As2O3对人乳腺癌中NF-kB p65、survivin和caspase-3的作用及相关性研究

目的探讨As2O3对人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植瘤组织中NF-kB p65、survivin及caspase-3表达的影响。方法复制人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植瘤模型，共22只，随机分为3组：对照组、顺铂组及不同浓度（1．5、3．0mg／kg）的As2O3组（简称As2O3组）。用原位杂交法检测survivin mRNA的表达；用免疫组化法检测肿瘤组织NF-kBp65、survivin及caspase-3蛋白的表达。结果人乳腺浸润性导管癌裸鼠移植瘤中NF-kB p65蛋白及survivin mRNA和蛋白表达的阳性细胞密度As2O3组明显低于顺铂组和对照组（P〈0．01），顺铂组也低于对照组（P〈0．01）；而caspase-3蛋白表达结果则相反（P〈0．01）。NF-kB p65蛋白、survivin蛋白及survivinmRNA阳性表达间相互呈正相关，而三者的表达均与caspase-3蛋白表达呈负相关。结论As2O3可能通过抑制NF-rBp65的活性抑制survivin，从而激活caspase-3，诱导人乳腺浸润性导管癌细胞的凋亡，且呈剂量依赖性。     

柳氮磺胺吡啶和5-氟尿嘧啶对裸鼠皮下移植瘤胰腺癌细胞BxPC-3凋亡基因的影响

目的 探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)和柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine, SZ)对裸鼠皮下移植瘤胰腺癌细胞BxPC-3凋亡基因的作用.方法 用RT-PCR和Western blot法分别检测5-FU及SZ单独或联合作用后裸鼠皮下移植瘤凋亡相关基因NF-κB (p65)、bcl-2及cyclinD1 mRNA和蛋白表达水平以及Bax蛋白表达水平的变化.结果 5-FU (7.5和15 mg/kg)和SZ(10和20 mg/kg)单独或联合作用裸鼠皮下移植瘤,其NF-κB (p65) mRNA表达相对含量和蛋白表达水平与各自对照组比较,除SZ组2个亚组外,其余各组均明显降低(P＜0.01); bcl-2和cyclinD1 在mRNA和蛋白水平以及Bax蛋白表达量与各自对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01); 上述指标经多因素方差分析显示二者间有明显的交互作用.结论 Bax水平上调, bcl-2、cyclinD1及NF-κB (p65)水平下调可能是SZ可协同增强5-FU诱导裸鼠皮下移植瘤胰腺癌细胞BxPC-3凋亡的机理之一.     

乳腺浸润性导管癌中survivin与NF-κB的表达及其临床意义

背景与目的：肿瘤的侵袭和转移是乳腺癌死亡的主要原因,对乳腺癌分子标记物的研究有助于诊断和预后判断,乳腺癌组织中凋亡基因survivin和核转录因子NF-κB蛋白的关系尚不清楚,本研究探讨乳腺浸润性导管癌组织中survivin和NF-κB蛋白的表达及其与患者临床病理特征、分子亚型及预后的关系,以期拓展对乳腺癌发病机制的理解与认识,为乳腺癌防治提供新策略。 方法：选择2015年5月—2017年5月在郑州人民医院行手术治疗、术后经病理确诊且病历完整的80例乳腺浸润性导管癌患者作为研究对象,用免疫组化法检测患者癌组织与癌旁组织在survivin与NF-κB蛋白的表达,用统计学方法分析survivin、NF-κB蛋白与患者临床病理参数、分子亚型及预后的关系。 结果：survivin与NF-κB在乳腺浸润性导管癌组织中的阳性表达率均明显高于癌旁组织（53.75% vs. 11.25%;56.25% vs. 8.75%,均P<0.05）。survivin和NF-κB的表达均与组织学分化、淋巴结转移状况、TNM分期、分子分型有关,均表现为在低分化、淋巴结转移阳性、TNM分期晚、非luminal型乳腺癌组织中高表达（均P<0.05）;同时,两者共高表达率也在低分化、淋巴结转移阳性、TNM分期晚、非luminal型的乳腺癌组织明显升高（均P<0.05）。乳腺浸润性导管癌组织中survivin和NF-κB表达呈正相关（r=0.546,P=0.000）。生存分析结果显示,survivin或NF-κB高表达患者的5年无病生存率均低于各自的低表达患者,而两者共高表达的患者5年无病生存率低于两者任何单一高表达或两者共低表达患者（均P<0.05）。Cox回归分析显示,NF-κB、survivin与NF-κB共表达、肿物直径、分化程度和淋巴结转移是乳腺浸润性导管癌患者预后的独立危险因素（均P<0.05）。 结论：乳腺浸润性导管癌组织中survivin和NF-κB蛋白的表达与患者的恶性临床病理特征及不良预后密切相关,而且两者可能存在协同作用促进了乳腺癌的发生与发展。     

