中国南海海绵和珊瑚共附生真菌多样性及其抑菌活性研究

目的揭示中国南海海绵和珊瑚共附生真菌多样性及其抗菌活性。方法采用9种不同的真菌培养基对海绵和珊瑚中的共生真菌进行分离培养和纯化,根据真菌18SrDNA对所分离的真菌进行鉴定,使用MEGA 5.2软件对所分离真菌进行系统发育分析。采用圆形滤纸片法进行抑菌活性筛选。结果从采自南海的6种海绵与3种珊瑚中共分离得到106株真菌菌株,通过形态分析和序列分析排重得到41株独立真菌菌株。18SrDNA序列比对结果分析显示,分别属于子囊菌门(Ascomycota)的11个目和担子菌门(Basidiomycota)的4个目,共计26个属。其中子囊菌门所占比例最高为93.4%,剩下的6.6%为担子菌门。通过抑菌活性筛选显示部分真菌对革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌具有广谱抗菌活性。结论本研究揭示了中国南海海绵和珊瑚共附生真菌丰富的种群多样性及部分真菌的抑菌活性,为进一步开发利用海绵和珊瑚共附生真菌及生产活性物质奠定了基础。     

海绵共附生真菌抗菌活性次级代谢产物研究进展

海绵共附生真菌次级代谢产物具有独特的化学结构和显著的生物学活性,是创新药物研发的重要来源.这些次级代谢产物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)等多种致病菌株具有潜在的抗菌活性.本文综述了2002-...     

一株海绵共附生真菌Fusarium equiseti SCSIO 41019的次级代谢产物及其抑菌活性研究

目的 研究海绵共附生真菌Fusarium equiseti SCSIO 41019的次级代谢产物及抑菌活性。方法 采用中压硅胶柱色谱、中压反相ODS柱色谱及高效液相色谱等方法对发酵产物进行分离和纯化，运用核磁数据及文献对比的方法鉴定化合物结构。采用滤纸片琼脂扩散法、改良肉汤稀释法评价化合物的抑菌活性。结果 从其大米发酵产物中分离并鉴定了8个化合物，分别为equisetin(1)、5'-epiequisetin(2)、lumichrome(3)、N-乙酰基色胺(4)、亚油酸(5)、methyl (4-hydroxyphenyl) acetate(6)、methyl (2-hydroxyphenyl) acetate(7)和graminin B(8)。化合物1、2和5对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)分别具有不同程度的抑制作用，最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)为2.0~125μg/mL，其中化合物1的抑菌活性最强(MIC值分别为2.0和3.9μg/mL)。结论 从菌株Fusarium equiseti SCSIO 41019分离得到两个具良好抑菌活性的化合物(1~2)，为将其开发为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的先导化合物提供一定参考。     

海绵共附生真菌Purpureocillium lilacinum的化学成分及T细胞调节活性研究

目的 对海绵Hymeniacidon sp.共附生真菌Purpureocillium lilacinum的化学成分及T细胞调节活性进行研究。方法 运用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱及高压液相色谱等色谱技术对真菌乙酸乙酯粗提物进行分离纯化得到单体化合物,通过现代波谱（核磁共振,质谱）及光谱（旋光）的综合运用并结合文献对照对化合物结构进行鉴定,运用流式实验对化合物T细胞调节活性进行测试。结果 共分离获得5个甾体化合物,鉴定为(24R)-豆甾-4-烯-6β-醇-3-酮（1）、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,9α-三醇-6-酮（2）、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α-二醇-6-酮（3）、麦角甾-5,24-二烯-3β-醇-7,23-二酮（4）及(22E,24R)-麦角甾-5,8,22-三烯-3β-醇-7-酮（5）。体外活性筛选实验中,化合物2~5在2.5 μmol/L时对刀豆蛋白A（ConA）诱导的T细胞增殖显示抑制活性,化合物5在10 μmol/L时对CD3+T细胞的增殖显示显著抑制活性,所有受试化合物对CD4+/CD8+ T细胞分化活性均无影响。结论 化合物1~4为首次从P. lilacinum中分离获得。本文是对化合物1~5 T细胞调节活性的首次报道。     

