小儿~3H—TdR参入法淋巴细胞转化试验的初步观察及临床应用

<正> 淋巴细胞转化试验是测定机体细胞免疫功能常用方法之一。人体外周血液中的淋巴细胞体外培养,在刺激原的作用下,能转化成淋巴母细胞。转化时细胞中的RNA与DNA合成显著增加,因而大量摄取胸腺嘧啶核苷(TdR)以复制DNA,所以测定外周血的淋巴细胞中~3H—TdR参入量,在一定程度上能反映机体的细胞免疫功能。为了了解小儿时期及肺炎患儿的细胞免疫状态,我们应用~3H—TdR参入淋巴细胞DNA观察淋巴细胞转化,对100例各年龄组健康人及125例肺炎患儿的淋巴细胞转化功能进行了初步观察。     

急性白血病治疗前后骨髓细胞~3H-胸腺嘧啶核苷掺入试验的初步观察

细胞核的DNA(去氧核糖核酸)的合成代谢,是细胞生长和增殖的关键。胸腺嘧啶核苷(TdR)则是DNA的必需成份,TdR透过细胞膜进入细胞,迅速转化为DNA的前驱物——三磷酸胸腺嘧啶核苷(TdTP)被利用进行DNA的复制。采用氚标记的胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)进行急性白血病骨髓细胞的体外掺入试验,以标记指数(LI)代表摄取~3H-TdR的细胞的数量,测知DNA合成     

用放射性示踪技术研究血内两类淋巴细胞的增殖动态及放射敏感性

我们利用放射性同位素~6H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)作示踪剂,液闪测定~3H摻入淋巴细胞内DNA的放射性计数(cpm),以分别观察血内两种淋巴细胞的增殖动态,及比较其辐射敏感性的差异。     

用氚—胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法测定儿童血液淋巴细胞体外转化实验报告

细胞免疫是发生于依赖胸腺的淋巴细胞,它可以被植物血凝素(PHA)所刺激而发生分裂。PHA可促进淋巴细胞中的脱氧核糖核酸(DNA)合成增加,再引起细胞形态变化,这个过程叫做淋巴细胞转化。利用这个特点可以测定细胞免疫功能。胸腺嘧啶脱氧核苷(TdR)是DNA的前体,     

先锋霉素Ⅱ对培养的癌细胞DNA合成的影响

<正> 研究化学物质对癌细胞 DNA 或 RNA 作用形式来探讨癌发生的本质及治疗癌症的途径是十分有意义的。细胞的生物合成,如DNA 分子合成过程,可用放射性同位素标记的前体分子以放射自显影或液体闪烁计数技术示踪观察。胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA 分子的特殊前体,测定氘标记的胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入到 DNA 分子中的放射性,能客观、灵敏地反映 DNA 合成的情况。本文通过测定掺入到小鼠腹水型肉瘤 S_(180)细胞的~3H—TdR 放射性,初步探讨先锋霉素Ⅱ对培养的癌细胞 DNA 合成的影响。     

直肠癌治疗前后血清免疫抑制因子的变化

作者采用氚标记胸腺嘧啶核苷掺入正常人T 淋巴细胞转化抑制试验检测直肠癌患者血清中免疫抑制因子,结果提示抑制因子检测可望作为直肠癌等肿瘤治疗的免疫指标。     

虫草类的免疫药理研究 Ⅴ.蝙蝠蛾拟青霉人工发酵培养物对小鼠T细胞及其亚群功能的影响

采用(~3H)-TdR(胸腺嘧啶核苷)掺入法,观察了蝙蝠蛾拟青霉人工发酵培养物(简称拟青霉)对小鼠T细胞及其亚群功能的影响。结果拟青霉能显著抑制小鼠淋巴细胞转化反应;在体外能显著增强刀豆索A(ConA)诱导的小鼠抑制性T细胞的功能,无淋巴细胞毒性作用;在体内显著增强自发性抑制性T细胞的功能。结果提示拟青霉能选择性地作用于Ts细胞亚群而发挥免疫调节作用。     