大黄素增强顺铂对膀胱癌T24细胞移植瘤抑制作用的实验研究

目的 探讨大黄素增强顺铂对膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的化疗作用及其机制。方法 建立膀胱癌T24细胞的裸鼠皮下移植瘤动物模型,将荷瘤鼠随机分为:Con组(生理盐水)、Cis组(顺铂50mg/kg)、Emo组(大黄素40mg/kg)和Cis+Emo组(联合用药,顺铂50mg/kg+大黄素40mg/kg)。腹腔注射给药,每3d1次,共8次。给药后测量肿瘤体积及质量。采用原位末端转移酶标记技术(Tunel)检测各组标本肿瘤细胞凋亡情况。免疫组织化学法检测肿瘤组织核转录因子(NF-κB)、凋亡抑制因子(XIAP)和胱天蛋白酶(Caspase-3)蛋白的表达。RT-PCR检测NF-κB、XIAP和Caspase-3mRNA的表达。结果 Cis+Emo组肿瘤体积和质量明显小于其他各组。Tunel实验显示,Cis+Emo组细胞凋亡水平明显高于其他各组。免疫组化和RT-PCR结果显示:与Con组相比较,Emo组和Cis+Emo组的NF-κB、XIAP蛋白、mRNA的表达显著下降;与Cis组和Emo组相比较,Cis+Emo组的NF-κB、XIAP蛋白、mRNA的表达显著下降;与其他各组相比,Cis+Emo组的Caspase-3蛋白和mRNA的表达显著增强。结论 大黄素可以通过下调NF-κB和XIAP、上调Caspase-3基因和蛋白的表达,增强顺铂对膀胱癌T24细胞移植瘤诱导凋亡作用。     

乳香胶联合吉西他滨对人胰腺癌BxPc-3细胞的作用及机制初探

目的 研究乳香胶联合吉西他滨对体内、外培养的人胰腺癌BxPc-3细胞的作用及相关机制.方法 四唑氮蓝还原法检测BxPc-3细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡(PI单染色法).Western blot检测不同浓度的乳香胶联合吉西他滨(两药联合组)用药后BxPc-3细胞内测核转录因子-κB(NF-κB) p65亚基以及NF-κB抑制蛋白IkB、凋亡调节蛋白Bcl 2和Bax的表达水平的变化.建立人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型,监测移植瘤体积变化.结果 两药联合组选择乳香胶(40 mg/L)和吉西他滨(10 mg/L)处理72 h后,抑制人胰腺癌细胞株BxPc-3细胞的作用显著优于单独使用(P＜0.01);凋亡比例(45.13±4.01)明显高于乳香胶组或吉西他滨组(P＜0.01)和对照组(5.07±1.37,P＜0.01);乳香胶或两药联合可抑制NF-κB的活性;对人胰腺癌BxPc-3细胞作用48 h后,Bcl-2的蛋白表达明显低于吉西他滨组和对照组(P＜0.01).而IkB和Bax蛋白的表达显著高于吉西他滨组和对照组(P＜0.01).与对照组比较,乳香胶或两药联合组可显著抑制裸鼠胰腺癌皮下移植瘤生长(P＜0.05).结论 乳香胶可通过抑制NF-κB的活性,增加IkB和Bax蛋白表达、抑制Bcl-2的蛋白表达,发挥抗肿瘤作用,并增强吉西他滨的药效.     

