异基因造血干细胞移植中NK细胞的作用

摘要异基因造血干细胞移植后，供者细胞可产生强大而持久的免疫治疗功效，其中异源反应性NK细胞活性是T细胞异源反应活性以外的，具有显著抗肿瘤／白血病活性的自然免疫现象，并逐渐受到人们的重视。已证实，NK细胞通过其受体与靶细胞MHC分子特异性的识别机制参与移植物抗白血病（GVL）作用并影响移植物抗宿主病（GVHD）的发生。异基因造血干细胞移植后异源反应性NK细胞输注已从动物实验逐渐应用于临床。本文就NK细胞异源反应性及其在异基因造血干细胞移植中的作用进行综述。     

免疫毒素去除T细胞在异基因造血干细胞移植中的应用

观察应用免疫毒素部分去除T细胞(TCD)的方法进行人类白细胞抗原／混合淋巴细胞培养(HLA/MLC)不相合异基因造血干细胞移植的临床疗效。采用蓖麻免疫毒素部分去T细胞对13例恶性血液病患者行HLA-MLC配型不相合的造血干细胞移植，其中慢性髓性白血病(CP1)6例；急性淋巴细胞白血病CR1 1例，CR2 1例，复发1例；急性髓性白血病CR1 2例，CR2 1例；骨髓增生异常综合征转化成急性髓性白血病M4型(CR1)1例。结果表明：13例患者中8例成功植入，其中2例发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病(aGVHD)，2例发生Ⅲ-Ⅳ度aGVHD。随访8-90个月，2例发生Ⅲ-Ⅳ度aGvHD患者早期死亡，另有1例患者死于迟发感染，其余5例均无病存活至今。5例未植活的患者中4例回输同一供者外周血造血干细胞后3例未植入，1例植活，但死于移植相关合并症；1例再次行同基因造血干细胞移植成功并无病存活至今。结论：采用蓖麻免疫毒素部分去T细胞的方法行HLA/MLC配型不相合的异基因造血干细胞移植可减少重度aGVHD的发生，但移植早期排斥率(HVG)较高，临床应用效果有待进一步评估。     

免疫活性细胞表达杀伤细胞抑制性受体与造血干细胞移植后移植物抗宿主病的关系

本研究的目的是探讨造血干细胞移植后杀伤细胞抑制性受体(KIR)CD158和CD94与GVHD发生的关系。用流式细胞术检测分析T淋巴细胞和NK细胞表达CD158a，CD158b和CD94表达状况，同时用PCR方法分析供受HLA—Cw配型，比较异基因外周血造血干细胞移植(allb-PBSCT)和脐血移植(UCBT)后该KIR分子变化和HLA—Cw相合或错配与GVHD发生的关系。结果表明：无论是PBSCT或是UCBT，移植后CD3^ CD158a^ 和CD3^ CD158b^ T细胞均增高并以CD8^ CD158b^ 细胞升高为主。发生急性与慢性GVHD组CD3^ CD158b^ 细胞均呈不同程度升高，在急性GVHD病例中升高最明显。急性GVHD期(即移植早期)KIR表达增高，慢性GVHD阶段(即移植后期)KIR呈减低趋势。CD94主要表达于CD3^ CD8^ T细胞，在UCBT或PBSCT后CD94在CD4^ T细胞和CD8^ T细胞均明显增高。5例HLA—Cw相合无1例发生重症GVHD；2例HLA—Cw不相合病例，有1例发生急重症GVHD，并死于间质性肺炎(IP)，另1例为AML(M5)，完全植入，无重度GVHD发生，但于53天后复发。4例相关相合移植中2例无急性GVHD，而无关相合4例均发生不同程度GVHD。结论：GVHD的发生与KIR表达有一定关系。CD158b分子可能是移植后早期T淋巴细胞活化的负调控分子。从T细胞表达KIR来理解GVHD发生机理，特别是与HLA-Cw特异性识别结合将有利于寻找一条新的特异性建立免疫耐受和减低GVHD的新策略。     

KIR与异基因造血干细胞移植中的移植物抗宿主病

异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病(GVHD)的发生、发展、治疗一直是移植领域不懈的研究目标.自从Ruggeri等人证实体外去除T细胞的单倍体造血干细胞移植模式下同种反应性NK细胞可预防GVHD、发挥移植物抗自血病(GVL)、促进植入的特点,同种反应性NK细胞为GVHD的研究开辟了新的研究领域.但杀伤免疫球蛋白受体(KIR)只是预测同种反应性NK细胞的一方面,并不代表同种反应性NK细胞的全部.随后关于KIR与造血干细胞移植预后的文章接踵而至,不同的移植中心结论不尽相同,分析原因可能与移植模式、移植物中T细胞参与、KIR重建规律不同有关.     

