沙眼衣原体重组口服活疫苗的体液免疫学特性

目的　检测所构建的沙眼衣原体 (Ct)重组疫苗株口服免疫小鼠后 ,产生的体液免疫应答 .方法　将所构建的重组菌以 5× 10 8菌落形成单位 (CFU ) /只的剂量 ,口服免疫雌性 BAL B/ c小鼠 ,随机分为 7组 ,每组 3只 .于免疫后第 2 ,7,14,2 1,2 8,35和 42 d各取 1组 ,采集血清、小肠肠腔冲洗液和阴道冲洗液标本 .分别以 D型 Ct和鼠伤寒杆菌临床分离株为抗原 ,检测各组血清、小肠冲洗液和阴道冲洗液标本中特异性 Ig G,Ig A和 Ig M.取抗 D型 Ct血清 Ig G阳性标本和阴道冲洗液 Ig A阳性标本 ,分别用于检测与 C型 Ct的交叉反应 .结果　在血清标本中 ,有抗 D型 Ct和抗鼠伤寒杆菌特异性 Ig G和 Ig M,在小肠冲洗液和阴道冲洗液标本中有抗上述两种抗原特异性 Ig G和 Ig A.抗 D型 Ct Ig G阳性血清标本和 Ig A阳性阴道冲洗液标本与 C型 Ct均有交叉反应 .结论　所构建的疫苗株免疫小鼠后 ,能够诱导 Ct特异性 Ig G及 Ig A产生 .     

乙型肝炎病毒核心抗原DNA疫苗对小鼠和猕猴的免疫原性观察

目的 :观察乙型肝炎病毒核心抗原 ( HBc Ag) DNA疫苗对小鼠和猕猴的免疫原性。方法 :肌内注射法接种 HBc AgDNA疫苗 ;EL ISA法检测小鼠和猕猴血清抗 - HBc Ig G终点滴度和 Ig G亚类水平 ;51铬释放法测定小鼠脾细胞 HBc Ag特异性细胞毒性T细胞 ( CTL )活性 ;EL ISA法检测猕猴外周血单个核细胞 ( PBMC)培养上清中 IFN -γ及 IL - 4水平 ;3H - Td R掺入法检测猕猴PBMC HBc Ag特异性增殖反应。结果 :小鼠和猕猴经接种该 DNA疫苗后均产生高滴度抗 - HBc抗体 (分别达 1∶ 3 2 80 5 0和1∶ 10 93 5 0 ) ;小鼠抗 - HBc Ig G亚类以 Ig G2 a为主 ,猕猴抗 - HBc Ig G亚类以 Ig G2占优势 ( Ig G1/Ig G2 <1) ;小鼠的 HBc Ag特异性CTL杀伤活性达 5 0 %以上 ;猕猴 PBMC培养上清中 ,IFN-γ水平与 IL - 4相比占明显优势 ( 15 .63 pg/ml vs <3 .13 pg/ml) ,猕猴PBMC抗原特异性增殖反应阳性 (刺激指数 =2 .12～ 3 .83 )。结论 :HBc Ag DNA疫苗对小鼠和猕猴均具有良好的体液免疫和细胞免疫原性。     

抗滋养细胞膜抗原（TA）IgG类抗体诊断原因不明性流产的？…

探讨抗滋养细胞膜抗原ＩｇＧ类抗体与原因不明性流产的关系。方法：采用酶联免疫吸附实验检测９５例例流产妇女及５２例正常妊娠妇女血清中抗滋养细胞膜抗原ＩｇＧ类抗体的水平。结论血清中抗滋养细胞膜抗原ＩｇＧ类抗体水平可以作为流产免疫因素的一个特异性的辅助诊断标准。     

抗滋养细胞膜抗原( T A) Ig G 类抗体诊断原因不明性流产的临床价值

目的：探讨抗滋养细胞膜抗原（ Ｔ Ａ） Ｉｇ Ｇ 类抗体与原因不明性流产的关系。方法：采用酶联免疫吸附实验（ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ）检测９５例流产妇女及５２例正常妊娠妇女血清中抗滋养细胞膜抗原（ Ｔｒｏ ｐｈｏｂｌａｓｔ ａｎｔｉｇｅｎ， Ｔ Ａ） Ｉｇ Ｇ 类抗体的水平。结果：流产妇女血清中抗滋养细胞膜抗原 Ｉｇ Ｇ 类抗体水平明显高于正常妊娠妇女（ Ｐ＜ ０００１）；流产妇女血清抗滋养细胞膜抗原 Ｉｇ Ｇ 类抗体水平与孕次呈正相关（ｒ＝ ０．９１， Ｐ＜ ００５）。结论：血清中抗滋养细胞膜抗原 Ｉｇ Ｇ 类抗体水平可以作为流产免疫因素的一个特异性的辅助诊断指标。     