树枝状角膜炎的联合治疗——高效价α-干扰素和三氟胸腺嘧啶核苷的应用

过去研究用人白细胞干扰素联合三氟胸腺嘧啶核苷治疗树枝状角膜炎是有效的,用高效价干扰素(30×10~6iu/ml)的疗效最好。作者实验用更高效价的干扰素(100×10~6iu/ml)疗法。用干扰素联合三氟胸腺嘧啶核苷能加速上皮愈合,有统计学意义(P<0.01),其效力取决于效价。高效价的α干扰素最好。作者用三氟胸腺嘧啶核苷联合30×10~6的干扰素和三氟胸腺嘧啶核苷联合100×10~6的干扰素作治疗比较,研究更高效价干扰素     

免疫功能受损的T淋巴细胞低剂量辐射效应

目的观察低剂量辐射对免疫功能受损的T淋巴细胞的影响。方法用同位素掺入法观察免疫功能受损的小鼠和营养不良患儿T淋巴细胞DNA、蛋白质合成及其低剂量辐射效应。结果2.5 Gy全身照射和环磷酰胺(CTX)腹腔注射小鼠外周血WBC分别在第4 d和第6 d下降最为明显,WBC分别从4850×106/L降至1078×106/L,4878×106/L降至1400×106/L。T淋巴细胞3H-TdR(3H-胸腺嘧啶核苷)掺入明显下降,每分钟放射性计数(CPM)分别从6075降至4099,5764降至3715。与0 cGy组相比,经5 cGy辐射后3H-TdR掺入明显增加,CPM分别从4099升至5639,3715升至5404。5 cGy辐射还可以明显增加营养不良患儿T淋巴细胞14C-TdR(14C-胸腺嘧啶核苷)和3H-Tyr(3H-酪氨酸)的掺入,CPM分别从5179升至6201,1393升至2371。结论适宜的低剂量辐射对免疫功能受损的T淋巴细胞DNA、蛋白质合成有刺激效应。     

广谱口服抗菌药——泰利必妥片(Tarivid Tab)

泰利必妥是日本第一制药株式会社所开发的新喹诺酮系合成抗菌剂。一般名称氟嗪酸(简称OFLX) 作用机理泰利必妥的抗菌活性为阻断DNA合成系中的DNA gyrase。能显著抑制[~3H]脱氧胸腺嘧啶核苷的大肠菌KL-16株侵入,也轻微抑     

用放射自显影法测定细胞免疫功能

淋巴细胞转化法是检查细胞免疫功能的主要方法之一。目前国内多数仍采用形态学方法,其主要缺点是难以明确划分过渡型细胞。由于标准不同,各实验室数值不一。如用液体闪烁计数器测定掺入的(?)H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR),虽可弥     

升温对T淋巴细胞增殖的影响

T细胞是机体内具有重要的免疫调节和效应功能的细胞群体,其功能表达不仅依赖于抗原或促分裂素引起的激活过程,还与细胞增殖有密切关系。基于机体在微生物病原感染时T细胞常处在体温升高与抗原激活影响下,以及升温对肿瘤的生长有抑制作用,本实验研究升温(热休克)对人T淋巴细胞增殖的影响。若以未经热休克预处理的激活淋巴细胞的~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)在酸不溶性物质(DNA)中的平均参入率为100％,则在先经16～24hPHA活化培养的淋巴细胞进行45℃10min处理后,~3H-     

老年糖尿病患者外周血淋巴细胞DNA修复功能的初步研究

我院于1988年5月至1990年7月对32例老年糖尿病患者用紫外线(UV)诱发~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入外周血淋巴细胞非程序DNA合成(Unscheduled DNA Synthesis, UDS),并进行液体闪烁计数测定,旨在探索DNA修复功能与糖尿病的关系,现报告如下.一、对象老年糖尿病组:共32例,其中男性20例,女性12例;年龄60～77岁,平均65.8岁.     

