扩张型心肌病新型抗钙通道抗体的发现

目的:观察扩张型心肌病(DCM)患者血清中是否独立存在抗心肌细胞L型钙离子通道(Human Cav1.2)自身抗体(简称:抗钙通道抗体)。方法:以合成多肽片段作为抗原,用ELISA法检测DCM患者(DCM组)及正常人(正常对照组)(各60例)血清中的抗钙通道抗体和抗心肌细胞线粒体内膜ADP/ATP载体蛋白(ANT)抗体。用亲合层析法提纯DCM患者(DCM组)血清中的抗钙通道抗体,以制备的大鼠抗Human Cav1.2α1亚单位多克隆抗体作为阳性对照,用免疫印记技术,免疫荧光组织化学技术检测DCM患者血清中抗钙通道抗体。结果:ELISA检测60例DCM患者中29例抗钙通道抗体阳性(29/60,阳性率48.33%),明显高于正常对照组(4/60,6.67%,P<0.01)。抗钙通道抗体和抗ANT抗体检出结果无一致性(P>0.05)。免疫印记中亲合层析法提纯的DCM患者抗钙通道抗体可特异地识别240000的多肽(Human Cav1.2α1c亚单位),结果与阳性对照相符。抗钙通道抗体经抗原充分吸附后特异性识别被阻断。免疫荧光实验显示,抗钙通道抗体能特异性地结合在大鼠心室肌细胞膜上。结论:DCM患者血清中存在新型的抗钙通道抗体。     

肠病毒感染及抗ADP/ATP载体抗体在病毒性心脏病发病中的意义

目的 :探讨肠病毒感染与抗二磷酸腺苷 /三磷酸腺苷 (ADP/ ATP)载体抗体在病毒性心脏病发病中的意义。方法 :应用逆转录聚合酶链式反应 (RT- PCR)和免疫转印法对临床诊断为病毒性心肌炎 (VMC)和扩张型心肌病 (DCM)患者进行肠病毒核糖核酸 (RNA)及抗 ADP/ ATP载体抗体的检测。结果 :RT- PCR方法检测肠病毒 RNA,VMC组 (n =74) 4 2例 (56.8% )阳性 ,DCM组 (n=2 6) 1 1例 (42 .3% )阳性。与健康组 (n =30 )比较具有显著性差异 (分别 P <0 .0 1 ,P <0 .0 5) ;肠病毒感染与 DCM患者心脏功能降低有明显相关性。免疫转印法检测 VMC(n =34)和 DCM(n =2 6)患者血清抗 ADP/ ATP载体抗体 ,VMC组 2 3例 (67.6% )阳性 ,DCM组 1 2例 (46.2 % )阳性 ,而健康组均为阴性 ;抗 ADP/ ATP载体抗体和肠病毒 RNA的检出相关 (r=0 .442 )。结论 :肠病毒RNA和抗 ADP/ ATP载体抗体在病毒性心脏病患者中检出具有相关性 ,对临床上出现前驱感染和心脏症状的患者 ,及时进行肠病毒 RNA、CVB- Ig M、抗 ADP/ ATP载体抗体的检测 ,有助于 VMC和 DCM的早期诊断。     

系列抗心肌多肽自身抗体对扩张型心肌病的诊断价值

目的 :探讨抗人工合成多肽自身抗体在扩张型心肌病 ( DCM)诊断中的价值。方法 :根据计算机预测心肌 ADP/ ATP载体 ( ANT)、β1 受体、M2 受体和肌球蛋白重链 ( MHC)抗原决定簇的氨基酸序列并合成多肽片段 ,以此片段作为抗原 ,同时用天然抗原对比 ,以酶联免疫吸附方法检测 48例 DCM患者 ( DCM组 )和 48例健康献血员 (对照组 )血清中抗心肌多肽自身抗体。结果 :DCM组中抗 ANT抗体、抗 β1 受体抗体、抗 M2 受体抗体和抗MHC抗体阳性分别有 31、2 6、2 0和 2 3例 ,与对照组比较有显著性差异 ( P <0 .0 0 5 ) ,且与天然心肌抗原检测结果高度一致 ( P <0 .0 1)。结论 :人工合成多肽可代替天然心肌抗原用于检测抗心肌自身抗体 ,抗心肌多肽抗体检测可以作为 DCM免疫学诊断方法     

