卵巢癌胸苷磷酸化酶及其mRNA的表达及临床意义

目的 :研究卵巢肿瘤中胸腺嘧啶脱氧核苷磷酸化酶 (TP)及其mRNA的表达与微血管密度 (MVD)的关系及其临床意义。方法 :卵巢良性肿瘤 2 1例 ,卵巢癌 35例。术后肿瘤组织用免疫组化法检测TP及factorⅧ的表达 ,计算MVD ;用原位杂交 (ISH)法检测TPmRNA。结果 :卵巢癌TP、TPmRNA的阳性率分别为 71.4 %和 4 8.5 % ,明显高于良性者的 38.0 %和 2 8.0 % (P <0 .0 0 1,P <0 .0 5 )。有淋巴结转移者TP、TPmRNA的表达率分别为10 0 %和 77% ,明显高于无淋巴结转移者的 65 .3%和 38.4 % (P <0 .0 5 )。卵巢癌TP、TPmRNA表达与病理组织类型、细胞分化程度、临床期别、患者腹水多少无关。卵巢癌的MVD平均为 2 8.2 7± 2 2 .34,明显高于良性者的 12 .5 3± 16.5 8(P <0 .0 1)。TP与MVD具有相关性 ,TP阳性者MVD明显增高。结论 :TP和TPmRNA在卵巢癌中表达增强 ,是卵巢癌重要的促血管生成因子 ,TP表达与淋巴结转移、患者预后有关     

卵巢癌微血管密度与血管壁α-平滑肌肌动蛋白的表达及其临床意义

目的 :研究卵巢癌微血管密度 (MVD)、血管壁α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)的表达并探讨其临床意义。方法 :通过免疫组化法 ,分别检测 2 1例卵巢良性肿瘤和 35例卵巢癌血管壁平滑肌特异性标志物α SMA和血管内皮细胞特异标志Ⅷ因子的表达 ,计算α SMA表达指数 (α SMA指数 )和MVD。结果 :卵巢癌血管α SMA中、强表达率为 31.4 % (11/ 35 ) ,明显低于良性肿瘤者的 6 1.9% (13/ 2 1)。卵巢癌α SMA指数平均为 0 .4 2± 0 .33,明显低于良性肿瘤者的 0 .72± 0 .38(P <0 .0 1)。卵巢癌的MVD平均为 2 8.2 7± 2 2 .34,良性肿瘤为 12 .5 3± 16 .5 8,两组差异有显著性 (P <0 .0 1)。α SMA表达及MVD均与临床分期及淋巴结转移有关。Ⅲ期和Ⅳ期卵巢癌的α SMA指数明显低于Ⅰ、Ⅱ期者 ;有淋巴结转移的α SMA指数明显低于无转移者。Ⅲ期和Ⅳ期卵巢癌的MVD明显高于Ⅰ、Ⅱ期者 ;有淋巴结转移的MVD明显高于无转移者。结论 :α SMA指数和MVD分别反映肿瘤新生血管的不同方面 ,α SMA指数反映新生血管的结构 ,MVD代表了新生血管的数量 ,二者联合检测可更全面地反映卵巢癌新生血管的特征     