氚—胸腺嘧啶核苷掺入法测定T淋巴细胞转化试验

本文介绍了应用氚—胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法测定体外淋巴细胞培养在PHA刺激下DNA合成的条件。实验结果表明,细胞培养72小时后,加~3H-TdR掺入24小时和PPO、POPOP、萘、二氧六(?)配制的闪烁液测得放射性为最灵敏。加~3H-TdR剂量3.0微居是可取的。     

白血病患者细胞增殖周期临床意义的探讨

近年来,国外采用分子生物学和细胞遗传学相结合的方法,建立了 BrdU(5溴脱氧尿嘧啶核苷)标记染色体测定细胞增殖周期技术。根据 DNA 半保留复制的特性和碱基类似物 BrdU 能替代胸腺嘧啶核苷掺入 DNA的原理,可以通过染色单体分化染色的受色类型判断细胞群体的增殖速率。这一技术已用于观察白血病人细胞增殖动力学变化,对     

氚化胸腺嘧啶核苷掺入法测定 人外周血淋巴细胞转化的影响因素

用氚化胸腺嘧啶核苷(~3H—TdR)掺入法测定有丝分裂原PHA刺激人外周血淋巴细胞转化反应。观察到在PHA浓度为50μg/ml时,5×10~5单个核细胞/ml的转化刺激指数最高。当细胞数继续增加,其刺激指数增加不明显。用自然沉降与密度梯度离心两种方法分离的淋巴细胞对PHA 刺激的反应不同。在无PHA刺激的情况下,自然沉降淋巴细胞的自然转化较密度梯度离心法分离者为高。     

正常人姐妹染色单体互换的研究

1973年Latt报导在应用含有5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridine简称Brdu)的培养液内,使淋巴细胞生长两个周期,由于在DNA合成期BrdU掺入置换了胸腺嘧啶,经用荧光染料33258Hoechst染色后,在荧光镜下可清楚的观察到染色体的两条染色单体发出暗亮不同强度的荧光     

海燕中含氮化合物的研究

目的 研究海燕 Asterina sp.的化学成分。方法 采用中压硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱、高效液相半制备色谱和薄层制备等方法对海燕的化学成分进行分离,利用 波谱分析技术和文献对照鉴定其结构。结果 从海燕中分离得到10个含氮化合物,分别鉴定为尿嘧啶(1)、胸腺嘧啶(2)、次黄嘌呤(3)、尿嘧啶核苷(4)、2′-脱氧尿嘧啶核苷(5)、鸟嘌呤核苷(6)、4-羟基-2′-脱氧嘧啶核苷(7)、3甲基-2′-脱氧胸腺嘧啶核苷(8)、氨基苯丙酰胺(9)、2′-脱氧胸腺嘧啶核苷(10)。结论 化合物3、5～9为首次从海燕中分离得到。     

呼吸道合胞病毒刺激体外淋巴细胞转化试验的初步探讨

<正> 继1966年Nowell发现植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)能刺激淋巴细胞出现母细胞转化现象之后,Rchrek证明,加入结核菌素或其纯蛋白衍生物(PPD)作为刺激原,进行淋巴细胞体外培养时也出现转化现象。这种淋巴细胞转化反应,与机体的细胞免疫性有密切关系。PHA为非特异性抗原刺激物,应用淋巴细胞在其刺激后的转化指数作为对机体细胞免疫功能的测定已广泛应用于临床;用特异性刺激因子(如结核菌素、病毒、细菌等)进行特异性淋巴细胞转化试验,国外也有报道。Gupta等应用PPD刺激末梢淋巴细胞,以淋巴母细胞转化指数作为结核性脑膜炎诊断的辅助证据。Scott和Welliver等采用纯化呼吸道合胞病毒(RSV)作为刺激原,应用~3H-胸腺嘧啶掺入法进行RSV特异性淋巴细胞转化试验以观察细胞免疫在RSV感染发病机理的作用,说明特异性抗原在体外刺激淋巴细胞转化可用以测定特异性细胞免疫功能。     

腺苷脱氨酶活性测定及其与临床疾病的相关性研究进展

腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)是嘌呤核苷代谢中重要的酶类,属于巯基酶,ADA首先催化腺嘌呤核苷转化为次黄嘌呤核苷,再经核苷磷酸化酶作用转化为次黄嘌呤,最终代谢产物为尿酸。人体内多种组织中ADA水平有不同程度的升高,其中含量较高的组织有胸腺、盲肠、脾脏和其他淋巴组织等。血液中ADA以红细胞、粒细胞和淋巴细胞中分布居多,而T淋巴细胞中ADA的活性比B淋巴细胞活性更高。研究表明,ADA与多种疾病的发生或发展有关,故临床上可通过测定血液、体液中的ADA及其同工酶水平来对疾病的诊断、鉴别诊断、治疗等方面提供一定的依据。