免疫和结缔组织疾病

,55131抗心肌线粒体自身抗体的识别及其临床意义/廖玉华…//临床医学一1995,15(1)一38一39 检测扩张型心肌病(DCM)22例,冠心病20例,健康献血员20例。结果:待测人血清经点免疫一过氧化物酶抗过氧化物酶(D卜PAP)法检测,巧例IX:M患者血清与心肌线粒体结合,而另两均为阴性(尸<0.001)。经免疫转EP技术(IMT)分析,16例I犯M患者血清与心肌线粒体30000肤结合,另两组均阴性(P<。.01)。两种方法识别符合率86.4%。说明此抗体的检测,对I兀二M的诊断具有很高的特异性。参3(梁一伍),55132常见变异型免疫缺陷病一例/张月莉…刀中华结核和呼吸杂志一1…     

抗心肌抗体消长与病毒性心脏病转化关系探讨

目的:探讨抗心肌抗体消长与病毒性心脏病(VHD)病程的关系及在病毒性心肌炎(VMC)向扩张型心肌病(DCM)转化过程中所起的作用。方法:通过计算机预测ADP/ATP载体(ANT)、β1-受体、M2-胆碱能受体及肌球蛋白重链(MHC)抗原决定簇的氨基酸序列,用人工多肽合成仪合成的多肽作为抗原,应用ELISA方法,对不同病程的VHD患者进行抗心肌抗体的检测,同时对慢性VMC(CVMC)患者进行追踪观察及干预,并评价疗效。结果:随着VHD患者病程的延长,4种抗心肌抗体的检出率呈先升高后降低的趋势,CVMC和早期DCM患者抗心肌抗体阳性率最高;22例抗体阳性的CVMC患者经过3.1年随访,其中8例演变成为DCM,经给予相应药物干预治疗后6例恢复正常;而6例抗体阴性的患者随访期间均未出现DCM表现。结论:监测患者血清中抗心肌抗体有助于防止VMC向DCM转化,对DCM的早期诊断和干预及VHD的疗效判断和预后都可以提供重要的线索。     

慢性病毒性心肌炎抗体对预后的影响及早期干预的疗效

目的：探讨抗心肌抗体在慢性病毒性心肌炎（VMC）向扩张性心肌病（DCM）转化过程中所起的作用及早期干预的疗效。方法：通过计算机预测ADP／ATP载体蛋白（ANT）和β1受体抗原决定簇的氨基酸序列，用人工多肽合成仪器合成的多肽作为抗原，应用ELISA方法，对慢性VMC病人进行抗心肌抗体的检测，同时对其进行临床追踪观察及干预，并评价其疗效。结果：慢性VMC病人抗心肌抗体联合检测阳性率为80％；22例抗体阳性的慢性VMC患经过3．1年随访，其中8例（36．4％）演变为DCM，经给予地尔硫Zhuo或倍他乐克干预治疗后6例恢复正常，而6例抗体阴性的患随访期间均未出现DCM表现。结论：慢性VMC病人抗心肌抗体阳性率较高，部分患会转化为DCM；药物干预治疗效果较好。     

抗心肌抗体对心肌炎心肌病临床诊断、治疗和预后评估的价值

抗心肌抗体(AHA)是机体产生针对自身心肌蛋白分子的抗体总称,介导心肌免疫损伤,促使病毒性心肌炎(VMC)和扩张型心肌病(DCM)的发生发展。近年来越来越多的临床证据显示,AHA在VMC和DCM患者体内表达具有高度敏感性和特异性。AHA的检测对VMC和DCM早期诊断、疾病风险评估和预后判断具有重要价值;而早期针对AHA选择临床用药,能有效防治疾病、改善患者预后。     