T细胞去除在异基因造血干细胞移植中的应用

T细胞去除(TCD)对allo-HSCT的疗效具有双重性,既能预防GVHD,又会导致移植排斥、 白血病复发率的升高及免疫重建延迟和EB病毒相关的淋巴增殖性疾病增加,因此限制了它的临床应用。 通过改进TCD技术有望达到既预防GVHD又不影响植人、抗白血病活性及免疫重建的目的。     

异基因造血干细胞移植治疗白血病9例

重庆医科大学附属第一医院血液内科2007-01/2008-04应用异基因造血干细胞移植治疗白血病患者9例,6例急性髓细胞性白血病,3例慢性髓系白血病;供者中6例为HLA完全相合的同胞,2例为HLA9/10相合的无关供者,1例为半相合供者;预处理采用经典的BU/CY方案或GIAC方案;移植物抗宿主病的预防采用环孢菌素A＋吗替麦考酚酯＋甲氨喋呤方案或环孢菌素A＋吗替麦考酚酯＋甲氨喋呤＋抗胸腺细胞球蛋白方案。结果全部患者均获得造血重建,中性粒细胞≥0.5×10^9L^-1、血小板〉20×10^9L^-1的中位时间分别是11,15d;无急性移植物抗宿主病发生,1例发生慢性移植物抗宿主病;随访3-16个月无病生存率为77.8%。死亡2例。     

分离GVL和GVHD的研究进展

造血干细胞移植中,如何增强移植物抗白血病效应同时抑制移植物抗宿主病是亟待解决的问题,本文从肿瘤细胞表面抗原、供者淋巴细胞输注、细胞因子、非清髓性骨髓移植、自然杀伤细胞、封闭共刺激信号及转基因技术等七个方面综述了这一领域的研究进展.     

T细胞去除在异基因造血干细胞移植中的应用

T细胞去除(TCD)对allo-HSCT的疗效具有双重性，既能预防GVHD，又会导致移植排斥、白血病复发率的升高及免疫重建延迟和EB病毒相关的淋巴增殖性疾病增加，因此限制了它的临床应用。通过改进TCD技术有望达到既预防GVHD又不影响植入、抗白血病活性及免疫重建的目的。     

杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因对异基因造血干细胞移植后常见并发症及复发的影响

造血干细胞移植(HSCT)是某些血液肿瘤疾病、免疫缺陷疾病、遗传代谢疾病等的有效治疗手段.伴随着接受H SCT患者的增多,移植后各种并发症日益受到关注,其中以病毒感染、移植物抗宿主病(GVHD)最为常见.移植后疾病复发是导致移植失败的主要原因.自然杀伤(NK)细胞是人体非特异性细胞免疫的重要组成部分,对外来病原菌的入侵起到第一道防线作用.NK细胞的杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)基因家族可编码KIR,而部分KIR可与人类白细胞抗原(HLA)-Ⅰ类分子特异性结合.近年来,有关供者KIR与移植后病毒感染,GVHD及复发的研究逐渐增多,某些KIR基因或者单倍体型可能与之密切相关.     

