一氧化氮合酶激活参与烧伤后Ca2+介导的心肌线粒体损伤

目的:探讨线粒体一氧化氮合酶(mtNOS)在严重烧伤早期心肌线粒体损害中的作用。方法:复制30%TBSAⅢ°烧伤大鼠模型,取正常及伤后1、3、6、12、24h大鼠心肌分离线粒体,测其呼吸功能、Ca²⁺浓度(_m)及细胞色素c氧化酶、mtNOS活性。结果:①伤后1h心肌线粒体呼吸控制率(RCR)显著高于正常组,但3、6、12、24h明显低于正常组,Ⅲ态呼吸速率(ST₃)变化与RCR平行,ST₄仅于伤后3h明显升高;②伤后各时点_m均明显高于正常组,尤以3、6h为甚,而mtNOS活性于伤后3、6、12、24h显著高于对照组,细胞色素c氧化酶活性于伤后3、6、12、24h显著低于正常组;③伤后mtNOS活性与_m呈明显正相关,相关系数为0.8945(P＜0.05),RCR与mtNOS活性呈显著负相关,相关系数为-0.9347(P＜0.05)。结论:伤后_m升高激活mtNOS,可能参与严重烧伤早期心肌线粒体损害。     

线粒体一氧化氮合酶的研究进展

Nitric oxide (NO) is an intra - and intercellular messenger with a broad spectrum of activities in the central nervous system, cardiovascular and immune systems. Mitochondrial nitric oxide synthase(mtNOS), which might be a new form of NOS in mitochondria, has been discovered to be active in the regulation of mitochondrial respiration, energy metabolism and manypathophysiological processes. In this review, the location, properties, physiological and pathophysiological significance of mtNOS were summarized.     

NO在外源性高浓度Ca~(2 )损伤心肌线粒体中的作用

目的 :探讨一氧化氮在外源性高浓度Ca2 损伤心肌线粒体中的作用。方法 :正常心肌线粒体分为单纯L -精氨酸 (L -Arg)组、Ca2 损伤组和左旋硝基精氨酸甲酯 (L -NAME)保护组 ,分别于含有 2 0 μmol/LEDTA、10 0 μmol/LCaCl2 以及 1μmol/LL -NAME 10 0 μmol/LCaCl2 的反应介质中孵育 ,然后测定线粒体活力、膜电位以及NO含量。结果 :Ca2 损伤组线粒体活力、膜电位明显下降 ,而NO-2 /NO-3 含量升高 ,且线粒体活力、膜电位与NO-2 /NO-3 含量呈显著负相关 (r=- 0 .5 2 97,P <0 0 1;r=- 0 6 0 41,P <0 0 1) ;L -NAME保护组线粒体活力与膜电位均明显高于Ca2 损伤组 ,但仍低于L -Arg组 ,而NO-2 /NO-3 含量低于Ca2 损伤组 ,且与L -Arg组无明显差异。结论 :外源性Ca2 可激活线粒体一氧化氮合酶 ,使NO生成增多 ,后者在线粒体活力与膜电位降低中起重要作用。     

一氧化氮,一氧化氮合酶与脑缺血损伤

在脑缺血损伤的不同阶段，不同类型的一氧化氮合酶（NOS）通过其催化生成的一氧化氮（NO）发挥不同的功能。在脑缺血早期，eNOS介导短时保护性作用，而nNOS则介导神经毒性效应并很快占据优势，使脑缺血损伤进展；至晚期，iNOS表达并介导毒性作用，使缺血生成的NO分别在脑缺血进展期和晚期介导神经毒性作用。这种机制为脑缺血损伤的治疗提供了新途径。     

一氧化氮合酶与继发性脊髓损伤

脊髓损伤包括原发性机械性损伤和继发性脊髓损伤,NOS/NO在继发性脊髓损伤中发挥重要作用。NOS的表达与脊髓损伤时间、损伤程度和损伤类型相关,既有神经损害作用,又有神经保护作用。影响NOS表达的因素众多,存在着复杂的网络调控机制。     

