540株绿脓假单胞菌的绿脓菌素分型模式及分型结果

绿脓假单胞菌(Pseudomonas aerug-inosa)是假单胞菌属的代表种,为临床上常见的重要致病菌之一,它分布性广、适应力强,一旦引起脓毒血症,死亡率高达80％以上。为了查明绿脓杆菌的分布规律和医院内交叉感染情况,在绿脓假单胞菌的分型中,除进行血清分型外,有必要进行绿脓菌素分型。国外的研究一直将绿脓菌素分型作为检查和鉴别绿脓似单胞菌的重要方法,用于实践中去。国内近年来才建立了这种分型方法,已有报道。本文就临床中收集的540株绿脓假单胞菌,进行了绿脓菌素     

N-乙酰半胱氨酸对铜绿假单胞菌的耐药性及绿脓菌素产量的影响

<正>铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)是院内感染的主要病原菌之一,具有很强的耐药性。其产生的次级代谢产物绿脓菌素(pyocyanin,PCN),可改变细胞内氧化还原水平,对宿主造成氧化伤害,是导致铜绿假单胞菌感染病人死亡的主要原因之一[1-3]。N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)是一种含有巯基的小分子化合物,常被作为抗氧化剂,用来改善细胞内氧化还原水平[2,4],因此在一些临床实验     

铜绿假单胞菌307株耐药性分析

目的通过观察铜绿假单胞菌的耐药性,为临床合理选择抗菌药物提供依据。方法采用美国BD公司PhoenixTM100型全自动细菌鉴定分析系统,对临床标本中分离的铜绿假单胞菌进行鉴定,并选用11种抗菌药物进行耐药性测定。结果307株铜绿假单胞菌分离株中,耐药率：亚胺培南16．6％、氨曲南28．0％、头孢吡肟22．5％）哌拉西林／他唑巴坦21．2％、阿米卡星19．5％、头孢他啶25．1％、哌拉西林28．7％、左氧氟沙星37．5％、庆大霉素31．9％、头孢噻肟99．0％、氨苄西林／舒巴坦98．1％。结论铜绿假单胞菌对抗生素耐药,对亚胺培南、阿米卡星等耐药率较低。     

铜绿假单胞菌耐药性变迁及其防治

目的 探讨临床分离铜绿假单胞菌(PAE)耐药性变迁及其防治.方法 对河南大学准河医院1999～2006年临床分离菌株K-B法药敏试验结果进行分析.结果 629株PAE占总菌株数的13.8%,居首位.PAE对环丙沙星等13种临床常用抗菌药物耐药率均呈增高趋势;对哌拉西林等5种药耐药率变化类型相似,近三年看属上升趋势;对头孢曲松73.0%的耐药率保持相对稳定;对多黏菌素等4种药耐药率均有下降.PAE对头孢噻肟等8种药耐药率高达75.0%～100%,对9种药物较敏感依次为:多黏菌素、亚胺培南、环丙沙星、头孢吡肟、头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、左氧氟沙星、头孢哌酮,总耐药率均＜30%.结论 PAE是医院感染最常见致病菌,耐药性很强.PAE感染可依据药敏结合临床选用头孢他啶、环丙沙星等抗菌活性强的药物,对PAE严重感染可选亚胺培南或采取β-内酰胺类与阿米卡星或左氧氟沙星联合用药方案.     

217株绿脓杆菌的绿脓菌素分型与药敏

本文对来自全国不同地区临床医院分离的217株绿脓假单胞菌进行了绿脓菌素分型,可分出19个绿脓菌素型和 1个NT型,分型率可达85.3％,217株绿脓假单胞菌同时进行了四种抗生素的药物敏感试验。结果表明,绿脓杆菌对该四种抗生素药物敏感度为46.1～80％,不敏感的为20～53.9％,对每种抗生素敏感度强的菌株数集中在9、NT、6和 8型中,绿脓菌素型别分布也是集中在该四型中,而菌素型别与药物敏感之间无明显关系。     