姜黄素增强奥沙利铂对结肠癌裸鼠皮下移植瘤的抑制和诱导凋亡作用

目的:探讨姜黄素增强奥沙利铂对肠癌HT-29细胞裸鼠移植瘤的诱导凋亡作用及其机制.方法:建立耐药肠癌HT-29细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤鼠随机分为Con组(生理盐水)、Oxa组(奥沙利铂7.5 mg/kg)、Cur组(姜黄素50 mg/kg)和Oxa+Cur组(联合用药,奥沙利铂7.5 mg/kg和姜黄素50 mg/kg).腹腔注射给药,每3 d 1次,共8次.给药后测量肿瘤体积.免疫组织化学法检测肿瘤组织细胞增殖子(Ki-67)、凋亡抑制子(XIAP)和核转录子(NF-κ B)的蛋白表达.RT-PCR检测NF-κB和XIAP mRNA的表达.结果: Oxa+Cur组肿瘤体积和质量明显小其他各组.与Con组相比较,Oxa组、Cur组和Oxa+Cur组的Ki-67蛋白表达显著下降;与Oxa组和Cur组相比较,Oxa+Cur组的Ki-67蛋白表达显著下降.与Con组相比较, Oxa组、Cur组和Oxa+Cur组的NF-κB和XIAP蛋白和mRNA的表达显著下降;与Oxa组和Cur组相比较,Oxa+Cur组的NF-κB和XIAP蛋白和mRNA的表达显著下降.结论:姜黄素可以通过下调Ki-67和NF-κB 及XIAP基表达,增强奥沙利铂对肠癌HT-29细胞移植瘤的抑制细胞增殖和诱导凋亡作用.     

NF-κB P65亚基siRNA增强吉西他宾诱导胰腺癌细胞凋亡作用的实验研究

目的 探讨NF-κB P65亚基siRNA(NF-κB P65 siRNA)在体内外增强吉西他宾诱导胰腺癌细胞凋亡的作用及机制.方法 培养人胰腺癌细胞株BxPC-3和PANC-1,分为空白对照组、阴性干扰序列对照组、吉西他宾组、NF-κB P65 siRNA组和联合治疗组.MTT方法检测细胞增殖情况;Western blot方法检测NF-κB P65及凋亡相关蛋白的表达水平;Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测胰腺癌细胞凋亡情况;电泳凝胶迁移实验检测NF-κB的DNA结合活性.BxPC-3接种裸鼠皮下建立胰腺癌移植瘤模型.治疗后监测肿瘤体积;TUNEL染色检测移植瘤组织细胞凋亡指数.结果 转染后72 h,与其他组相比,联合治疗组显著降低了细胞活力指数(P<0.05),下调了Bel-2和proeaspase-3的表达水平,同时上调了Bax的表达水平;流式细胞仪检测结果显示,联合治疗组细胞凋亡率高于其他组(P<0.05);EMSA实验结果证实,NF-κB P65 siRNA组和联合治疗组NF-κB的DNA结合活性低于对照组(P<0.05).联合治疗能够通过诱导凋亡而抑制裸鼠移植瘤生长(P<0.01).结论 NF-κB P65 siRNA可以通过抑制NF-κB的DNA结合活性,调控凋亡相关蛋白的表达水平,激活线粒体凋亡途径,从而增强吉西他宾对胰腺癌细胞的促凋亡作用.     

砷对人乳腺癌移植瘤血管内皮细胞的影响

三氧化二砷(As2 O3 )对血液性肿瘤疾病、某些实体瘤有肯定疗效[1] ,本实验探讨As2 O3 对荷人乳腺癌裸鼠移植瘤血管内皮细胞生长的影响,研究其作用机制。材料和方法一、材料1 实验动物和瘤株:BALB/c nu/nu雌性裸鼠2 2只,鼠龄6～8周,体重16 9～2 2 8g/只,人乳腺浸润性导管癌移植瘤瘤株第36代,由四川大学动物中心提供。2 药物及试剂:As2 O3 (1mg/ml)、顺铂(5mg/ml)购于重庆医科大学第一医院药房。兔抗人FⅧ RAg多克隆抗体、兔抗人VEGF多克隆抗体、SP 90 0 0通用型试剂盒、均购于北京中山生物技术有限公司。二、实验方法1 移植瘤模型…     