异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应的机理研究

目的　研究异种黑色素细胞疫苗诱导小鼠抗恶性黑色素瘤免疫反应的机理。方法　制备异种黑色素细胞疫苗 ,免疫小鼠。采用间接 EL ISA法检测小鼠抗肿瘤抗体滴度及抗体亚型 ,纯化免疫球蛋白及进行体外抗肿瘤增殖 ,采用 Western blot法分析交叉抗原蛋白质。接种恶性黑色素瘤 ,观察肿瘤生长 ,采用免疫细胞去除法分析NK细胞及 T细胞亚群对疫苗抑瘤效应的影响。结果　异种疫苗免疫后 2周小鼠体内出现抗自身肿瘤抗体 ,产生的抗体以 Ig G为主 ,抗体认别的猪眼黑色素细胞及恶性黑色素瘤细胞交叉抗原为相对分子质量达 180× 10 3的蛋白质 ,纯化的免疫球蛋白在体外能抑制恶性黑色素瘤细胞增殖。异种疫苗诱导特异性保护性免疫反应使 90 %小鼠恶性黑色素瘤生长受到抑制 ,去除 NK细胞不影响疫苗抑瘤效应 ,去除 CD4 + T细胞使疫苗抑瘤效应消失 ,去除CD8+ T细胞 70 %小鼠恶性黑色素瘤生长仍受到抑制。结论　异种黑色素细胞疫苗诱导特异性体液免疫及细胞免疫反应 ,抑制恶性黑色素瘤的生长 ,CD4 + T细胞在这一过程中发挥了关键性作用。     

B淋巴细胞对家兔免疫球蛋白和兔抗鼠IgM抗体的提呈作用

免疫学杂志 1989;5(1):15。 本文采用免疫球蛋白(Ig)特异的鼠T细胞株为靶细胞,以T细胞的增殖和IL-2的产生活性为反应指标,探讨了小鼠B淋巴细胞对兔Ig和兔抗鼠IgM抗原的提呈作用。实验结果显示,纯化的B细胞能将兔Ig及兔抗鼠IgM抗体提呈给Ig特异性的 T细胞,刺激T细胞的增殖。同时观察到B细胞具有辅佐兔Ig和兔抗鼠IgM抗体刺激T细胞株产生IL-2的能力。实验     

鼠源性抗人IgMμ链单克隆抗体的制备和鉴定

目的 :建立能稳定分泌高效价抗人 Ig Mμ链单克隆抗体的细胞株 ,收获并纯化抗体用于进一步研究。方法 :小鼠免疫脾细胞与骨髓瘤细胞用 PEG融合 ,小鼠体内诱生腹水的方法收获大量单克隆抗体 ,辛酸硫酸铵提纯 ,并鉴定其纯度。结果 :获得 3个稳定分泌抗体的细胞株 M1、M2、M3,鉴定其亚类分别为 Ig G3、Ig G2 a、Ig G1;腹水抗体纯化后获得纯化抗体含量分别为 0 .36 mg/ ml、0 .2 8mg/ ml、3.71mg/ ml。结论 :用 PEG进行细胞融合 ,辛酸硫酸铵盐析法纯化能够获得较高效价和纯度的抗体     

实验性轴索型格林巴利综合征兔血清抗空肠弯曲菌脂多糖抗体研究

目的 :探讨轴索型格林巴利综合征 (GBS)兔模型血清中抗空肠弯曲菌脂多糖 (LPS) Ig G抗体的改变。方法 :采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法检测注射 LPS后发病兔 3只 ,未发病兔 2 3只及对照组兔 1 0只血清中抗 LPS Ig G抗体滴度。结果 :发病兔血清中抗 LPS Ig G滴度最高 ,A值明显高于未发病兔组及对照组 ,P<0 .0 1。未发病兔组血清中抗 LPS Ig G抗体滴度也有升高 ,明显高于对照组 ,P<0 .0 1。结论 :注射 LPS后可使兔体内产生抗 LPS Ig G抗体 ,而且产生抗 LPS Ig G抗体滴度越高者患轴索型 GBS可能性越大。     