同种异基因Th2细胞移植对GVHD和GVL效应的作用

为探讨同种异基因Th2细胞移植是否可以减低移植物抗宿主病(GVHD)的发生和保留移植物抗白血病(GVL)效应的作用,在体外用rmIL-4,Con A和离子霉素把供鼠(C57BL/6H-2b)T细胞优势化诱导培养为Th2细胞,再把Th2细胞与供鼠骨髓细胞混合移植给红白血病受鼠模型(EL9611H-2d).结果表明未处理的对照组,受鼠平均存活时间为(10.6±1.3)天,10只均死于白血病;环磷酰胺化疗组,小鼠平均存活(18.7±4.2)天,10只小鼠最终均死于白血病;骨髓细胞和脾T淋巴细胞移植组,小鼠平均存活(22.7±7.4)天,9/10只均死于GVHD;骨髓细胞和Th2细胞移植组,3/10只在28天内死于GVHD,其余7/10只无GVHD发生,白血病发病时间明显推迟,平均存活(36.9±10.8)天,在50天时检查有2只鼠无白血病证据.研究证明体外极向化诱导培养的Th2细胞移植可减低GVHD发生的同时保留了抗白血病的能力.     

单核苷酸多态性及其在异基因造血干细胞移植中的应用

单核苷酸多态性是继限制性片段长度多态性，短串连重复序列多态性之后的第三代遗传标记，是基因组中变异最多的一种，被广泛应用于基因定位、克隆和遗传多样性研究以及法医学亲子鉴定等方面。作为一种稳定的遗传多态性，单核苷酸多态性成为异基因造血干细胞移植中嵌合体检测的新方法。本文就单核苷酸多态性的遗传特性，分析技术，在造血干细胞移植和其它方面的应用进行了综述。     

100例异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病的发生及其对患者复发和生存的影响

本研究探讨异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后急性移植物抗宿主病（aGVHD）和慢性移植物抗宿主病（cGVHD）的危险因素及其与预后的关系。对我院100例行allo—HSCT患者的临床资料进行了总结,对aGVHD、cGVHD的发生率和危险因素及其对复发和生存的影响进行了分析。结果表明：31例患者发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD,累积发生率为34．4％;14例发生Ⅲ-Ⅳ度aGVHD,累积发生率为17．7％。HLA相合程度与aGVHD的发生无显著相关性（P〉0．05）。曾发生的Ⅱ-Ⅳ度aGVHD是发生cGVHD的危险因素（HR=2．303,P=0．088）,女性因素为保护性因素（HR=0．401,P=0．055）。发生cGVHD者复发率较低。发生Ⅱ-Ⅳ度aGVHD为影响总生存率（OS）的危险因素（P〈0．05）,重度（Ⅲ-Ⅳ）aGVHD患者的死亡率极高（81．0％）,与0-Ⅰ度患者的死亡率（35．7％）相比有显著性差异（P=0．000）。结论：GVHD和移植物抗肿瘤效应（GVL）尚不能分离,但GVL的益处可能被GVHD相关死亡因素抵消,因此需积极防治重度aGVHD。局限型cGVHD可能是长期生存的有益因素。     

非清髓性异基因外周血造血干细胞移植治疗血液病6例报告

近年来 ,伴随移植学和免疫学研究的进展 ,国外一些学者新开展了非清髓性异基因外周血造血干细胞移植 (NMA Allo PBSCT)治疗血液病初步取得了较好的疗效[1-4 ] 。国内除我院有个例报告外尚无系列研究报告[5] 。我们用新设计的NMA Allo PBSCT治疗 6例血液病病人 ,效果如下。材料与方法病例6例病人均系 1998年 10月 - 1999年 10月在我科住院的病人 ,其中男 3例 ,女 3例 ,中位年龄 3 2 ( 16- 42 )岁。急性白血病 (AL)第一次完全缓解期 (CR1) 3例 ,其中急性髓性白血病 (AML) 2例 ,急性淋巴细胞白血病 (ALL) 1例。另 3例为 :慢性粒细…     