血必净对尿源性SIRS猪肾组织细胞因子的影响

目的 观察血必净注射液对尿源性SIRS猪肾组织细胞因子表达的影响,探讨血必净治疗尿源性SIRS的作用机制. 方法 健康实验猪45头按随机数字表法分为假手术对照组、模型组和血必净治疗组3组,每组15只,每组所有动物按时间点又分为术后0、4、6、12和24 h5个时间点亚组.建立尿源性SIRS猪模型.应用RT-PCR法检测肾组织中TNF-α、IL-6、IL-10、NF-κB p65mRNA的表达;采用Western blot法检测肾组织中NF-κB的活性. 结果 模型组猪的SIRS表现最为明显,血必净治疗组SIRS表现明显较轻.模型组猪肾组织TNF-α、IL-6、NF-κB p65mRNA的表达以及NF-κB的蛋白表达显著高于假手术组(P＜0.05);血必净治疗组较模型组的TNF-α、IL-6、NF-κB p65mRNA的表达以及NF-κB的蛋白表达显著降低(P＜0.01);IL-10 mRNA的表达情况则与之相反. 结论 血必净通过抑制NF-κB活性、上调IL-10、下调TNF-α,IL-6及NF-κB的表达而达到治疗尿源性SIRS的作用.     

印迹基因SLC22A18在乳腺癌中的表达及其意义

目的 研究印迹基因SLC22A18在乳腺浸润性导管癌中mRNA和蛋白水平的表达.并分析SLC22A18表达与乳腺癌临床病理特征之间的相关性,从而探讨SLC22A18基因在乳腺癌发生发展中的作用.方法 应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应方法检测46例乳腺浸润性导管癌和对应癌旁乳腺组织,以及20例乳腺良性病变组织中SLC22A18 mRNA的表达,应用免疫组织化学方法检测46例乳腺浸润性导管癌组织、20例乳腺良性病变中SLC22A18蛋白表达,分析SLC22A18 mRNA和蛋白表达与乳腺癌临床病理特征间的关系.结果 SLC22A18在46例乳腺浸润性导管癌中mBNA表达量低于癌旁组织(Z=-4.900,P＜0.01);46例乳腺浸润性导管癌中SLC22A18 mRNA表达量低于乳腺良性病变(Z=-3.182,P＜0.01).40例乳腺浸润性导管癌中SLC22A18 mRNA表达量低于6例导管内癌灶性浸润(Z=-2.022,P＜0.05).SLC22A18蛋白在20例乳腺良性病变、46例乳腺浸润性导管癌中表达阳性率分别为95%、69.6%,两组阳性表达率差异有统计学意义(x2=5.135,P＜0.05).SLC22A18 mRNA和蛋白表达与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期及淋巴结转移均无相关性(P＞0.05).结论 SLC22A18在乳腺浸润性导管癌中表达下调,SLC22A18可能参与了乳腺癌的发生,并有可能成为乳腺癌早期诊断的新分子标志物.     

三氧化二砷对裸鼠人乳腺癌移植瘤的作用及机制

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对乳腺癌移植瘤的作用及其机制.方法 建立BALB/C-nu/nu裸鼠ER阴性MDA-MB-435s人乳腺癌移植瘤模型,分别以不同浓度的AS2O3、顺铂和0.9%氯化钠注射液(NS)腹腔内注射,观察移植瘤的瘤重及抑瘤率.并用免疫组化检测乳腺癌石蜡标本中PTEN和Casepase7的表达.结果 AS2O3高剂量组、AS2O3低剂量组、顺铂组均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长,抑瘤率分别为48.68%、32.80%、66.67%.用药后移植瘤组织巾PTEN和Casepase-7蛋白阳性细胞数显著增多(P＜0.05).结论 AS2O3能明显抑制乳腺癌移植瘤的生长,其作用机制可能是通过上凋PTEN和Caspase-7的表达(P＜0.05),促进细胞的凋亡来抑制人乳腺癌细胞的生长.     

survivin siRNA对裸鼠乳腺癌细胞移植瘤微血管生成的影响

目的：探讨含survivin siRNA的PcDNA3-siRNA对裸鼠人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤微血管生成的影响。 方法：制作裸鼠MCF-7细胞移植瘤模型, 然后随机分为PcDNA3-siRNA处理组,PcDNA3处理组,空白对照组, 成瘤后分别将PcDNA3-siRNA质粒,、PcDNA3空质粒,生理盐水注入裸鼠MCF-7移植瘤中。采用RT-PCR及Western blot半定量法检测各组移植瘤组织中survivin mRNA及survivin蛋白的表达； SP免疫组化法检测各组移植瘤中的微血管密度（MVD）。 结果：PcDNA3-siRNA 组survivin mRNA及survivin蛋白的表达量较PcDNA3组及空白对照组明显降低（P﹤0.05）, 且PcDNA3-siRNA 组MVD明显低于PcDNA3组及空白对照组（P﹤0.05）； PcDNA3组与空白对照组survivin mRNA,survivin蛋白及MVD值差异无统计学意义（P﹥0.05）。 结论：PcDNA3-siRNA可抑制裸鼠MCF-7细胞移植瘤survivin的表达, 而且对移植瘤的微血管生成具有明显的抑制作用。     