人抗猪胰岛细胞天然抗体同种型的分析

为检测人抗猪胰岛细胞天然抗体的同种型 ,采取 18份胰岛素依赖型糖尿病 (IDDM)患者血清及 2 0份正常人血清分别与杂种猪胰腺组织的冰冻切片孵化后 ,再用免疫荧光标记的羊抗人 Ig G、Ig M单克隆抗体染色。 8份 IDDM血清和 8份正常人血清中含有直接针对猪胰岛细胞的 Ig G型抗体 ;4份 IDDM血清和 6份正常人血清中含有 Ig M型抗猪胰岛细胞抗体。结果表明 :人抗猪胰岛细胞天然抗体的同种型是 Ig G和 Ig M型抗体     

日本血吸虫Calpain疫苗候选分子抗感染的免疫机制

目的探讨日本血吸虫疫苗候选分子—钙离子激活的中性蛋白激酶(Calpain)的保护性免疫力和免疫保护性机制。方法用重组纯化的Calpain抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗Calpain血清,抗Calpain血清与机械转化的日本血吸虫童虫和来自于同种鼠激活的嗜酸性粒细胞共同培养,观察细胞对血吸虫童虫的粘附及对童虫的杀伤效果;RT-PCR分析Calpain抗原免疫BALB/c小鼠一氧化氮激酶(iNos.eNos.nNos)mRNA的表达;ELISA分析免疫小鼠体外培养脾细胞产生的细胞因子IFN-γ和IL-4。结果重组Calpain抗原免疫小鼠后,产生了一个极高的抗Calpain特异性抗体,此抗体介导了同种鼠的嗜酸性粒细胞对日本血吸虫童虫的粘附,37℃、5%CO2培养48h后,33.8%的日本血吸虫童虫被杀死,与控制组14.5%的自然死亡率相比有一个显著性的增高(P<0.01);RT-PCR测定重组Calpain抗原免疫1周小鼠iNosmRNA的表达显著性的增强,培养24h脾细胞上清中IFN-γ浓度高于对照组。结论Calpain特异性抗体介导了对日本血吸虫童虫的细胞毒作用,Calpain抗原能够诱导IFN-γ的产生,提示Calpain诱导Th1的免疫应答反应来抗日本血吸虫的感染。     

滋养层细胞促融合表位肽抗生育作用的初步研究

目的 合成多价抗原肽,观察其体液免疫效果,并初步评估其抗生育潜力.方法 选择人滋养层细胞促融合表位模拟肽与一种通用辅助T细胞表位(PADRE)作为骨架,合成多价抗原肽(MAP)结构的免疫原,与等量弗氏佐剂混悬后免疫雌性C57BL/6小鼠,观察体液免疫反应的特点及抗血清干扰滋养细胞融合的效果.结果 在431A 固相自动肽合成仪上成功地合成了MAP多肽, 并经HPLC纯化、质谱鉴定证实其纯度达95%以上;其在小鼠血清中诱导出的特异性抗体的滴度最高达1∶1 024,且可以特异识别滋养层细胞相关抗原表位;在1∶10 稀释的抗血清存在时,forskolin诱导的人绒癌细胞(BeWo)间融合显著减少(P＜0.01).结论 由含有人滋养层细胞促融合表位模拟肽、具有特异性氨基酸序列的新抗原所制备的抗血清可识别滋养层细胞相关天然抗原表位, 并在小鼠体内激发出较理想的特异性体液免疫, 同时,抗血清对BeWo细胞间融合具有一定抑制作用.     