医院铜绿假单胞菌分布及耐药性分析

目的调查医院铜绿假单胞菌(PA)的分布及对常用抗菌药物的耐药情况。方法对我院2008~2011年临床分离的PA 395株,采用半自动微生物分析仪ATB Expression进行细菌鉴定及药敏试验。结果4年共分离PA 395株,痰液标本占77.2%,PA感染主要发生于ICU科室,分离菌对抗菌药物耐药率较低的有多粘菌素(3.05%)、妥布霉素(6.84%)、阿米卡星(8.10%)、庆大霉素(13.92%)、头孢哌酮/舒巴坦(19.42%)、哌拉西林/他唑巴坦为(28.10%)、头孢吡肟(24.55%)、头孢他啶(28.86%)、环丙沙星(28.86%),对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为42.78%和37.72%。而对替卡西林(52.91%)、替卡西林/克拉维酸(49.11%)则有较高耐药性。结论PA是医院感染的重要病原菌,其耐药性已经十分突出,临床应严格遵守抗生素使用原则,合理应用抗生索。     

医院铜绿假单胞菌375株耐药性分析

目的 探讨我院感染铜绿假单胞菌的耐药性,为临床合理用药提供依据.方法 采用法国生物梅里埃ATB Expression细菌鉴系统,用K-B纸片扩散法进行细菌耐药监测.结果 我院2010年9月至2011年9月共检出1030株革兰阴性细菌,其中铜绿假单胞菌有375株.铜绿假单胞菌对阿米卡星、头孢他啶和亚胺培南耐药率较低,分别为26.9％(101株)、35.2％(132株)和48.0％(180株),耐药率最高的为氨苄西林/舒巴坦和复方新诺明(100.0％),对头孢噻肟耐药率达96.9％(363株),对其他测试抗菌药物耐药率均在50％以上;铜绿假单胞菌分离率最高的病区为烧伤科病房,占37.6％(141株),其次为干部病房(22.9％).其余科室铜绿假单胞菌的分离率均低于10％.结论 铜绿假单胞菌是医院感染的主要革兰阴性菌,耐药性性严重,必须加强对铜绿假单胞菌的监测,以预防其在临床中的暴发和流行.     

566株铜绿假单胞菌耐药性分析

目的:了解铜绿假单胞菌的耐药现状。方法:药敏试验用K-B法。结果:铜绿假单胞菌对多种抗生素的耐药率不断上升。结论:临床医生应根据实验室的试验结果合理、有效用药,减少、减缓耐药株的产生。     

铜绿假单胞菌耐药机制的分析

目的了解铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药机制。方法采用纸片K-B琼脂扩散法,参照CLSI2011年版标准判读结果。结果 154株铜绿假单胞菌中来自呼吸内科的52株,内分泌科6株,康复科46株,干部科11株,外科16株,儿科7株,ICU10株,五官科6株。可见,铜绿假单胞菌主要分布于呼吸内科,其次是康复科的慢性病患者。铜绿假单胞菌对米诺环素、头孢曲松、头孢唑肟耐药率达到50%以上,对氟喹诺酮类、氨基糖苷类均低于20%,对碳青霉烯类的美洛培南耐药率达到了7.8%。结论细菌产生头孢菌素酶(Ampc酶)是引起头孢类药物耐药的主要机制;产金属B-内酰胺酶是引起碳青霉烯类抗生素耐药的原因;拓扑异构酶的突变,改变了三元复合物的亲和力,抑制了氟喹诺酮的活性而产生耐药。     

群体感应系统对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响

目的:研究群体感应系统对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响.方法:采用生理盐水-吸痰管系统进行生物膜的培养,3天后用扫描电镜观察PAO1、PAO1 lasI rhlI、PAO1 lasR rhlR形成生物膜的情况.结果:PAO1野型可形成较厚、有孔状通道的生物膜,而PAO1 lasI rhlI基因缺陷型和PAO1 lasR rhlR基因缺陷型形成的生物膜明显稀薄,未能形成成熟的生物膜结构.结论:表明PAO1野型与lsaI rhlI和lasR rhlR基因缺陷型铜绿假单胞菌体外形成生物膜的能力差异有显著性.     