糖尿病对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响

目的:探讨AGE-RAGE系统对糖尿病大鼠自体移植静脉内膜增生的作用。方法:雄性SD大鼠40只，随机分为糖尿病组及正常对照组。两组均建立自体静脉移植模型，制模后的7 d和14 d测定血清AGE含量，取自体静脉移植标本行组织形态学观察，半定量RT-PCR检测RAGE，NF-κB p65及VCAM-1mRNA的表达，Western蛋白印迹和免疫组化方法检测RAGE，NF-κB p65及VCAM-1蛋白表达,并用免疫组化方法检测PCNA的表达。结果:术后7 d及14 d，与对照组比较，糖尿病组自体移植静脉内膜增生明显为重，PCNA，RAGE，NF-κB p65及VCAM-1mRNA和蛋白表达均增强，血清AGE含量增加，差异均有统计学意义（均P<0.05）。 结论:AGE-RAGE系统激活NF-κB，增强黏附分子的表达，可能是糖尿病大鼠自体移植静脉内膜增生加重的原因。     

大鼠肾移植后载脂蛋白M的表达变化及其在急性排斥反应中的作用和机制

目的 观察大鼠肾移植后载脂蛋白M(apoM)的表达,探讨apoM在急性排斥反应(AR)中的作用及机制.方法 以SD大鼠和Wistar大鼠作为供鼠,Wistar大鼠作为受鼠,建立同系和同种大鼠原位肾移植模型.实验共分3组,对照组取同系移植受鼠,AR组和PDTC组取同种移植受鼠,其中PDIC组受鼠术后0.5 h注射核因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC),其余2组注射等量生理盐水.术后1、3、5和7d,取各组血清和移植肾组织进行检测,采用蛋白质印迹法检测NF-κB P65和apoM蛋白的表达,采用实时聚合酶链反应法检测apoM、穿孔素和颗粒酶BmRNA的表达,并对各检测指标进行相关性分析.结果 术后各时间点,AR组和PDTC组apoM、穿孔素和颗粒酶BmRNA的表达水平均明显高于同期对照组(P＜0.01),而PDTC组3种mRNA的表达水平均较同期AR组显著降低(P＜0.01).AR组和PDTC组apoM和NF-κBP65蛋白的表达均较同期对照组明显增高(P＜0.01),PDTC组2种蛋白的表达水平均较同期AR组显著降低(P＜0.01).经相关性分析,apoM蛋白与NF-κB P65蛋白的表达呈直线正相关(r=0.469、P＜0.05),apoM mRNA与穿孔素和颗粒酶BmRNA的表达均呈正相关(r=0.731、P＜0.0l,r=0.514,P＜0.05).结论 同种肾移植后,受鼠移植肾组织内apoM的表达显著上调,其可能通过NF-κB的介导参与AR的发生.     

靶向糖原合成酶激酶-3β抗骨肉瘤的实验研究

 目的 研究糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)在骨肉瘤细胞增殖中的作用及相关分子机制,探讨其在骨肉瘤靶向治疗中的价值。方法 Western blot检测人成骨细胞及骨肉瘤细胞p-GSK-3β(Ser9)表达水平,观察GSK-3β抑制剂及siRNA干扰对细胞增殖、凋亡的影响,利用凋亡蛋白芯片筛查并验证GSK-3β调控骨肉瘤细胞的分子机制,通过裸鼠体内实验评估靶向GSK-3β对于骨肉瘤的治疗价值。结果 在骨肉瘤细胞中p-GSK-3β(Ser9)表达水平明显低于成骨细胞。GSK-3β特异性抑制剂及siRNA干扰均可明显抑制骨肉瘤细胞增殖并诱导凋亡蛋白cleave-caspase 3表达量明显上调。通过蛋白芯片筛查显示一组NF-κB调控的靶基因蛋白survivin、cIAP-1、XIAP及Bcl-2明显下调。Western blot验证了上述芯片结果,并发现氯化锂处理后p-IκBα水平下降,核内NF-κB p65表达量下降。NF-κB双荧光素酶报告系统检测稳定过表达持续活化GSK-3β细胞中NF-κB转录活性与空载体组细胞相比明显升高,而稳定干扰GSK-3β的细胞中NF-κB转录活性与空载体组细胞相比明显下降。裸鼠体内动物实验发现稳定干扰GSK-3β和采用氯化锂均可明显抑制骨肉瘤皮下移植瘤的生长。结论 GSK-3β在骨肉瘤中处于相对活化状态,可通过上调NF-κB转录活性调控骨肉瘤细胞增殖;靶向GSK-3β是骨肉瘤潜在的治疗新策略。     