扩张型心肌病抗心肌线粒体ADP/ATP载体自身抗体与Th细胞亚群分析

目的 :探讨扩张型心肌病 (DCM)的体液免疫学发病机制。方法 :借助免疫转印技术及流式细胞仪技术同步分析了 33例 DCM患者和 2 8例正常人的血清中抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体和 Th细胞亚群。结果 :DCM组 Th2 细胞在外周血淋巴细胞中占 (0 .5 3± 0 .2 3) % ,对照组 Th2 细胞占 (0 .2 2± 0 .18) % ,两组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;DCM组抗心肌线粒体 ADP/ATP载体抗体的检出率 (6 0 .6 1% )明显高于对照组(2 1.43% ) (P <0 .0 1) ;DCM抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体 ,阳性组中 Th2 细胞在外周血淋巴细胞中占 (0 .6 7± 0 .31) % ,阴性组 Th2 细胞占 (0 .2 8± 0 .14) % ,两组比较差异有显著性 (P<0 .0 1)。结论 :DCM中 Th2细胞与抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体的产生有关 ,而且 Th2 细胞和抗心肌线粒体 ADP/ATP载体自身抗体参与了 DCM的病理过程。体液免疫反应的异常在 DCM的发病机制中起着十分重要的作用。     

器官特异性抗心肌自身抗体与扩张型心肌病

近年来已证实扩张型心肌病(DCM)患者血清中存在器官特异性抗心肌自身抗体,这些抗体与心肌细胞特定抗原分子结合,引起心肌损害。DCM特异性抗心肌抗体的产生与人类白细胞抗原(HLA)Ⅱ类具有相关性。本文就特异性抗心肌抗体与DC-M的关系作一综述。     

原发性胆汁性肝硬化患者自身抗体检测及其临床意义

目的 探讨血清自身抗体对原发性胆汁性肝硬化(PBC)的诊断及其临床意义.方法 对PBC患者采用间接免疫荧光、免疫印迹法检测抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗线粒体抗体(AMA),并对AMAM2亚型及其抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/Le)、抗肝肾微粒体Ⅰ型(LKM-1)和抗肝特异性胞浆Ⅰ型抗体(LC-1)等肝脏疾病相关的自身抗体进行检测.结果 PBC患者自身抗体以AMA和AMAM2亚型为主.其阳性率分别为96.5%和93.1%.患者的抗体滴度均大于1:100,其中有8例出现ANA和SMA,1例出现AMA和SLA/LP同时阳性,表现与Ⅰ型和Ⅲ型自身免疫性肝炎重叠,另有19例AMAM2阳性患者进行肝穿病理检查时,12例(63.7%)患者病理提示符合PBC诊断.结论 自身抗体对PBC有诊断意义,注重自身抗体的检测对明确自身免疫性肝病有重要的临床意义.     

小儿心肌疾病抗肌球蛋白抗体和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的研究

为探讨病毒性心肌炎（VMC）和扩张型心肌病（DCM）发病的自身免疫机制，采用酶联免疫吸附和放射免疫技术检测30例VMC、14例DCM患儿血浆中抗肌球蛋白抗体和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM－CSF）。结果：VMC和DCM患儿抗肌球蛋白抗体和GM－CSF的阳性率均为54．5％（24／44），而正常对照组分别为4．0％（1／25）和8．0％（2／25）（均P＜0．01），且抗肌球蛋白抗体与GM－CSF的血浆水平有正相关性（r＝0．3583，P＜0．05）。提示：抗肌球蛋白抗体和GM－CSF均参与了VMC和DCM的发病，与心肌的自身免疫损伤过程有关。     

小儿病毒性心肌炎与扩张型心肌病临床特征与鉴别

目的:探讨小儿病毒性心肌炎(VMC)与扩张型心肌病(DCM)的不同临床特征。方法:对63例小儿 VMC和23例小儿DCM的临床资料进行对比分析。结果:与VMC相比,DCM患儿发病年龄在2岁以下者 (4.3%)少见,病程较长(>2个月者占61.0%),心脏增大和心力衰竭发生率高(均P<0.05),心脏增大明显,中 重度二尖瓣反流(82.6%)多见,心力衰竭较严重,心脏收缩功能减退显著(P<0.05);与DCM相比,VMC患儿 多有新近病毒感染史(79.4%),血清病毒 IgM阳性(77.1%)及CK MB升高(77.8%)(均P<0.05),治疗3个月 后VMC患儿轻度增大的心脏恢复正常。结论:小儿VMC与DCM在发病年龄、病程、有无新近病毒感染史,CK MB升高、心脏增大、心力衰竭和心脏收缩功能减退的发生率及程度,治疗效应方面均有不同,但两者的差异是相 对的,必须综合判断才能做出正确诊断,其中超声心动图和治疗效应对鉴别诊断尤为重要。     