宫颈癌血管内皮生长因子表达与血管生成癌细胞增殖及侵袭转移的关系

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)在早期宫颈癌的表达和临床意义。方法　采用免疫组织化学SP法检测 1998年 1月至 2 0 0 2年 2月期间 75例早期宫颈癌 (ICC)、18例宫颈上皮内瘤样病变 (CIN)和 15例癌旁正常宫颈上皮 (NCE)中VEGF的表达情况 ,并检测其中微血管密度 (MVD ,CD3 4 标记 )和癌细胞增殖标记指数 (Ki 6 7标记 )。结果　从NCE→CIN→ICC ,VEGF、Ki 6 7的阳性表达率和MVD均显著升高 (P <0 0 5 )。VEGF在ICC的表达与MVD显著正相关 (r =0 6 0 2 ,P <0 0 1) ,与盆腔淋巴结转移、脉管浸润、组织学分级和Ki 6 7表达显著相关 (P <0 0 5 ) ,但与年龄、FIGO分期、组织学类型和间质浸润无关 (P >0 0 5 )。低分化、盆腔淋巴结转移、脉管浸润及Ki 6 7高度表达者 ,与VEGF阳性表达显著相关 (P <0 0 5 )。结论　VEGF阳性表达可能在宫颈癌血管生成、癌细胞增殖、癌细胞侵袭转移中起重要作用。VEGF检测对进一步了解宫颈癌生物学行为和判断其预后具有一定的临床应用价值。     

VEGF、MMP2、MVD与卵巢癌临床病理关系的研究

目的 :研究卵巢癌中VEGF、MMP2的表达和MVD与临床病理参数和预后的关系并探讨其临床价值。方法 :采用免疫组化技术检测 5 3例卵巢癌和 10例卵巢交界性肿瘤中VEGF、MMP2的表达水平 ,用CD34标记新生血管内皮细胞 ,在显微镜下观察血管密度。结果 :卵巢癌中MVD与年龄呈正相关 (P =0 .0 16 ) ,粘液性囊腺癌中MVD高于其它组织学类型 (P <0 .0 1)。卵巢癌中VEGF的表达与FIGO手术分期呈正相关 (P =0 .0 0 1) ,VEGF表达还与腹水量呈正相关 (P =0 .0 0 2 )。MVD与VEGF、MMP2表达呈正相关 (P值分别为 0 .0 2 1和 0 .0 31) ,VEGF表达与MMP2表达呈正相关 (P =0 .0 0 2 )。VEGF、MMP2强阳性表达和MVD较高 (≥ 10 /HP)的患者预后差 (P值分别为 0 .0 2 6 ,0 .0 36和 0 .0 38)。结论 :VEGF是重要的血管生成因子 ,MMP2不仅在肿瘤的浸润和转移中意义重大 ,而且在肿瘤的血管生成中发挥作用。卵巢癌的FIGO手术分期、MVD及VEGF、MMP2表达与预后相关 ,特别是MMP2在肿瘤的浸润、转移和血管生成中有双重作用 ,既有助于判断患者对传统治疗的敏感性 ,而且对开发针对肿瘤的生物特异性治疗具有启发作用。     

血管内皮生长因子在卵巢癌细胞浸润转移中的作用

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在卵巢癌浸润转移中的作用。方法 :阳离子脂质体介导VEGF165质粒转染 2株卵巢癌细胞CaOV 3、COC1,并经逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)、Western免疫印迹检测转染VEGF165质粒前后癌细胞VEGFmRNA及其蛋白表达水平 ;用Boyden小室体外侵袭实验比较VEGF165质粒转染前后以及单克隆抗体作用后 2株癌细胞通过人工重组基底膜的能力强弱变化。结果 :VEGF165质粒转染后 ,2株细胞mRNA和蛋白表达水平均较转染前明显增强 (P <0 .0 5 )。VEGF165质粒转染的癌细胞CaOV 3、COC1穿过人工重组基底膜的相对百分率分别为 4 2 .5± 4 .1、2 6 .8± 2 .4 ,明显高于对照组穿膜细胞相对百分率 (2 4 .7± 1.9、8.6± 1.1) (P <0 .0 5 ) ;而在VEGF单克隆抗体存在时 ,2株癌细胞穿膜细胞相对百分率 (10 .2± 0 .7、5 .4± 0 .3)较处理前均有不同程度的下降 (P <0 .0 5 )。结论 :VEGF参与了卵巢癌转移的侵袭、浸润阶段 ,应用VEGF单克隆抗体可针对性地抑制VEGF介导的卵巢癌侵袭、浸润。     