一氧化氮及其合酶

对生物体内ＮＯ的研究，已成为当今医学界最为活跃的研究领域。目前已知有三类ＮＯ合酶，分别由内皮细胞、神经细胞及巨噬细胞产生。但新的研究结果显示这三种酶并非仅仅局限于这些部位。在其它部位亦可存在。如骨骼肌中的神经性ＮＯ合酶，它产生的ＮＯ以两种不同方式分别调节骨骼肌的收缩和舒张。     

一氧化氮/诱导型一氧化氮合酶在动脉粥样硬化过程中的作用

 目的：探讨一氧化氮（NO）/诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）过程中的动态变化,分析其对动脉粥样硬化形成过程的影响。方法：将60只SD大鼠随机分成2组：对照组及AS组,每组30只。AS组采用维生素D3腹腔注射联合高脂饲料饲养的方法构建动脉粥样硬化模型。用相关生化方法检测血清各项生化指标：总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖和钙离子,比色法检测血清NO浓度,并对主动脉行HE染色,免疫组化技术检测iNOS蛋白表达,将所得数据进行统计分析,用简单线性相关分析NO与钙离子及动脉粥样硬化指数的相关性。结果：90 d后成功构建了主动脉中膜钙化型动脉粥样硬化模型。血清NO浓度在动脉粥样硬化过程中逐步下降,各组间差异均有统计学意义（均P<0.05）。动脉粥样硬化过程中动脉粥样硬化指数与钙离子呈正相关,与NO呈负相关。在90 d的AS组粥样斑块区免疫组化技术检测到iNOS蛋白表达。结论:在动脉粥样硬化形成过程中,主动脉粥样斑块区iNOS蛋白高表达,但血清NO浓度逐渐降低,NO抗动脉粥样硬化作用减弱。     

严重烧伤早期心肌[Ca~(2 )]_m变化及其机制研究

目的 :探讨严重烧伤早期心肌线粒体Ca2 浓度 ([Ca2 ]m)的动态变化规律及其发生机制。方法 :复制 30 %Ⅲ°烫伤大鼠模型 ,测定伤后 1、3、6、12、2 4h大鼠心肌 [Ca2 ]m,同时检测影响 [Ca2 ]m 的相关指标—胞浆Ca2 浓度 ([Ca2 ]c)及线粒体Ca2 转运速率。结果 :烧伤后 1、3、6h [Ca2 ]m 依次升高 ,12、2 4h较 6h虽有所下降 ,但仍高于正常对照组 ;[Ca2 ]c 除伤后 1h无明显变化外 ,其余各时相点变化趋势与 [Ca2 ]m 相同 ,且伤后 [Ca2 ]m 与 [Ca2 ]c呈显著正相关 ,相关系数为 0 .9177(P <0 .0 1)。伤后 1h心肌线粒体Ca2 摄取速率明显升高 ,而Ca2 释放速率无明显改变 ,但 3、6、12、2 4h心肌线粒体Ca2 摄取速率与Ca2 释放速率均显著降低 ,且烧伤后 3、6、12、2 4h [Ca2 ]m分别与线粒体Ca2 释放速率呈明显负相关。结论 :烧伤后心肌线粒体存在明显的Ca2 超载和转运紊乱     

一氧化氮、一氧化氮合酶和心脏功能

一氧化氮合酶(nitric　oxide synthase,NOS)催化L-精氨酸的氧化反应生成L-胍氨酸和一氧化氮(nitric oxide,NO)。其产物NO可通过依赖cGMP(环磷酸鸟苷)途径与非依赖cGMP途径发挥其复杂的生理学功能,如在心血管系统具有维持血管张力、调节血压,抑制血管平滑肌细胞迁移、增生,抑制血小板聚集与白细胞对血管壁的粘附以及调节影响心肌收缩与舒张功能的作用,并参与心率变异调节功能。本文就3种NOS同工酶的基因及其基因表达调节及影响因素进行简要综述。着重介绍nNOS1的心脏自主神经调节机制,iNOS对心脏收缩抑制以及心脏保护与损伤的双重作用,并对eNOS参与心功能调节的机制及其它生理、病理学等方面研究进展进行综述。     