异基因外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病

为观察异基因外周血造血干细胞移植 (allo PBSCT)治疗急慢性白血病的疗效 ,从 1997年 3月至 2 0 0 3年 1月共进行了 2 1例急慢性白血病的Allo PBSCT。 2 1例的供者中 19例为HLA Ⅰ /Ⅱ抗原完全相合的同胞 ,1例慢性粒细胞白血病急粒变患者的供者为HLA半相合母亲 ,1例女性急性淋巴细胞白血病患者的供者为 1个B位点不合的胞妹。 2 1名供者均用rhG CSF动员 ,第 5天起用CS 3 0 0 0plus分离外周血单个核细胞 1-3次 ,预处理方案采用常用的TBI与联合化疗方案。所有病人均采用环胞菌素A和短程MTX进行移植物抗宿主病的预防。结果表明 ,移植后粒细胞恢复至≥ 0 .5× 10 9/L平均为 12天 ,血小板恢复至≥ 2 0× 10 9/L为 15天。 17例患者中发生急性GVHD 8例 (47% ) ,其中 1例为子母间移植 ;慢性GVHD 12例 (70 % ) ;4例存活的女性患者 ,包括 1例 1个B位点不合的ALL患者 ,均无急、慢性GVHD发生。 10 0天移植相关死亡 3例 (14 % ) ,复发 2例 (9.5% ) ,均为移植时未缓解患者。至报告时无病存活 11例 (52 .4% ) ,存活时间平均 40 (15-70 )个月。结论 :Allo PBSCT后造血恢复较快、白血病复发率相对较低 ,急性和重度GVHD的发生并无明显增加 ,但慢性GVHD发生率明显增高 ,并成为影响患者生存的主要并发症     

异基因造血干细胞移植患者5例护理

目的探讨异基因造血干细胞移植患者的护理。方法5例患者在100级层流病房内全环境保护下行异基因造血干细胞移植治疗,在治疗期间进行一系列的病情观察及护理,直到造血功能重建、植活稳定后迁出层流室。结果5例患者移植期间无明显发热、出血、感染及其他严重并发症发生,造血功能顺利重建。结论造血干细胞移植前后的护理工作对移植的成功具有关键作用。     

异基因造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征6例报告

本研究探讨异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）治疗骨髓增生异常综合征（MDS）的可行治疗方案及疗效。1999年9月-2007年2月采用清髓性预处理allo—HSCT治疗6例骨髓增生异常综合征患者,4例接受同胞HLA配型全相合的异基因外周血干细胞移植（allo—PBSCT）,2例接受单倍体相合异基因骨髓移植（hi—alloBMT）。预处理清髓方案为：全相合移植采用Bu＋Cy,单倍体相合并基因骨髓移植采用Cy4-TBI＋Ara—C。移植物抗宿主病（GVHD）采用联合免疫抑制剂的方法预防,全相合移植应用环胞菌素A和短程氨甲碟呤,单倍体相合并基骨髓移植除以上药物外还加用抗胸腺细胞球蛋白、CD25单克隆抗体及霉酚酸酯。结果表明,全部患者移植后均有造血重建,中性粒细胞数〉0．5×10^9／L及血小板数〉20×10^9／L的平均时间分别为15（11—20）天及20．3（12—28）天,植入证据检测证实为完全供者造血。仅1例发生急性1度皮肤移植物抗宿主病,其他患者未发生急性或慢性GVHD,1例移植后20个月死于疾病复发,1例移植后18个月死于肺部并发症,其余4例无病生存,中位存活时间51．8（18—108）个月。总之,allo—HSCT治疗MDS可行、有效,提高了年轻MDS患者疾病治愈及长期生存的机会。     

骨髓间充质干细胞对异基因骨髓移植后aGVHD和GVL的影响

为了观察骨髓间充质干细胞(BMMSC)对异基因骨髓移植(allo-BMT)后急性移植物抗宿主病(aGVHD)和移植物抗白血病(GVL)效应的影响，以急性淋巴细胞白血病(ALL)小鼠为动物模型，对其进行allo-BMT的同时，静脉输注体外培养的供鼠BMMSC，同时设立单纯allo—BMT对照组。记录受鼠存活时间；观察受鼠发生aGVHD一般反应及病理学变化；用流式细胞术检测受鼠CD4^ 、CD8^ T细胞亚群的差异；采用性染色体检查检测嵌合状况。结果显示：BMMSC推迟aGVHD发生的时间；降低CD4^ T细胞的同时增加CD8^ T细胞的数量；明显延长受鼠allo—BMIT后的生存时间。结论：BMMSC与allo-BMT联合进行具有一定的GVL效应；BMMSC能抑制allo—BMT后aGVHD的发生，但同时具有一定的GVL效应。