1株珊瑚共附生真菌Talaromyces verruculosus GXIMD 02504的次级代谢产物及抑菌活性研究

目的 开展1株北部湾来源珊瑚共附生真菌Talaromyces verruculosus GXIMD 02504的次级代谢产物及其抗菌活性研究。方法 采用多种现代色谱分离技术对菌株发酵产物进行分离纯化,利用核磁共振技术和文献数据对比解析化合物的化学结构,并采用滤纸片琼脂扩散法和改良肉汤稀释法测定其抑菌活性。结果 从其液体发酵产物中共分离鉴定了9个化合物,分别为chrodrimanins A-B, E-F, H(1～5)、芝麻素(6)、樱黄素(7)、5,7,4-三羟基异黄酮(8)、N-acetyl-tryptamine(9)。化合物8显示出对表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)的弱抑制活性,最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC)为78μg/mL。结论从菌株T. verruculosus GXIMD 02504中分离得到以chrodrimanin类混源萜为主的化合物9个,其中化合物6～8为首次从该属中分离得到,且化合物8具有一定的抗表皮葡萄球菌活性。本研究丰富了该菌次级代谢产物的结构多样性。     

海绵共附生微生物活性次级代谢产物的研究进展

目的综述海绵共附生微生物次级代谢产物的生物活性及研究进展。方法查阅文献。进行整理和归纳。结果与结论从海绵共附生微生物中已分离得到许多结构独特，活性多样的次级代谢产物。其中有些具有潜在的药用价值。     

海绵共附生真菌Nigrospora sp.的次级代谢产物及PD-1/PD-L1抑制活性研究

目的 研究海绵Callyspongia sp.共附生真菌Nigrospora sp.中化学成分以及生物活性。 方法 利用正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和半制备型反相高效液相色谱(RPLC)等方法对该菌株乙酸乙酯提取物进行分离纯化;通过核磁共振谱(NMR)、质谱(MS)等技术并结合文献报道数据分析鉴定化合物结构;采用均相时间分辨荧光(HTRF)法检测化合物的PD-1/PD-L1结合抑制活性。结果 分离得到7个已知化合物,分别为punctaporonin D (1),punctaporonin E (2),punctaporonin F (3),desuccinoylpunctaporonin C (4),(20S, 22E, 24R)-麦角甾-7, 22-二烯-3β, 5α, 6β-三醇 (5),(22E, 24R)-麦角甾-3β-羟基-5α, 9α-环氧-7, 22-二烯-6-酮 (6),麦角甾-7, 22-二烯-6β-甲氧基-3β, 5α-二醇 (7)。在体外生物活性检测中,化合物6显示出PD-1/PD-L1结合抑制活性,其IC50值为22.5 μmol/L。结论 化合物4为新天然产物,化合物1-3和化合物6为首次从该属真菌中分离得到。化合物6显示PD-1/PD-L1结合抑制活性。     

海绵共附生真菌Hansfordia sp.次级代谢产物的分离与鉴定

目的从海绵共附生真菌Hansfordia sp.的次级代谢产物中得到具有活性的化合物。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和半制备HPLC色谱分离纯化,根据化合物的NMR、MS波谱数据和理化性质进行结构鉴定。结果从真菌Hansfordia sp.的固体发酵物的乙酸乙酯提取物中分离得到8个单体化合物,分别鉴定为1,3,6-trihydroxy-8-methylxanthone(1)、4-chloro-1,3,6-trihydroxy-8-methylxanthone(2)、6-hydroxymellein(3)、(R)-4ydroxymellein(4)、3-(2-hydroxypropyl)-8-hydroxy-3,4-dihydroisocoumarin(5)、2,5-dimethyl-7-hydroxychromone(6)、(S)-regiolone(7)和cy-clonerodiol(8)。结论化合物1～8全部为首次从Hansfordia属真菌中分离得到。     

海绵共附生放线菌Saccharopolyspora sp.nov中抗肿瘤活性成分的研究

羽毛山海绵（Mycale plumose）来源的糖多孢菌（Saccharopolyspora sp.nov SP2-10）具有诱导肿瘤细胞坏死的活性。本文对其发酵产物的活性部位乙酸乙酯层进行活性追踪分离．共得到7个化合物；利用理化性质和波谱学方法鉴定它们的结构分别为胆甾醇、邻苯二甲酸二异丁酯、4（2，4-二羟基苯甲酰氨基）苯甲酸、苯丙胺酸、脱氧鸟苷、鸟苷和N-乙酰酪胺I并初步评价上述化合物的抗肿瘤活性，结果表明，邻苯二甲酸二异丁酯显示强细胞毒活性。     