上皮性卵巢肿瘤患者血清和肿瘤组织中VEGF水平的检测

目的　通过对上皮性卵巢肿瘤患者肿瘤组织中血管内皮生长因子 (VEGF)表达的观察以及对术前血清VEGF水平的检测 ,探讨VEGF与上皮性卵巢肿瘤临床病理因素之间的关系。方法　应用免疫组织化学和ELISA方法 ,对 79例上皮性卵巢肿瘤患者 (包括 2 1例卵巢良性囊腺瘤 ,1 2例交界性卵巢肿瘤和 4 6例上皮性卵巢癌 )术前血清VEGF水平和术后组织标本中VEGF的表达进行了检测。结果　①上皮性卵巢癌组织VEGF阳性表达率 (78 2 6 % )显著高于交界性肿瘤 (4 1 6 7% )和良性囊腺瘤 (33 33% ) (P <0 0 1 ) ;上皮性卵巢癌中 ,晚期癌 (Ⅲ、Ⅳ期 )的VEGF阳性表达率 (92 0 0 % )显著高于早期癌 (Ⅰ、Ⅱ期 ) (6 1 90 % ) (P <0 0 1 ) ,且强阳性表达率 (5 2 0 0 % )也显著高于早期癌 (1 4 2 9% ) (P <0 0 5 ) ;有腹水组VEGF阳性表达率 (87 5 0 % )显著高于无腹水组 (5 7 1 4 % ) (P <0 0 5 ) ;②上皮性卵巢癌患者血清VEGF水平也明显高于良性囊腺瘤患者和交界性肿瘤患者 (P <0 0 1 ) ,卵巢癌中 ,低分化患者血清VEGF水平高于高、中分化患者 (P <0 0 1 ) ,血清VEGF水平在临床Ⅲ、Ⅳ期患者明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者 (P <0 0 5 ) ,有明显腹水者比无腹水者高 (P <0 0 1 )。结论　VEGF在上皮性卵巢癌肿瘤组织中表达的增加以及血     

BRMS1和fascin基因在卵巢上皮癌中的表达及其意义

目的 :研究原发卵巢上皮癌 (POEC)中乳腺癌转移抑制基因 (BRMS1)和运动相关蛋白 (fascin)基因表达水平及其意义。方法 :用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 2 5份正常卵巢、15份良性卵巢上皮瘤、2 8份卵巢上皮癌及 15份卵巢癌盆、腹腔种植转移灶中BRMS1和fascin基因mRNA表达情况。结果 :(1)BRMS1基因表达 :在POEC为 0 .4 73± 0 .179,明显低于正常卵巢和良性上皮瘤组 (P <0 .0 5 ) ;在III、IV期 (晚期 )卵巢癌原发灶中的表达显著低于I、II期 (早期 ) (P =0 .0 12 ) ,在腹腔脱落细胞阳性患者卵巢癌组织中的表达明显低于阴性者 (P =0 .0 4 3) ;(2 )fascin基因表达 :在POEC为 0 .94 1±0 .2 87,明显高于良性上皮瘤的 0 .382± 0 .0 4 6(P <0 .0 0 1) ;其表达与分期有关 ,在III、IV期卵巢癌原发灶中的表达显著高于I、II期 (P =0 .0 2 ) ;(3)fascin/BRMS1的相对光密度值(ROD)比值随肿瘤转移增加。结论 :BRMS1和fascin基因表达与卵巢上皮癌转移密切相关 ,其中fascin/BRMS1的ROD比值可成为提示卵巢癌有转移的指标     