低分子量肝素介导了烧伤创面愈合中一氧化氮合酶的调控

一氧化氮(NO)在很多细胞和组织内是一种重要的信号分子。很多研究发现,有效地平衡NO的产生对烧伤愈合有重要作用。诱导型一氧化氮合酶(iNOS)可导致大量NO的间断合成。一氧化氮合酶(NOS)活性失调与烧伤病人的多器官功能衰     

大鼠严重烧伤后体内一氧化氮水平变化与预后的关系

目的:研究一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)在严重烧伤早期大鼠体内的变化规律及其与预后的可能联系。方法:检测严重烧伤前后大鼠血液中NO代谢产物NO^-₂/NO^-₃及脑、肺脏和十二指肠组织中神经型(nNOS)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的水平,同时统计各组大鼠的存活率。结果:烧伤后大鼠血液中NO^-₂/NO^-₃水平显著增高,非选择性NOS抑制剂L-NAME和选择性iNOS抑制剂氨基胍(AG)对其均有抑制作用,以L-NAME为甚;nNOS蛋白在伤后部分升高,L-NAME和AG均轻度上调nNOS水平;iNOS在正常组织中不表达,烧伤后表达异常增高,L-NAME和AG对此均无影响;与对照组比较,AG组大鼠存活时间延长,L-NAME组存活时间缩短。结论:严重烧伤后的血管扩张、血压降低和血管反应性低下与iNOS蛋白水平过度增高及其释放的大量NO关系密切。     

败血症大鼠心肌线粒体钙转运能力的变化

为探讨心肌线粒体钙调节功能在休克大鼠心肌细胞钙超负荷发生中的作用。本文采用结扎大鼠盲肠加穿孔的腹膜炎败血症休克模型,观察到休克早期、晚期线粒体钙含量分别增加180%、330%,休克晚期线粒体钙转运能力明显降低(摄钙量减少34.6%,摄钙速率降低33%,P<0.01)。结果提示,心肌线粒体钙转运能力的降低可能是休克动物心肌钙超负荷,继而导致心功能障碍的重要原因之一。     

重症烧伤大鼠早期外周血单个核细胞凋亡的实验研究

目的：探讨烧伤后早期外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）凋亡的发生、变化规律及ｂｃｌ－２蛋白表达的变化。方法：应用流式细胞仪、ＤＮＡ凝胶电泳等手段观察烧伤大鼠ＰＢＭＣ凋亡发生的动力学变化、ｂｃｌ－２蛋白的表达及烧伤血清对细胞凋亡的影响。结果：烧伤后６ｈ起,ＰＢＭＣ凋亡率明显增加,随时间的推延呈增高趋势,此时ｂｃｌ－２蛋白表达下调;烧伤血清可以诱导单核细胞株Ｒａｗ２６４．７凋亡。结论：ＰＢＭＣ凋亡在严重烧伤的免疫功能紊乱方面起重要作用,而ｂｃｌ－２基因下调可能是重症烧伤早期ＰＢＭＣ细胞凋亡的分子机制之一;烧伤血清含有（或缺乏）某种物质,可以介导细胞凋亡。     