东沙珊瑚共附生真菌ZH-IV-2的活性成分研究

摘要:目的 研究软珊瑚Sarcophyton sp.共附生真菌ZH-IV-2中的活性成分。方法 采用正相硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、凝胶Sephadex LH-20柱色谱以及高效液相色谱（HPLC）等分离手段对真菌ZH-IV-2的乙酸乙酯提取物分离纯化;并通过理化性质、波谱学数据等信息结构并文献报道数据鉴定化合物结构;采用羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)流式细胞法和酒石酸抗性酸磷酸酶（TRAP）染色法体外评价化合物对原代淋巴细胞的免疫调节活性及对髓系巨噬细胞的破骨细胞分化活性。结果 分离得到7个已知化合物,结构分别鉴定为：aspergillusidone B(1)及C(2),emeguisin A(3),unguinol(4),diorcinol(5),6-butyl-3-methyl-(3R,3aR,6S,6aS)-perhydrofuro[3,4-b]furan-2,4-dione(6),unguisin A(7)。在体外活性测试中,化合物3在0.5和1 μmol/L时对淋巴细胞增殖有明显的促进作用,化合物6在0.5和1 μmol/L时对破骨细胞生成有明显的促进作用,结果均具有显著性差异。结论报道化合物4的13C-NMR核磁数据,并对化合物7核磁数据归属进行校正。首次对化合物3的免疫调节活性及化合物6的破骨前体细胞分化活性进行报道,具有进一步研究价值。     

南海海绵的结构多样性和生物活性

海绵是重要的海洋生物资源,由于其生态条件特殊,产生的天然产物结构多样、生物活性显著。本文就作者近年对我国南海海绵代谢产物及其生物活性研究的部分结果进行总结,以阐明我国海绵生物资源的结构多样性,为我国海绵作为药用资源的深入研究提供参考依据。     

金荞麦中具抗菌活性内生真菌的筛选和鉴定

目的 研究药用植物金荞麦的抗菌活性内生真菌.方法 采用PDA培养基,从金荞麦的块根、茎、叶中分离到20株内生真菌,鉴定其抗菌活性,并对抗菌活性菌株进行形态学特征和分子鉴定.结果 发现其中1株内生真菌FD12对金黄色葡萄球菌有抗菌活性,但对大肠杆菌、黑曲霉无抑制作用;经形态学特征和分子鉴定,确定菌株FD12为黑肉座菌Hypocrea nigricans.结论 文中结果可为保护金荞麦野生资源,寻找和开发新型抑菌生物制剂开辟了一条新途径.     

The diversity of alkane-degrading bacterial communities in seagrass ecosystem of the South China Sea

Seagrass meadows are one of the most important marine ecosystems. Alkanes are the common hydrocarbon contaminants that can affect seagrass growth. In this study, a large spatial-scale investigation has been carried out on the alkane-degrading bacterial community structure in the rhizosphere and non-rhizosphere sediments of two seagrass species (Thalassia hemprichii and Halophila ovalis). AlkB gene was employed as a biomarker gene to study the alkane-degrading bacterial community structure. The results showed that the alpha diversity of the alkane-degrading bacterial community in T. hemprichii non-rhizosphere sediments was higher than that of its rhizosphere sediments. However, the alpha diversity of the alkane-degrading bacterial community in H. ovalis rhizosphere sediments was higher than that of its non-rhizosphere sediments in the open sea, but the result was contrast in the coast area. In addition, the alpha diversity of alkane-degrading bacterial communities in the coast area was higher than that of far away from the coast in the T. hemprichii rhizosphere and non-rhizosphere sediments. The phylogenetic analysis result revealed that the alkB sequences from the seagrass ecosystem were mainly affiliated with the class Alphaproteobacteria, and had the two novel lineages. Genus Agrobacterium was the most predominant alkane-degrading bacteria. These results contributed to disclose the geographical distribution pattern of alkane-degrading bacteria in the seagrass ecosystem of the South China Sea.