卵巢癌血管内皮生长因子过度表达及肿瘤浸润转移机制的探讨

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)过度表达在卵巢癌浸润转移中的作用及可能机制。方法　脂质体介导VEGFcDNA转染卵巢癌细胞系CAOV3、COC1 ,并经逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术、蛋白印迹 (Westernblot)法检测转染VEGFcDNA前后卵巢癌细胞中VEGF、明胶酶A(MMP 2 )mRNA及其蛋白表达水平 ;Boyden小室体外侵袭实验比较VEGFcDNA转染前后卵巢癌细胞穿透人工重组基底膜能力的变化。结果　VEGFcDNA转染后卵巢癌细胞系CAOV3、COC1细胞中VEGFmRNA表达水平分别为 0 98± 0 0 5和 0 87± 0 0 6 ,MMP 2mRNA表达水平分别为 0 95± 0 0 3和 0 82±0 0 2 ,均较转染前 (分别为 0 84± 0 0 3和 0 62± 0 0 4 ,0 71± 0 0 2和 0 61± 0 0 1 )明显增加 (P <0 0 5) ;VEGF、MMP 2蛋白表达水平也呈相同变化趋势 (P <0 0 5) ;VEGFcDNA转染后的CAOV3、COC1细胞的穿透人工重组基底膜的能力分别为 (42 5± 4 1 ) % ,(2 6 8± 2 4) % ,较对照组 [(2 4 7± 1 9) % ,(8 6±1 1 ) % ]明显增加 (P <0 0 5)。结论　VEGF促进卵巢癌浸润、转移的机制可能与诱导MMP 2合成及分泌有关。     

人参皂甙Rg3对荷卵巢癌的严重联合免疫缺陷鼠的抗肿瘤血管生成作用的研究

目的　研究人参皂甙Rg3体内抗卵巢癌血管生成的作用。方法　建立荷卵巢癌的严重联合免疫缺陷 (SCID)鼠腹腔移植瘤模型 ,分为 3组。空白组 :SCID鼠荷瘤后不干预 ;对照组 :荷瘤SCID鼠予磷酸盐缓冲液 (PBS)灌胃 ;实验组 :荷瘤SCID鼠予人参皂甙Rg3和PBS混悬液灌胃。分别采用逆转录聚合酶链反应技术、酶联免疫吸附法、免疫组织化学法检测 3组荷瘤SCID鼠的血管内皮生长因子 (VEGF)mRNA、蛋白及微血管密度 (MVD)。结果　 (1)人参皂甙Rg3处理后 ,荷瘤SCID鼠体内无腹水形成 ,腹腔中肿块播散减少。 (2 )实验组肿瘤组织VEGFmRNA表达的相对量为 119± 16 ,显著低于空白组、对照组 (分别为 2 5 4± 4和 2 73± 4 4 ,P均 <0 0 5 )。 (3)实验组血中VEGF蛋白的表达量为(14 6± 0 7)pg/ml,显著低于空白组和对照组 [分别为 (18 5± 2 1)和 (2 0 5± 1 7)pg/ml,P均 <0 0 5 ]。(4)实验组肿瘤组织中MVD为 (43± 7)个 /mm3 ,显著低于空白组和对照组 [分别为 (6 5± 12 )个 /mm3 和(73± 10 )个 /mm3 ,P均 <0 0 5 ]。结论　人参皂甙Rg3通过下调肿瘤VEGFmRNA及蛋白的表达量 ,阻滞肿瘤血管生成从而抑制肿瘤生长和转移     

VEGF、P53在卵巢上皮性肿瘤的表达及其与血管生成关系的研究

目的探讨VEGF、P53在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其与血管生成的关系,旨在了解卵巢上皮性肿瘤血管生成活性及其调节机制,为卵巢癌的治疗提出新的思路.方法采用免疫组化LSAB法分析74例卵巢上皮性肿瘤微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)和P53蛋白的表达状况及三者间的关系.结果MVD在腺瘤、交界瘤、卵巢癌中的数值依次升高,各组间差异均有显著性(P＜0.001,P＜0.05);MVD在卵巢癌中粘液性明显高于浆液性和子宫内膜样(P＜0.05,P＜0.05);VEGF在卵巢癌中的表达率明显高于腺瘤及交界瘤(P＜0.05).P53蛋白仅出现于卵巢癌组织,表达率50%,卵巢癌P53蛋白阳性组MVD高于P53阴性组(P＜0.05);等级相关分析显示卵巢上皮性肿瘤VEGF的表达强度与MVD呈正相关(r=0.762,P＜0.001);P53、VEGF间也存在正相关关系(ra=0.762,P＜0.01).结论血管生成活性的不同,有助于卵巢良、恶性肿瘤的鉴别;VEGF是卵巢上皮性肿瘤重要的促血管生成因子,且可能与卵巢癌腹水形成有关;P53突变可促进卵巢上皮性癌的血管生成,且在一定程度上可上调VEGF表达.     

