肝炎患者血清ADA与肝功酶谱的关系分析

腺苷脱氨酶（ADA）是一种与机体免疫系统有重要作用的核酸代谢酶，以同工酶的形式广泛存在于人体各种细胞，参与细胞内核酸分解代谢。50年代末被引入临床酶学，目前已广泛用于各类疾病的诊断，ADA在各种肝脏疾病中的应用亦有报道。血液中ADA主要来源于肝脏，与肝病关系较为密切。     

丙型肝炎病毒检测结果与临床诊疗过程中的错觉和假象

过去10 a间,丙型肝炎的诊断是建立在对丙型肝炎病毒(HCV)血清学抗体的大量筛查检测基础上的。这种诊断方法大大降低了由输血引起HCV感染的风险。近年来,随着生物学领域的发展,运用遗传学和分子生物学的原理,通过荧光标记的核酸探针与细胞内的核酸序列杂交,借助聚合酶链反应(PCR),以获得细胞内多种基因状态信息,为临床诊断和治疗     

超声对蛋白质合成及基因表达的影响

超声是一种非电离能量，对生物组织细胞有特定的理化作用，其研究前景广阔。超声生物效应的研究已深入到分子生物学水平，涉及到生命科学各个领域。核酸和蛋白质是细胞最重要的高分子物质，在细胞内生命活动中处于中心地位。以下就超声影响蛋白质合成及基因表达的研究进展作一综述。     

原位PCR实验技术及其应用前景

原位ＰＣＲ（ＩｎＳｉｔｕＰＣＲ）技术自１９９０年Ｈａａｓｅ〔１〕等人建立以来,在最近几年得到了快速的发展和应用。聚合酶链反应（ＰＣＲ）是一种快速测定核酸的高效、敏感方法,已在许多疾病的研究与诊断中得到了广泛应用。但是,ＰＣＲ技术须从混合的组织细胞中提取核酸,由于无法将扩增的核酸片段在特定的组织细胞中定位分析,所以难以肯定扩增产物的真正细胞来源。原位杂交虽具有细胞内定位能力,但对于核酸中个别少数变异或差异的序列和细胞内靶核酸含量少时则难以鉴别出来,而且有假阳性的干扰。原位ＰＣＲ技术把ＰＣＲ和原位杂…     

5种新型冠状病毒核酸检测试剂应用于DXcellenceTM全自动核酸检测分析系统的性能评估

目的 探讨5种新型冠状病毒核酸检测试剂与DXcellence^TM全自动核酸检测分析系统的适配性，为临床实验室选择新型冠状病毒核酸检测方法和仪器提供参考依据。方法 参考《病原体核酸即时检测质量管理要求专家共识》对定性项目的性能验证要求，在DXcellence^TM全自动核酸检测分析系统上，搭配艾科诺公司(简称Accunome)的核酸提取纯化试剂盒，评价5种新型冠状病毒核酸检测试剂(杭州金迪安、武汉明德、江苏硕世、北京金豪和上海思路迪，简写为JDA、MD、SS、JH、SLD)的性能。结果 5种新型冠状病毒核酸检测试剂均可配合Accunome公司的核酸提取纯化试剂盒，在DXcellence^TM全自动核酸检测分析系统上实现样本进、结果出的检测。5种试剂检测时间为：单个样本54～94 min, 12个样本65～105 min。JDA、MD、JH试剂对新型冠状病毒开放阅读框1ab基因(ORF1ab基因)329～450 copies/mL的检出率均为100%,在核衣壳蛋白基因(N基因)260 copies/mL的检出率均为100%;SS...     

原位杂交的技术关键及其应用

原位核酸分子杂交技术简称原位杂交（in situ hybridizatioa,ISH），其原理是应用已知碱基顺序并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待检测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合而形成杂交体．然后再应用与标记物相应的检测系统．通过组织化学或免疫组织化学方法在被检测的核酸原位形成带颜色的杂交信号．并在显微镜或电子显微镜下进行细胞内定位。这一技术为研究单一细胞中DNA和编码各种蛋白质、多肽的相应mRNA的定位提供了手段．为从分子水平研究细胞内基因表达及有关基因调控提供了有效的工具．可视为组织化学或免疫组织化学中革命性的突破。     

双链RNA介导的转录后基因沉默及其在血液系统肿瘤中的应用

双链RNA(dsRNA)介导的转录后基因沉默(PTGS)普遍存在于生物界中。PTGS是通过向细胞内引入核酸为起始,激发dsRNA的产生、小干扰(siRNA)的形成和mRNA特异性降解,从而阻断蛋白质的翻译而引起的基因沉默。它具有特异、高效等特点。研究表明,PTGS与细胞的生长发育、维持遗传稳定性和抵抗外来核酸的入侵有关,故用于血液系统肿瘤病因、发生发展和治疗的研究具有重要的价值。     

