应用聚合酶链反应（PCR）检测乙型肝炎患者的HBV—DNA

应用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）检测１０３例乙型肝炎患者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物（ＨＢＶＭ）的血清中结果有所不同：（１）在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率８６．１１％（３１／３６）；（２）在ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｅ和抗ＨＢｃ阳性血清中，ＰＣＲ阳性率５５．８８％（１９／３４）；（３）在抗ＨＢｅ和ＨＢｃ阳性血清     

应用聚合酶链反应（PCR）检测血清HBV—DNA

用ＰＣＲ技术检测２１３分血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ法检测其血清五项标志（ＨＢＶＭ）。结果表明，在不同类型的ＨＢＶ感染标志物中其血清ＰＣＲ结果有所不同。１０例健康正常人血清无１例检出ＨＢＶ－ＤＮＡ，２０３例免疫标志各异的血清共检出５４例存在ＨＢＶ－ＤＮＡ。     

PCR法与ELISA法检测HBV的比较

ＰＣＲ法与ＥＬＩＳＡ法检测ＨＢＶ的比较徐芸应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测２４３份人血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，并同时与ＥＬＩＳＡ法检测的乙肝病毒感染标志物（ＨＢＶＭ）的结果进行了比较，现将结果报告如下。１材料和方法１．１血清标本１９６份血清标本来自我院肝炎...     

PCR法检测血清HBV DNA及与若干HBV免疫学指标关系

本文比较了PCR法检测血清HBVDNA与ELISA法检测HBsAg、HBeAg的结果。用血清加热-PCR法检测HBV549bp特异DNA片段，用ELISA法检测HBsAg和NBeAg。133份食品从业人员体检血清样品中．57份HBsAg（－），其中未检出HBVDNA；60份HBsAg（＋）、HBeAg（－），其中检出8份HBVDNA（＋），HBVDNA检出率为13.3％；16份HBsAg（＋）、HBeAg（＋），其中检出15份HBVDNA（＋），HBVDNA检出率为93．8％。PCR法检测HBVDNA能更直接地反映HBV传染性。结果初步提示正常人体检中．仅凭HBsAg（＋）、HDeAg（－）确定其无传染性是不够充分的。     

PCR检测HBV—DNA若干影响因素探讨

多聚酶链反应（PCR）技术是体外酶促会成特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期。循环进行20～30周期，极微量DNA即可迅速扩增，增加106个拷贝。因此，检测标本中只需少量DNA，经放大即可检测到目的基因序列。PCR已在人体遗传学和临床微生物学等领域中得到广泛的应用。然而，由于PCR强大的扩增能力与检测的敏感性，往往在实际工作中有时会遇到一些问题，影响了PCR的检测，我们观察108份标本，PCR检测HBV-DNA，通过改变各种条件，改善了反应产物的产量和特异性，现将有关影响因素和防止…     

定量聚合酶链反应检测血清乙型肝炎病毒DNA及其意义

采用定量ＰＣＲ技术检测了１４０例病毒性肝炎患者及３１例ＨＢｓＡｇ携带者血清乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ基因含量。结果显示１２３例乙型肝炎患者及３１例ＨＢｓＡｇ携带者血清ＨＢＶＤＮＡ基因含量范围在１０１至１０９拷贝／微升，１７例其它类型肝炎及３０例健康正常人均未检出ＨＢＶＤＮＡ；与定性ＰＣＲ及分子斑点杂交检测比较，定量ＰＣＲ的灵敏度更高。该方法是一种快速、敏感、特异的定量ＰＣＲ技术，可用于乙型肝炎的临床诊断和实验研究。     

实时荧光PCR检测HBV DNA与ELISA检测HBV M结果分析

目的探讨荧光PCR检测HBV与ELISA检测HBV M结果之间的关系。方法采用实时荧光PCR法和ELISA法,对323例HBV感染者进行HBV DNA和HBV M检测。结果 HBsAg、HBeAg、HBcAb或HBsAg、HBeAg阳性者,其HBV DNA阳性率及病毒含量高于其它组,且有显著性差异。结论实时荧光PCR法和HBV M检测法各有其不同的临床意义,二者不可替代,互相具有参照作用。     

聚合酶链反应和分子斑点杂交检测HBeAg阳性血清HBVDNA的比较

检测血清中HBVDNA是确定乙肝患者肝细胞内有无HBV复制的直接方法.聚合酶链反应可以在几小时内使目的DNA分子扩增成百万倍.用于病毒基因检测具有极高灵敏度[1].我们采用裂解液煮沸使血情蛋白变性直接提取HBVDNA和应用蛋白酶消化、酚抽提血清HBVDNA两种PCR方法与地高辛标记探针的分子斑点杂交法同时检测血清HBVDNA进行对比分析，共检测HBeAg阳性血清标本187例，现将结果报告如下：1材料和方法1.1血清标本来源187例血清标本来自卫生部药政局；惭＄药物基地肝病专业某新药观察病人（诊断符合1993年二月北京第五次全国传染病、寄…     