血管内皮生长因子及其受体在卵巢上皮性癌组织中的表达

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(FLT1、FLK1)mRNA在卵巢上皮性癌组织中的表达及与临床病理因素的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应技术检测70例卵巢上皮性癌及22例卵巢良性肿瘤病变组织标本中VEGFmRNA及其受体FLT1mRNA及FLK1mRNA的表达。结果在良、恶性卵巢组织中均检测到VEGF121mRNA、165mRNA的表达,在卵巢上皮性癌组织中表达水平分别为(0.452±0.134,0.301±0.096)高于良性卵巢肿瘤[0.195±0.066(P=0.000),0.204±0.059(P=0.001)];在卵巢上皮性癌组织中,VEGF121mRNA表达高于VEGF165mRNA(P=0.000),而在良性卵巢肿瘤组织中两者表达水平差异无显著性(P=0.667)。FLT1mRNA、FLK1mRNA在部分卵巢上皮性癌组织中表达,分别为38.6%(27/70)和25.7%(18/70),而在良性卵巢肿瘤组织中未见表达。卵巢癌组织中VEGF121、VEGF165、FLT1、FLK1之mRNA表达与患者年龄、肿瘤体积、淋巴结转移、肿瘤分期之间无明显相关性。结论VEGF121、165及其受体FLT1、FLK1在卵巢上皮性癌的血管生成中起重要作用。     

卵巢癌临床和生物学预测因子研究

目的 :研究影响卵巢癌患者预后的临床和生物学因素。方法 :回顾分析卵巢癌患者 88例的临床资料 ,并检测肿瘤组织上皮中血管内皮生长因子 (VEGF)和胸苷磷酸化酶 (TP)的表达及肿瘤间质内微血管密度 (MVD) ,应用Cox比例风险模型评估临床因素包括年龄、临床分期、组织学类型、细胞分化级别、术后残余癌灶及生物学因子 :VEGF、TP、MVD与总生存期 (OS)和无进展生存期 (PFS)之间的相关性。结果 :(1)患者的年龄、临床分期和术后癌灶大小显著影响其生存期的长短 ;(2 )Cox模型未发现VEGF、TP和MVD与OS和PFS之间的相关性 ;(3)低分化 (G3、G4 )肿瘤细胞中VEGF的表达显著高于高分化(G1、G2 )者。结论 :(1)年龄、临床分期和术后残余癌灶是三个独立的临床预测因子 ,表明早期诊断和适宜治疗极为重要 ;对老年患者应密切监护 ;(2 )低分化肿瘤细胞比高分化肿瘤细胞具有更恶的基因型和表现型 ,更易诱导间质内微血管生成 ,促进肿瘤的复发、转移和快速生长 ,提示抗微血管生成治疗肿瘤的可行性     