胞苷脱氨酶的临床应用

胞苷脱氨酶(cytidine deaminase,CD,EC:3.5.4.5)是一种细胞内酶,可特异的催化胞苷产生不可逆的脱氨反应,在核酸代谢中起着重要的作用。胞苷脱氨酶在人体内广泛存在,它与多种疾病的发生、发展关系密切,测定其活性有助于类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、先兆子痫、胎盘早剥、宫内死胎和肝胆疾病的早期诊断和鉴别诊断。     

原位核酸杂交检测膀胱癌中结核菌L型DNA的意义

目的　探讨结核菌L型DNA表达在膀胱移行细胞癌发生与发展中的意义。方法　改良抗酸 (IK)染色和免疫组化染色 (S P法 )检测 6 8例膀胱癌组织中抗酸菌L型和结核菌抗原 ;原位核酸杂交 (ISH)检测 2 0例膀胱癌细胞内结核菌L型DNA。结果　抗酸菌L型阳性率 35 .2 % ,结核菌抗体 (BCG)阳性表达率 36 .7%。 4 0 %膀胱癌细胞内有结核菌L型DNA阳性信号 ,膀胱癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级阳性表达率分别为 2 0 %、30 %、80 % (P <0 .0 5 ) ,随着膀胱癌级别的增加 ,结核菌L型感染率显著增高。改良抗酸 (IK)染色、免疫组化染色和原位核酸杂交结果具有一致性。结论　膀胱癌中常伴有结核L型感染 ,结核菌L型DNA可进入膀胱移行细胞内 ,引起细胞增生和癌变 ,提示结核菌L型感染在膀胱癌发生、发展中起重要作用。     

乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸定量检测阳性者血清标志物模式与临床关系的探讨

随着分子生物学技术的发展，乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV—DNA)检测从核酸分子杂交技术到定量聚合酶链反应(PCR)技术，其灵敏度和特异度不断提高。定量PCR是一种在体外模拟自然DNA复制过程的核酸扩增技术，我们应用此技术检测慢性乙型肝炎患者血清HBV—DNA，以探讨HBV—DNA含量与乙肝病毒标志物状态和临床的关系。     

胞苷脱氨酶的临床应用

胞苷脱氨酶(cytidine deaminase,CD,EC:3.5.4.5)是一种细胞内酶,可特异的催化胞苷产生不可逆的脱氨反应,在核酸代谢中起着重要的作用.胞苷脱氨酶在人体内广泛存在,它与多种疾病的发生、发展关系密切,测定其活性有助于类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、先兆子痫、胎盘早剥、宫内死胎和肝胆疾病的早期诊断和鉴别诊断.     

胞苷脱氨酶的临床应用

胞苷脱氨酶(cytidine deaminase,CD,EC:3.5.4.5)是一种细胞内酶,可特异的催化胞苷产生不可逆的脱氨反应,在核酸代谢中起着重要的作用.胞苷脱氨酶在人体内广泛存在,它与多种疾病的发生、发展关系密切,测定其活性有助于类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、先兆子痫、胎盘早剥、宫内死胎和肝胆疾病的早期诊断和鉴别诊断.     

应用于激光扫描共聚焦显微镜的活细胞标本制作方法

目的　介绍急性神经元贴壁的简易方法和应用激光扫描共聚焦显微镜观察药物作用后神经元内核酸代谢的方法。方法　以双重荧光染料吖啶橙 (Acridineorange ,AO)进行染色。在 36°C孵育箱内孵育 15分钟。激光扫描共聚焦显微镜对染色后的细胞进行光束扫描 ,以观测细胞内核酸代谢变化的规律。结果　皮层神经元RNA有显著改变。结论　本方法的建立可以成功地应用于激光扫描共聚焦显微镜对胞内核酸代谢变化的研究。     