Effect of donor antigen-trichosnthin conjugate in induction of mouse to rat cardiac xenografting tolerance

OBJECTIVE: To investigate the special effect of donor antigen-trichosnthin (TCS) conjugate on depleting the immune reactive cells that respond to xenograft, and thus inducing specific xenograft tolerance. METHODS: Rat anti-mouse antibodies coupled sepharose-4B beads were used to purify mouse H-2 antigens by affinity chromatography. Those purified H-2 antigens were conjugated with TCS by heterobifunctional reagents SPDP [3-(2-pyridyldithio) propionic acid-hydroxysuccinimide ester] and 2-IT (2-iminothiolane). The specific inhibition function of Ag-TCS to recipient's immune cells was measured in vitro. Ag-TCS conjugate (200 micrograms/kg, i.v.) was administered to the recipients (rats) 4 days prior to cardiac xenotransplantation of mouse to rat. RESULTS: In vitro, the proliferation of immune reactive cells in the recipients pretreated with Ag-TCS was inhibited. The Ag-TCS conjugate significantly prolonged the cardiac survival time (6.88 +/- 1.36 days) compared with cyclosporine A (CsA) group (2.83 +/- 0.75 days) (P < 0.01). CONCLUSION: Donor Ag-TCS conjugate can induce specific tolerance to xenograft.     

树突状细胞与肠道免疫屏障

肠相关淋巴组织在防御病毒、细菌、寄生虫等有害侵袭的过程中发挥着重要的屏障作用,其中肠道树突状细胞最为关键。作为最强有力的专职抗原递呈细胞,树突状细胞能够摄取、加工肠道微生物抗原和其他口服抗原,呈递给T细胞、B细胞、自然杀伤细胞等效应淋巴细胞并使之致敏,通过这些致敏淋巴细胞及其合成的特异性抗体、细胞因子清除有害的病原微生物,同时对肠道正常菌群以及口服抗原保持免疫耐受。     

原因不明习惯性流产与HLA-G的相关性研究进展

人类白细胞抗原G(HLA-G)是人类白细胞抗原Ⅰ类中的非经典抗原,主要表达在人类早期胎盘绒毛外细胞滋养层上,在妊娠免疫耐受建立中起重要作用。近几年来的研究结果表明,HLA-G与原因不明习惯性流产的发生发展密切相关。在此就HLA的分子生物学特点、HLA-G的组织分布、HLA-G基因与表达、HLA-G基因多态性及其与原因不明习惯性流产的关系等方面予以综述。     

Th1/Th2细胞因子失衡致复发性流产的机制及治疗

复发性流产的发生机制错综复杂,近年来其与Th1/Th2细胞因子失衡的关系研究成为热点,Th1型细胞因子过度表达,对滋养层细胞产生细胞毒作用而形成免疫损伤,直接或间接影响胚胎着床及发育,而Th2型细胞因子维持母胎界面的免疫耐受作用受到抑制,致妊娠丢失,Th1/Th2型细胞因子平衡向Th1偏移与复发性流产密切相关。复发性流产的西医治疗主要有主动免疫治疗和被动免疫治疗,中医药治疗重视整体调理,辨证施治,可双向调节人体免疫功能,治疗的风险及不良反应少。     

自身免疫性感音神经性聋豚鼠的子代内耳生理功能研究

目的 :观察自身免疫性感音神经性聋 (ASHL)母豚鼠所产子代内耳生理功能的变化 ,探讨针对内耳的自身免疫因素对子代内耳生理功能的影响及其改变特点。方法 :同种内耳抗原 (CIEAg)持续免疫孕豚鼠 ,采用耳蜗电图 (记录cAP、CM )和眼震电图仪 (记录自发性眼震和冷热空气试验 )测试母鼠和子鼠的听觉和前庭功能 ,并检测血清特异性体液免疫反应。结果 :ASHL模型母豚鼠所产子鼠血清中发现有特异性抗体水平升高 ,部分 (3 /9)出现听觉损伤。非ASHL母鼠和对照组母鼠所产子代未见明显异常。结论 :ASHL雌鼠所产子代可出现感音神经性聋 ,其内耳损伤和功能障碍极可能与针对内耳组织的自身免疫反应 (尤其是体液免疫 )有关 ,从而提示内耳自身免疫因素可能为部分先天性非遗传性感音神经性聋的病因之一。     