卵巢癌患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白的研究

目的 :研究卵巢癌患者外周血T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白 (AgNORs)与卵巢癌的临床特点及生物学行为的关系。方法 :以卵巢癌患者 36例为研究组 ;以良性卵巢肿瘤患者 17例及健康妇女 2 0例为对照组。利用KL型肿瘤免疫图像分析系统计数T淋巴细胞核仁银染面积与细胞核面积比值 (integratedsquare ,IS)。结果 :卵巢浆液性腺癌、子宫内膜样腺癌、粘液性腺癌及未分化腺癌的IS均值分别为 9.31± 1.96 %、7.4 1± 0 .39%、7.98± 2 .95 %、6 .78± 0 .70 % ;高分化、中分化、低分化卵巢癌患者IS均值分别为 9.6 6±1.85 %、8.37± 1.95 %、8.16± 2 .0 5 % ;Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期卵巢癌患者的IS均值分别为 8.80± 1.35 %、10 .6 5± 0 .96 %、9.12± 1.6 3%、6 .0 1± 0 .4 5 % ;良性卵巢肿瘤及健康妇女的IS均值分别为 9.0 9± 1.83%、9.6 3± 1.5 2 %。不同组织学类型、不同分化级别卵巢癌患者其外周血T淋巴细胞AgNORs表达差异无显著性 (P >0 .0 5 )。Ⅳ期卵巢癌与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期卵巢癌及对照组患者的外周血T淋巴细胞AgNORs表达有高度显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 :Ⅳ期卵巢癌患者较Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期卵巢癌及对照组患者外周血T淋巴细胞rD NA转录活性及细胞免疫功能明显降低 ,这可能是导致卵巢癌进展的因素之一     

应用组织芯片技术研究卵巢癌组织中缺氧诱导因子1α与血管生成的关系

目的　探讨缺氧诱导因子 1α(hypoxiainduciblefactor 1α ,HIF 1α)在卵巢癌组织中的表达及其与血管生成的关系。方法　联合应用组织芯片和原位杂交、免疫组化技术 ,检测 2 95份卵巢上皮性肿瘤 (其中卵巢癌 2 38份、交界性卵巢肿瘤 19份、良性卵巢肿瘤 38份 )及 13份正常卵巢组织中HIF 1αmRNA和血管内皮生长因子 (VEGF)的表达情况 ,以CD3 4 单克隆抗体标记血管内皮细胞来检测微血管密度 (MVD)。结果　卵巢癌、交界性卵巢肿瘤和良性卵巢肿瘤、正常卵巢组织中HIF 1αmRNA的阳性表达率分别为 81 9%、4 2 1%、13 2 %和 0。交界性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中HIF 1αmRNA的表达高于正常卵巢和良性卵巢肿瘤 ,卵巢癌高于交界性肿瘤 ,差异均有统计学意义 (P <0 0 1)。卵巢癌组织中HIF 1αmRNA的表达与手术病理分期和病理类型无关 (P >0 0 5 ) ,而与病理分级呈正相关 (r=0 2 4 6 ,P <0 0 1)。卵巢癌组织中HIF 1αmRNA表达与VEGF表达 (r =0 2 0 6 ,P =0 0 1)和MVD计数 (r =0 4 5 1,P <0 0 1)均呈显著正相关。结论　卵巢癌组织过度表达HIF 1αmRNA ,并通过诱导VEGF促进肿瘤的新生血管形成。     

NGAL和MMP-9在卵巢上皮性癌中的表达及相关性研究

目的:检测中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在卵巢上皮性肿瘤组织和血清中的表达,了解两者与卵巢癌临床病理特征的关系。方法:应用半定量RT-PCR和ELISA法检测50例上皮性卵巢癌、21例卵巢良性肿瘤和18例正常对照的卵巢组织和血清中NGAL和MMP-9的表达水平。结果:(1)卵巢癌组的组织及血清中NGAL和MMP-9表达明显高于卵巢良性肿瘤组和正常对照组(P均<0.05);二者的高表达与临床分期、淋巴结转移正相关(P均<0.05);卵巢癌患者的组织及血清中NGAL与卵巢癌的组织分化程度正相关(P均<0.05),MMP-9则与卵巢癌的组织分化程度负相关(P均<0.05)。(2)卵巢癌患者的组织或血清中,NGAL表达均与MMP-9表达呈正相关(r=0.740,r=0.676,P均<0.05)。结论:NGAL和MMP-9在卵巢上皮性癌中表达上调,可能与卵巢上皮性癌的发生、发展有关。