病毒性心肌炎与扩张型心肌病心肌线粒体DNA缺失的定量分析

目的对比研究病毒性心肌炎(VMC)与扩张型心肌病(DCM)患者活检心肌组织线粒体DNA(mtDNA)缺失突变情况及其与外周淋巴细胞mtDNA缺失程度的相关性.方法用定量PCR法检测20例VMC患者、12例DCM患者心肌细胞及其外周血淋巴细胞mtDNA4977碱基对(mtDNA4977)和mtDNA7436碱基对(mtDNA)缺失率.取12例健康意外死亡者心肌和23例献血员外周血淋巴细胞作正常对照.结果正常对照者、VMC和DCM患者心肌细胞均存在mtDNA4977及mtDNA7436缺失,合计缺失率分别为0.175%、0.385%和3.004%;外周淋巴细胞mtDNA缺失程度与心肌细胞呈一致性改变,且有良好的相关性(r=0.960,P＜0.001).结论mtDNA缺失可能是VMC发病及其向DCM演变的一个重要心肌损伤机制;外周淋巴细胞在研究心肌细胞mtDNA缺失中的作用值得进一步探讨.     

心力衰竭患者抗β3 肾上腺素能受体自身抗体的分布及特性

目的探讨心力衰竭(心衰)患者血清中的抗β3肾上腺素能受体(β3-AR)自身抗体的生物学效应,为临床治疗心衰提供新的思路和线索.方法 (1)以人β3-AR细胞外第二环的合成肽段作为抗原,采用ELISA筛选正常人和心衰患者血清中抗β3-AR自身抗体.(2)提纯该抗体阳性的患者血清中的IgG.(3)设立各组对照观察该抗体对成年大鼠心肌细胞收缩效应的影响.(4)设立各组对照观察该抗体对乳鼠心肌细胞跳动频率的影响.结果 (1)正常人抗β3-AR自身抗体的阳性率为11.0%,平均滴度为1∶ 14.59±1.61;心衰患者抗β3-AR自身抗体的阳性率为26.7%,平均滴度为1∶ 43.27±2.71;与正常人相比,P＜0.05.(2)与空白对照组相比,该抗体可降低成年大鼠心肌细胞收缩幅度/初长度(3.84%±0.33%)、收缩速率(-0.47 μm/s±0.07 μm/s)和舒张速率(0.17 μm/s±0.02 μm/s),P＜0.05.该作用不能被纳多洛尔(nadolol,β1-AR和β2-AR受体拮抗剂)阻断,但可被布拉洛尔(bupranolol,非特异性β受体拮抗剂)或β3抗原阻断.(3)与空白对照组(94.3次/min±10.7次/min)相比,该抗体可降低乳鼠心肌细胞跳动频率(47.1次/min±8.11次/min),P＜0.05.同样该作用不能被纳多洛尔阻断,但可被布拉洛尔或β3抗原阻断.此外,该抗体的负性变时效应在观察时间内(6 h)无衰减.结论心衰患者血清中含有较高滴度的抗β3-AR自身抗体并具有负性变力和变时效应,提示该抗体可能参与心衰的病理生理机制.     

肌球蛋白致自身免疫性心肌疾病的实验研究

目的　探索在没有病毒感染的情况下 ,自身免疫机制在心肌炎和心肌病发病中的作用。方法　 (1)猪心肌肌球蛋白致BALB/C鼠自身免疫性心肌疾病模型的复制 :实验组 (n =32 )于实验的第 0 ,7和 30天 3次注射肌球蛋白 ,对照组 (n =2 0 )与实验组同样的时间注射弗氏完全佐剂 ,于初次免疫后的第 15 ,2 1和 12 0天分别留取血清和心肌标本。 (2 )病毒性心肌炎模型的复制 :病毒接种组 (n =2 2 )给予 10 3 TCID50 / 0 1mlCVB3 溶液腹腔注射 ,对照组 (n =10 )给予Vero细胞冻融液 0 1ml腹腔注射 ,接种时间及采样时间同肌球蛋白免疫组。 (3)抗体检测 :ELISA法检测小鼠血清抗肌球蛋白抗体。结果　病理结果显示 ,肌球蛋白致心肌炎小鼠急性期 (15和 2 1d)以心肌纤维变性坏死和淋巴细胞浸润较明显 ,间质病变较轻 ,内膜和心瓣膜无明显改变 ;慢性期 (12 0d)仅见心肌纤维化 ,急慢性期均可检测到高滴度的抗肌球蛋白抗体 (P <0 0 0 1) ,对照组为正常心肌 ,抗体滴度低。病毒接种组慢性期亦显示成纤维细胞增生。结论　心肌肌球蛋白可以作为自身抗原刺激机体产生自身免疫反应 ,在没有病毒感染的情况下 ,单一的自身免疫机制即可导致心肌炎向心肌病的转化。     