     

Secondary metabolites from the South China Sea invertebrates: chemistry and biological activity

The increasing demand for new lead compounds in the pharmaceutical and agrochemical industries has driven scientists to search for new sources of bioactive natural products. Marine invertebrates are a rich source of novel, bioactive secondary metabolites and they have attracted a great deal of attention from scientists in the fields of chemistry, pharmacology, ecology, and molecular biology. During the past 25 years, many complex and structurally unique secondary metabolites have been isolated from the invertebrates inhabiting the South China Sea. These metabolites are responsible for various bioactivities such as anti-tumor, anti-inflammation and antioxidant activities, and/or they act on the cardiovascular system. This review will focus on the marine natural product chemistry of invertebrates from the South China Sea, aiming to give the reader a brief view of the compounds isolated from these invertebrates, as well as their biological activities. The article covers the literature published during the period from the beginning of 1980 to the end of 2005, with 340 citations and 811 compounds from invertebrates from the South China Sea, including sponges, coelenterates, molluscs and echinoderms.     

三角叶黄连内生真菌的多样性及其抑菌活性的筛选

目的分离和鉴定三角叶黄连Coptis deltoidea根状茎、叶柄及叶中的内生真菌,并检测其抑菌活性。方法用平板法分离菌株,对照真菌鉴定手册,根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率、质地、生长培养基的颜色变化以及菌丝体和孢子的形态特征进行分类鉴定;选择大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作为指示菌,采用杯碟法对内生真菌的发酵上清液进行体外抑菌试验。结果从三角叶黄连中分离获得的297株内生真菌,分属2目、3科、32属;抑菌实验表明:22株内生真菌的发酵液对指示菌均有不同程度的抑制作用,其中6号内生真菌同时对两种致病菌的抑菌效果明显。结论三角叶黄连内生真菌在种类、不同部位呈多样性分布,且部分内生真菌的代谢产物具有较强的抑菌作用,可作为筛选抑菌活性物质的新资源。     

穿龙薯蓣内生真菌分离鉴定及其抑菌活性研究

目的 分离纯化穿龙薯蓣内生真菌,并对分离得到的内生真菌进行抑菌活性筛选及分类鉴定。方法 采用组织分离法纯化穿龙薯蓣内生真菌,采用载片培养法、挑片培养法、插片培养法,对照《真菌鉴定手册》和《半知菌纲手册》进行初步鉴定;以金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、白色葡萄球菌Staphylococcus albus、柠檬色葡萄球菌Staphylococcus citreu、四联球菌Micrococcus tetragenus、大肠杆菌Escherichia coli、伤寒杆菌Salmonella typhi、铜绿色假单胞菌Pseudomonas aeruginosa、变形杆菌Bacterium termo、肺炎杆菌Bacillus endocarditidis capsulatus、福氏痢疾杆菌Shigella flexneri、乙型副伤寒杆菌Bacterium paratyphosum B作为受试对象,检测内生真菌菌株发酵液以及菌丝提取物的抑菌活性,应用分子生物学方法对筛选出的活性菌株进行分类鉴定。结果 从穿龙薯蓣叶片中分离得到52株内生真菌,根据形态学特征将10株产孢子的内生真菌初步鉴定为2个目、3个科、9个属;其中有3株内生真菌的菌丝提取物具有广谱抗菌活性,结合形态学和分子生物学特征鉴定C37菌为赤霉属Gibberella真菌,C30和C50菌为链格孢属Alternaria真菌。结论 穿龙薯蓣叶片中存在具有抑菌活性的内生真菌,具有开发抑菌生物制剂的潜力。     

暗紫贝母产生物碱内生真菌的筛选及生物碱抑菌活性的测定

目的从暗紫贝母Fritillaria unibracteata Hsiao et K.C.Hsia内生真菌中筛选产川贝母类生物碱及产活性生物碱的菌株。方法利用生物碱沉淀试剂和薄层层析(TLC)技术检测发酵液中的生物碱,采用平板打孔法分别测定生物碱碱粗提液的抑菌活性,结合形态学特征和ITS序列鉴定筛得的真菌。结果筛得5株能产生物碱的内生真菌(A1、A2、A3、A11、A14),其总生物碱对金黄色葡萄球菌均有抑制作用。其中,A1、A3、A14为镰刀属Fusarium sp.真菌,A2、A11属于粘帚霉属Gliocladium sp.真菌。结论筛选出的内生真菌产生的生物碱与暗紫贝母的不尽相同,但其抑菌效果效果显著,值得进一步研究。