乙型肝炎病毒携带者血清学标记与PCR HBV—DNA检测结果比较

应用聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ,ＰＣＲ）直接检测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ,具有敏感性高,特异性高,对于较准确地判断ＨＢＶ复制、乙肝患者的预后和评价药物疗效都有重要的意义。我们对１４５例乙肝病毒携带者的血清作ＰＣＲ检测ＨＢ...     

PCR法在检测HBV DNA上的应用

作者应用聚合酶链反应(PCR)检测了12份乙型肝炎两对半阳性血清,并将PCR分析结果与两对半结果相比较,以探讨其在检测HBV DNA上的应用。     

HBV不同血清学标志组合中HBV—DNA的分布特征

采用聚合酶链反应（PCR）技术对270例HBV不同血清学标志及不同组合进行了HBV-DNA的检测。揭示HBV-DNA在HBeAg标志中检出率最高,阳性率为100．00％;其次是HBsAg、抗-HBc和抗一HBe,阳性率分别为66．0％、65．9％和46．2％;在抗-HBS标志物中未能检出HBV-DNA。并示出了HBV-DNA在HBV血清学标志不同组合中的阳性率有着非常显著性差别,研究表明,在HBeAg阴性组合中,采用聚合酶链反应技术检测HBV-DNA的临床意义,同明还分析了HBV-DNA与性别、HBsAg滴度及ALT的关系。     

荧光定量PCR仪检测HBV DNA结果比对分析

目的:探讨分析应用荧光定量PCR仪检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA的结果.方法:选取2018年8月～2019年9月本院收治的30例乙型肝炎患者,按数字法随机分两组,各15例,对照组仪器采用RLC480仪检测,观察组仪器采用荧光定量PCR仪检测,通过对患者HBV DNA水平的测定,对比分析不同仪器检测的结果.结果:RLC...     

内窥镜中检测HBV的PCR技术与ELISA方法比较

目的比较PCR HBV-DNA和ELISA HBs Ag两种检测方法在检测内窥镜中HBV的检测情况,确定PCR技术较为灵敏、可靠。方法现场采集内窥镜各关键部位(镜身、孔道、活检钳)的样品207份,平均分成2份,按各自所用试剂盒的要求分别进行试验,比较2种试验的阳性检出率、一致性等试验评价指标。结果 PCR HBV-DNA阳检率为27.54%,ELISA HBs A阳检率为2.42%,经x2检验,x2值4.63,P=0.031,一致性检验,kappa=0.089,P=0.008,由此说明2种检验方法在内窥镜中痕量的HBV的检测过程中差异有统计学意义。结论 PCR HBV-DNA对内窥镜中痕量的HBV的检测方法优于ELISA Hbs Ag方法。     

核酸提取方法对乙肝病毒定量PCR检测结果的影响

目的寻找简单、快速地提取血清乙型肝炎病毒(HBV)DNA并能应用于定量PCR测定的方法. 方法使用碱裂解法、酚氯仿法和煮沸裂解法同时提取血清HBV-DNA,比较荧光定量PCR测定的重复性和测定值的差异. 结果碱裂解法所得HBV-DNA量高于酚氯仿法和煮沸裂解法(P＜0.05),并且碱裂解法所得结果的重复性好于酚氯仿法和煮沸裂解法(CV分别为0.21,0.28和0.33). 结论碱裂解法提取HBV-DNA简单、快速,适用于HBV-DNA荧光定量测定.     

乙型肝炎病毒血清标志物与HBV DNA定量结果分析

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)血清学检测出现的组合模式与HBVDNA定量之间的关系,正确评价其临床意义。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清标志物,用荧光定量PCR检测HBVDNA含量,依据乙肝病毒标志物阳性出现的模式分为7组A组191例,为HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性(俗称大三阳);B组328例,为HBsAg、HBe-Ab、HBcAb阳性(俗称小三阳);C组26例,为HBsAg、HBeAg阳性;D组54例,为HBsAg、HBcAb阳性;E组35例,HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性;F组11例,为HBsAb、HBcAb阳性;G组10例,为HBcAb阳性。结果各组HBVDNA>1.00ⅹ103拷贝/ml的阳性增高百分率分别为A组98.95%(189/191);B组46.34%(152/328);C组100%(26/26);D组57.41%(31/54);E组20.00%(7/35);F组18.18%(2/11);G组20.00%(2/10)。A组、C组与B、D、E、F、G组间HBVDNA阳性增高率有显著性差异(P<0.01),其他各组间比较有些差异有显著性,有些差异无显著性(P<0.01或P>0.05)。结论正确合理地分析HBV血清学指标出现的类型,与HBVDNA的联合动态检测有助于临床诊断、疗效观察及预后判断。     