Identification of alpha- and beta-cardiac myosin heavy chain isoforms as major autoantigens in dilated cardiomyopathy.

BACKGROUND. Immunization with cardiac myosin induces experimental autoimmune heart disease in genetically predisposed mice. These mice produce heart-specific autoantibodies, some of which are directed against the cardiac myosin isoform. METHODS AND RESULTS. We have reported the presence of circulating heart-specific autoantibodies in 26% of patients with idiopathic dilated cardiomyopathy (DCM) using indirect immunofluorescence. To identify the autoantigen(s) recognized by heart-specific autoantibodies in human disease, we tested, by Western blotting, sera from 26 DCM patients, 14 of whom were cardiac antibody-positive and 12 antibody-negative, as well as sera from 12 patients with cardiac failure from ischemic or valvular heart disease and from 13 normal subjects who were cardiac antibody-negative. Crude myofibrillar proteins and myosin preparations extracted from human atrial or ventricular specimens were used as antigens. Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis was performed. The proteins were electrophoretically transferred to nitrocellulose sheets. The paper strips were incubated in sera from patients or controls at 1:100 dilution; the reaction was revealed with a peroxidase-labeled second antibody against human immunoglobulin. Twelve of the 14 DCM sera (86%) containing heart-specific antibodies reacted with both the alpha- (atrial specific) and beta- (ventricular and slow skeletal) myosin heavy chain isoforms; none of the 13 normal sera (p = 0.0001) and one of the 24 heart failure-negative control sera (4%, p = 0.0001) contained antibodies against myosin heavy chain. CONCLUSIONS. These findings indicate that alpha- and beta-cardiac myosin heavy chain isoforms as in the murine model of autoimmune heart disease are major autoantigens in patients with idiopathic DCM.     

Cardiac PPARalpha expression in patients with dilated cardiomyopathy

BACKGROUND: The peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARalpha) is a central regulator of myocardial fatty acid (FA) metabolism implicated in the pathogenesis of heart failure. AIMS: To characterize PPARalpha regulation in human dilated cardiomyopathy (DCM), we studied the expression of cardiac PPARalpha, cardiac carnitine palmitoyl-transferase I (CPT-1), a major PPARalpha target gene, and of the cardiac glucose transporter GLUT-4 in patients with DCM. METHODS: Left ventricular biopsies were taken from patients with DCM (n=16) and control subjects (n=15), and mRNA expression was quantitated using real-time PCR (SYBR((R))Green) and protein expression was measured by Western immunoblotting. RESULTS: Left ventricular PPARalpha mRNA levels were significantly increased in the DCM group compared to the control group (136+/-25.4% vs. control, p<0.01). Consistently, DCM patients had a significantly higher cardiac CPT-1 mRNA expression (147+/-51% vs. control, p<0.05) compared to the control group. Cardiac GLUT-4 expression was similar in both groups. CONCLUSION: Elevated cardiac PPARalpha levels followed by an induction of cardiac CPT-1 expression may result in increased fatty acid metabolism for cardiac energy production in DCM, suggesting a specific cardiac metabolic program in human DCM compared to other types of cardiomyopathy.     

从病毒性心肌炎演变为扩张型心肌病:病毒的作用

病毒感染、宿主免疫反应、以及遗传和环境变化是决定病毒性心肌炎向扩张型心肌病演变的重要因素,其中病毒感染既是启动又是影响疾病发生发展的关键环节。近年研究发现,病毒不仅对心肌细胞有直接和间接损伤作用,而且还通过逃逸宿主先天免疫、诱导免疫因子分泌或表达异常等机制推动疾病进程。抗病毒治疗有益于病毒性心肌炎患者的恢复,在一定程度上抑制扩张型心肌病的发生。