严重烫伤早期血胃泌素、胃动素及β-内啡呔的测定和意义

目的：检测严重烫伤休克后血清胃泌素（GAS）、β-内啡呔（β-EP）及血浆胃动素（MTL）浓度的动态变化并分析其意义方法：复制豚鼠背部30%Ⅲ°烫伤模型（假烫组，烫伤组），分别在其伤后3 h、6 h、12 h、24 h、48 h及72 h处死取血，RIA法测血清GAS、β-EP及血浆，MTL的浓度，同样方法复制10%Ⅲ°、20%Ⅲ°豚鼠背部烫伤模型，并对20%Ⅲ°烫伤豚鼠部分延迟复苏，后按时段采血。结果：GAS在伤后3h降至最低值，6 h至24 h一直维持于低水平，至48 h上升到对照值水平；MTL伤后3 h开始明显降低于对照值，12 h达最低值，其后略有上升但仍显著低于对照组；β-EP在伤后48 h内各时点均高于对照组，但在伤后6 h和12 h最高，以后有所下降。烫伤越重，休克复苏越延迟，血GAS、MTL、β-EP变化越大结论：严重烫伤早期血胃肠激素水平有明显变化，休克程度和延迟复苏对其影响很大。     

Calcium-containing vacuolated mitochondria during early heart development in chick embryos as demonstrated by cytochemistry and X-ray microanalysis

The ultrastructure of mitochondria in the developing heart was examined in chick embryos from 2 to 7 days after fertilization. Vacuolated mitochondria were observed in the heart muscle cells of embryos at all stages examined. The number of vacuolated mitochondria as a percentage of total mitochondria in muscle cells was high in embryos at 3 and 4 days and was much higher in the ventricular cells than in the atrial cells. Examination by cytochemistry and X-ray microanalysis revealed the accumulation of calcium in the vacuoles of mitochondria. These results suggest important roles for vacuolated mitochondria in the regulation of the intracellular concentration of calcium during the early development of the chick heart.     

实验性2型糖尿病大鼠心肌线粒体的氧自由基损伤

目的:研究糖尿病大鼠心肌线粒体氧自由基异常的机制。方法:测定正常对照组和链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠心肌线粒体中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、细胞色素C(Cyt-C)和线粒体钙含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性,并用透射电镜观察病理学改变。结果:模型组心肌线粒体NO、NOS、MDA、钙和胞浆细胞色素C均显著高于对照组(P0.05);线粒体细胞色素C和SOD均显著低于对照组(P0.05)。电镜下,模型组肌原纤维排列紊乱,部分融解消失,线粒体肿胀变性,数目增多。结论:氧自由基异常及脂质过氧化作用参与糖尿病心肌的线粒体损伤;Cyt-C和线粒体钙的改变也是糖尿病心肌线粒体损伤的因素。     

葛根素预处理对大鼠脑缺血早期脑组织eNOS的影响

目的: 研究葛根素在脑缺血早期的脑保护作用是否与脑组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达有关。方法: 45只大鼠随机分为3个研究组:假手术组(S组)5只、脑缺血组(M组)20只和葛根素预处理组(P组)20只。其中,P组和M组又分别分为脑缺血0.5 h、1 h、2 h、4 h 4个亚组。除假手术组外其它大鼠制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,P组在手术前10 min腹腔注射葛根素(100 mg/kg),M组和S组在同样时点注射等量生理盐水。采用神经功能缺损评分、神经元尼氏体染色评价脑组织功能及形态变化;采用免疫组化和Western blotting方法检测脑组织eNOS,观察其分布和表达水平。结果: P组各亚组神经功能缺损评分较对应时点的M组减轻(P<0.05),神经元尼氏体溶解也较M组减少,其脑组织eNOS蛋白质的表达均明显高于对应时点的M组(P<0.05)。结论: 葛根素预处理对大鼠脑缺血早期的脑保护机制可能与其上调脑组织eNOS蛋白质表达有关。     

丹参素（DS—182）对大鼠心肌线粒体氧自由基损伤的保护作用

本实验用产生OH·体系(Fe~(2+)/抗坏血酸)直接损伤大鼠心肌线粒体,观察丹参素的保护作用。实验结果表明丹参素对线粒体ADP/O,RCR(respiratory control rate,呼吸控制率)、细胞色素氧化酶活性有保护作用,提示丹参素为良好的OH·清除剂。