乙肝患者前S1蛋白、HBV DNA检测结果的评价

目的：探讨乙型肝炎前S1蛋白、HBV DNA检测的实际意义。方法：采用ELISA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBeAb、前S1蛋白，采用PCR法检测ItBVDNA。结果：乙型肝炎患者前S1蛋白对HBsAg、HBeAg、HBeAb和HBeAb阳性的检出率分别是24．1％，29．4％，14．4％和20．6％，而HBV DNA的检出率分别是56．7％，100％，12．4％和48．5％；HBsAg/HBeAg／HBeAb均阳性的高复制组中，前S1蛋白阳性占29．4％，HBV DNA阳性占100％；HBsAg／HBeAb／HBcAb均阳性的低复制组中，前S1蛋白阳性占19．2％，HBV DNA阳性占16．4％；HBsAb／HBeAb／HBcAb均阳性的康复组中，前S1蛋白和HBV DNA均为阴性。结论HBV DNA与乙型肝炎的复制状态极为密切，乙型肝炎患者前S1蛋白对乙型肝炎患者检出能力较低。     

一种简单易行的去除PCR反应中染料并纯化DNA的方法

[目的]介绍一种简单易行的去除PCR反应中染料并纯化DNA的方法. [方法]利用DNA具有与硅基质材料在高盐中结合,低盐条件下脱离的特征,将目的DNA和无水乙醇在吸附柱中混合并沉淀下来,结合在吸附柱上,再通过洗涤和洗脱收集的步骤去除PCR反应中的染料并纯化所需的DNA片段. [结果]纯化前目的基因含量28.74ng/μl,总量为25μl.纯化后目的基因含量17.01 ng/μl,总量为40 μl.凝胶电泳结果显示两者的条带分布相同.[结论]简化了DNA产物直接回收纯化的步骤,并且回收率较高,不影响后续实验操作,不失为一种简单可靠的方法.     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA与HBeAg、HBeAb组的关系

[目的]研究不同感染阶段的慢性乙型肝炎病毒感染者血清中HBV DNA载量与HBeAg(HBsAg、HBeAg、HBcAb,所谓大三阳)、HBeAb(HBsAg、HBeAb、HbeAb,所谓小三阳)组的相关性和临床意义. [方法]采用日立7600-010型全自动生化分析仪(ALT)、酶联免疫吸附实验(ELISA)、荧光定量聚合酶联反应(FQ-PCR)检测慢性乙型肝炎患者1481例血清HBV DNA含量,并进行分析. [结果]HBV DNA的载量与HBeAg存在呈相关性.结果发现免疫清除期、免疫残留期、免疫耐受期3中感染模武,在慢性HBV感染者不同时期阳性构成比分别为28.43%、37.14%、34.44%. [结论]FQ-PCR法检测HBV DNA具有特异性强、灵敏度高、重复性好、结果可靠的特点,对于乙肝感染的早期诊断、有无传染性和病毒的复制情况、药物疗效的观察和判断具有指导意义.     

2种消毒剂对HBsAg、HBV DNA灭活效果的试验观察

[目的]对复合季铵盐消毒剂与2%强化戊二醛破坏HBsAg及HBV DNA的效果进行对比观察.[方法]采用悬液定量法进行试验.[结果]在19℃～21℃,以含有效季铵盐成分5 000 mg/L该消毒剂水溶液对HBsAg悬液作用30 min,6 000 mg/L时作用20 min,10 000 mg/L时作用10 min,可有效地破坏乙肝表面抗原的抗原性;以含有效季铵盐成分5 000 mg/L该消毒剂水溶液对含HBV DNA的血清作用30 min,含有效季铵盐成分6 000 mg/L、10 000 mg/L分别作用10 min,对HBV DNA的杀灭率达99.9%.2%强化戊二醛与HBsAg悬液作用10 min,可有效地破坏乙肝表面抗原的抗原性,与含HBV DNA的血清作用10 min,对HBV DNA的杀灭率达99.9%.[结论]复合季铵盐消毒剂与2%强化戊二醛均可将HBsAg及HBV DNA破坏,在消毒实践中可选择使用.