Oral pseudomonas aeruginosa immunization enhances survival in mice subsequently burned and infected with P. aeruginosa

Mice fed 0 serotype-specific strains of P. aeruginosa for two weeks, had increased titers of IgM but not IgG antibodies to the strains fed. Immunized mice, burned and infected with P. aeruginosa, showed significant 0 serotype-specific enhanced survival. Survival of mice fed several 0 serotype-specific strains simultaneously increased when these mice were burned and infected with P. aeruginosa homologous to those fed except when a high exotoxin A producing strain was used. Mice fed purified exotoxin A showed an increased LD₅₀ when injected with graded toxin doses. Feeding both 0 serotype-specific P. aeruginosa plus exotocin A increased survival even with burn and infection using the high toxin producing strain. We conclude that feeding P. aeruginosa antigens provides successful immunization which avoids the effects of parental adminstration.     

Association of OprF mutant and disturbance of biofilm and pyocyanin virulence in pseudomonas aeruginosa

Outer membrane porin F (OprF) is a major structural membrane protein of Pseudomonas aeruginosa, a recognised human opportunistic pathogen which is correlated with severe hospital-acquired infections. This study investigating a multiphenotypic approach, based on the comparative study of a wild type strain of P. aeruginosa, its isogenic OprF mutant. Both P. aeruginosa PAO1 and OprF mutant strains were grown in same condition and cultures were subjected to further analysis by SDS PAGE, pyocyanin production and biofilm formation that was analyse using scanning electron microscopy. Based on biofilm formation essay and pyocyanin production, the study showed that OprF plays a dynamic role in P. aeruginosa virulence. The absence of OprF results in slow growth rate corresponded to elongated lag phase and reduced biofilm production also a significance reduction in the production of the quorum-sensing-dependent virulence factors pyocyanin. Accordingly, in the OprF mutant scanning electron microscope “SEM” images showed impaired cellular niche and detached cells when compared to regular attached P. aeruginosa wild type cells in the niche. Taken together, this study shows the contribution of OprF in P. aeruginosa virulence, at least partly through impairment of biofilm, cell to cell attachment in niche and pyocyanin production. This study show a vital link between OprF and virulence factor production, providing novel insights for its role in pathogenicity and future could provide the basis for the development of novel drug targets for antibiotics and vaccines.     

54株铜绿假单胞菌血清型分布及耐药性观察

对我院临床送检的各种细菌培养标本中分离出的54株铜绿假单胞茵,经系统鉴定后,进行血清学分型及耐药性观察,结果表明54株铜绿假单胞菌血清型以6、9型为主要流行株,占分离株的27.78％、24.08％。对10种抗生素敏感性较高的依次为氟哌酸、丁胺卡那霉素、多粘菌素,其敏感率为92.60％、74.08％、59.26％。     

秀丽隐杆线虫-耐药铜绿假单胞菌感染模型的建立

目的 建立耐药铜绿假单胞菌感染的秀丽隐杆线虫感染模型。方法 利用临床分离的P.aeruginosa A258制各BHI、PGS、NG和Aga线虫感染平板。采用不同浓度的四环素、利福平和多粘菌素B对感染线虫进行治疗,考察感染线虫的存活率。结果 不同感染平板对线虫致死情况不同。采用NG感染平板对glp-4;sek-1线虫进行感染,其LT50 为3.5d。32μg/mL利福平和16μg/mL多粘菌素B对该感染线虫进行治疗,与不加入药物的对照组相比,其存活率分别提高了5和14倍。但一定浓度的四环素没有提高感染线虫的存活率,在线虫体内不能抑制P.aeruginosa A258的感染,与体外抑菌实验结果相一致。结论 建立了秀丽隐杆线虫-耐药铜绿假单胞菌A258感染模型,为此模型用于抗感染化合物的筛选奠定基础。     