核因子κB p65在肌肉萎缩中的表达与被动运动对其影响

目的 研究核因子κB(nuclearfactor kappa B,NF-κB)p65在失神经骨骼肌中的表达及被动运动对其影响作用,探讨失神经骨骼肌萎缩的分子机制及防治方法.方法 选Wistar大鼠42只,随机分成健康对照组(6只)、失神经对照组(18只)和被动运动组(18只).失神经对照组和被动运动组建立右下肢失神经腓肠肌动物模型.被动运动组大鼠采用右下肢被动运动300次/d.分别在术后2 d、14 d及28d取其双侧腓肠肌称重,计算肌湿重比,采用RT-PCR和Western Blot检测大鼠右侧失神经腓肠肌NF-κB p65的mRNA和蛋白表达水平,根据实验结果做统计处理数据得出结论.结果 大鼠腓肠肌失神经支配后肌肉湿重比持续下降,NF-κB p65的mRNA和蛋白表达在2 d、14 d、28d持续增加(P＜0.05),术后14 d、28d被动运动组腓肠肌湿重比高于同期失神经对照组(P＜0.05),被动运动组mRNA和蛋白的表达在各个时间点低于失神经对照组(P＜0.05),差异有统计学意义.结论 在失神经骨骼肌萎缩中,NF-κB p65的表达持续增高.被动运动可以通过干扰NF-κB p65的mRNA和蛋白质的表达来延缓失神经骨骼肌萎缩.     

靶向抑制survivin基因对肝细胞癌血管生成的影响

目的研究靶向抑制survivin基因对肝细胞癌血管生成的影响,探讨survivin在血管生成中的作用机制。方法采用脂质体介导survivin ASODN体外转染人肝癌细胞株HepG2,Western blot检测细胞中survivin蛋白的表达;RT-PCR检测细胞中VEGF mRNA的表达;FCM检测细胞的凋亡率;利用皮下注射法建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型;采用脂质体包裹survivin ASODN直接瘤内注射,观察其对移植瘤生长情况的影响;SABC法检测移植瘤组织MVD。结果400 nmol/L survivin ASODN转染可明显下调HepG2细胞survivin蛋白表达,但不影响VEGF mRNA表达;ASODN组HepG2细胞凋亡率显著高于空白对照组和SODN组(F=428.19,P<0.01);ASODN组瘤体生长速度较空白对照组和SODN组明显减慢(F=12.63,P<0.01);ASODN组瘤体重量较空白对照组和SODN组明显减轻(F=5.90,P<0.05);ASODN组MVD较空白对照组和SODN组明显降低(F=34.29,P<0.01)。结论survivin ASODN可以抑制人肝癌裸鼠移植瘤生长,其机理可能是诱导HepG2细胞自发性凋亡和抑制肿瘤血管生成。     

