过继疗法的开展与完善均具有重要意义。实验发现胰岛素能促进LAK细胞的增殖,提高细胞的产率,但是胰岛素不能替代IL-2使经短期IL-2刺激的淋巴细胞继续增殖。胰岛素还能促进LAK细胞表面IL-2R的表达。这可能是胰岛素促进LAK细胞增殖的重要机制。     

抵抗LAK细胞杀伤的胃癌细胞株的建立及生物学特性的研究

人胃癌细胞系ＭＧＣ－８０３经反复与ＬＡＫ细胞共培养十个周期，获得对ＬＡＫ细胞杀伤抵抗的特性，命名该细胞变株为ＭＧＣ－８０３Ｒ。当效靶比为４０∶１时，对该细胞变株的杀伤率仅为４０％，而对亲代细胞的杀伤率为９０％。用“冷”靶细胞抑制试验、电镜、ＦＡＣＳ及荧光标记技术分析，证实ＭＧＣ－８０３Ｒ细胞膜结合识别位点有改变，ＭＨＣ－Ⅰ表达升高，ＩＣＡＭ－１表达降低，相互粘附的细胞数减少，胞内Ｆ肌动蛋白小体消失，微丝恢复有序排列，细胞生长速率减慢。上述结果提示经免疫筛选对杀伤有抵抗的ＭＧＣ－８０３Ｒ细胞在生物学特性上有所改变。     

LAK及TIL对靶细胞杀伤活性中效靶作用的细胞表面物质基础

在ＬＡＫ及ＴＩＬ杀伤靶细胞过程中介导效靶作用的细胞表面分子主要包括细胞粘附分子（ＣＡＭ）群类中的各种分子，其它一些尚未鉴定分属ＣＡＭ大类的糖蛋白，糖脂，层粘连层白（ｌａｍｉｎｉｎ）类似物和波形纤维蛋白（ｖｉｍｅｎｔｉｎ）类似物等。这些分子是效靶特异识别，结合的物质基础。虽然ＴＩＬ较ＬＡＫ杀伤活性呈现对靶细胞的特异性，但两者均存在不同程度的非特异性。本文以介绍ＬＡＫ及ＴＩＬ杀伤活性中效靶作用的细胞…     

免疫杀伤细胞治疗对恶性肿瘤患者T淋巴细胞免疫功能的影响

目的 探讨链式激活和诱导的免疫杀伤细胞(CAPRI细胞)治疗对肿瘤患者T淋巴细胞免疫功能的影响.方法 接受CAPRI细胞治疗的滨州医学院附属医院肿瘤内科收治的50例恶性肿瘤患者为研究对象(肿瘤组),同时选择体检健康者30例为对照组,用流式细胞术检测所有患者治疗前后外周血T淋巴细胞CD3+及CD4+、CD8+的百分率,计算CD4+/CD8+比值并进行比较.结果 肿瘤患者治疗前外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+[ (56.40±7.14)％、(30.69±8.01)％、(29.10±7.13)％、1.05 ±0.28]与健康对照组[(66.78±6.05)％、(41.35±5.71)％、(26.08±5.36)％、1.59±0.31]及治疗后13 d[ (59.35±6.31)％、(34.95±7.21)％、(27.95±6.03)％、1.25±0.22]和治疗后25d[(62.36±6.41)％、(37.03±7.62)％、( 25.04±4.53)％、1.46±0.48]比较,CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明显降低、CD8+均明显升高(均P＜0.05);治疗后25d与治疗后13d比较,CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明显升高、CD8+均明显降低(均P＜0.05).结论 CAPRI细胞治疗肿瘤,能够纠正CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+失衡状态,能够调节机体T淋巴细胞的免疫功能.     

不同激活方式影响细胞因子诱导杀伤细胞的扩增与活性

目的：研究不同激活方式对CIK细胞(Cytoline-induced killer cells，CIK)体外扩增的影响。方法：使用植物血球凝集素(pHYTOHEMAGGLUTININ，PHA)或抗CD3单抗刺激细胞增殖，从脐血单个核细胞定向诱导CIK细胞，用乳酸脱氢酶(LDH)分析法分析细胞毒活性，用流式细胞分析法对不同培养条件下CIK细胞的纯度进行分析。结果:使用抗CD3 mAb刺激生成的CIK细胞在扩增能力、纯度和细胞毒性方面都优于使用PHA刺激生成的CIK细胞。在细胞因子和有丝分裂原加入3d后，将其洗脱，但仍加入IL-2，有利于提高细胞的扩增能力。另外，使用包被的方法将抗CD3 mAb固定在孔板上比悬浮加入效果好。结论：这一结果对于CIK细胞的大量扩增和临床应用具有指导意义。     