结核分枝杆菌及其稳定L型的katG基因研究

目的探讨细胞壁缺陷对结核分枝杆菌异烟肼敏感性的影响以及结核分枝杆菌细胞壁缺陷形成异烟肼耐药性的分子基础。方法采用非高渗培养基体外药敏试验,检测自发形成及诱导形成的结核分枝杆菌稳定L型的异烟肼敏感性;用异烟肼耐药性相关结构基因katG的特异性引物,对自发形成及诱导形成的结核分枝杆菌稳定L型及其亲代细菌型的染色体DNA进行PCR扩增与序列分析。结果不论对异烟肼敏感还是耐药的结核分枝杆菌自发或诱导形成稳定L型后,都能够在含0．2ptg／ml异烟肼的非高渗液体培养基内生长和传代培养。结核分枝杆菌稳定L型katG基因PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳,可见形成与其亲代细菌型一致的DNA条带。PCR-DS分析结果显示,结核分枝杆菌稳定L型katG基因扩增产物具有与其细菌型相同的核苷酸序列。结论无论是自发形成的还是异烟肼诱导形成的结核分枝杆菌稳定L型都可形成异烟肼耐药性,但其katG基因的核苷酸序列并没有发生改变。提示结核分枝杆菌稳定L型的异烟肼耐药性与katG基因突变无关,细胞壁缺失也是导致结核分枝杆菌形成异烟肼耐药性的一个重要机制。     

美罗培南治疗小儿铜绿假单胞茵肺炎临床观察

目的 评价美罗培南治疗小儿铜绿假单胞菌肺炎的临床疗效及安全性。方法 对65例痰培养证实为铜绿假单胞菌肺炎的住院患儿根据药敏结果分为治疗组（34例）和对照组（31例），治疗组给予美罗培南20mg／（kg．d），1次／8h，静脉滴注。对照组应用头孢他啶100mg／（kg．d），1次／12h，静脉滴注。疗程7—14d。所有患者均于治疗前后密切观察并记录症状、体征变化，查血、尿常规，肝、肾功能和胸片。结果 治疗组：治愈30例（88．2％）；好转2例（5．9％）；无效2例（5．9％）。对照组：治愈14例（45．2％）；好转10例（32．3％）；无效7例（22．6％）。治疗组治愈率明显高于对照组（P〈0．01）。两组未见严重不良反应；对照组有4例BUN和1例Scr—过性升高。结论美罗培南治疗小儿铜绿假单胞菌肺炎治愈率高，细菌耐药性低，不良反应少。对确论铜绿假单胎．菌肺类的怠儿宦首扶姜罗培南．     

低浓度红霉素对铜绿假单胞菌抗吞噬能力的影响

目的：观察红霉素对铜绿假单胞菌（pseudomonas aeruginosa,PA）抗巨噬细胞吞噬能力的影响。方法：铜绿假单胞菌ATCC27853菌株接种于两组LB液体培养基中，一组加入低浓度红霉素，另一组不加红霉素为空白对照组．培养18h后，两组PA与小鼠腹腔巨噬细胞分别共同孵育2h，通过显微镜观察巨噬细胞吞噬率的变化。结果：经过18h的细菌培养和2h的细菌与巨噬细胞共同孵育，光镜下看到巨噬细胞对低浓度红霉素组PA的吞噬率增加。电镜下看到加红霉素组的巨噬细胞伪足增多，吞噬活性增强。结论：低浓度红霉素能抑制铜绿假单胞酋的毒力因子，从而增加巨噬细胞的吞噬率。     

泵抑制剂对环丙沙星在铜绿假单胞菌内聚积的影响

目的探讨耐药铜绿假单胞菌（PA）中是否存在主动外排系统,以揭示PA对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法检测碳酰氰间氯苯腙（CCCP）对16株PA药物M IC的影响;荧光法检测PA耐药菌和敏感菌对环丙沙星（CIP）的摄取,以及加入CCCP后对CIP累积量的变化情况。结果外排泵阳性株为4株,CCCP可以使PA 16菌体内环丙沙星的累积量显著上升,而其它菌株中加入CCCP后,环丙沙星的累积量变化不大。结论本地区PA中可能存在氟喹诺酮药物的主动外排系统。