碘-125粒子对胃癌细胞核因子κB表达影响的作用机制

目的探讨I-125粒子对胃癌细胞核因子κB(NF-κB)的表达及其抑制肿瘤细胞增殖的作用机制。方法建立人类胃癌细胞株(SGC-7901)裸鼠皮下移植瘤模型,随机分3组,分成实验组30只、空白对照组30只和对照组30只;对照组荷瘤裸小鼠不进行干预,空白对照组小鼠植入空白粒子(0 MBq),实验组小鼠植入I-125粒子,放射剂量为14.8MBq;观察粒子植入后瘤体生长情况,粒子植入28 d时处死所有裸鼠获取肿瘤标本。对标本进行测量分析,得到裸小鼠肿瘤抑制率。用RT-PCR方法进行测定瘤组织NF-κB基因的表达水平,Western blot方法进行测定肿瘤组织内NF-κB蛋白的表达水平。结果 I-125粒子植入小鼠后,与对照组相比,实验组小鼠的肿瘤生长变慢,两组抑瘤率分别为38%和43%。实验组中肿瘤组织的NF-κB基因mRNA及蛋白表达明显降低,差异有统计学意义。结论碘-125粒子抑制胃癌细胞增殖重要分子生物学机制之一是其抑制胃癌细胞NF-κB基因和蛋白的表达。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对失血性休克大鼠急性肺损伤时TLR4 mRNA表达的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对失血性休克大鼠急性肺损伤时Toll样受体4(TLR4)mRNA表达的影响.方法 健康SD大鼠40只,体重200～250 g,随机分为5组(n=8):假手术组(S组)、失血性休克致急性肺损伤组(ALI组)和低、中、高剂量盐酸戊乙奎醚预先给药组(P1～3组).S组仅行动静脉穿刺,不放血,ALI组股动脉放血至35～45 mm Hg制备急性肺损伤模型,P1～3组分别于放血前30 min股静脉注射盐酸戊乙奎醚0.3、1.0、3.0 mg/kg,随后制备急性肺损伤模型.各组复苏后4 h时处死大鼠取肺,称重后计算肺湿干重比,检测TLR4 mRNA和NF-κB p65蛋白的表达水平,观察病理学结果.结果 与S组比较,ALI组和P1组TLR4 mRNA、NF-κB p65蛋白表达水平及肺湿干重比升高(P＜0.05或0.01),P2.3组差异无统计学意义(P＞0.05);与ALI组比较,P2,3组TLR4 mRNA、NF-κB p65蛋白表达水平及肺湿干重比降低(P＜0.05或0.01);P2组和P3组上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).P2,3组肺组织病理学损伤程度较ALI组明显减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药可通过抑制肺组织TLR4 mRNA表达上调,进而降低NF-κB活性,从而减轻失血性休克诱发大鼠的急性肺损伤.     

肺组织NF-κB和PUMA与SAP-ALI的关系及PDTC的干扰作用

目的探讨NF-κB(核因子-κB)和PUMA(p53正向凋亡调节因子)在大鼠重症急性胰腺炎致急性肺损伤(SAP-ALI)发病中的作用及脯氨酸二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对此过程的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组(A组),SAP-ALI组(B组),SAP+PDTC干预组(C组),每组24只。各组再按6,12,24 h时点分为3个亚组,每亚组8只。A组开腹后翻动胰腺数次;B组采用胰胆管逆行注入5%牛磺胆酸钠(1 mL/kg)诱导SAP-ALI模型;C组在B组的基础上于术前1 h给予PDTC(15 mg/kg),各组按各时点处死大鼠。观察胰腺和肺脏病理变化。检测不同组肺脏组织中NF-κBp65,PUMA和Caspase-3的表达及Caspase-3活性;检测组织TNF-α,MIP-2和ICAM-1 mRNA的表达、髓过氧化物酶(MPO)的活性和肺泡上皮细胞凋亡指数。结果成功建立大鼠SAP-ALI模型。Western-blotting和RT-PCR结果显示,B组肺上皮细胞NF-κB p65,PUMA和Caspase-3蛋白表达在12 h后显著增加(P0.05),NF-κB p65与PUMA呈高度正相关(r=0.987,P0.01)。TNF-α,MIP-2,ICAM-1mRNA表达及MPO和Caspase-3活性明显增加(P0.01)。C组肺损伤病理组织学评分在术后各时点较B组显著下降(P0.05),C组12 h后的肺组织NF-κB p65,PUMA和Caspase-3蛋白表达及MPO和Caspase-3活性明显降低(P0.05);TNF-α,MIP-2,ICAM-1 mRNA表达明显下降(P0.05),C组细胞凋亡指数较B组明显降低(P0.01)。结论大鼠SAP-ALI既与NF-κB活化引起的炎症因子释放有关又与NF-κB活化引起的PUMA上调促进细胞凋亡有关。PDTC通过抑制NF-κB活化,下调炎症因子释放及NF-κB活化引起的PUMA表达可抑制肺组织的细胞凋亡,从而减轻SAP-ALI的程度。