淋巴因子激活的LAK／TIL细胞的表型

为研究肿瘤生物疗法中淋巴因子激活的杀伤细胞及其功能和特征与表型之间的关系，用流式细胞术（ＦＣＭ）结合抗体双荧光标记法对培养的淋巴因子激活杀伤细胞作连续的多项表型监测，发现存在着ＣＤ３－ＣＤ１６＋ＣＤ５６＋型，ＣＤ４＋型，ＣＤ８＋ＣＤ２８＋型，ＣＤ８＋ＣＤ２８－型的淋巴因子激活杀伤细胞的亚型。研究了ＣＤ３－ＣＤ１６＋ＣＤ５６＋亚型、ＣＤ８＋ＣＤ２８＋亚型的杀伤活性，显示了对不同的肿瘤靶细胞有不同的敏感性。     

IL-7对PHA-抗CD3 LAK细胞抑制效应的研究

文章将IL 7与IL 2 ,PHA及αCD3联用诱生PHA αCD3LAK细胞 ,应用活细胞计数、MTT和APAAP等方法测定了细胞增殖活性、mIL 2R的表达、外源性IL 2的消耗、细胞毒活性和效应细胞表型等指标 ,并分析比较了IL 7的加入对以上指标的影响。结果表明IL 7的加入使PHA αCD3LAK细胞消耗IL 2的量、mIL 2R表达的量和细胞的增殖能力降低 ,细胞毒活性减弱 ,并伴有CD8+ 细胞百分率的下降。这一结果呈现出的IL 7的抑制作用尚未见报道 ,有进一步研究的价值。     

猪苓多糖与IL—2协同诱导PBMC杀伤肿瘤细胞活性的实验研究

研究了猪苓多糖与ＩＬ－２协同诱导人外周血单个细胞成为具有较高杀伤肿瘤活性的细胞，其培养体系总杀伤单位明显高于ＬＡＫ细胞，其诱导细胞的杀伤活性可能与其分泌ＩＦＮ和ＴＮＦ有关。此研究为ＰＵＰＳ与ＩＬ－２协同诱导细胞的进一步研究和临床应用打下理论基础。     

Age-associated decline in IL-2 and IL-12 induction of LAK cell activity of human PBMC samples

Previously we reported that young and elderly natural killer (NK) cell activity against the standard NK sensitive K562 cell line can be augmented to the same degree by IL-2 and IFN-. We have extended these studies to include IL-12. Similar to IL-2 and IFN-, IL-12 can enhance NK cytotoxicity to the same degree in both young and elderly samples over a wide range of doses and incubation times when K562 cells are used as targets. However, in contrast to our findings with the NK system, we have observed that induction of lymphokine activated killer (LAK) cell activity, as defined by the ability of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) samples to lyse the normally NK resistant Daudi cell line, was significantly decreased in the elderly samples compared to young samples. Comparable age-associated differences were observed in LAK activity after induction with IL-2, IL-12, and IFN- at varying doses and incubation times. We hypothesize an age-associated deficiency either in the mechanism of LAK induction or in target cell recognition.     

氧化苦参碱对LAK细胞活性的影响

ＬＡＫ细胞具有很强的广谱杀瘤作用，而氧化苦参碱具有较强的免疫抑制作用。本文研究了氧化苦参碱对ＬＡＫ细胞活力的影响，结果表明：氧化苦参碱可抑制ＩＬ－２对小鼠脾细胞的促增殖作用，并且对ＩＬ－２活化ＬＡＫ细胞杀伤Ｐ８１５的能力也有抑制作用。当ＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）与２００μｇ／ｍｌ的氧化苦参碱共同孵育４ｄ后，可使ＬＡＫ细胞杀瘤能力（在效靶比为１００：１时）的８２．５％被抑制。同时氧化苦参碱本身对Ｐ８     

人LAK细胞体外抗肿瘤作用机理探讨

在对人LAK细胞体外杀伤作用研究的基础上,进一步探讨了该群细胞体外抗肿瘤的机理。实验结果证实,LAK细胞的杀伤是由多种因素参与的,杀伤时既有因子作用,又有直接接触杀伤。杀伤后靶细胞核破坏,DNA碎片释放到细胞外。在一定的培养时间内,LAK细胞的杀伤能力和细胞本身的增殖成正相关关系。     