幽门螺杆菌尿素酶减毒鼠伤寒杆菌疫苗诱导小鼠粘膜免疫应答的研究

目的:观察口服减毒鼠伤寒杆菌活菌重组疫苗后小鼠的粘膜免疫应答状况。方法:将已构建成功的表达幽门螺杆菌(H.pylori)尿素酶B亚单位(UreB)的重组减毒鼠伤寒杆菌SL3261/pTC01-UreB口服免疫Balb/c小鼠,12周后检测肠液和血清中的特异性抗体反应。结果:疫苗组小鼠的肠液和血清中可分别检测到针对UreB的特异性抗体IgA和IgG,病理学检查显示疫苗组小鼠较对照组小鼠胃粘膜炎症程度差异无统计学意义。结论:表达H.pyloriUreB的减毒鼠伤寒杆菌SL3261/pTC01-UreB能够诱导小鼠产生抗H.pylori的粘膜免疫,可用作抗H.pylori感染的口服疫苗。     

Reproductive immunology

The maternal immune system is challenged with paternal antigens through exposure to trophoblast tissue and fetal cells crossing the placenta into the maternal circulation. The dose of antigen, the manner of presentation (cellular, subcellular, or soluble), and the nature of the antigen all determine the type of response that will be elicited. It is also clear that complex maternal immunologic responses, including antibodies to red blood cell antigens, HLA-A, HLA-B, HLA-C, and HLA-D antigens, and cell-mediated responses such as proliferation, lymphokines, cytotoxicity, and suppressor cells, are generated to a variety of paternal antigenic determinants. The fact that some of these reactions are detected in vitro in the absence of maternal serum, but not in its presence, suggests that the local milieu is important in influencing their expression in vivo. For example, such factors as hormones (cortisol, progesterone, and estrogen), pregnancy-associated glycoproteins (alpha 2-macroglobulin and beta 1-glycoprotein) and AFP, which have immunosuppressive properties, may all serve nonspecifically to inhibit and decrease the general tone of maternal immunologic responses, particularly at the placental interface, where many of these factors are present in high concentrations. However, these nonspecific factors may not be sufficient to prevent presensitized effector lymphocytes from continuing an ongoing rejection process, as is often the case in the chronic rejection of an allograft. For this purpose, specific enhancing antibodies would play an important role by blocking maternal responses or protecting the fetus. There may be a subtle balance created on the trophoblast cell surface between specific antibodies and trophoblast or embryonic alloantigens, resulting in limited expression of antigens capable of inducing rejection reactions. This could favor the production of blocking antibodies and/or T-suppressor cells, as opposed to cytotoxic antibody and killer cells. In fact, low levels of antigen density on the cell surface favor a blocking effect by IgG rather than cytotoxicity. Blocking or enhancing antibodies can exert their effect on maternal immunologic responses in several ways. They could block the afferent limb by combining with antigen and preventing sensitization or increasing the level of sensitivity. An example of the latter would be the coating of fetal cells that enter the maternal circulation. Enhancing antibodies could work directly on the effector cells to suppress their function. The antibody itself, or more likely antigen-antibody complexes, may be important in this regard.(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)     

结核分支杆菌ESAT6蛋白的表达、纯化及抗原性研究

目的：获得重组ESAT6蛋白,研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值。方法：分别用生理盐水和卡介苗免疫小鼠8周后,以结核分支杆菌接种小鼠。应用基因工程技术表达、纯化ESAT6蛋白,分别以结核分支杆菌PPD或纯化的rESAT6蛋白为抗原,通过ELISA方法及结核病一步法检测小鼠或人血清中抗结核抗体。结果：重组质粒pET24b-ESAT6在大肠杆菌BL2（DE3）细胞内以包涵体形式存在,分子量约6kDa,每100ml培养菌可获得约18mg纯化的重组蛋白。生理盐水和卡介苗免疫小鼠血后血清中抗ESAT6抗体无区别。结论分支杆菌攻击后,两组小鼠血清中抗ESAT6抗体均明显升高,但只有卡介苗组小鼠抗体水平超过平均值＋2标准误。以33例正常人血清的OD值＋2S为正常界限值,33例正常人和32例结核病人血清一步法和PDD、rESAT6 ELISA检测抗结核抗体的特异性和敏感性分别为：一步法87.9%(29/33),65.6%(21/32),PPD93.9%(31/33),62.5%(20/32);rESAT6 97%(32/33),18.2%(4/32)。结论：pET24b-ESAT6大肠杆菌工程菌能以包涵形式高效表达重组ESAT6蛋白,卡介苗免疫对血清中ESAT6抗体无影响,结核病人血清中抗ESAT6抗体阳性率低,rESAT6纯化蛋白可作为结核病血清学诊断的混合抗原之一。