新型冠状病毒肺炎（COVID-19）热灭活咽拭子及热灭活后提取核酸样本在 4℃保存的稳定性研究

目的　研究 56℃ 30 min 热灭活后的新型冠状病毒肺炎 (COVID-19) 咽拭子及提取的核酸在 4℃保存的稳定性。方法　采用多重荧光定量 PCR 方法对一例 COVID-19 患者的咽拭子样本，56℃ 30 min 热灭活后进行 COVID-19 双靶点(ORF1ab 和 N 基因 ) 核酸检测，把原始咽拭子样本及提取的核酸保存在 4℃，分别于 24，48，72 和 96h 再次检测咽拭子样本及提取核酸中新冠病毒核酸的含量（Ct 值），分析热灭活后咽拭子样本及提取核酸在 4℃保存的稳定性。结果COVID-19 患者的咽拭子样本，56℃ 30 min 热灭活后核酸检测结果为 ORF1ab 和 N 基因双阳性，Ct 值分别为 31.27 和30.64，咽拭子样本 4℃保存 24，48，72 和 96h 后再次检测 ORF1ab 和 N 基因的结果为 24h (31.41 和 30.68)，48h (34.13和 34.28)，72h (34.06 和 34.11) 和 96h (36.22 和 40.02)。 提取的核酸 4℃保存 24，48，72 和 96h 后的检测结果为 24h (31.64和 30.06)，48h (31.62 和 29.95)，72h (31.72 和 29.75) 和 96h (31.36 和 30.09)。56℃ 30 min 热灭活的咽拭子样本在 4℃保存 24h 后，对 COVID-19 核酸的检测无明显影响 ( 偏倚 <1%)，但 4℃保存 48~72h，ORF1ab 基因核酸降解约 7 倍，N 基因降解约 11 倍，4℃保存 96h, ORF1ab 和 N 基因核酸分别降解 30.91 倍和 666.29 倍。但是提取的核酸 4℃保存 24~96h 后，对核酸的检测结果无明显影响 ( 偏倚均小于 3%)。结论　研究结果表明 56℃ 30 min 热灭活后提取的核酸的稳定性比原始咽拭子样本好，热灭活后的咽拭子样本可在 4℃保存 24h。     

数字PCR在几种常见人类传染病研究中的应用

聚合酶链式反应(polymerasechain reaction,PCR)是现代分子生物学的基础,被广泛应用于核酸的定性及定量分析,是人类传染病病毒核酸分析的核心技术.数字PCR(digital polymerase chain reaction,dPCR)作为一种新兴的核酸定量分析技术,具有高精确度、高精密度等优点.它打破了传统实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qPCR)技术的局限,不依赖于标准曲线,直接检测样本中靶片段的拷贝数,是一种更为简单且实用的核酸绝对定量分析技术.本文就近几年该技术在人类传染病病毒核酸定量分析方面的研究进行概述.     

创伤性脓毒症过程中小肠组织二胺氧化酶活性的变化

二胺氧化酶(DAO)是人类和哺乳动物小肠黏膜上层绒毛中具有高度活性的细胞内酶,其活性与粘膜细胞的核酸和蛋白合成密切相关,可反映小肠黏膜的完整性和损伤程度。本实验采用大鼠CLP模型、利用分光光度法测定小肠组织DAO活性。     

原位杂交的技术关键及其应用

原位核酸分子杂交技术简称原位杂交(in situ hybridization,ISH),其原理是应用已知碱基顺序并带有标记物的核酸探针与组织、细胞中待检测的核酸按碱基配对的原则进行特异性结合而形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统,通过组织化学或免疫组织化学方法在被检测的核酸原位形成带颜色的杂交信号,并在显微镜或电子显微镜下进行细胞内定位.     

献血者血液乙肝病毒血清学和核酸筛查成本效益分析

目的 为减少输血乙肝残余风险，对献血者血液乙肝病毒血清学HBsAg筛查、HBsAg+核酸单人份及HBsAg+核酸混样筛查策略的成本效益情况进行分析。方法 基于实际检测数据，根据已发表的文献确定各种参数，预测不同筛查策略下阻止窗口期感染、慢性感染及隐匿性感染的人数，计算血液乙肝病毒血清学和核酸筛查成本效益。结果 132 208份血样核酸单人份HBsAg-/HBV DNA+检出率(0.11%)高于混样检出率(0.058%)(P<0.05)。应用单人份乙肝核酸检测可阻止输血传播乙肝的病例数是混样筛查1.25倍，取得的效益亦是混样筛查1.25倍。HBsAg、HBsAg+核酸单人份及HBsAg+混样核酸3种筛查方法成本效益为1∶63.6、1∶28.6和1∶53.4。结论 血液乙肝HBsAg组合单人份核酸筛查具有最高的效益。HBV筛查应尽可能采用单人份核酸检测策略，以提高输血安全性。     

核酸扩增技术诊断沙眼衣原体感染研究进展

近年来 ,沙眼衣原体 (CT)的实验室诊断方法有两大主要突破 ,一是核酸扩增技术的应用 ,二是尿液作为一种非侵袭性、方便易得的标本取代传统的宫颈 (或尿道 )标本进行CT诊断。本文综述了几种核酸扩增方法在诊断CT感染上的研究进展及其应用     

国产乙型肝炎病毒(HBV)核酸扩增(PCR)定量检测试剂盒技术现状介绍

利用核酸扩增技术(PCR)定量检测样本中HBV DNA是乙型肝炎治疗过程中疗效监测的重要手段之一。继乙型肝炎病毒(HBV)核酸扩增(PCR)定性检测试剂盒批准临床使用之后，定量检测试剂盒也已陆续批准临床使用。本文对乙型肝炎病毒(HBV)核酸扩增(PCR)定量检测试剂盒的技术现状，国家定量检测标准品的组成、定值方法、合格标准及国产试剂存在的问题等方面作一粗浅的介绍，以供使用者、临床医生及诊断试剂的研发者参考。