冷冻保存对肝癌患者粘附性LAK细胞生物学特性的影响

为了观察冷冻保存对肝癌患者粘附性LAK (A LAK )细胞生物学特性的影响。我们采用苯丙氨酸甲酯 (PME )处理肝癌患者外周血单个核细胞 (PBMC )以制备A LAK细胞 ,并观察冷冻保存后A LAK细胞增殖能力、杀伤活性及细胞表型的变化。实验结果显示 ,A LAK细胞在冷冻复苏后的短时间内 ,增殖能力、杀伤活性均受到损伤 ,但随着IL 2的刺激而迅速恢复。至复苏后第 5天 ,冻存的A LAK细胞的杀伤活性明显高于未经冻存的新鲜A LAK细胞。而A LAK细胞的表面标志则在冷冻前后无显著性改变。因此 ,冷冻保存可促进肝癌患者A LAK细胞的免疫活性     

The immune system and serum glutamine during a triathlon

This study examined the influence of a triathlon on the immune system and on serum amino acid concentrations. Eight male triathletes swam 2500 m, bicycled 81 km, and ran 19 km. The concentration of total serum amino acids decreased during the race, with the lowest values occurring 2 h postexercise. Similarly, serum glutamine concentration declined from 468 (SEM 24) (prerace) to 318 (SEM 20) μmoll⁻¹ (2 h postrace) and the natural killer (NK) and lymphokine activated killer (LAK) cell activities were suppressed 2 h postexercise (P < 0.05). Blood mononuclear cell proliferation decreased during exercise with the lowest value observed after running. The leucocyte concentration increased during and after exercise due to an increase in the concentration of neutrophils and monocytes. There was no significant change in lymphocyte concentration during or after the exercise. The plasma concentration of interleukin-6 did not change and the plasma concentration of interleukin-1β and tumor necrosis factor-α were below detection limits. The LAK cell cytotoxicity, but not NK cell activity or proliferative response, was significantly correlated with serum glutamine concentrations (r = 0.39,P < 0.01). This study confirms that prolonged endurance exercise results in changes in the cytotoxic function of the NK and LAK cells as well as the proliferative response. The time-course of changes in serum glutamine concentrations were best parallelled by changes in LAK cell activities.     

双特异性抗体对LAK细胞增殖和细胞毒作用影响的体外研究

将抗ＣＤ３与抗ＨＢｓ的单克隆抗体经化学偶联得到双特异性抗体，观察该双特异性抗体对ＬＡＫ细胞增殖和增强细胞毒性的作用。结果显示双特异性抗体显著提高ＬＡＫ细胞与２．２．１５细胞结合率；促进淋巴细胞增殖。１２５Ｉ－ＵｄＲ释放试验检测发现双特异性抗体增强ＬＡＫ细胞对２．２．１５细胞的细胞毒性且与抗体浓度呈正相关。进一步对抗体的特异性研究表明，加入双特异性抗体后ＬＡＫ细胞对２．２．１５细胞毒性作用显著高于对照组。     

猪苓及猪苓多糖对BBN诱导的膀胱癌大鼠胸腺、脾指数及CD86表达的影响

目的观察猪苓及猪苓多糖(PPS)对BBN诱导膀胱癌过程中对大鼠胸腺、脾指数和膀胱组织免疫细胞浸润及CD86表达的影响,从而探讨其抗肿瘤作用中的免疫学机理。方法用N-丁基-N-4-羟丁基亚硝胺(BBN)和糖精水诱导建立Fisher344大鼠膀胱肿瘤模型,实验分6组即对照组、模型组、PPS组(130 mg.kg-1)及猪苓低、中、高剂量组(剂量分别为50、250、500 mg.kg-1)。用称重法测定大鼠的体质量和胸腺、脾脏质量,计算胸腺指数和脾指数;苏木素-伊红(HE)染色观察各组间质淋巴细胞浸润情况,免疫组化法观察各组大鼠膀胱组织CD86的表达情况。结果模型组大鼠胸腺指数显著降低(P<0.05);PPS组的胸腺指数明显高于模型组(P<0.05),猪苓各组脾指数与模型组比较差异无统计学意义。PPS组、猪苓低剂量和中剂量组淋巴细胞浸润较明显,可见淋巴滤泡形成;PPS组与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。模型组膀胱肿瘤组织中CD86弱表达或几乎不表达;PPS组膀胱癌上皮CD86表达明显增强,且癌旁上皮CD86有表达。结论猪苓和PPS可通过影响膀胱癌模型大鼠胸腺、脾指数和膀胱组织及癌旁组织淋巴细胞浸润及CD86表达,PPS的作用更显著,猪苓和PPS参与了抑制肿瘤的发生发展过程。